IL-6R基因单核苷酸多态性与肺结核易感性的相关性研究

目的探讨白细胞介素-6受体(Interleukin-6R,IL-6R)基因多态性与汉族人群肺结核发病的关系。方法分析深圳汉族人群中96例结核病患者和96名健康对照的IL-6R基因rs1552481、rs4379670、rs3887104、rs2229238位点的多态性,分析基因多态性与结核病易感性的关系。结果 IL-6R基因rs4379670位点,病例组TA基因型频率(25.3)明显低于对照组(39.8)(P<0.05),病例组T等位基因频率(14.7)明显低于对照组(24.2)(P<0.05);rs2229238位点,对照组TC基因型频率(25.3)明显低于病例组(37.9)(P<0.05),病例组T等位基因频率(14.7)也明显低于对照组(24.2)(P<0.05);其他两个位点病例组和对照组之间无明显差异。结论 IL-6R基因rs4379670位点AA型和rs2229238位点CC型可能与肺结核发病相关,两位点中等位基因T可能为保护性基因。

多发性硬化患者血清与脑脊液中白介素6及其可溶性受体成分sIL-6Rs、gp130的研究

目的为探讨IL-6及其可溶性受体在多发性硬化(MS)体液免疫异常中的作用。方法采用ELISA法测定了MS患者血清和脑脊液中IL-6及其可溶性受体成分(sIL-6R、sgp130)的水平,并与非MS的神经系统疾病、非MS神经系统炎症性疾病以及对照组进行组间比较。结果MS患者血清及脑脊液中IL-6水平与对照组相比差异无显著性,仅见脑脊液sIL-6R升高,且其血清水平与脑脊液水平呈正相关;同时血清sgp130水平升高而脑脊液sgp130水平减低。与MS组不同,在神经系统炎症性疾病组三者血清和脑脊液水平均有升高。结论研究结果提示sIL-6R、sgp130可能通过调控IL-6活性参与MS发病,与一般神经系统炎症性疾病相比MS的发病可能有某些不同的体液免疫机制。

消化道恶性肿瘤伴癌性腹水患者腹腔化疗前后血清及腹水IL-6和sIL-6R水平变化的意义

目的:探讨腹腔化疗对癌性腹水患者血清及腹水IL-6及sIL-6R水平影响及其临床意义。方法:采用放免法测定病人腹腔化疗前、治疗后四周血清及腹水IL-6水平变化,用ELISA同时测定sIL-6R水平变化,并与正常对照组相对比。结果:消化道恶性肿瘤伴癌性腹水患者血清IL-6和sIL-6R水平较正常对照组明显升高,腹水IL-6和sIL-6R水平较血清IL-6和sIL-6R水平明显增高。腹腔化疗后血清IL-6和sIL-6R水平下降,腹水IL-6和sIL-6R水平变化与血清水平变化相平行。且血清及腹水IL-6及sIL-6R水平变化与腹腔化疗是否有效有密切关系。结论:监测癌性腹水患者血清及腹水IL-6及sIL-6R水平变化是判断及预测腹腔化疗是否有效的途径之一。

吴茱萸碱对结直肠癌小鼠IL-6R/STAT3通路的影响

目的探讨吴茱萸碱对结直肠癌小鼠的抑瘤作用及对白介素-6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)/信号转导转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路的影响。方法将59只BALA/C小鼠随机留取9只作为对照组,其余皮下接种CT-26结直肠癌细胞株建立结直肠癌小鼠模型,将建模成功的40只小鼠随机分为模型组、顺铂组、吴茱萸碱组和顺铂+吴茱萸碱组,每组10只。顺铂组用15 mg·kg^(-1)·d^(-1)顺铂灌胃,顺铂+吴茱萸碱组用15 mg·kg^(-1)·d^(-1)顺铂+15 mg·kg^(-1)·d^(-1)吴茱萸碱灌胃,对照组、模型组用等量生理盐水灌胃。各组均每日灌胃1次,连续19周。末次灌胃24 h后,处死小鼠,称肿瘤质量并计算肿瘤体积、肿瘤抑制率;用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠肿瘤组织的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;用HE染色观察小鼠肿瘤组织的病理学变化;用免疫组织化学法检测肿瘤组织的微血管密度(microvesse density,MVD)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平;用Western blot检测肿瘤组织中IL-6R/STAT3通路相关蛋白的表达水平。结果从模型组到吴茱萸碱组、顺铂组、顺铂+吴茱萸碱组,小鼠肿瘤的质量依次减轻、肿瘤体积依次减小,IL-6、IL-1β、TNF-α水平依次降低(P<0.05)。模型组小鼠肿瘤组织中可见大片灶性坏死,细胞核增大、深染,大小不一,排列紊乱,有异形表现,呈典型恶性肿瘤细胞形态特征,肿瘤细胞密集;吴茱萸碱组、顺铂组和顺铂+吴茱萸碱组的肿瘤细胞核固缩、变小,肿瘤细胞形态破坏,密度依次降低,肿瘤组织内坏死区依次增大,MVD依次减小(P<0.05),VEGF阳性表达依次减弱(P<0.05)。从模型组到吴茱萸碱组、顺铂组、顺铂+吴茱萸碱组,小鼠肿瘤组织中IL-6R、p-STAT3、G 1/S-特异性周期蛋白-D1(G 1/S specific cyclin D1,Cyclin D1)、生存素(survivin)的蛋白水平依次下降(P<0.05)。结论吴茱萸碱可能通过抑制IL-6R/STAT3通路,发挥抗血管生成效应,从而抑制肿瘤的生长。

大鼠压力性损伤皮肤皮下组织中IL-6受体表达及其意义

目的观察大鼠压力性损伤组织中膜结合型IL-6受体(mIL-6R)和可溶型IL-6受体(sIL-6R)及受其调控的细胞因子表达水平,探讨IL-6受体对压力性损伤发生发展的影响及机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=20)、压力性损伤模型组(n=20)、sgp130Fc(特异性IL-6反式信号通路阻断剂)预处理组(n=20)。正常对照组不做任何处理;压力性损伤模型组在麻醉下于股薄肌处建立压力性损伤模型;sgp130Fc预处理组大鼠在麻醉前30 min给予sgp130Fc 250 ng腹腔内注射,随后在麻醉下采取与压力性损伤模型组相同的方法建立压力性损伤模型。大鼠建立压力性损伤模型成功后分别取股薄肌处组织及血液,运用ELISA法检测血液中IL-6、sIL-6R表达水平,运用免疫组化法检测组织中mIL-6R、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及凋亡因子(Bcl-2、Bax、Caspase-3)的表达。运用Tunel法观察组织中细胞凋亡水平。结果与正常对照组大鼠相比,压力性损伤模型组大鼠血液中IL-6、sIL-6R及组织中ICAM-1、Bax、Caspase-3表达明显增加(P<0.05),而组织中mIL-6R、VEGF表达减少(P<0.05)。sgp130Fc预处理组大鼠组织中mIL-6R、VEGF、Bcl-2的表达与压力性损伤模型组大鼠相比无明显差异(P>0.05),ICAM-1、Bax、Caspase-3的表达及细胞凋亡指数明显低于压力性损伤模型组大鼠(P<0.05)。结论压力性损伤大鼠组织中mIL-6R表达减少,血液中sIL-6R水平异常升高。异常升高的sIL-6R可上调炎症因子和凋亡因子表达,促使压力性损伤发生。

人白介素6受体结合功能域的构效关系研究

以分子对接(docking)方法研究人白介素6受体胞外区配基结合功能域“WSXWS”区氨基酸残基定点突变对受体与配基人白介素6结合时的相互作用能量、分子间相互作用的影响,从分子力学、分子动态学分析了人白介素6受体胞外区功能域关键氨基酸残基在受体与配基结合中的构象变化以及与人白介素6间的相互作用.

煤工尘肺患者血清白细胞介素6及其可溶性受体含量的变化

目的 探讨煤工尘肺患者血清白细胞介素 6(IL 6)和可溶性IL 6受体 (sIL 6R)水平的变化。方法 用酶联免疫吸附试验法 (ELISA法 )检测 14 8例不同期别煤工尘肺患者 [无尘肺 (0 + )→Ⅰ→Ⅱ ]及 40例健康对照者血清的IL 6及sIL 6R水平。结果 对照组、无尘肺 (0 + )组、Ⅰ期尘肺组及Ⅱ期尘肺组人群血清IL 6平均水平分别为 :(7 1± 6 8)、(7 9± 6 8)、(12 6± 11 7)、(2 4 6± 2 1 5)ng/L ,统计学处理差异有显著性 (P <0 0 5)。但煤工尘肺患者血清sIL 6R水平与对照组的差异无显著性意义 (P >0 0 5)。结论 IL 6介入了煤工尘肺的发生和发展过程 ,血清IL 6检测可能对煤工尘肺的早期诊断。

清肠化湿方对实验性结肠炎小鼠IL-6反式信号转导的影响

目的:观察清肠化湿方对实验性结肠炎小鼠白介素6(IL-6)反式信号转导trans-signaling的影响,初步探讨该方治疗溃疡性结肠炎(UC)作用机制是否与调控IL-6 trans-signaling有关。方法:TNBS法制备小鼠结肠炎模型,药物干预后,ELISA法检测可溶性白细胞介素6受体(s IL-6R)含量,实时荧光定量PCR法检测IL-6、糖蛋白130(gp130)m RNA相对表达水平,Western Blot法观察结肠黏膜IL-6、gp130蛋白的表达情况。结果:模型组小鼠s IL-6含量、IL-6及gp130 m RNA和蛋白表达水平较正常小鼠明显增高。清肠化湿方可以降低实验性结肠炎小鼠结肠s IL-6水平(P<0.01),降低IL-6及gp130m RNA和蛋白表达水平(P<0.01)。结论:清肠化湿方对小鼠实验性结肠炎发挥良好抗炎效应,可能与调控IL-6 trans-signaling有关。

白细胞介素6受体研究的新进展

白细胞介素6(interhukin-6,IL-6)是一种多功能细胞因子,在许多疾病中发挥着重要的作用。而IL-6只有通过和其受体形成IL-6/IL-6R/gp130六聚体复合物,才能进行信号传导,从而发挥其生物学作用。而白细胞介素6受体(IL-6R)是介导这个六聚体复合物形成的“中介分子”,它以其胞外区的相应结构与IL-6结合后进一步偶联gp130的胞外区并通过gp130的胞内区将IL-6的信号传递到胞内。鉴于IL-6R在信号传导过程中发挥着重要的作用,IL-6和其受体成功克隆表达,信号传递途径的研究不断深入,结构和功能关系的了解,特别是近几年来,对IL-6R的拮抗剂的研究的不断深入,使得用IL-6R来治疗IL-6的相关疾病开辟了广泛的前景。

抗白细胞介素-6受体单克隆抗体的制备

用白细胞介素-6（IL－6）依赖性人多发性骨髓瘤细胞株XG-1作为免疫原，我们成功地制备获得一株分泌抗人IL－6受体单克隆抗体的杂交瘤，命名为SI15。夹心ELISA和位点竞争试验表明，SI15和抗人IL－6受体单克隆抗体M19识别IL－6受体上的同一位点，对IL－6受体的生物学活性无影响。

乳腺癌患者放疗后血清IL-6与可溶性IL-6受体含量增加并与免疫细胞比例相关

目的探讨乳腺癌患者血清白细胞介素6(IL-6)与可溶性白细胞介素6受体(sIL-6R)水平对放疗后免疫功能的评估价值。方法随机选取术后放疗的55例乳腺癌患者为治疗组、经体检合格的55例正常健康成人为对照组,采用ELISA检测对照组及治疗组患者放疗前后血清IL-6与sIL-6R含量,并以流式细胞术检测治疗组患者放疗前后外周血CD45^+CD19^+B淋巴细胞、CD45^+CD3^+CD4^+T淋巴细胞、CD45^+CD3^+CD8^+T淋巴细胞及CD45^+CD16^+CD56^+自然杀伤(NK)细胞,比较淋巴细胞亚群与IL-6、sIL-6R含量的相关性。结果治疗组患者放疗后血清IL-6与sIL-6R含量显著高于放疗前及对照组,且Ⅲ期、Ⅳ期乳腺癌患者IL-6、sIL-6R含量明显升高。治疗组患者放疗后总T淋巴细胞、NK细胞比例明显降低,B淋巴细胞比例显著升高,且IL-6、sIL-6R含量与NK细胞比例呈正相关,与B淋巴细胞比例负相关。结论乳腺癌患者血清中IL-6与sIL-6R水平可作为乳腺癌病程评估和放疗后免疫功能的参考。

染色体1q12区段IL6R基因多态性与儿童哮喘易感性的研究

目的:检测染色体1q12区段IL6R基因多态性与儿童发生支气管哮喘易感性的关系。方法:150名支气管哮喘患儿为支气管哮喘组。150名健康儿童为对照组。采用质谱单核苷酸多态性(SNP)技术,对两组儿童的IL6R基因进行分析。结果:两组IL6基因位点的分布符合Hardy-Weinburg平衡定律。两组IL6R基因rs4845374位点的基因型与等位基因相比较,无明显差异(X2值分别为3.442和3.701;P值分别为0.179和0.088)。两组IL6R基因rs2228145位点的基因型与等位基因相比较,差异均有统计学意义(X2值分别为6.635和9.200;P值分别为0.036和0.003)。IL6R基因rs2228145位点基因型的变异等位基因T、C与支气管哮喘存在密切联系,CC、TT型出现支气管哮喘的风险均比CT型高。结论:IL6R基因rs4845374位点与儿童支气管哮喘无相关性,而rs2228145位点多态性与儿童支气管哮喘有相关性。

痛泻要方对溃疡性结肠炎大鼠下丘脑中IL-6,IL-6R表达的影响

目的:观察痛泻要方对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠下丘脑中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-6受体(IL-6R)基因和蛋白表达的影响。方法:将SPF级Wistar大鼠运用复合方法进行溃疡性结肠炎造模后,随机分为5组:模型组,痛泻要方低、中、高剂量(2.75,5.5,11 g·kg^(-1))组,美沙拉嗪(5-ASA)组。药物处理大鼠21 d后麻醉处死,肉眼观察结肠大体形态损伤并进行评分。分离各组大鼠血清,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中IL-6含量,分离大鼠下丘脑组织并提取总RNA后,实时荧光定量PCR(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)法检测IL-6和IL-6R基因表达,免疫组织化学染色法检测下丘脑组织IL-6和IL-6R的分布及蛋白表达量。结果:ELISA结果显示,与空白组比较,模型组大鼠血清中IL-6含量明显升高,经过药物处理后,药物组血清中IL-6含量均有所下降,其中以痛泻要方高剂量组效果最为明显(P<0.05)。Real-time PCR结果表明,模型组大鼠下丘脑组织中IL-6和IL-6R基因表达量明显高于空白组(P<0.05),经药物治疗后,药物组IL-6和IL-6R基因表达均有所降低,其中以5-ASA组和痛泻要方高剂量组降低最为明显(P<0.05)。免疫组织化学染色结果表明,与空白组比较,溃疡性结肠炎大鼠IL-6和IL-6R蛋白表达量明显增加(P<0.05),药物处理可以降低大鼠下丘脑IL-6和IL-6R蛋白表达量,其中以5-ASA组和痛泻要方高剂量组降低最为明显(P<0.05)。结论:痛泻要方对2,4,6三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法UC大鼠下丘脑组织中IL-6和IL-6R基因和蛋白的表达具有明显抑制作用,提示痛泻要方治疗溃疡性结肠炎的机制可能与抑制下丘脑中IL-6/IL-6R信号通路的异常活化有关。

基于分子对接预测靶点ACE2和IL-6R研究归芪白术方治疗新型冠状病毒肺炎的物质基础及其作用机制

目的基于计算机辅助药物设计(CADD),从阻断血管紧张素转换酶II(ACE2,新型冠状病毒受体)及白细胞介素-6受体(IL-6R,细胞炎症因子风暴关键受体)2个方面探索具有益气健脾、祛湿化瘀功效的归芪白术方"排毒""抑制炎症风暴"作用的物质基础和分子机制。方法使用化学信息学方法构建归芪白术方药物小分子化合物库,选择ACE2和IL-6R蛋白作为研究靶蛋白,确定靶蛋白晶体结构及活性位点,在此基础上通过分子对接,筛选能够与靶蛋白有效结合的药物小分子化合物。结果归芪白术方中有483个小分子化合物符合类药五原则,其中有224个小分子化合物与ACE2靶蛋白对接得分绝对值≥4分,有225个小分子化合物与IL-6R靶蛋白对接得分绝对值≥4分;归芪白术方小分子化合物MOL002298(Aloeemodin)、MOL004858(Gancaonin C)等与靶蛋白对接得分绝对值较高,MOL000040(Scopoletin)、MOL000098(Quercetin)等可同时与2个靶蛋白结合。结论归芪白术方含有多种有效成分,既含有可阻断新型冠状病毒受体ACE2的小分子化合物,也含有可靶向阻断细胞炎症因子风暴受体IL-6R的小分子化合物,可通过多点显效、协同增效而发挥扶正祛邪的作用。

白细胞介素6和病毒感染与免疫

白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)是一种多效性细胞因子,对机体免疫系统和非免疫系统的细胞均有较大影响,可发挥促炎或抗炎作用,影响机体生理平衡。病毒感染致病往往包括直接损伤和免疫病理机制,免疫调节是影响疾病进程和临床结果的重要干预靶点。IL-6拮抗剂的临床应用经验提示,靶向该细胞因子可改善疾病结局,但如何以及何时阻断是仍需进一步研究的重要领域。为增加对IL-6在疾病进程中的作用机制的理解,我们对IL-6主要功能、信号转导途径以及在病毒感染与免疫中的作用进行了初步的综述分析。

煤工尘肺患者血清白细胞介素6及其可溶性受体的含量及临床意义

目的 探讨血清白细胞介素 6 (IL 6 )和可溶性IL 6受体 (sIL 6R)水平与煤工尘肺的关系及临床意义。方法 采用ELISA法检测 5 6例煤工尘肺患者及 12 6名有相同接尘史但未患尘肺的煤矿工人 (对照组)血清IL 6及sIL 6R的水平。结果 尘肺患者血清IL 6平均水平为 (14.0± 13.1)pg/ml,高于对照组[(7.2± 8.2 )pg/ml],差异有显著性 (P <0 .0 1)。多元线性回归分析表明 ,尘肺患者血清IL 6水平与尘肺期别呈正相关 (r =0 .45 1,P <0 .0 1) ;尘肺患者血清sIL 6R水平与对照组的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 IL 6可能参与了尘肺的发病过程 ,测定尘肺患者血清IL

基于多靶点分子对接初探宣肺化浊方治疗新型冠状病毒肺炎的物质基础

目的:运用分子对接、靶点反向预测及反向分子对接技术探索宣肺化浊方治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的物质基础及可能的分子机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索宣肺化浊方中10味中药化合物,以血管紧张素转换酶2(ACE2),白细胞介素-6受体(IL-6R)为靶蛋白,运用分子对接筛选方中与ACE2,IL-6R对接打分较好且符合类药性的化合物,并进行化学信息学层次聚类分析;利用Swiss Target Prediction预测化合物潜在靶点;运用Cytoscape构建化合物-靶点网络;利用STRING分析靶点蛋白互相作用。结果:宣肺化浊方中针对ACE2潜在有活性的化合物共312个,活性较强的化合物15个;针对IL-6R符合条件的活性化合物共100个,活性较强的化合物3个,对活性较强的化合物进行化学信息学层次聚类分析发现大多属于黄酮类。药味-有效成分-靶点网络包含药材10味、化合物126个、靶点130个;STRING分析显示磷脂酰肌醇3激酶调节亚基1(PIK3R1),肉瘤基因(SRC),丝苏氨酸蛋白激酶1(AKT1),雄激素受体(AR)和表皮生长因子受体(EGFR)等蛋白可能是宣肺化浊方起效的关键靶点。结论:本研究基于多靶点分子对接虚拟筛选初步得到宣肺化浊方抗病毒、抗炎的物质基础,同时结合靶点反向预测和分析探索该方治疗COVID-19潜在作用靶点和分子机制,为宣肺化浊方及其相关方药的多角度挖掘和单体成分的现代化开发提供线索。

以白细胞介素-6信号通路为靶点的生物技术药物研究进展

白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)为一种多功能的细胞因子,其仅通过与自身受体形成复合体才能进行信号转导从而发挥生物学作用。鉴于IL-6在多种疾病中发挥的重要作用,随着IL-6信号转导系统研究的日益深入,以IL-6及其受体IL-6R、gp130与sIL-6R等为靶点的药物筛选和药物设计将为多种疾病的治疗开辟新的途径。本文以IL-6信号通路为靶点的生物技术药物研究进展作一综述。