探讨IL-34在小鼠慢性根尖周炎模型中的动态表达

目的:探讨白介素-34(IL-34)在小鼠慢性根尖周炎模型中的表达及变化情况。方法:选择35只SD小鼠,对其下颌第一磨牙开髓制造根尖周炎的模型,并在0、7、14、21、28 d随机脱颈处死,解剖分离含有第一磨牙的下颌骨,进行影像学检查,了解模型中根尖周的破坏情况。将下颌骨标本制备切片,进行HE染色观察根尖周组织病理学改变以及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测IL-34与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在根尖周炎模型中的动态表达。结果:影像学检查显示,0~7 d根尖无明显异常,14~21 d开始出现轻度根尖破坏,28 d根尖阴影变大,范围增宽。HE染色显示,0 d根尖周组织正常未见明显改变,7 d炎性因子浸润开始增多,14 d出现明显的骨质破坏以及坏死中心,21 d炎性渗出减少,小范围的骨质破坏区域增多,28 d炎性细胞浸润趋于稳定,小范围的骨质破坏连接成片,大范围的骨质破坏形成。TRAP染色显示,0 d几乎看不到破骨细胞,7~14 d破骨细胞数目明显增加,在21 d时到达高峰,28 d时轻微下降,但7、14、21、28 d时均高于0 d(P<0.05)。RT-qPCR检测显示,7~28 d的IL-34及TNF-α的mRNA表达量均逐渐增高,且在14 d到达顶峰,在21 d呈现下降的趋势,28 d又呈现上升趋势,在7~28 d的表达量均高于0 d(P<0.05),并且呈现正相关关系。结论:IL-34的mRNA表达量随着根尖周炎病变程度发展而改变,尤其是与骨质破坏的程度相关,并与TNF-α有着密切的联系,出现短暂的表达量下降说明其表达受到了抑制,有助于为临床治疗提供方向。

血清IL-34表达水平与原发性胆汁性胆管炎的相关性分析

目的:探讨IL-34是否参与原发性胆道胆管炎(PBC)发病机制。方法:将49例PBC患者与50例年龄、性别匹配的健康对照组进行比较,并对治疗前后进行比较。ELISA和化学发光法(CL)检测血清IL-34、抗线粒体抗体M2(AMA-M2)和部分细胞因子IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α浓度。结果:PBC患者血清IL-34水平明显高于健康对照组(P<0.01)。IL-34水平与AMA-M2水平具有一定相关性。治疗有效患者中,血清IL-34水平明显降低。PBC患者血清IL-2、IL-6、TNF-α水平较健康对照组明显升高。结论:本研究为IL-34在PBC发展中的新作用以及作为治疗靶点的潜在用途提供了支持。血清IL-34可能是PBC的候选生物标志物。

IL-34介导的NF-кB信号通路对根尖牙乳头干细胞成牙成骨定向分化的调节作用

目的:探讨白细胞介素-34(IL-34)介导的核因子кB(NF-кB)对根尖牙乳头干细胞(SCAPs)成牙/成骨定向分化调节作用。方法:使用酶消化法从小鼠根尖牙乳头组织传代培养SCAPs;流式细胞术鉴定SCAPs中CD44、CD90、CD45及集落刺激因子1受体(CSF-1R)的表达;实验分为4组:空白对照组、IL-34组(100 ng/mL IL-34)、CSF-1R组(100 ng/mL IL-34+25 ng/mL anti-CSF-1R)、NF-кB组(100 ng/mL IL-34+1umol/L BMS-345541)。通过蛋白质印迹法(Western blot)分析各组30、60、120 min时SCAPs胞浆中NF-кB关键蛋白p-IкBα、IкBα、p-P65及P65蛋白的表达情况;矿化诱导4组SCAPs 3、7、14 d时,茜素红染色和半定量分析比较各组细胞的矿化结节形成能力;通过RT-qPCR检测各组SCAPs中成骨相关基因Runt相关转录因子-2(RUNX2)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)mRNA水平。结果:流式细胞术显示,SCAPs中CD44(90.4%)、CD90(93.5%)阳性表达,造血干细胞CD45(3.1%)阴性表达,SCAPs表达CSF-1R(23.2%)阳性。与对照组比较,IL-34组SCAPs胞浆蛋白内p-IкBα、p-P65表达水平上调,矿化诱导3、7、14 d矿化结节形成量增多,细胞中RUNX2、DSPP、OCN mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与IL-34组比较,CSF-1R组和NF-кB组SCAPs胞浆蛋白内p-IкBα、p-P65表达水平下调(P<0.05),矿化诱导3、7、14 d矿化结节形成量减少,细胞中RUNX2、DSPP、OCN mRNA相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-34可通过IL-34/CSF-1R调节SCAPs中NF-кB信号通路,并通过IL-34/CSF-1R/NF-кB信号调节SCAPs的成牙/成骨定向分化能力。

IL-12、IL-15在急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞中的作用机制研究

分析IL-12、IL-15在急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞中的作用机制。方法:选取本院2021年12月~2022年12月期间收治的30例急性髓系白血病患者,提取患者BM-MNC,构建NK细胞诱导体系,A组加入SCF、IL-7、IL-12、IL-15,B组加SCF、IL-7、IL-2、IL-15。5周诱导分化结束后,对NK细胞活化情况进行检测。对NK细胞相关基因表达水平进行实时定量PCR检测,取K562细胞和患者来源原代白血病细胞分别作为靶细胞,取培养第5周的A、B组的NK细胞作为效应细胞,对NK细胞杀伤活性进行检测。结果:诱导分化前,BM-MNC中NK细胞和CD34+细胞所占比例分别为(0.46±0.11)%、(80.35±5.12)%。诱导分化后,A组NK细胞所占比例明显高于B组(P<0.05);但两组CD34 细胞所占比例组间差异不明显(P>0.05)。A组CD69+、Kp46+、NKG2D+表达比例均明显高于B组(P<0.05)。经组间差异检验,B组GranzymeB、TNF-α和IFN-y基因相对表达水平均显著低于A组(P<0.05)。对两组NK细胞对不同效靶比K562细胞与患者来源细胞的杀伤率进行统计和比较,结果显示,在不同的效靶比下,NK细胞对本组K562细胞以及骨髓血来源白血病细胞的杀伤率均存在一定的差异。其中,均呈现出效靶比越大,相应的杀伤率越高的特点。对两组NK细胞在同一效靶比下对不同细胞的杀伤情况进行比较,可知,对患者来源细胞的杀伤率均明显高于K562细胞(P<0.05)。开展组间比较,结果显示在同一效靶比下,A组细胞组合对K562细胞以及患者来源细胞的杀伤率均显著高于B组(P<0.05)。结论:IL-12、IL-15细胞因子组合可体外诱导分化CD34+白血病细胞为NK细胞,且具有一定的杀伤活性。

白细胞介素34(IL-34)促进大鼠根尖牙乳头干细胞增殖并向成牙成骨分化

目的探究白细胞介素34(IL-34)对大鼠根尖牙乳头干细胞(SCAP)成牙、成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养大鼠SCAP,实时荧光定量PCR检测IL-34在大鼠SCAP中的表达。采用噻唑蓝(MTT)法分析不同浓度IL-34对大鼠SCAP增殖活性的影响。茜素红染色观察矿化情况,划痕实验检测增殖能力,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(OSX)的表达。应用Western blot法检测ALP、DSPP、RUNX2、OSX蛋白的表达。结果IL-34促进大鼠SCAP增殖的最大剂量为100 ng/mL,茜素红染色显示IL-34能够促进SCAP的矿化。100 ng/mL IL-34处理显著提高成骨相关基因ALP、DSPP、RUNX2、OSX的表达。结论IL-34能够促进大鼠SCAP的增殖并向成牙/成骨分化。

Correction to “Interleukin-34 promotes the proliferation and epithelial-mesenchymal transition of gastric cancer cells”

Correction to“Interleukin-34 promotes the proliferation and epithelialmesenchymal transition of gastric cancer cells”.In this article,we found the following error in Figure 3A:The panel image"24 h,sh-RNA1"in the AGS cells wound healing assay was incorrectly inserted during the preparation of the submission;the correct figure is provided in this correction.

强直性脊柱炎患者血清TNF-α、RANKL、OPG和IL-34水平与附着点病变的相关性研究

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者TNF-α、细胞核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)和IL-34水平与超声评估附着点病变、实验室指标和临床指标的相关性。方法选取AS患者21例(AS组),类风湿关节炎(RA)患者21例(RA组),健康者41例(健康对照组)。采用ELISA法检测各组血清TNF-α、RANKL、OPG和IL-34水平。分析AS患者TNF-α、RANKL、OPG和IL-34与超声评估附着点病变、实验室指标和临床指标的相关性,并分析4项血清指标之间的相关性。结果 AS组患者血清TNF-α、RANKL和IL-34水平均高于RA组患者及健康对照组,血清OPG均低于RA组患者及健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。AS患者血清RANKL和IL-34水平与超声评估附着点骨侵蚀关节个数(r=0.564和0.482,均P<0.05)及附着点炎关节个数(r=0.634和0.545,均P<0.05)均呈正相关。AS患者血清IL-34水平与Bath强直性脊柱炎病情活动指数呈负相关(r=-0.454,P<0.05)。AS患者血清RANKL水平与血清OPG水平呈负相关(r=-0.461,P<0.05)。ROC曲线显示血清RANKL和IL-34水平诊断AS的AUC分别为0.994和0.941,均P<0.05。当血清RANKL水平≥125.85pg/ml,灵敏度为0.95,特异度为0.95;当血清IL-34水平≥728.15pg/ml,灵敏度为0.95,特异度为0.73。结论 AS患者外周血中存在较高水平的RANKL和IL-34,其与超声评估附着点病变骨侵蚀关节个数及附着点炎关节个数均呈正相关,提示两者可作为预测AS患者存在附着点病变的尤其是存在骨侵蚀的可靠指标。

应用SCF+IL-2等细胞因子从脐血CD34^+细胞扩增T细胞

肿瘤和艾滋病 (AIDS)的基因治疗或免疫治疗的研究需要大量的T细胞克隆。尽管T细胞来源于CD34+细胞 ,但由于需要胸腺组织的参与 ,使其在体外扩增大量细胞克隆非常困难。本研究用脐血单个核细胞作为辅助细胞 ,在SCF +IL 2等细胞因子的作用下 ,人脐血CD34+在此培养条件下 ,不断产生CD4 +或CD8+T细胞至少持续 3周。在培养扩增过程中 ,发现CD4 +和CD8+T细胞的比例有一个不断变化的动态过程 ,培养体系中可以检测到CD4和CD8双阳性细胞的存在 ;RT PCR可检测到负责TCR重排的RAG 2基因的表达 ,说明所获得的T细胞来源于CD34+细胞。本研究为从CD34+细胞获得大量的T细胞克隆提供了一个简便的体外培育体系。

吸人糖皮质激素对哮喘患者外周血CD_(34)^+细胞、IL-5和嗜酸粒细胞的影响

目的:探讨糖皮质激素对支气管哮喘患者外周血CD_(34)^+细胞、白细胞介素-5(IL-5)和嗜酸粒细胞(EOS)的影响。方法:选择哮喘急性发作期患者30例,常规取血测定CD_(34)^+细胞、IL—5和EOS;用吸入治疗2周后,再次取血测定外周血EOS计数、IL—5水平及CD_(34)^+细胞数目。结果:哮喘患者外周血EOS、IL-5及CD_(34)^+细胞数明显高于正常组(P＜0．01)EOS凋亡指数呈显著下降( P＜0．01)。经吸入布地奈德治疗2周后,IL-5、EOS及CD_(34)^+水平均显著降低。EOS凋亡指数呈显著增加,哮喘患者血清IL-5水平与EOS数呈显著正相关(r=0．92,P＜0．01),与CD_(34)^+细胞数亦呈显著正相关(r=0．90,P＜0．01)。结论:糖皮质激素可能影响CD_(34) ^+造血细胞的释放和向外周组织的迁移。

IL-34的生物学特性及与心血管疾病和自身免疫性疾病关系的研究进展

IL-34可由神经元、角质形成细胞和成骨细胞等分泌,并在多种组织中表达。目前发现的受体有巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)和蛋白酪氨酸磷酸酶ζ(PTP-ζ),其中最重要的是M-CSFR。IL-34与M-CSF的生物学活性相似,能促进单核-巨噬细胞系统的增殖与分化,能诱导多种细胞因子和趋化因子生成增加,具有促炎,促进破骨细胞形成以及神经保护的作用。在心血管疾病和自身免疫性疾病中,IL-34水平有明显增高,表明其与这些疾病关系密切,可能在疾病的发生、发展中起重要作用。

IL-12、IL-15对急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞作用研究

目的应用细胞因子组合体外诱导CD34+白血病细胞转化为自然杀伤(NK)细胞,探讨白介素(IL)-12、IL-15对NK细胞分化增殖、细胞活性、细胞毒作用以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达的作用。方法提取26例2016年8月至2017年11月初治高白细胞血症急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞(BM-MNC),应用A组(SCF、IL-7、IL-12、IL-15)、B组(SCF、IL-7、IL-2、IL-15)两组细胞因子组合分别体外诱导分化5周,流式细胞术检测NK细胞比例及活化标志,实时定量PCR(QPCR)检测两组NK细胞Granzyme B、TNF-α、IFN-γ等基因的表达水平; CCK-8法分别检测两组NK细胞对患者来源白血病细胞和K562细胞的杀伤率。结果 A组NK细胞比例为(71. 22±2. 25)%,显著高于B组的(56. 32±3. 97)%(P <0. 05)。A组细胞增殖倍数与B组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。A组NK细胞活化标志CD69+、NKp46+、NKG2D+NK细胞比例分别为(70. 72±3. 62)%、(70. 30±3. 45)%、(72. 75±3. 89)%,均显著高于B组的(59. 98±2. 86)%、(60. 38±2. 84)%和(62. 30±4. 25)%(P <0. 05)。Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因的表达水平较诱导前患者BM-MNC显著升高,A组上述基因表达水平分别为13. 36±1. 54、9. 38±0. 51和6. 26±0. 25,均显著高于B组的9. 82±1. 21、7. 06±0. 52和4. 28±0. 23(P <0. 05)。在效靶比为10∶1时,A组NK细胞对K562细胞和患者来源白血病细胞的杀伤率分别为(62. 20±2. 36)%和(70. 78±2. 54)%,均显著高于B组的(56. 77±3. 81)%和(62. 95±1. 94)%(P <0. 05);且相同效靶比时A、B两组NK细胞对患者来源白血病细胞的杀伤率显著高于K562细胞(P <0. 05)。结论 CD34+白血病细胞可在体外诱导分化为NK细胞,且具有杀伤活性。联合应用IL-12、1L-15细胞因子组合能够诱导分化的NK细胞活性,提高对白血病细胞的杀伤率以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达水平,且诱导分化的NK细胞对白血病细胞的杀伤具有同体特异性。

IL-6/sIL-6R对人脐血CD34^+细胞体外扩增的作用

背景和目的:造血干细胞具有自我更新、多向分化与重建长期造血的潜能,因此,造血干细胞广泛应用于干细胞移植、免疫治疗、基因治疗等领域。胎儿脐带血中富含造血干细胞,但单份脐带血中造血干细胞的数量有限,不能充分满足临床和科研需要,因此在体外培养使脐带血干/祖细胞数量扩增的研究日益受到重视。已知一些细胞因子可以在体外培养中使脐血干/祖细胞大量扩增。新近发现IL-6/sIL-6R(可溶性IL-6受体)或其融合蛋白可促使脐带血CD34+细胞中CD34+gp130+IL-6R-细胞亚群在体外培养中大量扩增。本实验旨在观察IL-6/sIL-6R在脐带血CD34+细胞体外扩增中的作用,并探讨合适细胞因子组合。方法:脐血CD34+细胞用MiniMACS分离,然后在含有不同细胞因子组合的液体培养基中体外培养7天或14天,培养前后分别进行有核细胞计数、用FCM(流式细胞术)测定CD34+细胞比例计算CD34+细胞总数及进行CFU-GM集落培养。根据不同细胞因子组合分为空白对照组,SCF组,SCF+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL组。结果:空白对照组和SCF组CD34+细胞数量在培养7天或14天后明显下降。SCF+IL-6/sIL-6R组培养7、14天分别使有核细胞及CD34+细胞绝对数扩增(7.1±2.4)倍、(39.0±14.0)倍及(1.8±0.7)倍、(4.8±2.4)倍;SCF+FL+IL-6/sIL-6R组(16.

扩张型心肌病患者外周血单个核细胞IL-34表达及分泌的初步研究

目的观察白介素-34(IL-34)在扩张型心肌病(DCM)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中表达和血浆水平变化,探讨其在DCM发病中的作用。方法选择30例明确诊断为DCM的患者(DCM组),24例心力衰竭的患者(HF组)及30例健康体检者为正常对照组(NC组)。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定PBMCS的IL-34 mRNA的表达。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中IL-34水平。结果DCM组PBMCs表达IL-34 mRNA水平明显高于HF组及NC组,差异有统计学意义(P<0.01);而HF组及NC组间差异无统计学意义(P>0.05)。DCM组IL-34的灰度值比和血浆蛋白含量明显高于HF组和NC组,差异有统计学意义(P<0.01);而HF组及NC组间差异无统计学意义(P>0.05)。DCM组的IL-34 mRNA表达和蛋白水平与射血分数(EF值)呈明显负相关(r=-0.517,P<0.01;r=-0.512,P<0.01)。结论IL-34可能在DCM的免疫发病机制中起了一定作用。

加味青蒿鳖甲汤对髓系MRD-L患者CD_(34)^+细胞源DC诱导过程中IL-12的影响

目的:探讨加味青蒿鳖甲汤对树突细胞(DC)诱导和对IL-12分泌的影响。方法:本研究采用体外培养的方法,用含不同剂量(高、中、低)加味青蒿鳖甲汤动物血清联合细胞因子、不含药血清联合细胞因子及单纯用细胞因子,共同培养缓解期急性髓系白血病(AML-CR)患者骨髓中分离提取的CD+34细胞,诱导其成为DC,观察各组在不同阶段对DC成熟的影响,以及各组血清中IL-12的分泌变化。结果:含药血清均能上调DC表面特征性分子及共刺激分子CD80、CD83、CD86表达水平,较单纯细胞因子组比较有显著性差异(P<0.01),且含中剂量药血清更能促进DC分泌IL-12(P<0.01)。结论:联合细胞因子的含加味青蒿鳖甲汤的血清,可使来源AML-CR骨髓的CD+34,在体外比单纯用细胞因子诱导培养DC能够更好地促进DC的生长、成熟和分化,并能促进DC分泌IL-12,增加抗肿瘤作用。

血清IL-34水平评估非病毒性肝细胞癌患者预后的临床价值

目的评估血清IL-34预测非病毒性肝细胞癌患者(HCC)预后的临床价值。方法选择2013年3月至2014年3月我院收治的100例非病毒性肝细胞癌患者(非病毒性HCC组)和100例健康体检者(对照组)。通过ELISA评估血清IL-34水平。结果非病毒性HCC组血清IL-34水平[(15.89±6.21)pg/mL]显著高于对照组[(3.03±0.83)pg/mL,t=22.122,P<0.001]。PLT、ALT、AST、ALP、总胆红素、AFP、Child-pugh分级、肿瘤大小、肿瘤分期与IL-34呈正相关。ROC分析血清IL-34对非病毒性HCC的AUC=0.889,截断值8.87 pg/mL,P<0.001,95%CI 0.820~0.958,敏感性82.98%,特异性92.45%。高IL-34(≥8.87 pg/mL,n=41)和低IL-34(<8.87 pg/mL,n=59)生存率具有统计学差异(χ2=14.360,P=0.002)。Cox比例风险模型分析AFP、肿瘤大小、肿瘤分期、IL-34是非病毒性HCC预后危险因素。结论IL-34是非病毒性肝细胞癌患者生存预后的独立因素,IL-34可能与非病毒性肝细胞癌预后有关。

探讨IL-34对慢性根尖炎中RANKL/OPG平衡的影响

该文研究之目的:慢性根尖炎主要是以根尖炎性骨破坏为表现的口腔常见疾病,RANKL/OPG调节慢性根尖周病中的骨吸收。该文主要研究炎性因子IL-34对RANKL/OPG的平衡的影响,从而进一步探索IL-34在该疾病中的致病机理。之方法:实验组选用18组根尖周炎病例的肉芽组织,对照组选用正畸拔牙中的健康牙周组织8例。应用免疫组化检测IL-34、RANKL及OPG的表达情况,并进行数据测量及定量分析三者之间的相关性。之结果:在慢性根尖周炎中IL-34在根尖周炎和对照组的表达量分别为0.206±0.038和0.131±0.023,差异有统计学意义(P<0.05)。在根尖周炎组IL-34与RANKL呈负相关(r=-0.578,P=0.039);IL-34与OPG呈正相关(r=0.778,P=0.000),差异均有统计学意义。之讨论:本次实验证明了IL-34与根尖周炎的发生有很大关系,但IL-34可能只是很多影响RANKL/OPG平衡的炎性因子的一种。

sIL-6R,IL-6和SCF对人脐血CD34^+细胞的扩增作用

1995年,我们发现由于细胞因子(SCF)和白细胞介素6(IL-6)/可溶性白细胞介素6受体(sIL-6R)复合物同时激活c-kit和gp130信号系统,有利于CD34^+细胞的扩增。在此基础上,我们进一步研究了同时激活这两个信号系统对更原始的脐血长期培养启动细胞(long-term culture-initiating cell,LTC-IC)和混合造血细胞集落形成单位(CFU-Mix)的扩增作用。

重组人IL-12和SCF促进新生儿脐带血中CD34^+细胞的分裂增殖

目的分析IL-12及SCF对CD34+细胞分裂增殖及IL-12Rβ的表达。方法分离正常足月产新生儿脐带血与健康成年人外周血中的单个核细胞,采用流式细胞术(FACS)比较2组中CD34+细胞的频率,分析IL-12及SCF对CD34+细胞的作用。结果健康成年人外周血中CD34+细胞平均频率为0.13%,显著低于新生儿脐带血中CD34+细胞的平均频率1.53%(P<0.001)。进一步研究表明,SCF可以促进CD34+细胞表达CD25;IL-12及SCF可以显著促进CD34+细胞的分裂增殖以及IL-12Rβ1的表达。结论新生儿脐带血中CD34+细胞的频率明显高于成年人外周血中CD34+细胞的频率。IL-12及SCF可以促进CD34+细胞的分裂增殖以及IL-12Rβ1的表达。

MIP-1α联合IL-8对小鼠CD34^+细胞体外增殖的影响

目的 了解巨噬细胞炎症蛋白 1α(macrophageinflammatoryprotein 1α ,MIP 1α)联合白细胞介素 8(interleukin 8IL 8)体外对小鼠CD34+ 细胞增殖的影响。方法 采用免疫磁珠吸附法分离小鼠CD34+ 细胞 ,将标本分为MIP 1α和IL 8各 1ng/ml组 ,10ng/ml组 ,5 0ng/ml组和空白组 ,建立液体培养体系及半固体培养体系 ,体系中分别加入相应浓度的MIP 1α和IL 8(空白组不加 ) ,培养一定时间后 ,观察各组的细胞生长情况 ,并作液体培养体系中细胞的周期分布检测。结果 1ng/ml浓度的MIP 1α与相同浓度的IL 8联合使用 ,对小鼠CD34+ 细胞的体外增殖没有明显的影响 ,与空白组比较P >0 .0 5 ;10ng/ml和 5 0ng/ml浓度下 ,两者联合使用 ,则能明显抑制小鼠CD34+ 细胞的体外增殖 ,与空白组比较P <0 .0 1。但这两个浓度组相互比较却无显著差异 ,P >0 .0 5。周期分析结果表明 ,10ng/ml组和 5 0ng/ml组的G0 /G1期细胞均明显多于空白组和 1ng/ml组 ,P <0 .0 1,10ng/ml组与 5 0ng/ml组、1ng/ml组与空白组之间无显著差异 ,P >0 .0 5。结论 较低浓度下的MIP 1α联合IL 8,在体外能明显抑制小鼠CD34+ 细胞的增殖。

孟鲁司特对哮喘大鼠骨髓CD_(34)^+细胞IL-4 mRNA和IL-4蛋白表达的影响

目的:研究IL-4mRNA和IL-4蛋白在哮喘大鼠CD34+细胞中的转录表达及孟鲁司特(montelukast,MK)对其表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为3组:哮喘组、MK组和正常对照组。用卵白蛋白制备大鼠哮喘模型。应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆中IL-4和γ-干扰素(IFN-γ)浓度;用MiniMACS磁珠分选系统分离骨髓CD34+细胞;采用SYBR GREEN I荧光实时定量PCR法测定CD34+细胞中IL-4 mRNA的相对表达量。采用免疫组化技术测定CD34+细胞中IL-4蛋白的表达量。结果:哮喘组骨髓CD34+细胞中IL-4mRNA和IL-4蛋白的表达量高于其它各组(P<0.01);哮喘组除了IFN-γ水平低外,IL-4浓度和嗜酸性粒细胞(Eos)绝对值都是三组中最高的(P<0.01);除哮喘组外,其余组的各项指标相近(P>0.05)。IL-4 mRNA表达量与IL-4浓度、Eos绝对值呈正相关(P<0.01),与IFN-γ浓度呈负相关(P<0.01)。结论:哮喘大鼠骨髓CD34+细胞中IL-4mRNA的表达增强;孟鲁司特可以下调IL-4mRNA的表达,可能成为其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。