重症烧伤休克大鼠白细胞表面beta-2整合素的表达

目的 :阐明烧伤休克时 beta-2整合素与白细胞 -内皮细胞粘附间的关系。方法 :将 16只 SD大鼠随机均分为对照组和烧伤休克组。应用流式细胞技术检测中性粒细胞及单细胞表面 beta-2整合素CD11a( LFA-1)和 CD11b( Mac-1)的表达量变化 ,同时比较观察二组动物肠系膜微循环中微静脉内白细胞与内皮细胞粘附数量变化。结果 :二组自身对照 (烫伤前与烫伤后 3 h或开腹前与开腹后 3 h)及相互对比结果显示 ,中性粒细胞及单核细胞表面 CD11a表达量均无显著差异 ( P>0 .0 5 ) ;在烧伤组 ,单核细胞 CD11b有显著降低( P<0 .0 5 ) ,而中性粒细胞 CD11b有显著升高 ( P<0 .0 5 )。微循环观察结果显示 ,休克组动物烫伤后随时程延长附壁滚动及紧密粘附的白细胞数量明显增多 ,而对照组则无明显变化。结论 :烧伤休克状态下 ,白细胞表面 CD11a数量无显著变化 ,而 CD11b数量则有所改变。白细胞 -内皮细胞粘附力的增强可能有 beta-2整合素功能活性上调参与。

整合素-α2和整合素-β3基因多态性与急性心肌梗死的相关性研究

目的探讨整合素-α2(ITGA2)基因C807T和整合素-β3(ITGB3)基因T176C多态性与急性心肌梗死(AMI)的关系及其脂蛋白水平对血脂的影响。方法选择AMI患者180例为AMI组,同期选择健康体检者200例为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测两组ITGA2和ITGB3的基因型,同时测定血脂、脂蛋白水平。结果 AMI组患者TC、TG、LDL-C水平明显高于对照组(P<0.05),2组的ITGB3基因T176C多态性分布差异无统计学意义(P>0.05),而ITGA2基因C807T多态性分布差异有统计学意义(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,T等位基因携带者患AMI的风险是C等位基因的1.608倍(OR=1.608,95% CI:1.194～2.165),携带T等位基因的AMI患者TC水平显著高于未携带T等位基因者(P<0.05)。结论 ITGA2基因C807T多态性与AMI的发病具有相关性,其中T等位基因可能是AMI的遗传易感基因;ITGA2基因C807T多态性可能通过影响血脂水平而影响AMI的发生。

2-乙酰基毛蕊花糖苷抗破骨细胞形成及其作用机制

目的:研究2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨细胞分化的影响及潜在的分子机制。方法:采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色及TRAP酶活力检测法评价0.1、1.0、10.0μmol·L^(-1)的2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨前体细胞向破骨细胞分化的影响;采用细胞增殖活性检测试剂盒(CCK8)法检测2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨细胞分化的影响;采用F-actin环染色和骨陷窝形成实验检测2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨前体细胞诱导形成的破骨细胞功能的影响;采用蛋白免疫印迹法(WB)检测破骨细胞分化相关特异性蛋白TRAP、整合素β3(ITGβ3)和细胞原癌基因c-Fos的表达水平。结果:与模型组相比,2-乙酰基毛蕊花糖苷显著降低TRAP活性(P<0.05),且对破骨前体细胞活力未见显著影响,提示2-乙酰基毛蕊花糖苷显著抑制破骨细胞形成。F-actin环染色和骨陷窝形成实验也显示2-乙酰基毛蕊花糖苷显著抑制破骨细胞骨吸收功能;WB实验结果表明2-乙酰基毛蕊花糖苷可显著抑制破骨细胞分化特异性蛋白TRAP、ITGβ3和c-Fos等蛋白水平的表达。结论:2-乙酰基毛蕊花糖苷能抑制破骨细胞的形成,作用机制可能与其抑制TRAP、ITGβ3和c-Fos的表达有关。

lncRNA HCG18调节miR-3619-5p/ITGB2轴对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lnc RNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)能否通过调控微小RNA(mi R)-3619-5p/整合素β2(ITGB2)轴参与乳腺癌细胞的迁移和侵袭。方法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞系及人乳腺上皮MCF-10A细胞系,qRT-PCR和Westernblot检测lncRNAHCG18、miR-3619-5p、ITGB2的表达水平;Starbase数据库预测lncRNA HCG18、ITGB2与miR-3619-5p的结合位点;利用转染技术将MCF-7细胞分为Control组、si-NC组、siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组、si-HCG18+miR-3619-5p inhibitor组、miR-NC组、miR-3619-5p mimics组、miR-3619-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-3619-5p mimics+ITGB2组,qRT-PCR和Western blot技术检测各组lncRNA HCG18、miR-3619-5p与ITGB2的表达水平,CCK-8、细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞增殖活力、迁移能力和侵袭能力。结果与MCF-10A组比较,MCF-7组细胞lncRNA HCG18、ITGB2表达水平升高,miR-3619-5p表达水平下降(P<0.05);lncRNA HCG18、ITGB2与miR-3619-5p具有结合位点;沉默lncRNA HCG18表达或过表达miR-3619-5p可抑制MCF-7细胞增殖活力、迁移和侵袭,抑制miR-3619-5p表达或过表达ITGB2可部分逆转沉默lncRNAHCG18表达或过表达miR-3619-5p对MCF-7细胞增殖活力、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论lncRNAHCG18在乳腺癌细胞中表达上调,沉默lncRNA HCG18的表达可能通过上调miR-3619-5p表达、下调ITGB2表达抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭。

乳腺癌中Casitas B细胞淋巴瘤谱系B、受体酪氨酸激酶、整合素β2的表达及其与MRI特征的相关性研究

目的本研究旨在通过探究乳腺癌磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)特征与Casitas B细胞淋巴瘤谱系B(B cell tymphoma B,CBL-B)、受体酪氨酸激酶(recombinant AXL receptor tyrosine kinase,AXL)、整合素β2(integrin beta 2,ITGB2)表达间的相关性,以期为乳腺癌的早期诊断、治疗方案的制订及术前无创评估乳腺癌预后提供影像学新思路。方法选择2017年9月至2020年9月于临沂市中心医院就诊并行手术治疗的204例乳腺癌女性患者作为研究对象,采用飞利浦全数字Ingenia3.0 T MRI进行扫描。记录肿瘤直径、形状、边缘、强化方式、时间-信号强度曲线(time-signal intensity curve,TIC)曲线类型、早期强化率和ADC值。采用免疫组织化学SP法检测乳腺癌组织和癌旁组织中的CBL-B、AXL、ITGB2表达水平。结果乳腺癌组织中CBL-B低表达、AXL高表达和ITGB2高表达者所占比例显著高于癌旁组织(χ^(2)=19.663、12.711、10.180,P均<0.05)。单因素分析结果显示,MRI特征中的肿瘤直径、形状、早期强化率、ADC值与乳腺癌CBL-B蛋白表达有关(χ^(2)=8.904、7.184、9.330,8.706,P均<0.05);MRI特征中的肿瘤直径、形状和TIC分型与乳腺癌AXL蛋白表达有关(χ^(2)=11.397、21.951、12.718,P均<0.05);MRI特征中的肿瘤直径、TIC分型、早期强化率和ADC值与ITGB2蛋白表达有关(χ^(2)=8.703、10.271、4.193、4.490,P均<0.05)。二元Logistic回归分析结果显示,肿瘤直径≥3 cm和早期强化率≥100%是乳腺癌CBL-B低表达的独立危险因素(P均<0.05);肿瘤直径≥3 cm、形状不规则或毛刺是AXL高表达的独立危险因素(P均<0.05);肿瘤直径≥3 cm、早期强化率≥100%、ADC值≥1.12×10^(-3) mm^(2)/s是乳腺癌ITGB2高表达的独立危险因素(P均<0.05)。结论乳腺癌MRI特征有助于预测CBL-B、AXL、ITGB2的表达,从而为疾病的临床诊治和预后评估提供参考依据。

基于串联质谱标签定量蛋白质组学的痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的 利用串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)定量蛋白质组学技术研究痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用机制。方法 建立II型胶原蛋白诱导的RA大鼠模型,并给予痹祺胶囊进行干预,取对照组(C)、模型组(M)、痹祺胶囊0.4 g/kg给药组(BQ)的左膝关节组织,采用TMT定量蛋白质组学技术分析鉴定各组大鼠膝关节组织中的蛋白,以表达差异倍数≥1.2或差异倍数≤0.83且P<0.05筛选M vs C、BQ vs M、BQ vs C差异表达蛋白,并分析经痹祺胶囊干预后有回调趋势的差异表达蛋白。最后通过GeneCards、OMIN数据库检索RA疾病靶点,与回调蛋白进行交集分析得到与RA疾病相关的回调蛋白,对其进行基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,明晰痹祺胶囊对RA的作用机制。结果 经痹祺胶囊干预后有121个差异蛋白具有回调趋势,其中38个与RA疾病相关,如β2整合素(integrin subunit beta 2,ITGB2)、钙调蛋白2(calmodulin 2,CALM2)、钙调磷酸酶B亚基(calcineurin subunit B type 1,PPP3R1)、前列腺素合成酶(prostacyclin synthase,PTGIS)等。生物信息学分析发现这些回调蛋白参与了与RA相关的多条信号通路,如ITGB2参与调节RA及白细胞跨内皮细胞迁移信号通路;CALM2、PPP3R1通过调节钙信号通路,进而调节T细胞、B细胞受体信号通路、T细胞分化及破骨细胞分化等信号通路;PTGIS参与花生四烯酸代谢途径等。结论 痹祺胶囊可能通过干预ITGB2、PPP3R1、CALM2、PTGIS等蛋白的表达,调节了与RA相关的多条信号通路,发挥免疫抑制、抗炎、活血、抑制骨破坏和骨吸收、抑制血管翳生成等多方面药理作用,从而达到治疗RA的效果。

整合素基因多态性与缺血性脑卒中及血脂的相关研究

目的 探讨整合素-Ⅱ2基因（integrin alpha-2，ITGA2）C807T和整合素-β3基因（integrin beta-3，ITGB3）T176C多态性与缺血性脑卒中的关系及其对血脂、脂蛋白水平的影响。方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和DNA测序的方法检测265例缺血性脑卒中患者和280名对照组ITGA2和ITGB3的基因型；同时按常规方法测定血浆脂质、脂蛋白水平。结果 缺血性脑卒中组总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triacylglycerol，TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（low density lipoproteincholesterol，LDL-C）水平明显高于对照组（P〈0．05），ITGB3基因T176C多态性在缺血性脑卒中组和正常人群中的分布差异无统计学意义（P〉0．05），而ITGA2基因C807T多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义（P〈0．05），等位基因频率的相对风险分析发现，T等位基因携带者患缺血性脑卒中的风险是C等位基因的1．455倍（OR=1．455，95％CI：1．134～1．866），携带T等位基因的缺血性脑卒中个体血浆TC水平显著高于不携带者（P〈0．05）。结论 ITGA2基因C807T多态性与缺血性脑卒中的发病具有相关性，其中T等位基因可能是缺血性脑卒中的遗传易感基因；ITGA2基因C807T多态性可能通过影响血脂水平而影响缺血性脑卒中的发生。