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Analysis of interspecies adherence of oral bacteria using a membrane binding assay coupled with polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis profiling 被引量:1
1
作者 Ren-ke Wang Xue-song He +4 位作者 Wei Hu Renate Lux Ji-yao Li Xue-dong Zhou Wen-yuan Shi 《International Journal of Oral Science》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期90-97,共8页
Information on co-adherence of different oral bacterial species is important for understanding interspecies interactions within oral microbial community. Current knowledge on this topic is heavily based on pariwise co... Information on co-adherence of different oral bacterial species is important for understanding interspecies interactions within oral microbial community. Current knowledge on this topic is heavily based on pariwise coaggregation of known, cultivable species. In this study, we employed a membrane binding assay coupled with polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis (PCR-DGGE) to systematically analyze the co-adherence profiles of oral bacterial species, and achieved a more profound knowledge beyond pairwise coaggregation. Two oral bacterial species were selected to serve as "bait": Fusobacterium nucleatum (F. nucleatum) whose ability to adhere to a multitude of oral bacterial species has been extensively studied for pairwise interactions and Streptococcus mutans (S. mutans) whose interacting partners are largely unknown. To enable screening of interacting partner species within bacterial mixtures, cells of the "bait" oral bacterium were immobilized on nitrocellulose membranes which were washed and blocked to prevent unspecific binding. The "prey" bacterial mixtures (including known species or natural saliva samples) were added, unbound ceils were washed off after the incubation period and the remaining cells were eluted using 0.2 mol.L1 glycine. Genomic DNA was extraeted, subjeeted to 16S rRNA PCR amplification and separation of the resulting PCR produets by DGGE. Selected bands were recovered from the gel, sequenced and identified via Nucleotide BLAST searches against different databases. While few bacterial species bound to S. mutans, consistent with previous findings F.. nucleatum adhered to a variety of bacterial species including uncultivable and uneharacterized onesl This new approach can more effectively analyze the co-adherence profiles of oral bacteria, and could facilitate the systematic study of interbacterial binding of oral microbial species. 展开更多
关键词 membrane binding assay polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis COAGGREGATION Fusobacterium nucleatum streptococcus mutans
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Influences of bracket bonding on mutans streptococcus in plaque detected by real time fluorescence-quantitative polymerase chain reaction 被引量:1
2
作者 AI Hong LU Hong-fei +4 位作者 LIANG Huan-you WU Jian LI Ruo-lan LIU Guo-ping XI Yun 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2005年第23期2005-2010,共6页
Background Enamel demineralization occurs frequently during orthodontic treatment. In this study, we evaluated the changes of the density of mutans streptococcus (MS) in plaque after bracket bonding and using fluori... Background Enamel demineralization occurs frequently during orthodontic treatment. In this study, we evaluated the changes of the density of mutans streptococcus (MS) in plaque after bracket bonding and using fluoride adhesive on maxillary incisors by real time fluorescence-quantitative polymerase chain reaction (RT-FQ PCR).Methods The study was designed as a self-paired test. Brackets were bonded with fluoride adhesive on the left side, while non-fluoride adhesive on the right side for each patient. Plaque samples were taken from the surfaces around the brackets of four maxillary incisors before brackets bonding and after the bonding 4 weeks later. The amount of MS was measured by RT-FQ PCR. The data obtained were analyzed statistically using the SPSS 11.5 version and the alpha level was set at 0. 05 ( 2-tailed).Results The amount of MS in plaque increased significantly after bracket bonding ( P 〈 0.01 ), whereas no significant differences were observed among four maxillary incisors both before and after brackets bonding (P 〉 0. 05 ), and among the incisors using and not using fluoride adhesive ( P 〉 0. 05 ).Conclusions The increase of the density of MS in plaque after bracket bonding is one of the etiological factors for enamel demineralization in orthodontic patients. The result of this study did not support what we observed clinically that the incidence of enamel demineralization for lateral incisors was higher than that for central incisors. Using fluoride adhesive for bonding did not affect the amount of MS in plaque in our study. Further study is needed. 展开更多
关键词 mutans streptococcus · enamel demineralization · plaque · bracket bonding · fluorideadhesive· real time fluorescence-quantitative polymerase chain reaction
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Quantitative detection of Streptococcus mutans and bacteria of dental caries and no caries groups in permanent teeth from a north China population 被引量:2
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作者 WANG Zhan-yong WANG Jian-qiu +2 位作者 ZHOU Yan ZHAO Dong XIAO Bai 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2012年第21期3880-3884,共5页
Background Streptococcus mutans (S. mutans) is the prime pathogen of dental caries. There are few reports that studied the relationship between S. mutans, bacteria and dental caries in permanent teeth when compared ... Background Streptococcus mutans (S. mutans) is the prime pathogen of dental caries. There are few reports that studied the relationship between S. mutans, bacteria and dental caries in permanent teeth when compared to those in primary teeth. This study aimed to detect S. mutans and bacteria of dental caries and non-caries groups in permanent teeth from a north China population by real-time polymerase chain reaction (PCR) and compare the relationship between the number of these bacteria and the prevalence of dental caries in permanent teeth. 展开更多
关键词 real-time polymerase chain reaction streptococcus mutans dental caries
原文传递
Community-acquired pneumonia:The importance of the early detection of drug-resistant organisms
4
作者 Sai Doppalapudi Muhammad Adrish 《World Journal of Critical Care Medicine》 2024年第2期11-14,共4页
Pneumonia is a disease associated with significant healthcare burden with over 1.5 million hospitalizations annually and is the eighth leading cause of death in the United States.While community-acquired pneumonia(CAP... Pneumonia is a disease associated with significant healthcare burden with over 1.5 million hospitalizations annually and is the eighth leading cause of death in the United States.While community-acquired pneumonia(CAP)is generally considered an acute time-limited illness,it is associated with high long-term mortality,with nearly one-third of patients requiring hospitalization dying within one year.An increasing trend of detecting multidrug-resistant(MDR)organisms causing CAP has been observed,especially in the Western world.In this editorial,we discuss about a publication by Jatteppanavar et al which reported that a case of a MDR organism was the culprit in developing pneumonia,bacteremia,and infective endocarditis that led to the patient’s death.The early detection of these resistant organisms helps improve patient outcomes.Significant advances have been made in the biotechnological and research space,but preventive measures,diagnostic techniques,and treatment strategies need to be developed. 展开更多
关键词 Methicillin-resistant Staphylococcus aureus polymerase chain reaction Antibiotic resistance Bacterial colonization infective endocarditis
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无托槽隐形矫治与传统固定矫治对牙周变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌的影响 被引量:52
5
作者 石晶 闫征斌 +1 位作者 侯景秋 彭惠 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期151-154,共4页
目的对比成人正畸患者应用无托槽隐形矫治技术与传统固定矫治技术的牙周指数、变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌的变化。方法选择成人正畸患者30例,分为2组,实验组15例应用无托槽隐形矫治技术,对照组15例应用固定矫治技术。分别在矫治器戴入... 目的对比成人正畸患者应用无托槽隐形矫治技术与传统固定矫治技术的牙周指数、变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌的变化。方法选择成人正畸患者30例,分为2组,实验组15例应用无托槽隐形矫治技术,对照组15例应用固定矫治技术。分别在矫治器戴入前,戴入后第1、3个月检查临床牙周指标[包括菌斑指数(PLI)、牙龈出血指数(SBI)、探诊深度(PD)],同时采集菌斑,利用实时荧光定量聚合酶链反应检测样本中变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌和总细菌的数量,计算出变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌的构成比。将临床牙周指数、变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌构成比进行组间对比和组内不同时间点对比。结果治疗前实验组与对照组牙周指数、变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌构成比差异无统计学意义(P>0.05);治疗中,实验组牙周指数、变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌构成比均低于对照组(P<0.05),实验组PLI和变异链球菌构成比随时间延长而升高(P<0.05),SBI、PD和牙龈卟啉单胞菌构成比未见明显升高(P>0.05),对照组牙周指数、变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌构成比均随时间延长而升高(P<0.05)。结论与传统固定矫治技术对比,无托槽隐形矫治技术更利于口腔卫生维护,但仍会对口腔卫生有不利影响。 展开更多
关键词 无托槽隐形矫治 牙周指数 变异链球菌 牙龈卟啉单胞菌 实时荧光聚合酶链反应
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PCR同时检测变形链球菌和远缘链球菌 被引量:6
6
作者 谭海平 边专 +2 位作者 樊明文 杜民权 范兵 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第6期598-600,共3页
目的:建立一种快速、简便地同时检测变形链球菌和远缘链球菌的方法。方法:以变形链球菌Dextranase基因设计引物,用PCR检测变形链球菌群细菌。结果:变形链球菌(血清型c、e、f)的PCR扩增产物为720 bp;远缘链球菌(血清型d、g)的PCR扩增产物... 目的:建立一种快速、简便地同时检测变形链球菌和远缘链球菌的方法。方法:以变形链球菌Dextranase基因设计引物,用PCR检测变形链球菌群细菌。结果:变形链球菌(血清型c、e、f)的PCR扩增产物为720 bp;远缘链球菌(血清型d、g)的PCR扩增产物为460 bp;道勒链球菌(血清型h)910 bp;仓鼠链球菌(血清型a),鼠链球菌(血清型b)均为1 270 bp。其它异种菌均不能扩增出产物,因此该PCR检测具有高度的特异性。从细菌纯培养物中PCR检测的敏感性为105菌落形成单位(colony-form ing un its,CFU)。结论:PCR能同时检测变形链球菌和远缘链球菌。该检测方法具有较高的敏感性和特异性,有望运用于临床检测。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 检测 变形链球菌 远缘链球菌
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全托儿童口腔变形链球菌水平传播的初步研究 被引量:4
7
作者 邹静 尚冉 +1 位作者 凌均棨 周学东 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期388-390,共3页
目的通过对幼儿园全托儿童之间口腔变形链球菌水平传播的研究,为儿童龋病预防提供新的思路.方法选择24名3~4岁全托儿童为研究对象,其中无龋组和有龋组各12名.采用无菌牙签采集牙面菌斑,厌氧培养48 h,根据变形链球菌的典型形态挑取单个... 目的通过对幼儿园全托儿童之间口腔变形链球菌水平传播的研究,为儿童龋病预防提供新的思路.方法选择24名3~4岁全托儿童为研究对象,其中无龋组和有龋组各12名.采用无菌牙签采集牙面菌斑,厌氧培养48 h,根据变形链球菌的典型形态挑取单个菌落进行次代纯培养,经形态学和微量生化鉴定后将分离的菌株行AP-PCR扩增,对来自不同个体基因型相似的菌株再进行DNA指纹分析.结果 24名受检儿童中,变形链球菌检出率为66.7%,无龋组和有龋组检出率分别为58.3%和75.0%.经AP-PCR扩增,24名儿童口腔中检测出29个不同基因型的变形链球菌,其中携带2个以上基因型儿童占45.8%.经DNA指纹分析,有2种基因型在11名全托儿童口腔中有重复检出.结论变形链球菌在全托儿童口腔中可能存在水平传播. 展开更多
关键词 变形链球菌 基因型 随机引物聚合酶链反应法 DNA指纹分析
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不同龋敏感儿童菌斑中变异链球菌数量及菌群比例的定量分析 被引量:8
8
作者 赵河川 陈霄迟 徐韬 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期619-623,共5页
目的比较不同龋敏感儿童口腔菌斑中变异链球菌数量及其在菌群中比例的差异。方法采集26名3~4岁不同龋敏感的儿童牙面菌斑,运用TaqMan探针实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测有龋组和无龋组儿童菌斑中变异链球菌和总菌数量,以及变... 目的比较不同龋敏感儿童口腔菌斑中变异链球菌数量及其在菌群中比例的差异。方法采集26名3~4岁不同龋敏感的儿童牙面菌斑,运用TaqMan探针实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测有龋组和无龋组儿童菌斑中变异链球菌和总菌数量,以及变异链球菌在总菌群中所占的比例,并对结果进行分析比较。结果有龋组和无龋组儿童每毫克菌斑中变异链球菌菌落数分别为1.33×10^5、1.16×10^3CFU·mg^-1,二者间差异有统计学意义(P=-0.033);每毫克干重菌斑中总菌落数分别为7.17×10^7、1.01×10^8CFU·mg^-1,二者间差异无统计学意义(P=-0.418):有龋组和无龋组变异链球菌在总菌中所占比例分别为0.0586和0.0186,二者间差异有统计学意义(P=-0.008)。结论无龋与患龋儿童牙面总菌群数量差异无显著性,但患龋儿童牙面菌斑中变异链球菌数量更多,在总菌群中所占比例更大。提示菌斑中变异链球菌与总菌的比例与儿童患龋风险密切相关,可以作为评估龋易感性和预测龋病发展趋势的新指标。 展开更多
关键词 龋齿 乳牙 牙菌斑 变异链球菌 实时荧光定量聚合酶链反应
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祖辈看护与幼儿变形链球菌传播关系的研究 被引量:3
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作者 彭楚芳 王嘉德 +2 位作者 葛立宏 郑树国 郭丽宏 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期198-201,共4页
目的研究中国北京城区1~2岁幼儿与祖辈看护人之间变形链球菌的传播情况,为幼儿龋病预防提供新的思路。方法在北京海淀区武警幼儿园亲子班,根据问卷中有关幼儿看护情况,选取20对1~2岁幼儿及祖辈看护人,幼儿用棉签收集菌斑样本,祖辈看... 目的研究中国北京城区1~2岁幼儿与祖辈看护人之间变形链球菌的传播情况,为幼儿龋病预防提供新的思路。方法在北京海淀区武警幼儿园亲子班,根据问卷中有关幼儿看护情况,选取20对1~2岁幼儿及祖辈看护人,幼儿用棉签收集菌斑样本,祖辈看护人取刺激性唾液评估口腔中变形链球菌水平,9名变形链球菌阳性幼儿的母亲也进行了取样。龋齿情况用dft和DFT评估。11对检出变形链球菌的幼儿、祖辈看护人及9名母亲的209株细菌样本经AP-PCR扩增后进行细菌基因型相似性分析。结果11名检出变形链球菌幼儿,9名与祖辈看护人有相似基因型出现,占感染变形链球菌幼儿的81.8%(9/11),而仅有3名幼儿与母亲有相似基因型出现,占感染变形链球菌幼儿的33.3%(3/9)。结论北京城区由祖辈看护的1~2岁幼儿变形链球菌主要来源是祖辈看护人。 展开更多
关键词 变形链球菌 聚合酶链反应 传播 基因型
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利用Cre/loxP系统构建无标记的htrA基因缺失的变链菌突变株 被引量:4
10
作者 张文娟 于丹妮 +1 位作者 韩育植 任志明 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第2期108-111,共4页
目的:利用Cre/loxP位点特异性重组系统构建口腔变异链球菌htrA基因缺陷株,并删除选择标记。方法:PCR扩增变链菌的htrA基因片段并克隆到pGEM-T-EasyTA载体。随后插入卡那霉素(Km)抗性基因盒(loxP-Km-loxP)并替换htrA基因的部分序列,使htr... 目的:利用Cre/loxP位点特异性重组系统构建口腔变异链球菌htrA基因缺陷株,并删除选择标记。方法:PCR扩增变链菌的htrA基因片段并克隆到pGEM-T-EasyTA载体。随后插入卡那霉素(Km)抗性基因盒(loxP-Km-loxP)并替换htrA基因的部分序列,使htrA基因失活,构建出htrA基因缺失的同源重组载体pIB△htrA-Km。将该质粒电转化变链菌标准株,抗生素筛选出发生同源重组的菌株,再用含cre基因的热敏质粒pCrePA电转化,删除Km抗性基因。在限制性温度下培养,消除质粒pCrePA,获得无标记的变链菌htrA基因缺陷株,经PCR及DNA测序鉴定。结果:PCR及DNA测序分析证明htrA基因的部分序列及Km抗性基因均被删除,该部位只留下一个loxP位点。结论:成功构建出了变链菌htrA基因缺失突变株,并删除了抗性标记,为进一步研究htrA基因缺失对变链菌致龋毒力的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 链球菌 变异 丝氨酸内肽酶类 整合酶类 重组 遗传 基因缺失 聚合酶链反应 质粒
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葡萄糖浓度对变形链球菌spaP基因表达的影响 被引量:4
11
作者 姜颖 张铁柱 +2 位作者 杨锦波 刘天佳 陈坤 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期584-587,共4页
目的观察不同浓度葡萄糖对变形链球菌初始粘附相关基因spaP表达的影响。方法变形链球菌分别在0.2、1.0、5.0%葡萄糖条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始粘附相关基因spa... 目的观察不同浓度葡萄糖对变形链球菌初始粘附相关基因spaP表达的影响。方法变形链球菌分别在0.2、1.0、5.0%葡萄糖条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始粘附相关基因spaP的表达情况。结果在0.2%~5.0%葡萄糖浓度范围内,粘附较强的变形链球菌菌株spaP基因的表达随糖浓度的增加而明显增强,粘附较弱的菌株也呈现这样的趋势,但差异不具有统计学意义。粘附较强的变形链球菌菌株其spaP基因的表达总体上高于粘附较弱的菌株。结论在一定浓度范围内(0.2%~5.0%),葡萄糖浓度升高利于变形链球菌spaP基因表达可能是其促进变形链球菌初始粘附的机制之一;变形链球菌对牙面的粘附力可能与其spaP表达量有关。 展开更多
关键词 变形链球菌 初始粘附 TaqMan实时荧光定量PCR
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酸性环境对变形链球菌spaP基因表达的影响 被引量:3
12
作者 姜颖 张铁柱 +2 位作者 杨锦波 刘天佳 王君 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期780-783,共4页
目的:观察酸性环境对变形链球菌初始黏附相关基因spaP表达的影响。方法:变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始黏附相关基因spaP的表... 目的:观察酸性环境对变形链球菌初始黏附相关基因spaP表达的影响。方法:变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始黏附相关基因spaP的表达。结果:pH5.5的酸性环境中变形链球菌spaP基因表达显著下调(P<O.05);黏附较强的变形链球菌菌株无论在中性还是酸性的环境中,其spaP基因的表达总体上高于黏附较弱的菌株。结论:酸性环境抑制变形链球菌spaP基因表达可能是酸性环境中变形链球菌初始黏附下降的机制之一;变形链球菌对牙面的黏附力可能与其spaP表达的量有关。 展开更多
关键词 变形链球菌 初始黏附 TaqMan实时荧光定量PCR
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聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌 被引量:6
13
作者 王建秋 李昌义 +2 位作者 肖白 张鹏 刘敬忠 《口腔医学纵横》 CSCD 1997年第3期134-136,共3页
本研究旨在应用聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌。针对血清C型变形链球菌的spaP基因序列合成特异性引物,用聚合酶链反应(PCR)扩增spaP基因片段的方法检测变形链球菌各菌株和口腔多种常居菌。结果只有变形链球菌血清C型产生了扩增产物... 本研究旨在应用聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌。针对血清C型变形链球菌的spaP基因序列合成特异性引物,用聚合酶链反应(PCR)扩增spaP基因片段的方法检测变形链球菌各菌株和口腔多种常居菌。结果只有变形链球菌血清C型产生了扩增产物,呈现单一的192bpDNA条带。这种方法使过去不能检出的微量靶序列(3个cfu)得以检出,具有高度的特异性和敏感性。用本方法检测50例口腔菌斑标本,有44例呈阳性结果。提示该检测技术是一种快速、准确检测变形链球菌的新方法。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 变形链球菌 龋齿
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随机引物聚合酶链反应指纹法对变形链球菌标准株进行基因分型 被引量:6
14
作者 陈罕 凌均棨 +3 位作者 刘建伟 高燕 杨国平 林正梅 《中山医科大学学报》 CSCD 2000年第4期251-252,259,共3页
:【目的】探索一种利用随机引物聚合酶链反应指纹法技术进行变形链球菌基因分型的方法。【方法】利用变形链球菌不同血清型标准株和通用引物 5′ TGCCGAGCTG 3′,研究了在不同条件下进行聚合酶链反应的结果 ,寻找满意的聚合酶链反应条... :【目的】探索一种利用随机引物聚合酶链反应指纹法技术进行变形链球菌基因分型的方法。【方法】利用变形链球菌不同血清型标准株和通用引物 5′ TGCCGAGCTG 3′,研究了在不同条件下进行聚合酶链反应的结果 ,寻找满意的聚合酶链反应条件。【结果】找到了较为满意的聚合酶链反应条件 :94℃ 30s,36℃ 30s,72℃ 1min ,反应进行 45个循环。 展开更多
关键词 龋齿 病因学 变形链球菌 聚合酶链反应 基因分型
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维吾尔族和汉族不同龋敏感儿童变异链球菌和远缘链球菌的检测 被引量:2
15
作者 刘芳 冯锦虹 +1 位作者 仵楠 赵今 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第5期340-344,共5页
目的研究维吾尔族和汉族不同龋敏感儿童牙菌斑中变异链球菌和远缘链球菌的检出量,分析变异链球菌及远缘链球菌与不同民族儿童乳牙龋齿发生的关系,为不同民族儿童乳牙龋的防治提供依据。方法采用T-A克隆技术制备变异链球菌ATCC25175、远... 目的研究维吾尔族和汉族不同龋敏感儿童牙菌斑中变异链球菌和远缘链球菌的检出量,分析变异链球菌及远缘链球菌与不同民族儿童乳牙龋齿发生的关系,为不同民族儿童乳牙龋的防治提供依据。方法采用T-A克隆技术制备变异链球菌ATCC25175、远缘链球菌ATCC6715、内参基因16S rRNA的质粒标准品,应用SYBR Green I荧光定量聚合酶链反应对变异链球菌和远缘链球菌进行定量检测。结果维吾尔族儿童高龋组远缘链球菌的检出量高于汉族儿童高龋组[(1.06×105±0.43×103)copies.μL-1vs(8.29×104±1.20×104)copies.μL-1],差异有统计学意义(P<0.05),而维吾尔族、汉族儿童高龋组变异链球菌检出量比较差异无统计学意义(P>0.05),同时维吾尔族和汉族儿童远缘链球菌和变异链球菌的检出量高龋组均高于无龋组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论远缘链球菌可能是维吾尔族儿童乳牙龋高发的危险因素。 展开更多
关键词 变异链球菌 远缘链球菌 荧光定量聚合酶链反应 维吾尔族儿童
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变形链球菌表面蛋白真核表达载体pcDNA3-PAc的构建Ⅲ.变形链球菌表面蛋白PAc编码基因pac的体外扩增 被引量:2
16
作者 刘建国 刘天佳 +3 位作者 周学东 杨德琴 张义正 王海燕 《贵州医药》 CAS 2003年第8期679-681,共3页
目的获取完整的变形链球菌表面蛋白PAc的编码基因 pac。 方法建立扩增长片段目的基因的PCR反应体系 ,根据文献报道的 pac核苷酸序列设计引物 ,使用通用缓冲液和高纯度的质粒 pPC4 1DNA为模板 ,经PCR扩增 pac基因。 结果扩增产物经琼脂... 目的获取完整的变形链球菌表面蛋白PAc的编码基因 pac。 方法建立扩增长片段目的基因的PCR反应体系 ,根据文献报道的 pac核苷酸序列设计引物 ,使用通用缓冲液和高纯度的质粒 pPC4 1DNA为模板 ,经PCR扩增 pac基因。 结果扩增产物经琼脂糖电泳和分子量鉴定 ,为单一的 4 .7kb条带。结论成功地从质粒 pPC4 1DNA模板上扩增到全长 4 .7kb的完整 pac基因 。 展开更多
关键词 变形链球菌 pcDNA3-PAc 基因克隆 聚合酶链反应
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变异链球菌gtfs在不同pH条件下表达的差异性 被引量:2
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作者 陆玉 刘天佳 杨锦波 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期667-669,共3页
目的检测具有不同产胞外多糖(EPS)能力的变异链球菌菌株在不同pH条件下产EPS的能力及其与gtfA、gtfB、gtfC、gtfD表达变化的关系。方法选取变异链球菌(血清型c)临床分离株502(高产糖株)和参考株UA159(低产糖株),以实时定量逆转录聚合酶... 目的检测具有不同产胞外多糖(EPS)能力的变异链球菌菌株在不同pH条件下产EPS的能力及其与gtfA、gtfB、gtfC、gtfD表达变化的关系。方法选取变异链球菌(血清型c)临床分离株502(高产糖株)和参考株UA159(低产糖株),以实时定量逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)方法检测在不同pH条件下与变异链球菌产糖能力密切相关的毒力因子gtfA、gtfB、gtfC、gtfD的表达变化。结果在pH5.5条件下,高产糖株和低产糖株gtfA、gtfB、gtfD的表达均有不同程度的升高,而gtfC略降低,高产糖株gtfB、gtfC的表达水平高于低产糖株。结论gtfs的表达水平与变异链球菌的致龋力密切相关。 展开更多
关键词 变异链球菌 葡萄糖基转移酶 实时定量逆转录聚合酶链反应
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不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性之间的关系 被引量:1
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作者 李伟 贺新兰 +5 位作者 胡红梅 张铮辉 王蔚 周鹏 汤洪 刘兴容 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第6期500-503,共4页
目的:研究不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性的关系.方法:①随机选取50例24—32岁的高龋、中龋及无龋者,取牙面菌斑样本接种于MS培养基上,每人随机挑取2—5株临床分离株,提取细菌染色体DNA,采用AP—PCR法对不同龋敏感者... 目的:研究不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性的关系.方法:①随机选取50例24—32岁的高龋、中龋及无龋者,取牙面菌斑样本接种于MS培养基上,每人随机挑取2—5株临床分离株,提取细菌染色体DNA,采用AP—PCR法对不同龋敏感者口腔变形链球菌临床分离株进行基因分型.②以pH0.5为间隔配制pH4.0~7.0系列的,含50mg/L葡萄糖的MS液体培养基,对不同基因型口腔变形链球菌临床分离株进行厌氧培养48h,用精密pH计检测培养基上清液的pH值.结果:①14例高龋个体中有3例为1种基因型,5例有2种基因型,6例有3种基因型;9例中龋个体中有4例为一种基因型,3例有2种基因型,2例有3种基因型;13例无龋个体中有12例为1种基因型,1例有2种基因型.②不同基因型的变形链球菌培养基上清液的pH值进行统计学分析,发现基因型越多的细菌其产酸能力越强.结论:①龋敏感越高的个体其口腔变形链球菌临床分离株基因型越多;②不同基因型的变形链球菌pH值的检测,基因型越多的细菌其产酸能力越强. 展开更多
关键词 龋敏感者 随机引物聚合酶链法 基因型 链球菌 变异
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变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建 被引量:1
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作者 李文月 高爽 +6 位作者 张志鹰 张红 超博 武玉凤 李贺 王春萌 张志民 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第5期490-494,共5页
目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反... 目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反应法(overlap extension polymerase chain reaction,OE-PCR)获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后,进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株,并进行PCR鉴定。结果:经PCR鉴定和测序鉴定,含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定,UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功。结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株,可用于gtfB基因功能的研究。 展开更多
关键词 变形链球菌耐氟菌株 gtfB基因 重叠延伸聚合酶链反应 同源重组 基因失活
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母子口腔中变形链球菌基因型的对照研究 被引量:1
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作者 胡晓燕 李颂 梅陵宣 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期439-442,共4页
目的:分析高龋、无龋儿童及其母亲口腔中变形链球菌(S.mutans)菌株的基因型,探讨S.mutans基因型与致龋活性的关系。方法:试剂盒法提取细菌染色体DNA,对20名儿童(高龋组10名,无龋组10名)及其母亲的共800株S.mutans临床分离株进行AP-PCR... 目的:分析高龋、无龋儿童及其母亲口腔中变形链球菌(S.mutans)菌株的基因型,探讨S.mutans基因型与致龋活性的关系。方法:试剂盒法提取细菌染色体DNA,对20名儿童(高龋组10名,无龋组10名)及其母亲的共800株S.mutans临床分离株进行AP-PCR基因型分析。结果:高龋儿童携带的S.mutans基因型数目多于无龋儿童(P<0.05),高龋儿童的母亲携带的S.mutans基因型数目显著多于无龋儿童的母亲(P<0.01),高龋儿童母亲的DMFT值显著高于无龋儿童母亲(P<0.01),高龋组和无龋组的共有基因型数目无统计学差异(P>0.05)。结论:高龋个体比无龋个体携带更多的S.mutans基因型,个体携带的S.mutans基因型数目与其致龋活性有关。 展开更多
关键词 变形链球菌 基因型 随机引物聚合酶链反应
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