IL-33介导Treg细胞功能参与布鲁氏菌病免疫调节机制研究

目的分析白细胞介素(IL)-33和调节性T(Treg)细胞在布鲁氏菌病(简称布病)患者中的变化特点,验证IL-33对Treg细胞的调节作用,阐明布病中IL-33对Treg细胞调节的免疫机制。方法采集2021年1-12月在新疆维吾尔自治区人民医院就诊的39例布病患者(布病组)和同期体检的42例健康对照者(健康对照组)的外周血,使用AimPlex试剂盒检测血清IL-33水平,使用流式细胞术检测Treg细胞比例,提取外周血单个核细胞(PBMC)进行体外培养试验观察IL-33刺激后和阻断后叉头框蛋白P3(Foxp3)比例和mRNA表达水平变化。结果与健康对照组比较,布病组IL-33水平与Treg细胞比例均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。体外试验显示,两组PBMC在IL-33刺激后Foxp3比例和mRNA表达水平显著增高,IL-33阻断后Foxp3比例和mRNA表达水平显著回落,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论布病患者IL-33和Treg细胞显著增多,IL-33促进Treg细胞的免疫功能,阻断IL-33有望成为免疫治疗布病的潜在靶点。

白细胞介素-33/ST2信号通路调控辅助T细胞/调节性T细胞免疫平衡参与慢性阻塞性肺疾病发病机制分析

目的探究基于白细胞介素-33(IL-33)/ST2信号通路激活树突状细胞(DCs)成熟,调控辅助T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡参与小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病的临床机制。方法选择36只SPF级C57BL/6健康小鼠,随机选取12只作为健康对照组,其余小鼠用于制作COPD模型,采用香烟烟雾刺激和气道内注入脂多糖的方式建立COPD模型,以小鼠肺部压力-容积曲线移动或弹性程度降低为造模成功,将模型小鼠按照随机数字表法分为COPD组(n=12)和IL-33抗体干预组(n=12)。于造模开始第3周时为IL-33抗体组小鼠腹腔注射IL-33抗体,健康对照组和COPD组小鼠注射同等剂量生理盐水,于造模开始第28天在小鼠清醒状态下采集三组小鼠的内眦静脉从血液,使用PBS液冲洗三组小鼠右肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),比较三组小鼠外周血、BALF中DCs、IL-33表达情况差异,采集肺组织甲醛固定后染色处理,光镜下观察肺组织病理变化。结果COPD组小鼠外周血、BALF中Th17/Treg比值均高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);COPD组小鼠外周血、BALF中DCs成熟标志物CD80、CD86水平均高于健康对照组和IL-33抗体组,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ低于健康对照组和IL-33抗体组,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR分析显示,COPD组小鼠IL-33灰度值高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);三组小鼠气道炎症病理差异较大。结论调控IL-33/ST2信号通路可以激活DCs细胞成熟,恢复COPD小鼠Th17/Treg平衡,改善COPD小鼠炎症指标水平。

基于决策曲线分析抗RA33、IL-6及hs-CRP水平对类风湿关节炎治疗反应性的预测价值

目的基于决策曲线分析抗类风湿关节炎-33(抗RA33)、白细胞介素-6(IL-6)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平对类风湿关节炎(RA)患者治疗反应性的预测价值。方法选取2021年1月至2023年8月该院收治的102例RA患者,收集患者临床资料并检测其血清抗RA33、IL-6及hs-CRP水平。使用甲氨蝶呤与依那西普治疗半年后,根据治疗反应性分为反应良好组与无反应组。采用Pearson相关分析RA患者抗RA33、IL-6、hs-CRP水平与RA疾病活动评分(DAS28)的相关性,多因素Logistic回归分析RA患者治疗无反应的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析抗RA33、IL-6、hs-CRP在RA无反应中的效能。采用决策曲线分析抗RA33、IL-6、hs-CRP单独与联合预测RA患者治疗无反应的净收益情况。结果治疗半年后,反应良好和中度的患者共80例(反应良好组),无效22例(无反应组)。反应良好组病程短于无反应组,DAS28评分低于无反应组(P<0.05)。反应良好组血清抗RA33、IL-6、hs-CRP水平低于无反应组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,血清抗RA33、IL-6、hs-CRP水平与DAS28评分均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,DAS28评分及抗RA33、IL-6、hs-CRP水平为RA患者治疗无反应的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清抗RA33、IL-6、hs-CRP单独及联合预测患者治疗无反应的曲线下面积分别为0.729、0.814、0.831、0.948,三者联合的预测价值更高。决策曲线分析显示,在大多合理阈值范围内,血清抗RA33、IL-6、hs-CRP联合预测对RA患者治疗反应性的总体净收益高于单独预测的净收益。结论抗RA33、IL-6、hs-CRP水平与RA患者治疗反应性密切相关,三者联合预测治疗无反应的临床价值及净收益较高。

参附黄配方对脓毒症小鼠不同脑区IL-33/ST2轴的影响

目的 观察参附黄配方对脓毒症小鼠不同脑区白细胞介素-33(IL-33)/ST2轴的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、脓毒症组和参附黄组。脓毒症组和参附黄组采取盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症模型。参附黄组术后给予每日2次的2.5 g/kg参附黄配方0.5 m L灌胃;脓毒症组和对照组给予每日2次的纯净水0.5 mL灌胃。采用临床分级评价小鼠临床指数,采用神经功能分级评价神经功能指数,采用酶联免疫标记法评价各组小鼠前额叶皮层和海马区IL-33和ST2的含量。结果 与对照组比较,脓毒症组小鼠临床指数显著增高,神经功能指数显著降低(P<0.05);前额叶皮层和海马区IL-33和ST2蛋白表达显著增多(P<0.05)。与脓毒症组相比较,参附黄组临床指数显著降低(P<0.05),神经功能指数显著增高(P<0.05);前额叶皮层和海马区IL-33蛋白表达显著增高(P<0.05),ST2蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论 参附黄配方对CLP小鼠临床症状和神经功能具有一定保护作用,其机制可能与调节IL-33/ST2轴有关。

白细胞介素-33信号通路对乙型肝炎相关肝细胞癌患者单核细胞的调控效应

目的检测乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)患者白细胞介素-33(IL-33)水平,分析IL-33信号通路对HBV相关HCC患者单核细胞功能的影响。方法收集31例HBV-HCC患者、33例慢性乙肝(CHB)患者和21例对照者,采集外周血,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),磁珠法分选CD14^(+)单核细胞。采集11例HBV-HCC患者癌旁组织和肿瘤组织,分离肝脏内淋巴细胞(IHL)。酶联免疫吸附试验检测血浆IL-33和可溶型肿瘤生长抑制因子2(s ST2),流式细胞术检测CD14^(+)单核细胞中ST2。重组人IL-33刺激CD14^(+)单核细胞,检测细胞因子分泌、CD14^(+)单核细胞HLA-DR比例以及单核细胞杀伤功能变化。结果CHB组和HBV-HCC组血浆IL-33水平均低于对照组(P<0.01);HBV-HCC组血浆s ST2水平高于CHB组和对照组(P<0.01);HBV-HCC组PBMC中ST2^(+)CD14^(+)细胞比例低于CHB组和对照组(P<0.0001);HBV-HCC组CD14^(+)单核细胞中ST2平均荧光强度(MFI)低于CHB组和对照组(P<0.0001)。肿瘤组织IHL中ST2^(+)CD14^(+)细胞比例低于癌旁组织(P<0.05),肿瘤组织IHL中ST2 MFI低于癌旁组织(P<0.05)。HBV-HCC组和CHB组单核细胞活性低于对照组,肿瘤组织IHL中单核细胞比例低于癌旁组织,表现为HLA-DR比例降低,分泌肿瘤坏死因子-α、IL-6、IL-1β和颗粒酶B的水平降低(P<0.05)。0.1 ng/ml和1 ng/ml的IL-33刺激HBV-HCC患者分选的CD14^(+)单核细胞后,ST2^(+)CD14^(+)细胞比例无明显变化(P>0.05),但细胞因子分泌水平升高,HLA-DR^(+)CD14^(+)单核细胞的比例升高(P<0.05)。但仅1 ng/ml的IL-33刺激后单核细胞诱导靶细胞死亡的比例升高(P<0.0001)。结论HBV-HCC患者单核细胞活性降低,IL-33信号通路可增强HBV-HCC患者单核细胞功能活性。

IL-33促进非小细胞肺癌EMT的研究

目的探讨IL-33参与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的过程及临床意义。方法生物信息学分析IL-33在非小细胞肺癌中的生物学行为。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/网站下载非小细胞肺癌芯片GSE5843和GSE102287进行生存分析。免疫组织化学评估非小细胞肺癌中蛋白IL-33、ST2的表达,免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的组织定位和分布。体外CCK-8法检测IL-33刺激下A549、SK-MES-1细胞的细胞活力,划痕实验和Transwell实验检测IL-33促进A549、SK-MES-1细胞迁移和侵袭能力。免疫印迹实验检测最佳浓度IL-33处理下ST2、E-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)蛋白的表达。结果生物信息学分析发现IL-33可通过EMT参与NSCLC的进展和转移,生存分析提示IL-33与非小细胞肺癌预后有关,IL-33高表达者,预后差(P<0.05)。免疫组化结果显示与癌旁组织相比,非小细胞肺癌中IL-33、ST2高表达,E-cadherin表达下降,Vimentin明显增多(P<0.05),且在肺腺癌与肺鳞癌之间的表达无明显差异(P>0.05)。IL-33可促进A549、SK-MES-1细胞增殖、迁移和侵袭。与HPAEpiC细胞相比,A549、SK-MES-1细胞高表达ST2、Vimentin、MMP-9、E-cadherin(P<0.05),IL-33刺激下A549、SK-MES-1细胞ST2、Vimentin、MMP-9表达明显升高,E-cadherin明显下降(P<0.05)。结论非小细胞肺癌中IL-33通过ST2促进EMT过程,促进非小细胞肺癌进展。

血清YKL-40、IL-33、copeptin水平与急性心肌梗死患者预后的关系

目的 探讨血清甲壳质酶蛋白(YKL)-40、白介素-33(IL-33)、和肽素(copeptin)水平与急性心肌梗死患者预后的关系。方法 选择2020年9月至2021年3月秦皇岛市第一医院心内科的重症监护室(CCU)收治的200例急性心肌梗死患者作为研究对象,按照是否发生心血管不良事件将患者分为预后良好组和预后不良组。对比两组的血清YKL-40、IL-33、copeptin水平差异,采用Spearman相关性分析分析血清YKL-40、IL-33、copeptin水平与急性心肌梗死患者预后的关系,采用多因素Logistic回归分析急性心肌梗死患者预后不良的独立影响因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估血清YKL-40、IL-33、copeptin水平对急性心肌梗死患者预后不良的预测价值。结果 预后良好组的血清YKL-40、IL-33、copeptin水平均低于预后不良组,差异具有统计学意义(t=7.788、5.415、4.534,P<0.05)。Spearman相关分析结果表明,血清YKL-40、IL-33、copeptin水平与心肌梗死患者预后不良发生呈正相关(r=0.450、0.340、0.274,P均<0.001)。Logistic多因素回归分析显示,年龄、高血压、YKL-40、IL-33、Copeptin过度表达是急性心肌梗死患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清YKL-40、IL-33、copeptin联合预测急性心肌梗死不良预后的效能更高,其曲线下面积(AUC)为0.872,灵敏度、特异度分别为79.0%、81.9%。结论 血清YKL-40、IL-33、copeptin水平与急性心肌梗死患者预后不良密切相关,其表达对急性心肌梗死预后具有良好的预测价值。

氯吡格雷联合阿司匹林对急性脑梗死IL-18、IL-33、NT-pro BNP的影响

目的:分析氯吡格雷联合阿司匹林对急性脑梗死患者血清白细胞介素(IL)-18、IL-33及N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平及疗效的影响。方法:选取萍乡市人民医院2020年7月—2021年8月收治的急性脑梗死患者72例,以随机数字表法分组,对照组(n=36)在常规治疗基础上使用氯吡格雷治疗,试验组(n=36)在对照组基础上使用阿司匹林治疗,两组均连续服药4周,比较两组炎症因子、NT-proBNP水平,并比较临床疗效及用药不良反应。结果:两组治疗7 d后IL-6、IL-18、IL-33、NT-pro BNP水平均低于治疗前,且试验组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组临床总有效率为97.22%,高于对照组的77.78%,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组总用药不良反应发生率为11.11%,与对照组的8.33%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:氯吡格雷联合阿司匹林治疗急性脑梗死,可更好地发挥药效,提高临床效果,降低IL-6、IL-18、IL-33、NT-pro BNP水平,安全有效。

红花对系统性硬化症小鼠皮肤及肺组织IL-33、ST2的影响

目的:观察红花对博来霉素(BLM)诱导的系统性硬化症(SSc)小鼠皮肤和肺组织IL-33、ST2表达水平的影响,探究红花减轻SSc小鼠皮肤及肺组织纤维化的作用机制。方法:将32只BALB/C小鼠随机分为醋酸泼尼松组、红花水煎液组、模型组、对照组,每组8只。除对照组外,其他各组小鼠背部皮下注射BLM诱导建立SSc小鼠模型,0.1 ml/次,1次/d,连续28 d;造模期间,醋酸泼尼松组小鼠灌胃浓度为0.45 g/ml的醋酸泼尼松溶液0.2 ml/次,1次/d,连续28 d;红花水煎液组小鼠灌胃浓度为0.15 g/ml的红花水煎液0.2 ml/次,1次/d,连续28 d;对照组和模型组小鼠灌胃生理盐水0.2 ml/次,1次/d,连续28 d。给药期间观察各组小鼠一般生存状态及皮肤硬化情况,给药结束后禁食12 h,予腹腔注射2%戊巴比妥钠过量麻醉处死小鼠后取材。小鼠皮肤和肺组织切片脱蜡后行HE、Masson染色,根据皮肤HE玻片白细胞计数评定皮肤炎症水平,根据皮肤Masson染色胶原容积分数(CVF)评估皮肤的纤维化程度;分别采用Szapiel、Ashcroft评分系统评价小鼠肺部炎症水平及纤维化水平;免疫组织化学法(IHC)检测小鼠皮肤和肺组织的IL-33、ST2表达。结果:(1)与模型组小鼠比较,红花水煎液组和醋酸泼尼松组小鼠的精神状态、体质量、反应水平、背部剃毛区域被毛再生情况、皮肤弹性及硬度等有不同程度的改善。(2)对照组小鼠皮肤和肺组织形态结构基本正常,局部可见少量炎症反应;模型组小鼠皮肤和肺组织可见密集炎症细胞浸润和胶原纤维大量沉积;红花水煎液组和醋酸泼尼松组小鼠皮肤和肺组织炎症细胞浸润和胶原纤维沉积较模型组有所减轻。模型组小鼠皮肤炎症评分、CVF及肺组织Ashcroft、Szapiel评分较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);红花水煎液组和醋酸泼尼松组小鼠上述指标较模型组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)与对照组比较,模型组小鼠皮肤和肺组织IL-33和ST2表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,红花水煎液组和醋酸泼尼松组小鼠IL-33和ST2表达水平均有不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:红花水煎液可以抑制BLM诱导的SSc小鼠皮肤和肺组织的免疫炎症,减轻纤维化程度,其作用机制可能与其明显降低SSc小鼠皮肤和肺组织的IL-33、ST2表达水平有关。

支气管哮喘患儿血清IL-8、IL-33水平与肺功能指标的相关性

目的探讨支气管哮喘患儿血清白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-33(IL-33)水平与肺功能指标的相关性。方法选取该院儿科哮喘门诊2023年1-6月收治的60例支气管哮喘患儿作为研究组,根据支气管哮喘严重程度将研究组患儿分为轻度组(22例)、中度组(27例)和重度组(11例),另选取同期于该院就诊的60例气管异物或气道畸形的非哮喘患儿为对照组。比较研究组与对照组,以及不同病情严重程度患儿间的血清IL-8、IL-33水平,采用Pearson相关分析支气管哮喘患儿血清中IL-8、IL-33水平与各项肺功能指标的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析患儿血清IL-8、IL-33对重度支气管哮喘的诊断价值。结果研究组第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pre)、用力呼气50%时的瞬间流速(FEF50%)及最大呼气中期流速(FEF25%~75%)均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组血清IL-8和IL-33水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);轻度组、中度组、重度组血清IL-8和IL-33水平依次升高,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清IL-8、IL-33水平与肺功能指标均呈负相关(P<0.05);血清IL-8和IL-33联合检测诊断重度支气管哮喘的曲线下面积(AUC)为0.861,大于血清IL-8(0.660)和IL-33(0.681)单独检测的AUC(Z=2.579、1.978,P=0.023、0.047)。结论支气管哮喘患儿血清IL-8和IL-33水平与各肺功能指标密切相关,二者联合检测对重度支气管哮喘具有较高的诊断价值。

血清TLR4、IL-25、IL-33与小儿肺炎支原体肺炎病情的相关性及预测价值分析

目的分析血清Toll样受体4(TLR4)、白细胞介素-25(IL-25)、白细胞介素-33(IL-33)与小儿肺炎支原体肺炎(MPP)病情的相关性及预测价值。方法回顾性选取2022年6月—2023年6月苏州大学附属第二医院收治的150例MPP患儿作为研究对象。根据MPP患儿病情,分为难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)组、轻症肺炎支原体肺炎(MMPP)组;根据患儿预后情况,分为预后不良组、预后良好组。患儿入院时均接受血清TLR4、IL-25、IL-33检测,统计患儿基线资料。采用二元logistic回归分析血清TLR4、IL-25、IL-33水平与MPP患儿病情严重程度及预后的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清TLR4、IL-25、IL-33水平对MPP患儿病情严重程度的预测价值。结果RMPP组、预后不良组病变范围≥2个肺叶、病变类型为大片状阴影患儿占比分别高于MMPP组、预后良好组,TLR4相对表达量、IL-25、IL-33水平分别高于MMPP组、预后良好组(P<0.05);二元logistic回归分析结果显示,病变类型为大片状阴影,血清TLR4相对表达量、IL-25、IL-33高表达是MPP患儿病情为MMPP、预后不良的危险因素(OR>1,P<0.05);ROC曲线显示,血清TLR4相对表达量、IL-25、IL-33水平及联合检测预测MPP患儿病情为RMPP的曲线下面积(AUC)均>0.70,有一定的预测价值,其中联合检测最高。结论血清TLR4、IL-25、IL-33水平与MPP患儿病情严重程度及预后密切相关,三者水平能够有效预测MPP患儿病情发展。

血清IL-33在阿尔茨海默病、轻度认知障碍、主观认知下降患者中的表达水平及意义

目的比较血清白介素-33(IL-33)在阿尔茨海默病(AD)、轻度认知障碍(MCI)、主观认知下降(SCD)患者中的水平变化差异,探讨IL-33与认知功能的相关性,并评价血清IL-33的诊断价值。方法选取在新疆医科大学第二附属医院住院的AD患者46例、MCI患者42例、SCD患者51例及同期健康体检人群[健康对照(HC)组50例]。对所有受试者进行神经心理学评估,并用ELISA法检测血清IL-33的水平。比较4组的一般资料和外周血常规生化资料,分析血清IL-33水平与简易精神状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分的相关性,采用逻辑回归分析AD的影响因素,并绘制ROC曲线分析IL-33的诊断价值。结果1)4组的血清IL-33水平差异有统计学意义(P<0.05)。与HC组相比,AD组、MCI组IL-33水平较低(P<0.05);与SCD组相比,AD组、MCI组IL-33水平较低(P<0.05);与MCI组相比,AD组IL-33水平较低(P<0.05);SCD组与HC组IL-33水平差异无统计学意义(P>0.05)。2)血清IL-33水平与MMSE(r=0.578,P<0.001)、MoCA(r=0.583,P<0.001)呈正相关。3)多因素Logitic回归分析提示受教育程度(OR=0.385,P<0.05)、同型半胱氨酸(Hcy)(OR=1.142,P<0.05)、IL-33(OR=0.902,P<0.05)是AD发生的影响因素;血清IL-33水平诊断AD的曲线下面积为0.865(95%CI 0.786~0.943),灵敏度为87.0%,特异度为80.0%,CUToff为49.135(P<0.05);联合受教育程度、血清Hcy水平、血清IL-33水平诊断AD的曲线下面积为0.894(95%CI 0.825~0.962),灵敏度为89.1%,特异度为83.7%(P<0.05)。结论1)血清IL-33在AD、MCI、SCD患者和健康人群中的表达水平不同,在AD患者中水平最低,在健康人群中水平最高;IL-33对SCD发生风险的影响不大。2)血清IL-33表达水平与其认知功能呈正相关。3)血清IL-33可能是AD发生的保护因素,对AD的发生有较好的诊断价值,有望成为AD辅助诊断的生物标记物。4)受教育程度、血清IL-33水平、血清Hcy水平均是AD发生的影响因素,联合多因素对AD的诊断效能更高。

血清IL-33和TNF-α活性及外周血淋巴细胞中NF-κB水平与冠心病不同程度病变的相关性分析

目的:分析冠心病(CHD)冠状动脉病变严重程度与血清白细胞介素33(IL-33)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性水平及外周血淋巴细胞中核因子κB(NF-κB)蛋白表达之间的相关性,探讨其在CHD发展中的作用及价值。方法:选择就诊于心内科并行冠状动脉造影检查并确诊为CHD的病人167例(CHD组),同时期行冠脉造影正常对照27例(CON组)。根据Gensini评分将167例CHD病人分成轻微病变组(<30分,LS组)84例、中度病变组(30~<60分,MS组)54例和重度病变组(≥60分,HS组)29例。实验室行ELISA检测血清中IL-33和TNF-α活性水平,分析在不同冠状动脉病变程度下IL-33和TNF-α的活性水平差异,探讨IL-33和TNF-α活性水平与CHD的关联性。同时取CHD组及CON组的外周血淋巴细胞,提取蛋白,使用Western blotting检测NF-κB蛋白表达情况。结果:HS组血清总胆固醇(TC)与CON组和LS组、MS组相比升高(P<0.05),HS组血清IL-33与TNF-α水平较MS组、LS组和对照组升高,并且随着冠状动脉病变程度的加重逐渐升高(P<0.01),两者之间呈正相关关系(r=0.663,P<0.01);CHD组中NF-κB蛋白表达低于CON组(P<0.01)。结论:随着冠状动脉病变程度的加重,血清IL-3和TNF-α水平也逐渐升高,且两者间存在一定程度的线性相关,同时与CON组相比,CHD病人NF-κB蛋白表达显著升高。

IL-33介导M2巨噬细胞在口腔黏膜上皮-间充质转化中的相关作用机制

目的探讨白细胞介素33(IL-33)介导M2巨噬细胞在口腔黏膜上皮-间充质转化(EMT)中的相关作用机制。方法将25只雄性BALB/c小鼠分为口腔黏膜成纤维化(OSF)组(20只)和对照组(5只)。OSF组通过槟榔碱刺激建立OSF小鼠模型,对照组使用PBS注射液在相同部位给药。观察口腔黏膜组织巨噬细胞表型、IL-33以及转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路表达水平;培养人口腔黏膜细胞并与M2巨噬细胞相互作用体外模型,使用IL-33添加剂和TGF-β受体抑制剂,观察EMT标志物表达水平。结果HE染色和Masson染色证实了口腔黏膜纤维化模型建立成功,与对照组比较,OSF组口腔黏膜组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低,波形蛋白(Vimentin)表达水平升高(均P<0.05)。此外,观察到IL-33和TGF-β水平升高以及TGF-β1/Smad通路激活,巨噬细胞在口腔黏膜组织中聚集且表型为M2巨噬细胞。与空白对照组比较,IL-33组E-cadherin水平降低,Vimentin的表达增高(均P<0.05);LY-2109761+IL-33组与IL-33组相比,E-cadherin的表达增高,Vimentin的水平降低(均P<0.05)。Western blot检测TGF-β、p-Smad2和Smad2的表达水平提示,与IL-33组相比,LY2109761+IL-33组IL-33对TGF-β有促进作用(P<0.05);IL-33组与空白对照组相比,p-Smad2水平显著提高(P<0.05);LY-2109761+IL-33组与IL-33组相比,p-Smad2水平显著降低(P<0.05)。结论IL-33通过介导M2巨噬细胞调控TGF-β1/Smad通路促进口腔黏膜上皮间质转化。

急性缺血性脑卒中病人血清降钙素原、白细胞介素-33及25-羟维生素D水平与卒中相关性肺炎的关系研究

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)病人血清降钙素原(PCT)、白细胞介素-33(IL-33)、25-羟维生素D[25-(OH)]D水平与卒中相关性肺炎(SAP)的关系。方法选取2020年5月至2022年4月郑州大学第一附属医院重症监护病区AIS病人200例,根据入重症监护病区72 h内是否发生SAP分为SAP组(78例)与非SAP组(122例)。统计并比较两组一般资料[性别、年龄、身体质量指数(BMI)、入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、高血压、糖尿病、高脂血症]以及血清PCT、IL-33、25-(OH)D水平。采用logistic回归分析AIS病人并发SAP的影响因素,受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清PCT、IL-33及25-(OH)D及联合检测对SAP的诊断效能。结果SAP组血清25-(OH)D水平低于非SAP组,血清PCT、IL-33水平高于非SAP组,均差异有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析显示PCT、IL-33、25-(OH)D是AIS病人并发SAP的影响因素(P<0.05);ROC曲线显示血清PCT、IL-33、25-(OH)D及联合检测AIS病人并发SAP的AUC分别为0.93[95%CI:(0.89,0.96)]、0.93[95%CI:(0.89,0.96)]、0.90[95%CI:(0.85,0.93)]、0.99[95%CI:(0.97,1.00)],联合检测时预测效能较高。结论血清PCT、IL-33、25-(OH)D水平对AIS病人并发SAP具有早期诊断价值,联合检测可提高SAP的诊断效能。

IL-33/ST2信号通路在aGVHD中的作用及间充质干细胞干预的研究进展

急性移植物抗宿主病(acute Graft versus Host Disease, aGVHD)是异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)后出现的严重并发症及死亡原因之一。aGVHD的发生十分复杂,许多机制尚未阐明。白细胞介素-33 (Interleukin 33, IL-33)及其受体白细胞介素1受体相关蛋白(Interleukin-1 receptor like-1,IL-1RL1,也称ST2)组成的信号通路除了参与感染性炎性疾病,自身免疫性疾病,变态反应性疾病,心血管疾病外,还参与aGVHD的发生。本文就IL-33及其受体ST2在免疫及aGVHD中的作用的研究进展进行综述,并对文献报道的aGVHD、间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)及IL-33/ST2信号通路之间的相互作用进行梳理分析,期望为临床移植医学领域治疗aGVHD提供依据和方法。

IL-33、IL-8和NETs在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达及其意义

目的:探讨白细胞介素33(IL-33)、白细胞介素8(IL-8)和中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的主要成分髓过氧化物酶(MPO)及瓜氨酸化组蛋白3(CitH3)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织中的表达情况,阐明IL-33、IL-8和NETs对COPD发生发展的影响。方法:选取因肺部结节或肺部肿瘤行肺叶切除术的77例患者作为研究对象,分为不吸烟对照组20例、吸烟对照组18例,不吸烟COPD组19例和吸烟COPD组20例。收集研究对象的肺组织标本,HE染色观察各组患者肺组织病理形态表现,免疫组织化学染色检测各组患者肺组织中IL-33、IL-8、CitH3和MPO蛋白的表达。采用Spearman相关分析COPD组患者肺组织中IL-33、IL-8、CitH3和MPO的蛋白表达水平之间及其与肺功能指标、平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和Bosken评分的相关性。结果:吸烟对照组患者气道Bosken评分明显高于不吸烟对照组(P<0.001);不吸烟COPD组患者气道Bosken评分和MLI明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05),MAN明显低于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05);吸烟COPD组患者气道Bosken评分明显高于不吸烟对照组、吸烟对照组和不吸烟COPD组(P<0.05),MLI明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05),MAN明显低于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05)。免疫组织化学染色,吸烟COPD组患者肺组织中IL-33蛋白表达水平明显高于不吸烟对照组、吸烟对照组和不吸烟COPD组(P<0.05),IL-8、CitH3和MPO蛋白表达水平明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05);不吸烟COPD组患者肺组织中IL-33、IL-8、CitH3和MPO蛋白表达水平明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05);Spearman相关性分析,COPD组患者肺组织中IL-33蛋白表达水平与第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)和MAN等呈负相关关系(r=-0.406,P<0.05;r=-0.493,P<0.01;r=-0.567,P<0.05),与Bosken评分和MLI等呈正相关关系(r=0.935,P<0.001;r=0.590,P<0.001);COPD组患者肺组织中IL-8蛋白表达水平与FEV1/FVC、FEV1%pred和MAN等呈负相关关系(r=-0.527,P<0.01;r=-0.497,P<0.01;r=-0.463,P<0.01),与Bosken评分和MLI等呈正相关关系(r=0.557,P<0.001;r=0.486,P<0.01);COPD组患者肺组织中CitH3蛋白表达水平与FEV1/FVC、FEV1%pred和MAN等呈负相关关系(r=-0.527,P<0.01;r=-0.640,P<0.001;r=-0.531,P<0.01),与Bosken评分和MLI等呈正相关关系(r=0.565,P<0.001;r=0.585,P<0.001);COPD组患者肺组织中MPO蛋白表达水平与FEV1/FVC呈负相关关系(r=-0.329,P<0.05),与Bosken评分呈正相关关系(r=0.410,P<0.05);COPD组患者肺组织中IL-8蛋白表达水平与CitH3和MPO蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.390,P<0.05;r=0.349,P<0.05);COPD组患者肺组织中IL-33蛋白表达水平与IL-8、CitH3和MPO蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.602,P<0.001;r=0.616,P<0.001;r=0.387,P<0.05)。结论:IL-33、IL-8和NETs在COPD患者肺组织中的表达水平升高,三者可能参与COPD的慢性炎症,并与疾病严重程度相关。

IL-33与缺血性脑血管病的研究进展

白细胞介素(IL)-33又称为IL-1F11,是最新发现的IL-1家族的第11位成员[1,2],Schmitz等[3]通过计算分析发现,其与IL-1家族成员具有极高的相似性,均具有典型的β-三叶草结构。IL-33是一把双刃剑,扮演着“双重因子”的角色,在不同的疾病和模型中或作为常规细胞因子或作为核转录因子,发挥致炎或抗炎的作用。

敲低IL-33下调炎症因子和NLRP3表达抑制哮喘小鼠炎症反应

目的探讨白细胞介素33(IL-33)对哮喘小鼠炎症反应的调控机制。方法利用10μg/mL脂多糖(LPS)构建小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)的体外细胞炎症模型,根据是否转染IL-33的小干扰RNA(si-IL-33)质粒和过表达(IL-33-OE)质粒,将细胞分成si-IL-33组,IL-33-OE组和模型组。实时荧光定量PCR检测IL-33、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、IL-1β和IL-6的信使RNA(mRNA)表达水平。钙离子荧光探针检测试剂盒(Fluo-3 AM)检测钙离子含量,JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位变化。利用腹腔注射致敏剂和激发剂的方法建立小鼠哮喘模型,根据处理方案的不同,将哮喘小鼠分成si-IL-33组、IL-33-OE组和模型组,每组5只。ELISA试剂盒检测小鼠血清IL-1β、IL-6和NLRP3含量,HE染色和Masson染色检测肺组织的病变情况。结果与模型组相比,si-IL-33组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量均降低,IL-33-OE组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量增加。BMMSC中钙离子荧光降低,而IL-33-OE组中钙离子荧光升高。si-IL-33组细胞线粒体中JC-1以聚合物形式存在,呈明亮的红色荧光,细胞中的绿色荧光非常弱;说明si-IL-33组细胞线粒体稳定,线粒体功能尚在。使用IL-33-OE质粒处理使线粒体膜电位下降后,JC-1不能以聚合物形式存在于线粒体基质中,此时线粒体内红色荧光强度显著降低,而细胞质中的绿色荧光显著增强。si-IL-33组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显降低,而IL-33-OE组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显升高。si-IL-33组几乎未见炎细胞浸润,炎症缓解,上皮细胞正常。si-IL-33组肺组织的纤维增生部分趋于正常。与模型组相比,si-IL-33组的支气管壁总面积(WAt)/支气管基底膜周径(Pbm)和气管壁平滑肌面积(WAm)/Pbm降低,IL-33-OE组的WAt/Pbm和WAm/Pbm增加。结论敲低IL-33通过下调NLRP3、IL-1β、IL-6表达抑制哮喘小鼠的炎症反应。

血清miR-33a-5p、SMAD7水平与视网膜静脉阻塞患者视力预后的关系

目的观察视网膜静脉阻塞患者血清微小核糖核酸-33a-5p(miR-33a-5p)、SMAD同源物7(SMAD7)水平变化,并探讨二者与视力预后的关系。方法选择视网膜静脉阻塞患者108例(观察组),同期体检健康的志愿者108例(对照组),采集所有研究对象清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-33a-5p,采用ELISA法检测血清SMAD7。比较两组血清miR-33a-5p、SMAD7水平,分析视网膜静脉阻塞患者血清miR-33a-5p、SMAD7水平的关系。所有视网膜静脉阻塞患者予雷珠单抗玻璃体腔内注射治疗。治疗3个月,评估视力,其中预后不良57例、预后良好51例。采用多因素Logistic回归模型分析视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-33a-5p、SMAD7水平对视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的预测价值。结果观察组血清miR-33a-5p水平低于对照组,血清SMAD7水平高于对照组(t分别为13.362、38.657,P均<0.01)。Pearson相关分析显示,视网膜静脉阻塞患者血清miR-33a-5p水平与血清SMAD7水平呈负相关(r=-0.649,P<0.05)。单因素分析显示,视网膜静脉阻塞患者视力预后不良者合并高血压、高血脂比例和有并发症比例以及血清SMAD7水平均高于其预后良好者(χ^(2)/t分别为13.412、7.342、10.095、6.394,P均<0.05),血清miR-33a-5p水平低于其预后良好者(t=7.373,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-33a-5p水平降低、血清SMAD7水平升高和合并高血压、高血脂以及有并发症是视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的独立危险因素(OR分别为0.683、3.843、2.146、1.463、2.773,P均<0.05)。血清miR-33a-5p、SMAD7水平预测视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.870、0.869,二者联合预测视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的AUC为0.938。血清miR-33a-5p、SMAD7水平联合预测视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的AUC高于二者单独(Z分别为2.419、2.422,P均<0.05)。结论视网膜静脉阻塞患者血清miR-33a-5p水平降低、血清SMAD7水平升高;血清miR-33a-5p水平降低、血清SMAD7水平升高是视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的独立危险因素;血清miR-33a-5p、SMAD7水平对视网膜静脉阻塞患者视力预后不良均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。