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Genetic Diversity of Chinese and Swedish Rapeseed (Brassica napus L.) Analyzed by Inter-Simple Sequence Repeats (ISSRs) 被引量:6
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作者 MAChao-zhi StineTuevesson 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2003年第2期137-143,共7页
We have compared genetic diversity of 24 Chinese weak-winter, Swedish winter and spring B. napus accessions by inter-simple sequence repeats (ISSRs). By cluster analysis (UPGMA) based on 125 polymorphism bands amplifi... We have compared genetic diversity of 24 Chinese weak-winter, Swedish winter and spring B. napus accessions by inter-simple sequence repeats (ISSRs). By cluster analysis (UPGMA) based on 125 polymorphism bands amplified with 20 primers, the 24 accessions were divided into three groups. Six Swedish winter lines and eight Chinese weak-winter lines were in the group I and the groupⅡwere two Chinese weak-winter lines XiangyoulS and Bao81. The third group contained eight Swedish spring lines. Principal co-ordinates analysis (PCO) showed similar groupings to cluster analysis. Results from cluster analysis and PCO analysis showed very clearly that Chinese weak-winter, Swedish spring and winter accessions were distinguished from each other and Chinese weak-winter accessions in this study were genetically closer to Swedish winter accessions than to Swedish spring accessions. The Chinese weak-winter accessions had larger diversity than Swedish spring or winter accessions did. This study indicated that ISSR is a suitable and effective tool to evaluate genetic diversity among rapeseed germplasm. 展开更多
关键词 Brassica napus L. Genetic diversity inter-simple sequence repeats (issrs)
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Determination of the Population Structure of Fig Genotypes from Algeria and Turkey Using Inter Primer Binding Site-Retrotransposon and Simple Sequence Repeat Markers
2
作者 Hakima Belttar Abdelouhab Yahia +6 位作者 Seda Nemli Duygu Ates Semih Erdogmus Birgul Ertan Sara Himour Serra Hepaksoy M. Bahattin Tanyolac 《Agricultural Sciences》 2017年第12期1337-1357,共21页
In order to identify the variation and estimate the genetic diversity among the fig (Ficus carica L.) genotypes collected from Algeria and Turkey, the genetic relationships between 86 genotypes were investigated using... In order to identify the variation and estimate the genetic diversity among the fig (Ficus carica L.) genotypes collected from Algeria and Turkey, the genetic relationships between 86 genotypes were investigated using 23 inter primer binding sites (iPBS)-retrotransposon and 16 simple sequence repeat (SSR) primers. A total of 63 polymorphic bands for the iPBS-retrotransposon markers and 25 alleles for the SSR markers were identified with an average of 2.7 and 1.6 per primer, respectively. The average value of polymorphism information content (PIC) for the iPBS markers (0.73) was higher than that for the SSR markers (0.69). Applying the neighbor-joining method to the combined iPBS-retrotransposon and SSR data, the fig genotypes were clustered into two groups. The STRUCTURE software was used to determine the population structure. Among the genotypes studied, two populations (K = 2) were identified indicating a low diversity between the Algerian and Turkish varieties. Both types of markers were able to differentiate all the fig genotypes and were efficient in discriminating the closely related genotypes. Our data also showed that as a universal marker, iPBS-retrotransposon is a useful tool for the molecular characterization of fig genotypes. 展开更多
关键词 FICUS CARICA L. inter PRIMER Binding Sites-Retrotransposon simple sequence repeat Genetic Diversity Population Structure
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基于ISSR-PCR体系鉴别樟芝单核体交配型
3
作者 李晓晖 盖舒萍 +5 位作者 汪雯翰 琚建伟 张守兵 丁保安 李燕 贾薇 《中国食用菌》 2024年第2期68-75,共8页
通过原生质体单核化技术获得樟芝单核体,基于内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列进行鉴定,采用14个引物对简单重复序列区间(inter-simple sequence repeats,ISSR)进行多态性扩增,筛选条带清晰、重复性好的引物用于樟芝... 通过原生质体单核化技术获得樟芝单核体,基于内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列进行鉴定,采用14个引物对简单重复序列区间(inter-simple sequence repeats,ISSR)进行多态性扩增,筛选条带清晰、重复性好的引物用于樟芝单核体的交配型鉴定。结果表明,通过原生质体单核化技术获得31个樟芝单核体,经ITS序列分析确定获得的单核体为樟芝。以单核体S2、S10、S14、S27的DNA为模板,对14条ISSR引物进行初步筛选,得到4个条带清晰、重复性好的引物P7、P9、P21、P25用于交配型鉴定。单核体S9和S25为同一交配型,两者与S2为不同交配型,通过镜检进一步验证S9、S25可以与S2形成具有锁状联合的双核菌株。该方法可明显缩短樟芝单核体交配型的鉴定时间。 展开更多
关键词 樟芝 单核体 交配型 issr ITS
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^(60)Co-γ射线辐照对月季“蜻蜓”的诱变效应及突变体ISSR分析 被引量:1
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作者 夏萌 左悠 +2 位作者 杨碧楠 李博文 明凤 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2023年第4期443-452,共10页
为培育花色独特、栽培品质优良的新型蓝色月季,使用^(60)Co-γ射线对月季“蜻蜓”进行辐照处理,并设置40,50,60 Gy三个剂量梯度.月季“蜻蜓”辐照产生的诱变效应表现为:(1)辐照处理均会对植株造成一定的损伤和产生抑制生长效应,且高剂... 为培育花色独特、栽培品质优良的新型蓝色月季,使用^(60)Co-γ射线对月季“蜻蜓”进行辐照处理,并设置40,50,60 Gy三个剂量梯度.月季“蜻蜓”辐照产生的诱变效应表现为:(1)辐照处理均会对植株造成一定的损伤和产生抑制生长效应,且高剂量辐照处理的植株在生长过程中,出现生长点或老叶叶尖枯死、新叶生长缓慢、新芽不再萌发、植株根部萎蔫且出现腐烂发黑现象;(2)突变体在花型、花色、花期、花瓣等花部形状上与对照组(CK)存在较大差异,具体表现在突变体的最大花径增大或缩小、花色改变、花期缩短、花瓣数量和花瓣形态改变.采用简单重复序列区间扩增多态(ISSR)分子标记技术及非加权组平均法(UPGMA)对辐照处理的月季“蜻蜓”材料进行遗传多样性和亲缘关系聚类分析,发现月季“蜻蜓”经过辐照诱变之后遗传物质有不同程度的突变.以上结果为培育优质蓝色月季品种奠定了基础. 展开更多
关键词 ^(60)Co-γ射线 物理诱变 简单重复序列区间扩增多态(issr) 分子育种 月季
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基于ISSR标记分析连云港地区野生灵芝种质资源遗传多样性及亲缘关系
5
作者 纪伟 苏文英 +4 位作者 刘晓梅 王一璞 任立凯 奚小艳 陈克龙 《中国农学通报》 2024年第6期128-134,共7页
为分析连云港地区野生灵芝种质资源之间的亲缘关系和多样性水平,以连云港地区15株野生灵芝为研究对象,采用ISSR分子标记进行遗传多样性及亲缘关系分析。15株野生灵芝中扩增出多态性条带为40条,片段大小在250~2000 bp之间,平均等位基因位... 为分析连云港地区野生灵芝种质资源之间的亲缘关系和多样性水平,以连云港地区15株野生灵芝为研究对象,采用ISSR分子标记进行遗传多样性及亲缘关系分析。15株野生灵芝中扩增出多态性条带为40条,片段大小在250~2000 bp之间,平均等位基因位点1.8个,平均有效等位基因数1.2454,平均Nei's遗传多样性0.1742,平均Shannon信息指数0.2925,有效等位基因数(Ne)的变化范围为1.0000~1.6423,Nei's遗传多样性(He)的变化范围为0.1031~0.3911,Shannon信息指数(I)的变化范围为0.2235~0.5799,根据ISSR分子标记的遗传聚类图,15株灵芝相似系数范围在0.415~0.866之间,相似系数为0.63时,可以将15株野生灵芝分为四组。研究结果为连云港地区灵芝种质资源分类、保护和品种创制提供了参考依据。 展开更多
关键词 灵芝 简单序列重复区间 遗传多样性 聚类分析 亲缘关系
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辐射诱变小兰屿蝴蝶兰叶片生长与表型差异品种间ISSR分析
6
作者 李威 宋子涵 +2 位作者 何国仁 陈佳瀛 明凤 《上海师范大学学报(自然科学版中英文)》 2024年第3期380-387,共8页
使用60Co-γ射线对小兰屿蝴蝶兰进行辐射处理,分别对单唇瓣、三唇瓣品种采用15 Gy和20 Gy剂量的处理,采用简单重复序列区间扩增多态(ISSR)分子标记技术对经辐射处理的小兰屿蝴蝶兰材料进行遗传多样性和亲缘关系分析.筛选出8条引物,共扩... 使用60Co-γ射线对小兰屿蝴蝶兰进行辐射处理,分别对单唇瓣、三唇瓣品种采用15 Gy和20 Gy剂量的处理,采用简单重复序列区间扩增多态(ISSR)分子标记技术对经辐射处理的小兰屿蝴蝶兰材料进行遗传多样性和亲缘关系分析.筛选出8条引物,共扩增出89条清晰的谱带,其中72条表现出多态性,多态比例为80.9%.单唇瓣品种之间遗传相似范围在0.54~0.97,三唇瓣品种之间遗传相似范围在0.54~0.91,说明辐射突变品种之间有丰富的遗传多态性.单唇瓣小兰屿蝴蝶兰经过辐射后,在遗传距离L=0.65处可分为4组,三唇瓣小兰屿蝴蝶兰经过辐射后,在遗传距离L=0.72处可分为7组.观察生长表型发现:经辐射处理的小兰屿蝴蝶兰出现生长快速表型,部分经辐射处理的单唇瓣株系生长率比对照组更高,而经辐射处理的三唇瓣株系生长率普遍比对照组高.非加权组平均法(UPGMA)聚类分析表明:小兰屿蝴蝶兰经过辐射诱变后有不同程度的突变,突变程度最大的品种在遗传距离图谱上自成一支.以上结果为培育优质蝴蝶兰品种奠定了材料基础. 展开更多
关键词 60Co-γ射线 物理诱变 简单重复序列区间扩增多态(issr) 分子育种 小兰屿蝴蝶兰
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基于ITS和ISSR标记的灵芝遗传多样性和群体结构分析
7
作者 赵翠敏 赵岑 +3 位作者 张兰迎 吴倩倩 武恩斯 李敏敏 《北方园艺》 CAS 北大核心 2024年第3期103-111,共9页
以来自不同地理区域的48个灵芝种质资源为试材,采用ITS和ISSR分子标记的方法,研究了灵芝遗传多样性,以期利用遗传信息数据较理想地显示出不同灵芝菌株的遗传多样性。结果表明:通过进行ITS序列扩增测序,将48个灵芝菌株分为赤芝(35个)、... 以来自不同地理区域的48个灵芝种质资源为试材,采用ITS和ISSR分子标记的方法,研究了灵芝遗传多样性,以期利用遗传信息数据较理想地显示出不同灵芝菌株的遗传多样性。结果表明:通过进行ITS序列扩增测序,将48个灵芝菌株分为赤芝(35个)、无柄灵芝(11个)、四川灵芝(1个)、古巴栓孔菌(1个)。5条ISSR引物共扩增得到53条条带,多态性条带比率为96.23%,Nei′s基因多样性为0.27,Shannon′s信息指数为0.43。ISSR标记遗传相似系数约为0.70,将48个灵芝菌株分为3组,其中第1组为11个无柄灵芝,第2组为菌株29“盆景1”,其他菌株为第3组,说明2种标记结合分析能够更加准确分析不同菌株间的亲缘关系。菌株16和17同为赤芝,且ISSR分子标记遗传相似系数达0.98,推测可能为同一品种,为生产中出现的同物异名现象。该研究选取的用于PCR扩增的ISSR引物,多态性较好、稳定性较高,能有效鉴别出无柄灵芝与其他灵芝,并揭示种质的遗传多样性和群体遗传结构,可为灵芝种质资源保护及优质种质材料选育提供参考依据,以期更好地推动灵芝产业健康发展。 展开更多
关键词 灵芝 ITS issr 遗传多样性
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ISSR-PCR在石斛种间鉴别中的应用 被引量:73
8
作者 沈颖 徐程 +1 位作者 万小凤 张铭 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期423-427,共5页
目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位... 目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位点最少7个,最多14个,扩增片段大小为220-1260 bp。其中,引物UBC-807和UBC-864具有较高的多态性条带比率,均可以独立将所有被测种区分开来。结论ISSR-PCR作为一种简便、可靠的分子标记鉴定技术,可以作为石斛属种间鉴别的方法之一。 展开更多
关键词 石斛属 鉴别 引物 多态性位点 扩增片段 琼脂糖凝胶电泳 同种 issr-PCR 分子标记 鉴定技术
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苦瓜ISSR-CR反应体系的建立 被引量:7
9
作者 王绪 邓俭英 +3 位作者 方锋学 张曼 张玲玲 孙德利 《种子》 CSCD 北大核心 2007年第1期15-18,共4页
以苦瓜(Momordica charantia L.)为试材,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度、循环次数对苦瓜ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20μl的反应体系中,Mg^2+的用量为1.2—1.6mmol/L,dNTPs浓度为0.2mmol/L,引物的浓度为0... 以苦瓜(Momordica charantia L.)为试材,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度、循环次数对苦瓜ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20μl的反应体系中,Mg^2+的用量为1.2—1.6mmol/L,dNTPs浓度为0.2mmol/L,引物的浓度为0.25μmol/L,Taq DNA聚合酶的用量为1u,模板DNA的用量为30~50ng,在46.4—51.7℃的退火温度下35个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。 展开更多
关键词 苦瓜 issr(intersimple sequence repeat) 反应体系 优化
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Assessment of Genetic Diversities of Selected Laminaria (Laminariales, Phaeophyta) Gametophytes by Inter-Simple Sequence Repeat Analysis 被引量:17
10
作者 Xiu-LiangWANG Chen-LinLIU +2 位作者 Xiao-JieLI Yi-ZhouCONG De-LinDUAN 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2005年第6期753-758,共6页
Abstract: Inter-simple sequence repeat (ISSR) analysis was used to assess genetic diversity among 10 pairs of male and female Laminaria gametophytes. A total of 58 amplification loci was obtained from 10 selected ISSR... Abstract: Inter-simple sequence repeat (ISSR) analysis was used to assess genetic diversity among 10 pairs of male and female Laminaria gametophytes. A total of 58 amplification loci was obtained from 10 selected ISSR primers, of which 34 revealed polymorphism among the gametophytes. Genetic distances were calculated with the Dice coefficient ranging from 0.006 to 0.223. A dendrogram based on the unweighted pair-group method arithmetic (UPGMA) average showed that most male and female gametophytes of the same species were clustered together and that 10 pairs of gametophytes were divided into four groups. This was generally consistent with the taxonomic categories. The main group consisted of six pairs of gametophytes, which were selected from Laminaria japonica Aresch. by intensive inbreeding through artificial hybridization. One specific marker was cloned, but was not converted successfully into a sequence characterized amplified region (SCAR) marker. Our results demonstrate the feasibility of applying ISSR markers to evaluate Laminaria germplasm diversities. 展开更多
关键词 GAMETOPHYTES genetic analysis inter-simple sequence repeat LAMINARIA sequence characterized amplified region
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石蒜属植物种质资源ISSR-PCR反应体系的建立 被引量:14
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作者 张雷凡 高燕会 +3 位作者 朱玉球 刘志高 童再康 黄华宏 《浙江林学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期156-161,共6页
为进一步开展石蒜属Lycoris植物种质资源遗传多样性研究,利用正交试验设计的方法,从Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物等5因素4水平,对石蒜属植物ISSR(intersimple sequence repeats)反应体系进行优化,确立了石蒜属植物ISSR的最佳反应体... 为进一步开展石蒜属Lycoris植物种质资源遗传多样性研究,利用正交试验设计的方法,从Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物等5因素4水平,对石蒜属植物ISSR(intersimple sequence repeats)反应体系进行优化,确立了石蒜属植物ISSR的最佳反应体系:在20μL反应体系中,含1×Buffer,模板DNA 50 ng,2.5 mmol.L-1氯化镁(MgCl2),0.15 mmol.L-1dNTP,25.05 nkatTaq聚合酶,0.5μmol.L-1引物。进一步进行梯度退火试验,确定最适宜退火温度为57℃。 展开更多
关键词 植物学 石蒜属 简单序列重复区间(issr) 正交设计 PCR聚合酶链反应体系
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何首乌ISSR-PCR反应体系的建立与优化 被引量:12
12
作者 赵振华 严萍 +1 位作者 焦旭雯 赵树进 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期567-569,共3页
目的建立和优化ISSR-PCR反应体系。方法通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响。结果建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内... 目的建立和优化ISSR-PCR反应体系。方法通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响。结果建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100 ng模板、1.5 UTaqDNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs。扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45 s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。结论这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序。 展开更多
关键词 何首乌 简单重复序列区间扩增多太性 反应体系 建立与优化
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皱边石杉内生真菌ISSR-PCR反应条件的优化 被引量:3
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作者 史云峰 禹利君 +3 位作者 刘仲华 黄璜 胥锦桦 朱楠楠 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期398-403,共6页
以从皱边石杉中分离纯化出的99株内生真菌DNA为材料,优选出10条ISSR引物(UBC842、UBC848、UBC850、UBC856、UBC861、UBC864、UBC868、UBC873、UBC880、UBC887)的最适退火温度,并对其进行ISSR–PCR反应体系单因素试验及正交试验优化,建... 以从皱边石杉中分离纯化出的99株内生真菌DNA为材料,优选出10条ISSR引物(UBC842、UBC848、UBC850、UBC856、UBC861、UBC864、UBC868、UBC873、UBC880、UBC887)的最适退火温度,并对其进行ISSR–PCR反应体系单因素试验及正交试验优化,建立皱边石杉内生真菌ISSR–PCR的优化反应体系,即25μL反应体系中,10×PCR Buffer(Mg2+浓度为2.0 mmol/L)2.5μL,dNTPs(10 mmol/L)0.6μL,引物(10 pmol/μL)2.0μL,Taq E(1 U/μL)1.5μL,DNA模板(10 ng/μL)3μL,无菌ddH2O 15.4μL。以UBC873引物对99株内生真菌基因组DNA进行PCR扩增,初步获知皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性非常丰富。 展开更多
关键词 皱边石杉 内生真菌 内部简单重复序列 正交试验
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茉莉花ISSR-PCR反应体系的建立 被引量:19
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作者 邱长玉 高国庆 +3 位作者 陈伯伦 周瑞阳 牛英 张加强 《北方园艺》 CAS 北大核心 2008年第2期214-217,共4页
以茉莉花为材料,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对茉莉花ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20μL的反应体中,Mg^2+的用量为1.2~1.6mmol/L,dNTPs浓度为0.15mmol/L,引物的浓度为0.5μmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1U... 以茉莉花为材料,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对茉莉花ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20μL的反应体中,Mg^2+的用量为1.2~1.6mmol/L,dNTPs浓度为0.15mmol/L,引物的浓度为0.5μmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为40-70ng,在48-50℃的退火温度下40个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。 展开更多
关键词 茉莉花issr反应体系 优化
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山桐子ISSR-PCR反应体系的建立与引物筛选 被引量:5
15
作者 代莉 蔡齐飞 +3 位作者 王艳梅 刘震 黄帅 李芳芳 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期548-551,共4页
以山桐子幼嫩叶片为材料,通过对CTAB法(十六烷基三甲基溴化铵法)的改良,摸索出适于山桐子基因组DNA提取的方法,并以核酸纯度、片断分布情况等指标来评价,获取高质量基因组DNA;用2个不同样品对65条ISSR引物进行了筛选,筛选出了22条扩增... 以山桐子幼嫩叶片为材料,通过对CTAB法(十六烷基三甲基溴化铵法)的改良,摸索出适于山桐子基因组DNA提取的方法,并以核酸纯度、片断分布情况等指标来评价,获取高质量基因组DNA;用2个不同样品对65条ISSR引物进行了筛选,筛选出了22条扩增图谱清晰的ISSR引物.结果表明,获得的基因组质量较高,获得的ISSR引物适用于山桐子,同时也表明反应体系对山桐子的ISSR分析是可行的;并对影响山桐子基因组DNA的制备、引物筛选及扩增反应因素进行了简要的分析讨论. 展开更多
关键词 山桐子 issr 引物筛选
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ISSR-PCR对我国旋毛虫7个地理株的分子鉴定 被引量:5
16
作者 牛洪涛 崔晶 王中全 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期113-116,共4页
目的探讨对不同种和地理株旋毛虫进行分子鉴定。方法利用简单重复序列区间-PCR(inter simple sequencerepeat-PCR,ISSR-PCR)标准引物对5种旋毛虫及我国旋毛虫7个地理株基因组DNA进行扩增,并观察影响扩增效果的因素。结果5种旋毛虫均分... 目的探讨对不同种和地理株旋毛虫进行分子鉴定。方法利用简单重复序列区间-PCR(inter simple sequencerepeat-PCR,ISSR-PCR)标准引物对5种旋毛虫及我国旋毛虫7个地理株基因组DNA进行扩增,并观察影响扩增效果的因素。结果5种旋毛虫均分别扩增出了各自的特异性条带:旋毛虫(T1)2条(950bp和850bp),乡土旋毛虫(T2)1条(850bp),布氏旋毛虫(T3)3条(1 300bp、950bp和700bp),伪旋毛虫(T4)1条(600bp),纳氏旋毛虫(T7)有4条带(1 700bp、1 450bp、1 050bp、900bp)。我国有6个猪源旋毛虫地理株均扩增出了与T1相同的2个特异性条带(950bp、850bp)。此外,T1、河南株、云南株、哈尔滨株、黑龙江同江株还扩增出了另外2条弱带(500bp和400bp);但湖北株和天津株则无这2条弱带,湖北株扩增出了1 350bp的条带,天津株扩增出了1 600bp的条带。非猪源的广西株与T1相比,缺少950bp的条带。对1条旋毛虫肌幼虫,在80%酒精保存24w的肌幼虫,在10%甲醛、0.2%叠氮钠及0.05%柳硫汞溶液保存9 w的肌幼虫,应用ISSR-PCR均可扩增出其特异性条带。结论ISSR-PCR用于旋毛虫种的分子鉴定具有良好的稳定性和敏感性;我国6个猪源旋毛虫地理株均为T1,其中云南株、河南株、哈尔滨株及黑龙江同江株可归为一类,湖北株和天津株可归为另一类,来自果子狸的广西株分类地位待定。 展开更多
关键词 旋毛虫 中国地理株 分子鉴定 issr—PCR 分类
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应用ISSR-PCR对10个菊花品种进行遗传多样性分析 被引量:6
17
作者 程华 李琳玲 +4 位作者 张心玲 方佳 郑永生 姜德志 程水源 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第20期4292-4297,共6页
中国的菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)品种数量众多,形态变异丰富,适应性强,分布广泛,遗传背景非常复杂,这为菊花品种的资源调查、分类鉴定、遗传多样性分析等带来了困难。试验采用分子标记技术,对福白菊(C.morifolium cv.Fubai... 中国的菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)品种数量众多,形态变异丰富,适应性强,分布广泛,遗传背景非常复杂,这为菊花品种的资源调查、分类鉴定、遗传多样性分析等带来了困难。试验采用分子标记技术,对福白菊(C.morifolium cv.Fubaiju)、杭白菊(C.morifolium cv.Hangbaiju)等10个菊花品种进行了分类鉴定及亲缘关系研究,结果显示,在简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(Inter-simple sequence repeat-Polymerase chain reaction,ISSR-PCR)分子标记反应体系及引物的筛选方面,选择了条带数量多和清晰度高的菊花反应体系,应用野生福白菊对39条ISSR引物进行了筛选,淘汰了扩增效果差、带型不易辨认的引物,最终确定12条引物用于菊花品种的鉴定。ISSR-PCR聚类分析结果表明,12条ISSR引物扩增出了185条清晰的、重复性好的ISSR条带,其中多态性条带有176条,多态性比率高达95.1%。应用NTSYS 2.10e软件进行UPGMA法聚类分析,在相似系数0.55处可将10个菊花品种大致分为3类,结果福白菊与其他杭菊品种在遗传上有较大的差异。 展开更多
关键词 菊花 简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应 分子标记 遗传多样性
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银杏ISSR-PCR扩增反应体系的建立与优化 被引量:12
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作者 徐奭 张耀川 +4 位作者 李树成 姚涛 牛振刚 陈文俐 白素兰 《生物技术通讯》 CAS 2012年第1期80-85,共6页
目的:为了对银杏进行分子鉴定和遗传关系的分析,建立银杏ISSR-PCR的最佳扩增反应体系。方法:采用正交设计和单因素梯度实验,对影响ISSR-PCR反应体系的5个主要因素(Mg2+、dNTP、引物、模板DNA及Taq DNA聚合酶)进行筛选及优化。结果:银杏2... 目的:为了对银杏进行分子鉴定和遗传关系的分析,建立银杏ISSR-PCR的最佳扩增反应体系。方法:采用正交设计和单因素梯度实验,对影响ISSR-PCR反应体系的5个主要因素(Mg2+、dNTP、引物、模板DNA及Taq DNA聚合酶)进行筛选及优化。结果:银杏25μL ISSR最佳扩增反应体系包含10×Taq反应缓冲液、2.5 mmol/L MgCl2、0.45 mmol/L dNTP、1.2μmol/L引物(UBC861)、10 ng模板DNA及0.9 U Taq DNA聚合酶,使用此ISSR扩增反应体系,获得了10株不同性别银杏DNA的清晰条带,验证了该体系的稳定性。结论:优化的反应体系为采用ISSR分子标记技术对银杏进行遗传多样性分析、遗传育种和转基因等研究奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 银杏 issr-PCR 反应体系优化
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西洋杜鹃ISSR-PCR反应体系的建立及优化 被引量:3
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作者 郑宇 何天友 +3 位作者 陈凌艳 陈礼光 荣俊冬 郑郁善 《福建林学院学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期126-130,共5页
以西洋杜鹃(Rhododendron hybridum)叶片提取的基因组DNA为材料,用引物UBC880(序列为GGA GAG GAG AGGAGA)研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对该种植物ISSR扩增结果的影响。确立了可用于西洋杜鹃ISSR-PCR分析的最适宜的PCR反应体系... 以西洋杜鹃(Rhododendron hybridum)叶片提取的基因组DNA为材料,用引物UBC880(序列为GGA GAG GAG AGGAGA)研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对该种植物ISSR扩增结果的影响。确立了可用于西洋杜鹃ISSR-PCR分析的最适宜的PCR反应体系:20μL PCR反应体积中,含10 ng模板DNA,0.25 mmol.L-1 dNTPs,2.0 mmol.L-1 Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.4μmol.L-1引物,并确定引物UBC 880的最适退火温度为54.4℃。PCR扩增程序:94℃预变性5 min,94℃变性45 s,54.4℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共40个循环后,72℃延伸7 min,4℃保存。应用该ISSR体系对11份西洋杜鹃种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性。 展开更多
关键词 西洋杜鹃 简单序列重复区间 反应体系 优化
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福建省玉米大斑病菌ISSR-PCR反应体系的优化和引物的筛选 被引量:3
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作者 代玉立 甘林 +5 位作者 阮宏椿 杨静民 石妞妞 杜宜新 陈福如 杨秀娟 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期810-817,共8页
【目的】明确适用于福建省玉米大斑病菌ISSR分子标记的反应体系和引物。【方法】采用单因素水平优化法对ISSR-PCR扩增反应中的Taq聚合酶用量、dNTPs浓度、Mg^2+浓度、模板DNA浓度、PCR反应循环数以及引物的最佳退火温度等重要参数进行... 【目的】明确适用于福建省玉米大斑病菌ISSR分子标记的反应体系和引物。【方法】采用单因素水平优化法对ISSR-PCR扩增反应中的Taq聚合酶用量、dNTPs浓度、Mg^2+浓度、模板DNA浓度、PCR反应循环数以及引物的最佳退火温度等重要参数进行优化。【结果】适合福建省玉米大斑病菌群体遗传多样性分析的ISSR-PCR反应体系(25μL)为:Taq聚合酶0.55 U、dNTPs 0.30 mmol·L^-1、Mg 2+1.30 mmol·L^-1、DNA模板100 ng、引物10 pmol。ISSR-PCR扩增程序为:94℃预变性4 min;94℃变性45 s,51.2~56.0℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃延伸10 min。利用优化的反应体系从56条ISSR引物中筛选出稳定性好、多态性高的引物10条:UBC117、UBC118、UBC808、UBC835、UBC847、UBC855、UBC856、UBC857、UBC866和UBC887,其最佳退火温度分别为55.6、53.1、51.2、51.2、56.0、53.1、53.1、51.2、51.2和51.2℃。利用优化的ISSR-PCR反应体系对21株供试菌株进行PCR扩增,结果表明,相同地理来源以及不同地理来源菌株间的DNA多态性均不同,表明福建省玉米大斑病菌群体存在丰富的遗传多样性。【结论】本研究优化的ISSR-PCR反应体系和筛选的引物可用于福建省玉米大斑病菌群体遗传多样性和遗传结构的研究。 展开更多
关键词 玉米大斑病菌 反应体系 简单序列重复区间扩增多态性 玉米大斑病 遗传多样性
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