胶质瘤细胞中IL-1RAP的作用及其与STAT3的关系

目的研究白介素1受体辅助蛋白(IL-1RAP)在胶质瘤中的作用及其与转录活化因子3(STAT3)的关系。方法构建IL-1RAP表达载体,转染胶质瘤细胞系U251,利用流式±细胞仪检测转染IL-1RAP对U251细胞周期及凋亡影响。利用免疫共沉淀钓取STAT3,检测转染IL-1RAP后STAT3的表达情况,并利用免疫荧光方法检测IL-1RAP与STAT3的共定位情况。结果 IL-1RAP蛋白定位于胶质瘤细胞核。与转染空质粒对照组相比,IL-1RAP有明显的促进肿瘤细胞凋亡[(52.10±5.51)%vs.(7.57±0.54)%,P<0.05]和周期阻滞作用[(68.22±1.96)%vs.(38.31±7.22)%,P<0.05]。通过免疫共沉淀和共定位证实IL-1RAP和STAT3可以相互作用。结论 IL-1RAP有抑制胶质瘤细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。IL-1RAP可能通过与STAT3相互作用进入细胞核发挥促进细胞凋亡和抑制细胞周期的作用。

IL-1RⅡ和IL-1RAcP重组质粒对大鼠自身免疫性心肌炎的作用及机制

目的:研究白细胞介素1 Ⅱ型受体(IL-1RⅡ)和白细胞介素1受体辅助蛋白(IL-1RAcP)重组质粒对大鼠实验性自身免疫性心肌炎(EAM)的作用及其机制。方法:构建体内导入用重组质粒pCAGGS-IL-1RⅡ和pCAGGSIL-1RAcP,并以pCAGGS-SP(signal peptide)作为对照质粒。将雄性Lewis大鼠分成4组:对照(control)组(未免疫未注射质粒的大鼠,n=5)、EAM+SP组(免疫的大鼠尾静脉注射对照质粒,n=9)、EAM+IL-1RⅡ组(免疫的大鼠尾静脉注射IL-1RⅡ质粒,n=8)和EAM+IL-1RⅡ+IL-1RAcP组(免疫的大鼠尾静脉注射IL-1RⅡ和IL-1RAcP质粒,n=7)。第0天免疫大鼠造模;第6天应用流体动力学方法尾静脉注射重组质粒;第17天处死大鼠进行疗效评估,评估指标包括组织病理学、心脏彩超检测、心脏重量/体重比值、心肌中心衰标志物心房钠尿肽(ANP)和脑钠尿肽(BNP)及炎症因子的表达。构建体外细胞转染用重组质粒pUC19-IL-1RⅡ-actin和pUC19-IL-1RAcP-tub,转染入Cos7细胞获得培养上清液,将含有IL-1RⅡ和IL-1RAcP的培养上清液加至脂多糖(LPS)诱导的H9c2细胞中,RT-qPCR检测炎症因子的表达变化。将构建的重组质粒pEGFP-IL-1RⅡ-actin和pEGFP-IL-1RAcP-tub转染入Cos7细胞,免疫共沉淀(Co-IP)检测目的蛋白的形成。结果:与EAM+SP组相比,EAM+IL-1RⅡ组和EAM+IL-1RⅡ+IL-1RAcP组大鼠心肌炎症程度均有显著减轻,左心室收缩期内径显著缩小(P<0.05),心肌中ANP、BNP、TNF-α、IL-2、IFN-γ和TGF-β的表达水平显著降低(P<0.01),IL-4的表达水平显著升高(P<0.01)。在H9c2细胞中,与LPS组比较,LPS+IL-1RⅡ组和LPS+IL-1RⅡ+IL-1RAcP组TGF-β和IL-6的表达水平显著降低(P<0.01),IL-10的表达水平显著升高(P<0.05);与LPS+IL-1RⅡ组比较,LPS+IL-1RⅡ+IL-1RAcP组TNF-α和IL-2的表达水平显著降低(P<0.05),IL-13的水平显著升高(P<0.01)。Co-IP检测到IL-1RⅡ与IL-1RAcP相互结合并形成了一个新的蛋白,为异源二聚体。结论:IL-1RⅡ和IL-1RAcP重组质粒导入可有效缓解大鼠EAM的炎症损伤,其机制与两者结合形成异源二聚体并强力抑制炎症因子的表达有关。

白介素1受体辅助蛋白在儿童和成人低级别胶质瘤中的作用

目的探讨白介素1受体辅助蛋白(interleukin 1 receptor accessory protein,IL-1RAP)在成人与儿童低级别胶质瘤中的表达,分析其与预后的相关性。方法应用高通量全基因分析、免疫组织化学法、qRT-PCR和Western blotting方法对20例低级别胶质瘤(成人10例,儿童10例)标本中IL-1RAP的表达进行检测。结果经高通量全基因分析、免疫组织化学、qRT-PCR和Western blotting分析证明IL-1RAP与成人比较,儿童低级别胶质瘤总阳性表达率较低,有统计学意义(100%>30%,Chi-Square=12.439,P<0.05)。结论 IL-1RAP可能在胶质瘤的发生、发展过程之中扮演重要的角色。IL-1RAP可能成为评价低级别胶质瘤预后差异的重要参考指标及潜在的药物靶点。

白细胞介素-1受体辅助蛋白在神经精神疾病发病中作用的研究进展

白细胞介素-1受体辅助蛋白(interleukin-1 receptor accessory protein,IL1RAP)是白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1信号通路的重要组分之一,参与IL-1/IL-1RⅠ(白细胞介素-1受体Ⅰ型,interleukin-1 receptorⅠ)/IL1RAP复合物的形成,募集衔接蛋白及下游信号中间体,激活蛋白激酶,最终诱导促炎介质的合成及急性期炎症反应的发生。另外,IL1RAP还参与调节神经突触形成,是免疫系统及神经系统之间的重要分子联系,可能参与了神经精神疾病的病理过程。该文结合既往IL1RAP在IL-1信号通路中作用的研究,对近年来IL1RAP在神经精神疾病(如神经胶质瘤、阿尔茨海默病、精神分裂症等)中作用的最新研究成果进行综述,以期探索IL1RAP在这些疾病发病中的作用及机制,为其诊断及治疗提供理论支持。

IL-33/ST2信号通路与骨代谢的研究进展

白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)是白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)细胞因子超家族的一个新成员,它可以激活肥大细胞、淋巴细胞、巨噬细胞,产生Th2细胞因子,并且在炎症、感染、自身免疫性疾病中发挥其重要作用。IL-33的经典信号途径是通过ST2和IL-1受体辅助蛋白(interleukin-1 receptor accessory protein,IL-1 RAcP)组成的异三聚体,将信号转导至细胞内。IL-33/ST2信号通路通过激活T、B淋巴细胞等方面影响骨代谢。本文就IL-33/ST2信号通路在骨代谢中的作用研究作一综述,复习文献结果表明,IL-33在骨代谢方面的作用仍存在争议,一些学者研究认为IL-33可抑制破骨细胞的生成,并且在生理性骨重建中起作用;但也有学者认为IL-33可促进破骨细胞的形成及分化,从而导致骨吸收。IL-33及其信号通路参与牙周炎及根尖周炎牙槽骨骨代谢,具体机制尚不清楚,还需进一步研究。

髓细胞白血病干细胞表面标志蛋白白细胞介素-1辅助蛋白及其在血液系统疾病中的研究进展

白细胞介素（IL）-1受体辅助蛋白（IL-1RAP）已被证实作为IL-1受体Ⅰ型（IL-1R Ⅰ）的共同受体,参与IL-1的效应发挥.最新研究表明,IL-1RAP是新鉴定的髓细胞白血病干细胞（LSC）表面标志蛋白,且IL-1RAP抗体,可通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用（ADCC）,杀灭慢性髓细胞白血病（CML）患者体内的LSC,而不损伤正常造血干细胞（HSC）.另有研究发现,IL-1RAP表达水平与急性髓细胞白血病（AML）临床预后密切相关,IL-1RAP表达水平亦是预测骨髓增生异常综合征（MDS）危险度的潜在指标.笔者拟就髓细胞白血病LSC表面标志蛋白IL-1RAP及其在血液系统疾病中的研究进展进行综述如下.