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Screening of a High Growth Influenza B Virus Strain in Vero Cells 被引量:4
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作者 Ze LIU Wei-dong LI +6 位作者 Ming-bo SUN Lei MA Zi-quan, GUO Shu-de JIANG Guo-yang LIAO Jing-si YANG Chang-gui LI 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2010年第1期65-70,共6页
Due to the insufficient supply of embryonated chicken eggs,the preparation of large quantities of inactivated influenza vaccines will require an alternative virus culture system after the emergence or reemergence of a... Due to the insufficient supply of embryonated chicken eggs,the preparation of large quantities of inactivated influenza vaccines will require an alternative virus culture system after the emergence or reemergence of a pandemic influenza virus.The Vero cell is one of the ideal options since it was used for producing many kinds of human vaccines.However,most of the influenza viruses can not grow well in Vero cells.To develop a new influenza vaccine with Vero cells as a substrate,the virus needs to adapt to this cell substrate to maintain high growth characteristics.By serial passages in Vero cells,the B/Yunnan/2/2005va(B)strain was successfully adapted to Vero cells,with the hemagglutination titer(HAT)of the virus reaching 1:512.The high growth characteristic of this strain is stable up to 21 passages.The strain was identified by hemagglutination inhibition (HAI)test and sequencing respectively;the HA1 gene sequence of the virus was cloned and analyzed.The screening and establishment of high growth B virus provides an important tool for influenza vaccine production in Vero cells. 展开更多
关键词 influenza b virus Vero Cells ADAPTION
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神经介素B及受体NMBR和PD-L1在H9N2亚型流感病毒感染过程中的相互作用研究
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作者 李春雨 田世茂 +5 位作者 孔迎迎 陈灿辉 田也 刘莎莎 陈吉龙 杨桂红 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第1期65-70,共6页
神经介素B(NMB)及其G蛋白偶联受体(NMBR)发挥的抗甲型流感病毒免疫反应,以及甲型流感病毒感染诱导细胞程序性死亡配体1(PD-L1)高表达均与NF-κB信号通路有直接关系,而NF-κB信号通路的激活受ERK信号通路的调控。为深入探究NMB与NMBR调节... 神经介素B(NMB)及其G蛋白偶联受体(NMBR)发挥的抗甲型流感病毒免疫反应,以及甲型流感病毒感染诱导细胞程序性死亡配体1(PD-L1)高表达均与NF-κB信号通路有直接关系,而NF-κB信号通路的激活受ERK信号通路的调控。为深入探究NMB与NMBR调节H9N2亚型流感病毒感染诱导PD-L1上的作用,本研究以H9N2亚型流感病毒为模式毒株,基于NMBR干扰和过表达细胞系、PD-L1干扰和过表达细胞系以及C57BL/6小鼠,采用RT-PCR和Western blot方法分析NMB与NMBR对PD-L1表达变化以及ERK磷酸化的影响。结果显示:H9N2亚型流感病毒感染诱导的NMBR和PD-L1表达之间存在着负调控的关系,外源性NMB可以有效激活小鼠体内NMBR的表达,进而抑制PD-L1表达,NMB与NMBR也能影响H9N2感染诱导的ERK磷酸化水平。综上,H9N2亚型流感病毒感染诱导表达的NMB与NMBR通过ERK信号通路调节PD-L1的表达而发挥抗流感病毒作用,将为深度剖析宿主-甲型流感病毒之间的互作关系提供新的科学依据。 展开更多
关键词 流感病毒 H9N2亚型 神经介素b 神经介素b受体 细胞程序性死亡配体1
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Superior mesenteric vein thrombosis induced by influenza infection:A case report 被引量:1
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作者 Gyu Man Oh Kyoungwon Jung +4 位作者 Jae Hyun Kim Sung Eun Kim Won Moon Moo In Park Seun Ja Park 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2020年第18期4193-4199,共7页
BACKGROUND Among the various types and causes of mesenteric ischemia,superior mesenteric vein(SMV)thrombosis is a rare and ambiguous disease.If a patient presents with SMV thrombosis,past medical history should be rev... BACKGROUND Among the various types and causes of mesenteric ischemia,superior mesenteric vein(SMV)thrombosis is a rare and ambiguous disease.If a patient presents with SMV thrombosis,past medical history should be reviewed,and the patient should be screened for underlying disease.SMV thrombosis may also occur due to systemic infection.In this report,we describe a case of SMV thrombosis complicated by influenza B infection.CASE SUMMARY A 64-year-old male visited the hospital with general weakness,muscle aches,fever,and abdominal pain.The patient underwent computed tomography(CT)and was diagnosed with SMV thrombosis.Since the patient’s muscle pain and fever could not be explained by the SMV thrombosis,the clinician performed a test for influenza,which produced a positive result for influenza B.The patient had a thrombus in the SMV only,with no invasion of the portal or splenic veins,and was clinically stable.Anticoagulation treatment was prescribed without surgery or other procedures.The follow-up CT scan showed improvement,and the patient was subsequently discharged with continued oral anticoagulant treatment.CONCLUSION This case provides evidence that influenza may be a possible risk factor for SMV thrombosis.If unexplained abdominal pain is accompanied by an influenza infection,examination of an abdominal CT scan may be necessary to screen for possible SMV thrombosis. 展开更多
关键词 influenza b virus Mesenteric ischemia Venous thrombosis Mesenteric vascular occlusion influenza HUMAN Case reports
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H9N2亚型流感病毒感染过程中神经介素B及受体对NF-κB信号通路泛素酶的调控
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作者 田世茂 万乾晖 +5 位作者 许晓东 孔迎迎 田珂 唐钰冰 陈吉龙 杨桂红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期3118-3126,共9页
神经介素B(neuromedin B,NMB)及受体(NMB receptor,NMBR)通过NF-κB信号通路参与抑制甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)H1N1亚型(IAV/H1N1)的感染。但关于NMB和NMBR对NF-κB信号通路相关泛素蛋白酶的调控如何,尚未见报道。为探究NMB... 神经介素B(neuromedin B,NMB)及受体(NMB receptor,NMBR)通过NF-κB信号通路参与抑制甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)H1N1亚型(IAV/H1N1)的感染。但关于NMB和NMBR对NF-κB信号通路相关泛素蛋白酶的调控如何,尚未见报道。为探究NMB和NMBR调控IAV诱导的NF-κB信号通路相关的泛素蛋白酶表达的影响,本研究基于IAV/H9N2感染sh-NMBR细胞与NMB刺激的A549细胞,采用RT-PCR、qRT-PCR及Western blot(WB)分析NMB和NMBR对H9N2感染引起的NF-κB信号通路相关的E3泛素连接酶Mind bomb-2(MIB2)和Ring Finger Protein 8(RNF8)及去泛素蛋白酶Cylindromatosis(CYLD)的表达变化。结果显示:H9N2感染sh-NMBR细胞中,RNF8和CYLD表达增加,MIB2表达和P65磷酸化水平降低;NMB激活A549细胞中NMBR的表达后,诱导细胞中RNF8和CYLD的表达水平下降,MIB2表达和P65磷酸化水平增加。结果表明:NMB和NMBR通过调控IAV/H9N2感染诱导的泛素蛋白酶的表达和P65活性,从而影响IAV/H9N2感染激活的NF-κB信号通路的功能,该结果为深入研究NMB和NMBR抑制甲型流感病毒感染的作用机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 神经介素b 神经介素b受体 IAV/H9N2亚型 E3泛素连接酶 P65磷酸化
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评估三种不同品牌的新型冠状病毒抗原洗脱液对甲型/乙型流感病毒抗原检测盒的性能影响
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作者 张龙锋 再屯古丽 芮棵 《黑龙江医学》 2024年第11期1334-1336,共3页
目的:评估三种品牌新型冠状病毒抗原洗脱液对雅培(上海)诊断产品销售有限公司生产的Clearview甲型/乙型流感病毒抗原检测盒的性能影响,探讨研究使用一个样本同时进行新型冠状病毒抗原和甲型/乙型流感病毒抗原两种检测的可行性。方法:选... 目的:评估三种品牌新型冠状病毒抗原洗脱液对雅培(上海)诊断产品销售有限公司生产的Clearview甲型/乙型流感病毒抗原检测盒的性能影响,探讨研究使用一个样本同时进行新型冠状病毒抗原和甲型/乙型流感病毒抗原两种检测的可行性。方法:选取江苏大学附属医院就诊的102例患者,每人采取两根鼻拭子。按照各自的产品说明书对同一患者采集的双份鼻拭子分别用所选的三种品牌中的一种新型冠状病毒抗原洗脱液和甲型/乙型流感病毒抗原洗脱液进行抗原洗脱、同时检测甲型/乙型流感病毒抗原检测,对检测的结果进行符合率分析。结果:广州万孚生物技术股份有限公司的新型冠状病毒抗原洗脱液的检测Clearview甲型/乙型流感病毒抗原的结果,甲型流感病毒抗原阳性符合率为100%;乙型流感病毒抗原阳性符合率、阴性符合率、总符合率均为100%。杭州艾康生物技术有限公司的新型冠状病毒抗原洗脱液的检测Clearview甲型/乙型流感病毒抗原的结果,甲型流感病毒抗原阳性符合率、乙型流感病毒抗原阳性符合率均为100%;阴性符合率为90%;总符合率为97%。浙江东方基因生物制品有限公司的新型冠状病毒抗原洗脱液的检测Clearview甲型/乙型流感病毒的结果,甲型流感病毒抗原阳性符合率、乙型流感病毒抗原阳性符合率、阴性符合率、总符合率均为100%。结论:所试验的三种品牌的新型冠状病毒抗原洗脱液适用于雅培(上海)诊断产品销售有限公司生产的Clearview甲型/乙型流感病毒抗原检测。 展开更多
关键词 甲型流感病毒抗原 乙型流感病毒抗原 新型冠状病毒抗原洗脱液 符合率
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一步法多重RT-PCR快速筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒 被引量:9
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作者 莫秋华 杨翠兰 +7 位作者 林继灿 谭华 涂承宁 叶立青 刘志明 杜坚 孙虹 杨泽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1545-1547,共3页
目的建立能同时筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒的多重RT-PCR技术。方法针对A型流感病毒的M基因、B型流感病毒的NS基因设计通用扩增引物,针对新型甲型H1N1流感病毒的HA基因设计特异性扩增引物,采用一步法建立多重RT-PCR反应体系。... 目的建立能同时筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒的多重RT-PCR技术。方法针对A型流感病毒的M基因、B型流感病毒的NS基因设计通用扩增引物,针对新型甲型H1N1流感病毒的HA基因设计特异性扩增引物,采用一步法建立多重RT-PCR反应体系。通过盲法实验与实时荧光RT-PCR进行比对来评价方法的准确性,并应用于临床评价方法的实用性和有效性。结果琼脂糖凝胶电泳分析多重RT-PCR产物,结果显示目的扩增片段条带清晰明亮,没有非特异性产物出现,可见该方法扩增效率高,特异性强。50份样本的盲法实验结果显示两种方法检测结果完全一致,符合率为100%。结论建立的多重RT-PCR方法能通过一次实验快速、准确地同时筛检A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒,是一项成本低廉、对流感的疫情监测和早期诊断具有实用价值的筛检技术。 展开更多
关键词 多重RT-PCR A型流感病毒 b型流感病毒 甲型H1N1流感病毒
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贵州省2013—2016年B型流感病毒流行特征分析 被引量:15
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作者 万永虎 庄丽 +6 位作者 郑勤妮 任丽娟 付琳 蒋维佳 张德著 唐光鹏 李世军 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期338-342,共5页
目的了解贵州省B型流感病毒的流行特征和规律,为其预防与控制提供依据。方法采用描述性方法对贵州省2013年4月1日—2016年3月31日B型流感病毒RT-PCR检测结果进行统计。结果贵州省2013—2016年3个监测年度B型流感病毒RT-PCR检测阳性1 904... 目的了解贵州省B型流感病毒的流行特征和规律,为其预防与控制提供依据。方法采用描述性方法对贵州省2013年4月1日—2016年3月31日B型流感病毒RT-PCR检测结果进行统计。结果贵州省2013—2016年3个监测年度B型流感病毒RT-PCR检测阳性1 904份,其中By系1 215份、Bv系642份,2013年4月—2014年3月、2014年4月—2015年3月2个监测年度B型流感的优势流行株都是By系,而2015年4月—2016年3月是Bv和By系共同流行,流行季节主要在冬春季;B型流感病毒男性检出所占比率较高,占56.83%;15岁以下低年龄组人群B型流感病毒检出数最高(70.80%),而Bv系在0~岁年龄组最高(42.37%),By系在5~岁年龄组最高(35.56%);混合感染病原组合构成主要以By+Bv为主,占67.65%,与B型有关的混合感染数占95.59%。结论贵州省B型流感病毒存在By和Bv两种系别的流行,流行季节为冬春季,男性感染病例多于女性,发病以15岁以下人群为主,加强低年龄群体流感疫苗的接种和监测具有重要意义。 展开更多
关键词 b型流感病毒 病原学 病毒分离 流行特征 监测
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山东省2017—2018年B型流感病毒药物敏感性检测及神经氨酸酶基因特征分析 被引量:8
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作者 吴巨龙 孙林 +4 位作者 张圣洋 宋绍霞 刘倜 王显军 李忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期229-233,共5页
目的检测山东省2017-2018流感监测年度B型流感病毒对神经氨酸酶抑制剂的药物敏感性,分析其神经氨酸酶(NA)基因特征。方法选取山东省2017—2018年分离的18株B型流感病毒(Yamagata系16株,Victoria系2株),通过生物学耐药实验检测病毒对奥... 目的检测山东省2017-2018流感监测年度B型流感病毒对神经氨酸酶抑制剂的药物敏感性,分析其神经氨酸酶(NA)基因特征。方法选取山东省2017—2018年分离的18株B型流感病毒(Yamagata系16株,Victoria系2株),通过生物学耐药实验检测病毒对奥司他韦和扎那米韦的药物敏感性。提取病毒核酸后一步法RT-PCR扩增NA基因片段,双向测定核苷酸序列,对基因序列和氨基酸序列特征比对分析。结果在检测的18株B型流感病毒中,有1株Yamagata系病毒对奥司他韦和扎那米韦2种药物的敏感性均降低,此株病毒的NA基因发生H274Y位点突变。其余15株Yamagata系病毒和2株Victoria系病毒均为奥司他韦及扎那米韦的敏感株。结论随机选取的18株B型流感病毒中大多数病毒对神经氨酸酶抑制剂敏感,临床上可继续使用此类药物对流感患者进行治疗。应加强耐药性监测,警惕耐药株的出现。 展开更多
关键词 b型流感病毒 神经氨酸酶抑制剂 耐药性
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多重RT-PCR同步快速检测A型和B型流感病毒 被引量:4
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作者 程小雯 房师松 +2 位作者 庾蕾 张再清 吕星 《中国热带医学》 CAS 2004年第5期692-694,共3页
目的 建立特异、敏感、快速、同步检测含漱液中A、B型流感病毒的分子生物学检测方法。 方法 以流感病毒A型保守的M基因和流感病毒B型的NS基因为模板分别设计的两对引物 ,用MRT -PCR同时扩增A型M基因和B型NS基因的片断 ,得到相对应的... 目的 建立特异、敏感、快速、同步检测含漱液中A、B型流感病毒的分子生物学检测方法。 方法 以流感病毒A型保守的M基因和流感病毒B型的NS基因为模板分别设计的两对引物 ,用MRT -PCR同时扩增A型M基因和B型NS基因的片断 ,得到相对应的病毒片段 ,根据扩增出的片段的位置和大小来判断含漱液中A、B型流感病毒分型。 结果 用MRT -PCR从 19株A型流感病毒毒株和 11株B型流感病毒毒株分别特异地扩增出M基因 5 0 1bp的片段和NS基因 13 6bp的片段 ,灵敏度可达 1 6× 10 -5TCID5 0 ;对 2份黑天鹅的咽拭子和肺组织标本均检出A型流感病毒M基因 5 0 1bp的片段。 结论 多重逆转录聚合酶链反应能特异、敏感快速的检测A、B型流感病毒。 展开更多
关键词 b型流感 M基因 扩增 A型流感病毒 含漱液 RT—PCR 快速检测 NS基因 黑天鹅 毒株
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荧光定量RT-PCR快速检测B型流感病毒的研究 被引量:8
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作者 何建凡 张然 +2 位作者 吴春利 程小雯 吕星 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第8期981-983,共3页
目的:利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测B型流感病毒的方法。方法:根据B型流感病毒HA基因的相对保守序列分别设计一对引物及其相应的Taqman探针,建立、优化反应体系后,利用10倍稀释法检验方法的灵敏度并建立相对定量标准曲线;特... 目的:利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测B型流感病毒的方法。方法:根据B型流感病毒HA基因的相对保守序列分别设计一对引物及其相应的Taqman探针,建立、优化反应体系后,利用10倍稀释法检验方法的灵敏度并建立相对定量标准曲线;特异性检验后利用临床标本与普通RT-PCR法进行比较。结果:B型流感病毒检测反应的灵敏度为5.0×10-6TCID50,标准曲线相关系数为0.998,扩增效率为107.8%,5种非B型流感病毒病原体检测均为阴性,说明此方法具有很好的稳定性、重现性和特异性。结论:本研究建立荧光定量RT-PCR技术可以准确检测B型流感病毒,不仅灵敏度高、稳定性好,而且可以对病毒滴度进行定量检测。 展开更多
关键词 b型流感病毒 荧光定量RT-PCR 快速检测
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两株B型流感病毒的基因组序列分析 被引量:4
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作者 岳秀芳 夏咸柱 +12 位作者 于志君 朱晓文 刘红 李硕 范宝静 王世申 吴静 武艳丽 王铁成 杨松涛 黄耕 高玉伟 胡桂学 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期267-273,共7页
目的了解两株B型流感病毒的基因组序列特征。方法对两株B型流感病毒进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析。结果成功扩增出两株B型流感病毒的全基因组序列,并且两毒株的基因组均属于Yamagata系类似株Ⅱ系。两株病毒的基因组序列与... 目的了解两株B型流感病毒的基因组序列特征。方法对两株B型流感病毒进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析。结果成功扩增出两株B型流感病毒的全基因组序列,并且两毒株的基因组均属于Yamagata系类似株Ⅱ系。两株病毒的基因组序列与疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)以及Victoria系代表株B/Brisbane/60/2008、B/Malay-sia/2506/2004相比,HA基因同源性为89.7%~97.3%,NB基因同源性则为95.4%~98.4%。两株病毒的HA蛋白与WHO推荐的疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)相比,存在11处氨基酸突变,其中HA的N131K氨基酸位点突变,可能对抗原性产生影响。NB的S198N氨基酸位点突变可能影响神经氨酸酶抑制剂的灵敏度。结论两株B型流感病毒的遗传进化状态稳定,但是与同分支中的毒株基因序列部分位点存在差异。 展开更多
关键词 b型流感病毒 基因序列 进化树
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A型和B型流感病毒抗原的快速检测方法及临床应用 被引量:4
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作者 王厚芳 孙芾 +2 位作者 林宏 于俊峰 李明 《现代检验医学杂志》 CAS 2004年第3期7-9,共3页
目的 介绍一种检测 A型和 B型流感病毒抗原的快速方法以便及早确诊病人是否患有流感及所患流感类型 ,从而为临床提供良好的治疗依据。方法 采用一种快速 EIA法检测 A型和 B型流感病毒抗原试剂盒检测有流感症状病人的咽拭子或鼻咽拭子... 目的 介绍一种检测 A型和 B型流感病毒抗原的快速方法以便及早确诊病人是否患有流感及所患流感类型 ,从而为临床提供良好的治疗依据。方法 采用一种快速 EIA法检测 A型和 B型流感病毒抗原试剂盒检测有流感症状病人的咽拭子或鼻咽拭子中是否有流感病毒抗原。结果 从 2 0 0 1年 1 0月到2 0 0 3年 6月两年内累计检测了 2 88例病人标本 ,总阳性率为 1 1 .1 % ( 32 /2 88) ,且以 A型流感病毒感染为主 ( 8.3% )。 2 0 0 2~ 2 0 0 3年流感季节 ,流感病毒感染的总阳性率为 1 8.9% ( 2 7/1 43) ,A型流感病毒感染阳性率占 1 6.1 % ( 2 3/1 43) ,B型流感病毒感染阳性率占 2 .8% ( 4 /1 43)。这一季节内阳性结果主要集中在2 0 0 3年 1月 ;5 5例病人标本中 A型流感病毒感染的阳性率为 2 9.1 % ( 1 6/5 5 ) ;B型流感病毒感染的阳性率为 1 .8%。其中 1 2 y以下儿童 2 5例 ,A型流感病毒感染阳性率为 40 % ( 1 0 /2 5 ) ,是 B型的 1 0倍 ( 1 /2 5 )。结论 采用日本生产的快速 EIA法检测 A型和 B型流感病毒抗原试剂盒 1 5 min内可确定标本中是否有流感病毒抗原并能同时区分出两种主要流感病毒感染类型— A型流感或 B型流感 ,有利于疾病的早期诊断、治疗和预防 ,防止社区 展开更多
关键词 流感 流感病毒抗原 A型流感病毒 b型流感病毒
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蒿芩清胆汤对流感病毒性湿热证NF-кB表达的影响 被引量:8
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作者 罗炳德 潘沅 +3 位作者 林培政 刘叶 万为人 郭进强 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期840-842,共3页
目的:应用蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热症模型进行治疗,并探索其中可能存在信号通路,为评价其作用打下实验基础。方法:将小鼠随机分为正常组、病毒组(单纯病毒感染)、模型组(高脂饮食+湿热环境+病毒感染)、阳性药物组(模型组+病毒唑... 目的:应用蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热症模型进行治疗,并探索其中可能存在信号通路,为评价其作用打下实验基础。方法:将小鼠随机分为正常组、病毒组(单纯病毒感染)、模型组(高脂饮食+湿热环境+病毒感染)、阳性药物组(模型组+病毒唑)、蒿芩清胆汤组(模型组+蒿芩清胆汤)。造模成功后取小鼠肺组织,用免疫组织化学法检测肺组织切片NF-κB阳性光密度值;提取小鼠腹腔巨噬细胞用RT-PCR的方法检测其NF-κBmRNA的表达,测定各组小鼠肺指数并计算肺指数抑制率,再进行比较。结果与模型组相比,蒿芩清胆汤组的小鼠肺病变程度明显好转,肺组织NF-κB的阳性表达及腹腔巨噬细胞NF-κBmRNA的表达均明显降低,差异具有显著性(P<0.05)。结论:蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热症疗效显著,而它是通过下调NF-κB的表达来干预肺泡内炎症反应,减少肺组织损伤从而达到治疗的目的。 展开更多
关键词 蒿芩清胆汤 流感病毒 湿热证 NF-Κb
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冷适应减毒B型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定(英文) 被引量:2
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作者 杨鹏辉 安文琪 +8 位作者 石辛甫 段跃强 罗德炎 张鹏飞 唐冲 邢丽 张玉静 刘秀梵 王希良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期358-363,共6页
以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB1... 以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB123-PA,pAB124-HA,pAB125-NP,pAB126-NA,pAB127-M和pAB128-NS.在成功拯救冷适应A型流感病毒的基础上,利用反向遗传学技术成功获救了具有感染性的重配B型流感病毒株,命名为rMDV-B.该重配病毒株以B/Ann Arbor/1/66为病毒骨架,其中HA和NA来源于2006~2007年当年流行株B/Malaysia/2506/2004.rMDV-B在鸡胚尿囊液和MDCK细胞中的HA效价可达1∶64~1∶512.实验结果暗示:从单一供体病毒株可以产生有效的减毒活B型流感病毒疫苗候选株,能够为将来人用流感疫苗的设计提供可借鉴的模型. 展开更多
关键词 b型流感病毒 反向遗传学 8质粒拯救系统 重组流感病毒
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B型流感病毒核衣壳蛋白ELISA捕获法的建立和临床应用 被引量:5
15
作者 丘立文 廖志勇 +4 位作者 王压娣 丁细霞 狄飚 袁国勇 车小燕 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1435-1438,共4页
目的制备和鉴定B型流感病毒核衣壳(N)蛋白单克隆抗体(mAb),建立双抗体夹心捕获抗原ELISA,用于B型流感病毒感染的早期诊断。方法用重组B型流感病毒N蛋白和B型流感病毒抗原免疫BALB/c小鼠制备mAb,采用ELISA间接法、免疫荧光(IFA)和免疫印... 目的制备和鉴定B型流感病毒核衣壳(N)蛋白单克隆抗体(mAb),建立双抗体夹心捕获抗原ELISA,用于B型流感病毒感染的早期诊断。方法用重组B型流感病毒N蛋白和B型流感病毒抗原免疫BALB/c小鼠制备mAb,采用ELISA间接法、免疫荧光(IFA)和免疫印迹(WB)进行筛选和鉴定,通过竞争抑制试验分析抗体识别表位,并采用抗体配对试验建立双抗体夹心捕获抗原ELISA检测B型流感病毒N抗原。结果获得12株特异性针对B型流感病毒N蛋白的mAb,识别8个不同的抗原位点,根据mAb识别抗原表位,对mAb进行多种组合的配对试验,筛选出2株单抗BN4和BN8混合作为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的单抗BN1和BN5混合作为测定抗体,建立了双抗体夹心ELISA,测定新鲜的漱口液标本的灵敏度达100%,而对冻融的漱口液标本检测灵敏度为83.9%,与其他呼吸道病毒如A型流感病毒、副流感病毒等无交叉反应,特异度达100%。结论获得特异性好的mAb,经过抗体的配对和优化,建立了一种灵敏度高、特异性强的B型流感病毒抗原的ELISA捕捉法,可用于B型流感病毒感染的早期实验室诊断及流行病学研究。 展开更多
关键词 b型流感病毒 核衣壳蛋白 单克隆抗体 ELISA
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2006年河北省新分离Victoria系B型流感病毒变异株血凝素基因序列分析 被引量:4
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作者 刘艳芳 齐顺祥 +2 位作者 郭瑞玲 刘兰芬 田茶 《实用预防医学》 CAS 2007年第5期1392-1395,共4页
目的分析2006年河北省分离的B型流感毒株HA抗原性和基因特性,阐明HA基因的变异与流感流行的关系。方法用MDCK(Madin Darby Canine Kidney)细胞分离培养流感病毒,血凝抑制(Hemasslutination Inhibition,HI)试验鉴定型别。提取病毒核糖核... 目的分析2006年河北省分离的B型流感毒株HA抗原性和基因特性,阐明HA基因的变异与流感流行的关系。方法用MDCK(Madin Darby Canine Kidney)细胞分离培养流感病毒,血凝抑制(Hemasslutination Inhibition,HI)试验鉴定型别。提取病毒核糖核酸(RNA),采用RT-PCR扩增病毒HA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAStar软件作分析处理。结果2006年在河北省流行的B型流感病毒属Victoria系,与北半球该流行期的国际疫苗株B/上海/361/02不同,其抗原性与最近的Victoria系代表株B/Hong Kong/330/2001相比已发生较大变异,核苷酸同源性仅为96.5%~97.2%,在抗原决定簇上有6个位点发生了氨基酸替换。结论2006年在河北省流行的Victoria系B型流感病毒是一个新的变种,在HA1区域发生的变异是今年B型流感流行的主要原因,应该引起重视。 展开更多
关键词 b型流感病毒 HAl基因 核苷酸序列
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一枝蒿酮酸酰胺衍生物的合成和抗A_3,B型流感病毒和单纯I,II型疱疹病毒活性研究 被引量:10
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作者 雍建平 阿吉艾克拜尔·艾萨 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1807-1812,共6页
从新疆一枝蒿中分离得到了单体化合物一枝蒿酮酸,然后以一枝蒿酮酸和有机胺为原料,在偶联剂DCC,HOBt/DMAP的作用下,合成了13种未见文献报道的一枝蒿酮酸酰胺衍生物2a~2m.所合成的化合物经过IR,1HNMR,ESI-MS等分析方法进行了表征,并对... 从新疆一枝蒿中分离得到了单体化合物一枝蒿酮酸,然后以一枝蒿酮酸和有机胺为原料,在偶联剂DCC,HOBt/DMAP的作用下,合成了13种未见文献报道的一枝蒿酮酸酰胺衍生物2a~2m.所合成的化合物经过IR,1HNMR,ESI-MS等分析方法进行了表征,并对化合物2a~2m进行初步的体外抗A3,B型流感病毒和单纯I,II型疱疹病毒活性研究.初步试验结果表明化合物2a同时具有抗A3,B型流感病毒活性,而且抗B型流感病毒活性比母体化合物的活性较高.化合物2d的抗B型流感病毒活性比母体化合物高16倍,化合物2e同时具有较强的抗单纯I,II型疱疹病毒活性. 展开更多
关键词 合成 一枝蒿酮酸酰胺衍生物 流感病毒 单纯疱疹病毒 活性研究
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四川省2006年B型流感病毒抗原性及基因特性研究 被引量:2
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作者 潘明 李天舒 +3 位作者 童文彬 黄婷 何树森 杨超美 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第12期2237-2238,2241,共3页
[目的]阐明2006年四川省流行的B型流感病毒血凝素抗原性及其基因变异情况。[方法]对2006年分离的B型毒株进行单向血凝抑制实验,再将病毒株进行血凝素基因HA1区核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,然后进行基因进化特性分析。[结果]200... [目的]阐明2006年四川省流行的B型流感病毒血凝素抗原性及其基因变异情况。[方法]对2006年分离的B型毒株进行单向血凝抑制实验,再将病毒株进行血凝素基因HA1区核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,然后进行基因进化特性分析。[结果]2006年四川省人群中同时流行着B型Victoria系和Yamagata系毒株。Victoria系毒株与B/Hongkong/330/2001比较,病毒单向血凝抑制效价均有4倍以上差异,并且在HA1区发生8个氨基酸替换,在197位增加一个糖基化位点。Yamagata系毒株与B/Shanghai/361/2002比较,病毒单向血凝抑制效价均有4倍以上差异,并且在血凝素基因HA1区有7个氨基酸位点发生改变,在196位增加一个糖基化位点。[结论]四川省2006年B型流感病毒的抗原性与B/Hongkong/330/2001、B/Shanghai/361/2002相比已经发生了变化。 展开更多
关键词 b型流感病毒 抗原特性 血凝素
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长沙县地区门诊儿童常见上呼吸道感染病原体共感染特征 被引量:2
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作者 彭杜平 洪迎瑞 +6 位作者 喻娟娟 范英杰 李兴军 王群 周凡琦 杨牡丹 李敏 《检验医学与临床》 2024年第4期524-529,共6页
目的分析长沙县上呼吸道感染病原谱特点,探讨该地区常见呼吸道病原体的共感染分布特征,为该地区呼吸道感染疾病的早期诊断和治疗提供可靠依据。方法回顾性分析湖南省长沙市长沙县妇幼保健院门急诊于2022年1—6月收治的17456例上呼吸道... 目的分析长沙县上呼吸道感染病原谱特点,探讨该地区常见呼吸道病原体的共感染分布特征,为该地区呼吸道感染疾病的早期诊断和治疗提供可靠依据。方法回顾性分析湖南省长沙市长沙县妇幼保健院门急诊于2022年1—6月收治的17456例上呼吸道感染患儿(年龄<14岁)的临床资料,患儿均采集咽拭子标本,采用多重聚合酶链反应检测6种常见病原体:甲型流感病毒(Flu.A)、乙型流感病毒(Flu.B)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、鼻病毒(HRV)、肺炎支原体(MP),分析不同性别、年龄患儿病原体检出情况,以及单一感染率与混合感染率等感染分布特征。结果17456例患儿病原体检出率为52.93%,主要感染病原体依次为Flu.B(24.00%)、HRV(11.41%)、Flu.A(8.41%)、RSV(6.54%)、ADV(5.20%)和MP(1.45%),混合感染率为4.02%。男童中MP与Flu.B或ADV混合感染率高于女童,差异有统计学意义(P<0.05)。随着年龄增长,Flu.B及MP检出率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。MP、ADV感染患儿更易发生混合感染,MP混合感染约占MP总感染的24.11%,MP混合感染患儿白细胞计数异常、中性粒细胞百分比异常、淋巴细胞百分比异常的比例相对MP单一感染患儿更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论该地区儿童常见上呼吸道感染病原体主要为Flu.B、HRV、Flu.A,常见病原体检出率及其混合感染率呈现年龄差异性,MP感染患儿易发生混合感染,及时、准确鉴别呼吸道感染病原体有利于早期诊断和合理用药。 展开更多
关键词 上呼吸道 病原体 共感染 儿童 肺炎支原体 甲型流感病毒 乙型流感病毒 呼吸道合胞病毒
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清透邪热方对甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 冯丽谦 杨丽丽 +2 位作者 李明真 孙雨 刘涛 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期289-294,共6页
目的研究清透邪热方体外抗甲型H1N1流感病毒效应机制。方法将清透邪热方制备成0.388、0.194、0.097、0.0485、0.024 25mg/mL不同浓度,用H1N1甲型流感病毒感染小鼠Ana-1巨噬细胞,给予不同浓度清透邪热方及达菲进行干预,检测肿瘤坏死因子... 目的研究清透邪热方体外抗甲型H1N1流感病毒效应机制。方法将清透邪热方制备成0.388、0.194、0.097、0.0485、0.024 25mg/mL不同浓度,用H1N1甲型流感病毒感染小鼠Ana-1巨噬细胞,给予不同浓度清透邪热方及达菲进行干预,检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)和白细胞介素-6(IL-6)表达,Toll样受体7(TLR7)及其下游髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)mRNA和蛋白表达。结果清透邪热方能够抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TNF-α、IP-10、IL-6的表达;其中清透邪热方0.024 25mg/mL组降低H1N1病毒感染组TNF-α、IL-6显著(P<0.01);清透邪热方0.097mg/mL组降低IP-10显著(P<0.01)。清透邪热方能够抑制H1N1流感病毒感染后Ana-1细胞后TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高;其中清透邪热方0.048 5mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7mRNA、MyD88mRNA表达显著(P<0.01);清透邪热方0.024 25mg/mL组抑制H1N1病毒感染组NF-κB mRNA表达显著(P<0.01);清透邪热方0.048 5mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7蛋白表达升高显著(P<0.01),清透邪热方0.388mg/mL组抑制H1N1病毒感染组MyD88蛋白、NF-κB蛋白表达显著(P<0.01)。结论清透邪热方通过抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高,减少TNF-α、IP-10和IL-6表达,起到抗病毒作用。 展开更多
关键词 清透邪热方 甲型H1N1流感病毒 小鼠Ana-1巨噬细胞 TLR-7/MyD88/NF-κb通路
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