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一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化
被引量:
2
1
作者
魏义举
龙海亭
+4 位作者
杨旭
李建芳
毕研伟
李健峰
徐维明
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期90-95,共6页
通过引物设计,利用重叠延伸PCR(OE-PCR)和搭桥PCR方法扩增得到A型流感病毒M2蛋白缺失跨膜区基因以及HA多表位基因,分别克隆测序后以pET28a+为表达载体构建重组质粒pET28a+-M2d-HA。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选获得了高效表达...
通过引物设计,利用重叠延伸PCR(OE-PCR)和搭桥PCR方法扩增得到A型流感病毒M2蛋白缺失跨膜区基因以及HA多表位基因,分别克隆测序后以pET28a+为表达载体构建重组质粒pET28a+-M2d-HA。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选获得了高效表达流感病毒缺失跨膜区M2蛋白和HA多表位蛋白片段重组融合蛋白的工程菌,表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的45%左右。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经亲和层析和阴离子交换层析纯化后复性,得到纯度在90%以上的目的蛋白。Westernblot结果显示纯化的重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。为进一步研究广谱型流感病毒亚单位疫苗奠定了基础。
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关键词
流感病毒
亚单位疫苗
多表位
表达纯化
抗原性
下载PDF
职称材料
题名
一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化
被引量:
2
1
作者
魏义举
龙海亭
杨旭
李建芳
毕研伟
李健峰
徐维明
机构
中国协和医科大学/中国医学科学院医学生物研究所
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期90-95,共6页
基金
云南省自然科学基金资助项目(2005C0062M)
文摘
通过引物设计,利用重叠延伸PCR(OE-PCR)和搭桥PCR方法扩增得到A型流感病毒M2蛋白缺失跨膜区基因以及HA多表位基因,分别克隆测序后以pET28a+为表达载体构建重组质粒pET28a+-M2d-HA。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选获得了高效表达流感病毒缺失跨膜区M2蛋白和HA多表位蛋白片段重组融合蛋白的工程菌,表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的45%左右。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经亲和层析和阴离子交换层析纯化后复性,得到纯度在90%以上的目的蛋白。Westernblot结果显示纯化的重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。为进一步研究广谱型流感病毒亚单位疫苗奠定了基础。
关键词
流感病毒
亚单位疫苗
多表位
表达纯化
抗原性
Keywords
influenza virus subunit vaccine multiepitope expression and purification antigenicity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化
魏义举
龙海亭
杨旭
李建芳
毕研伟
李健峰
徐维明
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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