菊粉酶高活力菌株的筛选和发酵条件的研究

从101林酵母中筛选出一株高菊粉酶活力的菌株克鲁维酵母(Kluyveromyces sp.)y-85,该菌株菊粉酶的合成受木糖或菊粉的诱导,产酶适宜的培养基组成(％)为:菊芋抽提液7.0,尿素2.0,玉米浆3.0,产酶的最适温度和pH分别为30℃和5～6,在这些条件下,摇瓶培养24h,该菌株产生的酶活力可达1403u/ml。

一步法制备高果糖浆工程及产酶菌体营养价值研究

利用克鲁维酵母菊粉酶酶解菊粉制作高果糖浆 ,优选的酶解条件是 :菊糖浓度15.0 % ,酶作用剂量 2 2U/g ,50℃下作用 6～ 36h ,底物水解率 >95%。水解产物中果糖占95%以上 ,葡萄糖占 5%以下 ,不含其它糖。产酶酵母所含营养物质非常丰富。真蛋白含量4 3.10 % ,赖氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、色氨酸分别是 3.0 2、0 .58、0 .4 4、0 .52mg/kg ,维生素B1和B2含量分别是 5.53和 6 0 .70mg/kg ,重要微量元素铜、锌、铁、锰的含量分别是 19、110、170和 15mg/kg。在本研究设计工艺下 ,高果糖浆和高值兼用酵母生产可以一举两得。

微生物菊粉酶基因结构、酶学性质与应用研究进展

综述了微生物菊粉酶基因结构、酶学性质、发酵生产与应用等方面研究的最新进展。

一步酸法水解菊粉生产高果糖浆

用黑曲霉突变株AJ1958产生的菊粉酶，水解菊粉抽提液生产高果糖浆．以6O目菊芋粉在水料比为6：1，料液pH3．0~3．5，60℃条件下浸泡0·5h，过滤，其菊粉抽提率可达95％以上．在每克菊粉投酶量120μmol／min下，水解菊粉抽提液6h～7h，水解率达到95％以上．调nH至4．2～4．5，经活性炭脱色，减压浓缩，得可溶性固形物浓度为0·77g／g以上，果糖含量0．90g／g以上，具有果糖纯正香味的高果糖浆．

用于高果糖浆制备的宛氏拟青霉嗜热嗜酸菊粉酶酶学特性分析

为实现酶法水解菊糖制备高果糖浆,从宛氏拟青霉(Paecilomyces variotii)XS27发酵液中分离纯化菊粉酶,并对其酶学特性进行研究。发酵液经过硫酸铵盐析、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow层析、Sephacry S-100分子筛过滤层析,得到电泳纯的菊粉酶,比活力327.4 U/mg,纯化倍数37.85。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳测得菊粉酶为单一亚基的酶蛋白,分子质量62.0 kDa。菊粉酶能在较宽的pH值范围(3.5～6.5)内保持高活性,最适作用pH 4.0。在温度40～65℃之间,酶活力较高,最适作用温度为60℃。薄层色谱分析显示菊粉酶水解菊糖最终产物为果糖。以菊糖为底物,酶的K_m和V_(max)分别为5.93μmol/L和75.18μmol/(L·min)。Mg2+、Mn2+、Ca2+对酶有显著激活作用,Ba2+、Ni2+和Hg2+对酶有一定抑制作用。β-巯基乙醇、二硫苏糖醇和乙二胺四乙酸对酶有抑制作用,表面活性剂(十二烷基硫酸钠、Tween 80和Trition X100)以及乙醇对酶活力没有影响。从宛氏拟青霉XS27发酵液中分离纯化的菊粉酶在强酸高热的环境下具有强活性和稳定性,对表面活性剂乙醇有高耐受性,适合于果葡糖浆的工业化生产。

菊粉酶及其应用研究进展

菊粉酶是一种能水解菊粉中β-2,1-D果聚糖果糖苷键的一类水解酶,在许多微生物如真菌、酵母和细菌中存在。菊粉酶可用于生产高果糖浆、低聚果糖和酒精,在药学和食品工业中具有重要的应用价值和良好的应用前景。本文介绍了菊粉酶的分类、性质、产酶微生物、条件优化、分离纯化及应用进展。

菊糖酶酵母去阻遏突变体的选育

一株萨地假丝酵母(Candida Salmenticensis B—102)能产生菊糖酶(Inulinase)。经研究发现,这株酵母酶系统合成菊糖酶时受右旋糖、果糖的抑制。因此,应用固定化酵母细胞进行菊糖连续水解制备高果糖浆时,将受到限制。使用甲基磺酸乙酯(EMS)处理菌体细胞后,通过脱氧葡萄糖选择淘汰,分离到稳定的菊糖酶合成去阻遇突变体。测定了突变体的一些特性,并探讨诱变处理对菌体酶系统的影响。

菊粉的酶法生物转化在食品中应用的研究进展

菊粉是我国分布广泛、含量丰富的重要农副产品,利用菊粉酶对其进行生物深加工可高效实现菊粉在食品领域的低成本、多方向、高附加值利用。本文综述国内外菊粉应用于食品的酶法研究开发现状,对不同类型菊粉酶生物转化产品的性质及食品应用、酶的微生物来源及菊粉酶的最新研究进展进行阐述。

菊粉酶研究和应用

该文介绍菊粉酶来源、分类、性质、提取、纯化和应用研究进展。

发酵菊粉酶酶解大蒜渣的工艺研究

以大蒜渣为原料,利用马克斯克鲁维酵母诱导产出菊粉酶。所得菊粉酶经硫酸铵盐析,得出最佳饱和度为40%～80%。在这一区间的饱和度下经过透析、冷冻干燥,沉淀得到较纯的外切菊粉酶。再利用发酵酶水解大蒜渣制备果葡糖浆,经选择温度,酶活,底物浓度,pH以及时间这5个单因素,并正交设计,得出最优方案:pH4.8,温度为45℃,底物浓度9mg/mL,酶活量53.95U/mL,时间为8h,此时水解率达到96%。经高效液相色谱法-示差折光分析法可以知道,酶解液以果糖为主。

基因工程菊粉酶对高浓度蔗糖水解的研究

对菊粉酶基因工程菌株GS115/INU1进行诱导表达,通过发酵液的分离纯化后,得到在SDS电泳显示单一条带的GS115/INU1酶液。该酶的蔗糖水解酶比活性为1.85U/μg,水解蔗糖最适pH值为4.0,最适温度50℃。加酶量为48U/g底物,对50%蔗糖溶液进行水解,水解时间6h,水解率达到99.7%。对80%蔗糖溶液进行水解,水解时间14h,水解率达到97.8%。