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The Potential of Rat Inner Cell Mass and Fetal Neural Stem Cells to Generate Chimeras
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作者 郭继彤 李雪峰 +6 位作者 Shahnaz Fida 苟克勉 Nakisa Malakooti ZHANG Chun-fang John R Morrison Alan O Trounson DU Zhong-tao 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期158-164,共7页
The rat chimera is an important animal model for the study of complex human diseases. In the present study we evaluated the chimeric potential of rat inner cell masses (ICMs) and fetal neural stem (FNS) cells. In ... The rat chimera is an important animal model for the study of complex human diseases. In the present study we evaluated the chimeric potential of rat inner cell masses (ICMs) and fetal neural stem (FNS) cells. In result, three rat chimeras were produced by day 5 (D5) Sprague-Dawley (SD) blastocysts injected with ICMs derived from day 6 (D6) and D5 Dark Agouti (DA) blastocysts; four rat chimeras had been generated by D5 DA blastocyst injected with D5 SD ICMs. For the requirement of gene modification, cultured rat inner cell mass cells were assessed to produce chimeras, but no chimeras were generated from injected embryos. The potential to generate chimeras from rFNS and transfected rFNS cells were tested, but no chimeric pups were produced. Only 2 of 41 fetuses derived from D5 DA blastocyst injection with SD LacZ transfected rFNS cells showed very low number of LacZ positive cells in the section. These results indicate that DA and SD rat ICMs arc able to contribute to chimeras, but their potential decreases significantly after culture in vitro (P〈0.05), and rFNS cells only have the potential to contribute to early fetal development. 展开更多
关键词 Rat chimeras inner cell mass Rat fetal neural stem cells Blastocyst injection
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Generation of rat-mouse chimeras by introducing single cells of rat inner cell masses into mouse blastocysts
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作者 TiANDa Li Leyun Wang +7 位作者 Xinxin Zhang Liyuan Jiang Yufei Li Junjie Mao Tongtong Cui Wei Li Liu Wang Qi Zhou 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期325-328,共4页
In the field of developmental biology and regenerative medicine,mammalian interspecific chimeras have been proved very useful for investigating early embryonic development and the immune system establishment,and exten... In the field of developmental biology and regenerative medicine,mammalian interspecific chimeras have been proved very useful for investigating early embryonic development and the immune system establishment,and extended to a promising potential for human organ generation(Rossant et al.,1982). 展开更多
关键词 Generation of rat-mouse chimeras by introducing single cells of rat inner cell masses into mouse blastocysts GFP
原文传递
从早期胚胎分离和培养兔胚胎干细胞 被引量:1
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作者 周振明 桑润滋 +2 位作者 韩建永 孙国杰 李俊杰 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期70-73,共4页
采用昆白系小鼠成纤维细胞(MEF)作为饲养层,低糖DMEM+10%NBS+10%FCS+10 ng/mL LIF+10 ng/mL SCF+0.1 mmol/L β-巯基乙醇+100 IU/mL青霉青+80 IU/mL链霉素作培养基,从培养96 h的胚胎中分离出1个兔类ES细胞集落,克隆传至4代,悬浮培养的兔... 采用昆白系小鼠成纤维细胞(MEF)作为饲养层,低糖DMEM+10%NBS+10%FCS+10 ng/mL LIF+10 ng/mL SCF+0.1 mmol/L β-巯基乙醇+100 IU/mL青霉青+80 IU/mL链霉素作培养基,从培养96 h的胚胎中分离出1个兔类ES细胞集落,克隆传至4代,悬浮培养的兔类ES细胞团,可出现囊状胚。兔类ES细胞接种在衰老的饲养层上,出现滋养层细胞和上皮样细胞。 展开更多
关键词 胚胎分离 胚胎干细胞 内细胞团 胚胎培养
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家兔早期胚胎细胞发育能力的研究 被引量:1
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作者 杜淼 陆德裕 +2 位作者 沈三兵 黄国屏 邹贤刚 《实验生物学报》 CSCD 1990年第4期477-485,共9页
本文利用胚泡注射法制作嵌合体对家兔交配后96,120和144小时的ICM细胞的发育能力进行了研究。供体胚胎取自青紫兰灰免,受体胚胎取自新西兰白兔,结果表明96和120小时供胚的ICM细胞与96小时受胚胚泡组合后均能参与发育,形成嵌合兔,144小... 本文利用胚泡注射法制作嵌合体对家兔交配后96,120和144小时的ICM细胞的发育能力进行了研究。供体胚胎取自青紫兰灰免,受体胚胎取自新西兰白兔,结果表明96和120小时供胚的ICM细胞与96小时受胚胚泡组合后均能参与发育,形成嵌合兔,144小时者未获得嵌合体。由于120小时的ICM细胞发育的2只表型为雄性的嵌合兔,其中1只不育,其性腺和外周血核型表明不育兔为xx/xy性嵌合,性腺中有处于不同发育程度的卵巢和精细管,外周血含xx和xy两种核型。本实验结果首次证明家兔交配后120小时胚泡的ICM细胞仍具有参与嵌合体发育的能力。它不仅能参与体细胞的分化,并具有形成生殖细胞的能力。交配后144小时胚泡的ICM细胞其发育能力似乎已发生了局限。 展开更多
关键词 家兔 胚胎细胞 发育能力
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兔类胚胎干细胞的体外培养 被引量:1
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作者 陈晓宇 朱志伟 +1 位作者 于福先 潘建治 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期252-257,共6页
为了确立兔类胚胎干细胞(ESCs-like)体外培养方法,研究探讨了兔囊胚形成环境与饲养层细胞对内细胞团(ICM)增殖、ICM原代集落形成以及集落碱性磷酸酶(AKP)阳性率的影响,并在MEF和REF饲养层上进行了兔ESCs-like的体外培养。结果显示,去除... 为了确立兔类胚胎干细胞(ESCs-like)体外培养方法,研究探讨了兔囊胚形成环境与饲养层细胞对内细胞团(ICM)增殖、ICM原代集落形成以及集落碱性磷酸酶(AKP)阳性率的影响,并在MEF和REF饲养层上进行了兔ESCs-like的体外培养。结果显示,去除透明带桑葚胚在体外具有较高的囊胚发育率和囊胚贴壁率(P<0.05),体外发育囊胚ICM原代集落的AKP阳性率却显著低于体内发育囊胚(P<0.05);与MEF饲养层相比,REF饲养层上ICM原代集落的形成率显著偏低(P>0.05),但原代集落的AKP阳性率却显著高于其余各组(P<0.05);MEF饲养层与REF饲养层均支持兔ESCs-like的传代培养,但F3代后MEF组中ESCs-like的集落形成率显著高于REF组(P<0.05)。 展开更多
关键词 类胚胎干细胞(ESCs-like) 内细胞团(ICM) 集落 饲养层
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从家兔早期胚胎分离ES细胞影响因素的研究 被引量:1
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作者 曹君君 王新庄 +2 位作者 夏霞 王轶敏 牛晖 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第B09期68-72,共5页
比较胚胎的不同处理方法,不同饲养层对兔胚胎内细胞团(ICM)贴壁和增殖的影响。结果显示:消化掉外层粘蛋白和部分透明带的胚胎96 h贴壁率(85.29%,29/34)较高,内细胞团生长良好;超排组胚胎的贴壁率和内细胞团(ICM)原代克隆率与自然发情组... 比较胚胎的不同处理方法,不同饲养层对兔胚胎内细胞团(ICM)贴壁和增殖的影响。结果显示:消化掉外层粘蛋白和部分透明带的胚胎96 h贴壁率(85.29%,29/34)较高,内细胞团生长良好;超排组胚胎的贴壁率和内细胞团(ICM)原代克隆率与自然发情组差异不显著(85.71%vs 88.06%,21.43%vs19.40%,P>0.05);与对照组(12.5%,3.13%)相比,在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层(M EF)和兔胚胎成纤维细胞饲养层(REF)上培养获得的呈聚集状生长ICM及ICM原代克隆率较高(P<0.01),M EF组和REF组差异不显著(54.1%,22.95%vs 51.92%,17.31%,P>0.05),但REF饲养层培养效果不稳定。研究结果表明,兔早期胚胎消化掉外层粘蛋白和部分透明带有利于胚胎内细胞团贴壁和增殖;超排处理不影响从兔胚中分离胚胎干细胞(ES);小鼠胚胎成纤维细胞饲养层能有效支持兔胚内细胞团的贴壁和增殖。 展开更多
关键词 胚胎 胚胎干细胞 内细胞团 体外培养
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猪ICM注人囊胚获得嵌合胚的研究 被引量:1
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作者 樊俊华 魏庆信 +2 位作者 华文君 赵浩斌 郑新民 《湖北畜牧兽医》 1997年第2期7-10,共4页
以湖北白猪囊胚为ICM供体,杜洛克猪囊胚为受体囊胚,进行嵌合胚的研究.采用免疫外科和显微外科两种方法,分离184枚供体囊胚的ICM.用酶将ICM分散,而后注入到受体囊胚的囊胚腔中,共获67枚嵌合胚,经体外短期培养,其中35枚嵌合胚恢复,恢复率... 以湖北白猪囊胚为ICM供体,杜洛克猪囊胚为受体囊胚,进行嵌合胚的研究.采用免疫外科和显微外科两种方法,分离184枚供体囊胚的ICM.用酶将ICM分散,而后注入到受体囊胚的囊胚腔中,共获67枚嵌合胚,经体外短期培养,其中35枚嵌合胚恢复,恢复率为52.2%.将恢复的嵌合胚分别移入5头与供体囊胚猪同步的受体母猪子宫内,两头受孕,其中一头维持到分娩.产仔4头,但未见毛色嵌合现象. 展开更多
关键词 嵌合体 内细胞团 囊胚
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兔胚泡在着床前的形态变化 被引量:2
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作者 黄国屏 杜淼 陆德裕 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期220-224,I019,20,共7页
用透射电镜观察和比较了交配后4~7天兔胚泡的内细胞团细胞细微结构的变化。结果表明,交配后5天胚泡中的内细胞团细胞排列成单层,并在内侧出现原始内胚层以后,内细胞团细胞开始分化。我们的观察显示,兔胚泡的原始内胚层不是由内细胞团... 用透射电镜观察和比较了交配后4~7天兔胚泡的内细胞团细胞细微结构的变化。结果表明,交配后5天胚泡中的内细胞团细胞排列成单层,并在内侧出现原始内胚层以后,内细胞团细胞开始分化。我们的观察显示,兔胚泡的原始内胚层不是由内细胞团分层形成,而可能是由分散在胚泡壁滋养层内侧、形态与内细胞团细胞相似的一些细胞衍生而成。本文并对极滋养层的断裂和消失全过程进行了描述和讨论。 展开更多
关键词 胚泡 内细胞团 原始内胚层 形态
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兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清对8-细胞胚胎发育的影响
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作者 胡春超 崔利芳 +3 位作者 王鹏博 王棉娟 邸科前 李相运 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期812-818,共7页
目的制备兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清,观察其对小鼠胚胎发育的影响。方法用小鼠胚胎培养基稀释兔抗血清,分别稀释至50倍、100倍、200倍,用其对小鼠8-细胞胚胎进行培养,通过胚胎致密化、囊胚率、胚胎体外贴壁生长、细胞计数、胚胎移植和... 目的制备兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清,观察其对小鼠胚胎发育的影响。方法用小鼠胚胎培养基稀释兔抗血清,分别稀释至50倍、100倍、200倍,用其对小鼠8-细胞胚胎进行培养,通过胚胎致密化、囊胚率、胚胎体外贴壁生长、细胞计数、胚胎移植和免疫荧光染色观察胚胎发育状况。结果形态学上50倍稀释的抗血清能够抑制8-细胞胚胎的发育甚至使其死亡;100倍稀释的抗血清能够延迟8-细胞胚胎的致密化,并使得胚胎在囊胚化过程中出现空泡化的现象;200倍稀释的抗血清作用不明显。未作免疫处理的兔血清与空白对照组差异不显著。100倍稀释的抗血清能够显著抑制囊胚内细胞团(ICM)的发育、囊胚细胞分布紊乱、胚胎细胞数目减少以及囊胚畸形率增加。虽然囊胚的碱性磷酸酶和Oct4均呈阳性,但经胚胎移植后都不能正常发育。结论兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清能够抑制小鼠胚胎致密化过程和囊胚内细胞团的发育,使囊胚出现空泡化,细胞分布紊乱,抑制胚胎着床。 展开更多
关键词 兔抗血清 胚胎干细胞 内细胞团 致密化 体外培养 小鼠
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