推拿[扌衮]法对骨骼肌钝挫伤家兔模型损伤后炎症及纤维化的影响

目的 探讨推拿[扌衮]法对家兔骨骼肌钝挫伤后相关纤维蛋白表达的影响,以及对骨骼肌钝挫伤修复的作用机制。方法 健康成年新西兰兔15只,随机分为空白组(A)、模型组(B)和治疗(C)组,每组5只。使用自制改良重力锤打击装置对模型组和治疗组建立骨骼肌钝挫伤模型,治疗组家兔于造模成功后7 d给予推拿[扌衮]法干预,频率140次/min,2次/d,3 min/次,共治疗3 d。干预结束后1 d进行取材。HE和Masson染色观察兔股四头肌病理改变;Western-blot检测各组股四头肌基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、特异性抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及I型胶原蛋白(I collagen,COL-I)表达。结果 空白组肌组织结构规整;模型组肌组织形态迥异,边界模糊,间隙显著增宽,炎细胞浸润显著,四周胶原纤维生成增加;治疗组肌组织结构相对完整,间隙缩小,可见少量炎细胞浸润与胶原纤维生成,其病理修复程度显著优于模型组。检测家兔股四头肌MMP-9、TIMP-1、TGF-β1、COL-I表达,与空白组相比,模型组与治疗组明显增加(P<0.01);但治疗组显著低于模型组(P<0.01)。结论 推拿[扌衮]法能够通过减少细胞外基质过度沉积抑制骨骼肌纤维化,其作用机制可能与下调MMP-9、TIMP-1、TGF-β1及COL-I表达量有关。

IGF-1和黄芪丹参治疗骨骼肌钝挫伤的生物力学评价

目的 观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和黄芪丹参的治疗对大鼠骨骼肌钝挫伤愈合的影响。方法72只雄性SD大鼠,制作成右侧腓肠肌钝挫伤动物模型,随机分成3组,即IGF-1组(注射外源性IGF-1),中药组(注射黄芪丹参注射液)和自然愈合组。于伤后7、14、21、28、42、56d测双侧腓肠肌的最大颤搐强度、断裂强度和拉伸长度。结果(1)自然愈合组损伤骨骼肌力学指标在伤后8周仍明显低于正常;(2)IGF-1组和中药组改善的速度和程度均明显高于自然愈合组,以IGF-1组尤为显著;(3)IGF-1治疗组修复的损伤骨骼肌,其最大颤搐张力和断裂强度均明显高于健侧。结论(1)急性骨骼肌钝挫伤后,自然愈合组修复质量不佳;(2)IGF-1和黄芪丹参具有促进骨骼肌损伤修复的作用,其中以IGF-1的作用更为显著;(3)IGF-1可能有促进骨骼肌肥大的作用。

骨骼肌损伤修复过程中组织胰岛素样生长因子的表达

目的 :观察Sprague -Dawley (SD)大鼠骨骼肌钝挫伤后组织修复过程中局部内源性胰岛素样生长因子mR NA的表达情况。方法 :雄性SD大鼠腓肠肌钝挫伤后不同时期处死取材 ,分别进行组织学和超微结构观察 ,作逆转录-聚合酶链反应 (RT -PCR)分析。结果 :IGF -ImRNA含量在伤后 2、3、4、6、9、14天升高 ,IGF -II 3、4、6、9天升高 ;光镜及电镜发现大鼠腓肠肌局部充血、水肿、变性 ,部分肌纤维和肌丝紊乱、断裂。伤后 1天 ,肌纤维崩解、碎裂 ,许多炎症细胞吞噬碎片。 4天 ,出现大量成肌细胞核 ,有肌管形成。 14天 ,肌管融合成肌纤维 ,有部分胶原纤维疤痕形成。结论 :SD大鼠骨骼肌钝挫伤后修复过程中有内源性IGFmRNA的表达 ,与修复有关。

利用碱性成纤维细胞生长因子包裹的磁性纳米粒对大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌肉收缩力与松弛特性恢复的影响研究

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)包裹的磁性纳米粒对大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌肉收缩力与松弛特性恢复的影响。方法:通过免疫化学偶联技术,制备重组bFGF包裹的磁性纳米粒。将雄性Wistar大鼠随机分为自然愈合组、生理盐水组、小牛血清白蛋白(BSA)包裹磁性纳米粒组、bFGF包裹磁性纳米粒组和bFGF直接注射组,采用重物下落装置建立大鼠急性骨骼肌钝挫伤模型,按上述分组方式分别于损伤部位皮下注射药物或不作处理,在外加磁场的牵引下靶向聚焦至损伤部位。在损伤后第2、10、17、24和30天分别取样,测定和计算肌肉收缩力和应力松弛。结果:磁纳米化的bFGF对大鼠腓肠肌钝挫伤后第17、24天的收缩力有明显提高作用;在损伤后第2天,磁纳米化的bFGF即能使应力松弛恢复接近正常肌肉水平;与bFGF直接注射组相比,bFGF包裹磁性纳米粒对损伤肌肉收缩力的提高更明显(P<0.05,第17天)。结论:磁纳米化的bFGF比直接注射bFGF能明显改善大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌肉收缩应力和恢复应力衰减。

大鼠骨骼肌挫伤后bFGF和MMP-1阳性细胞率比值与损伤时间的关系研究

目的:研究骨骼肌挫伤后碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和金属蛋白酶-1(MMP-1)阳性细胞率表达比值的变化规律及其与骨骼肌损伤时间的关系,为骨骼肌挫伤时间推断提供新的方法。方法:将65只健康SD大鼠随机分成实验组(60只)及对照组(5只)。实验组大鼠采用自由落体法建立骨骼肌挫伤模型后根据处死时间不同再分为0. 5 h、1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、4 d、7 d、10 d和14 d共12组,每组5只;对照组常规饲养24 h后处死。取骨骼肌组织行常规HE染色及b FGF和MMP-1免疫组织化学染色,在光学显微镜下观察b FGF、MMP-1表达情况,对结果进行图像分析,计算阳性细胞率并完成相应统计学处理。结果:b FGF和MMP-1均在伤后呈现出上升-峰值-下降的表达趋势。当b FGF与MMP-1阳性细胞率的比值为0且MMP-1的阳性细胞率高于正常水平时,可推测骨骼肌挫伤时间在3 h内;当二者的比值大于0且小于1. 01时,可推测骨骼肌挫伤时间在3 h～3 d之间。结论:研究比较先后不同时间表达的两种生化指标阳性细胞率的比值,同时结合二者各自阳性细胞率的变化情况,可在一定程度上用于推断骨骼肌挫伤的时间范围。

大鼠骨骼肌挫伤后bFGF与c-Fos阳性细胞率比值与损伤时间关系的研究

目的研究大鼠骨骼肌挫伤模型细胞内碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和c-Fos阳性细胞率比值的变化与损伤时间的关系,为骨骼肌损伤时间的分析提供新的依据。方法选用健康成年SD大鼠65只,体重180~200g。依据处死时间的不同,随机分为12个实验组和1个对照组,每组5只。实验组大鼠于伤后0.5h、1h、3h、6h、12h、1d、2d、3d、4d、7d、10d、14d处死,制作大鼠骨骼肌挫伤模型;对照组大鼠常规饲养24h后处死。分别实验组大鼠取挫伤处骨骼肌及对照组大鼠正常骨骼肌作bFGF和c-Fos免疫组化染色,分析bFGF和c-Fos的表达情况。结果当骨骼肌损伤时间在0.5~3h时,bFGF和c-Fos的阳性细胞率比值为0,且c-Fos阳性细胞率升高;当骨骼肌损伤时间在3h^1d时,bFGF和c-Fos的阳性细胞率比值在0~1.22,且c-Fos阳性细胞率高于bFGF;当骨骼肌损伤时间>1d时,bFGF和c-Fos的阳性细胞率比值>1.22并持续升高。结论 bFGF和c-Fos阳性细胞率比值所呈现的单调性时序性改变,表明采用两种表达时间存在先后差异的生化指标,通过二者阳性细胞率比值的变化规律并结合二者阳性细胞率的变化情况,可推断大鼠骨骼肌挫伤的损伤时间。

巨刺干预对骨骼肌钝挫伤大鼠肝细胞生长因子表达的影响

目的:观察巨刺干预对骨骼肌钝挫伤大鼠肝细胞生长因子(HGF)的影响,探讨巨刺治疗骨骼肌钝挫伤的机制。方法:将SD大鼠54只随机分为空白组(6只)、模型组(24只)、巨刺组(24只),模型组与巨刺组再分为1、3、5、7 d 4个亚组,每亚组6只。空白组不做处理,模型组与巨刺组采用自制打击装置建立骨骼肌钝挫伤模型。损伤后24 h,巨刺组选取健侧"足三里"及患侧阿是穴对应的健侧处进行电针干预,每次15 min,每天1次,4个亚组分别治疗1、3、5、7 d;模型组不干预,4个亚组分别在损伤后1、3、5、7 d取材。HE染色观察大鼠腓肠肌形态变化,免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞率,Western blot检测HGF和PCNA表达量。结果:(1)HE显示,损伤后1 d,巨刺组腓肠肌炎性细胞少于模型组;损伤后3、5 d,巨刺组成肌细胞及肌管多于模型组;损伤后7 d,巨刺组新生肌细胞多于模型组。(2)免疫组化结果显示,损伤后1、3、5 d,巨刺组PCNA阳性细胞率均显著高于模型组(均P<0.001);损伤后7 d,巨刺组PCNA阳性细胞率显著低于模型组(P<0.001)。(3)免疫印迹结果显示,损伤后1、3、5 d,巨刺组HGF和PCNA蛋白表达量均显著高于模型组(均P<0.05);损伤后7 d,巨刺组中HGF和PCNA表达量显著低于模型组(均P<0.05)。结论:巨刺可调控骨骼肌钝挫伤大鼠HGF的表达,促进损伤骨骼肌肌卫星细胞激活、增殖、迁移和分化,加快骨骼肌损伤修复进程。

穴位按摩对受损骨骼肌血管内皮生长因子表达、微泡超声造影及血液流变的影响

目的将新西兰兔制成股四头肌钝挫伤模型，观察按摩损伤侧阳陵泉对受损骨骼肌血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达、微泡超声造影及血液流变的影响。方法采用随机数字表法将42只新西兰大白兔分为正常组（6只）、自然恢复组（18只）及按摩组（18只）。选用重物打击法将自然恢复组及按摩组实验兔制成股四头肌急性钝挫伤模型。按摩组实验兔于制模当日开始，在每天下午3：00时给予患侧阳陵泉按摩，每天持续15min，每天治疗1次。于制模后2h、3d、7d及10d时采用微泡超声影像技术检测各组实验兔局部肌肉病理改变；于制模后3d、7d及10d时采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组实验兔肌肉组织中VEGFmRNA表达；采用全自动血流变分析仪检测各组实验兔全血黏度及血浆黏度改变。结果制模后3d、7d及10d时发现自然恢复组肌肉组织中VEGFmRNA表达较正常组分别增加了35．00％、43．81％、17．94％；按摩组VEGFmRNA表达则较正常组分别增加了94．39％、85．69％、94．20％。微泡超声造影显示按摩组局部损伤修复情况明显优于自然恢复组。血液流变观察结果显示穴位按摩能调节实验兔全身血流状态，加速损伤愈合。结论按摩患侧阳陵泉能改善实验兔局部血供及全身血流状态，加速急性骨骼肌钝挫伤修复。