烟碱对白细胞介素-1β诱导的培养牛脑微血管内皮细胞表达α_vβ_3整合素的增强作用

目的观察烟碱对牛脑微血管内皮细胞（Bovine cerebral microvascular endothelial cells,ＢＣＭＥＣ）表达αvβ3整合素 的影响。方法离体培养新生牛脑微血管内皮细胞；血细胞计数仪测定ＢＣＭＥＣ粘附大鼠血单核细胞（ＭＮ）的数目；应用 ＥＬＩＳＡ法检测ＢＣＭＥＣ对αvβ3整合素的表达量。结果高浓度烟碱（１０－５mol/L)单独作用于ＢＣＭＥＣ２h后，使ＢＣＭＥＣ 对 ＭＮ的粘附率从（１２．９＋０．４）％增至（１５．７＋０．６）％，且 ＢＣＭＥＣ也可表达少量的 αvβ３整合素；而当烟碱与ＢＣＭＥＣ作用２ ｈ后，再经白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）诱导４ｈ，烟碱可浓度依赖性（１０－７～１０－５mol/L）地增强ＩＬ－１β的诱导作用，增加ＢＣＭＥＣ 对ＭＮ的粘附率以及Ｅ－选择素的表达量；抗αvβ3整合素抗体（αβＡＩＡb）能显著阻断ＩＬ－１β诱导ＢＣＭＥＣ后对ＭＮ的粘 附率。结论烟碱具有增强ＩＬ－１β诱导的脑微血管内皮细胞表达αvβ３整合素的作用。

人整合素β3亚基编码基因真核表达载体的构建

目的构建人整合素β3亚基金读码框(ORF)基因真核表达载体,为探讨整合索β3作为汉坦病毒(Hantavirus,HV)受体的特异性奠定基础。方法根据已公布的序列设计引物,用PCR方法从原核质粒中扩增出人整合素分子β3亚基ORF基因,应用TA克隆将其插入pcDNA3.1/V5-His-TOPO载体中,采用酶切和PCR鉴定,选取初筛正向插入的阳性克隆进行测序。结果序列分析表明与基因库中已发布的人整合素β3亚基ORF核苷酸序列基本一致,成功构建了pcDNA3.1-β3真核表达载体。结论上述结果表明,真核表达载体pcDNA3.1-β3已被成功构建,并为进一步研究汉坦病毒的病原学及生物学特征提供了基础。