Bacillus tropicus来源β-D-呋喃果糖苷酶基因的克隆与表达及其酶学特性研究

为获得新β-D-呋喃果糖苷酶资源并探究其酶学性质及在转化糖中的应用潜力,挖掘出Bacillus tropicus来源的β-D-呋喃果糖苷酶基因BtFFase8,成功合成后表达在大肠杆菌宿主中。通过数据库筛选β-D-呋喃果糖苷酶的基因序列,将基因克隆至载体pET-28a(+)中。将获得的重组质粒转化至大肠杆菌BL21,构建重组菌株大肠杆菌BL21/pET28a-BtFFase8。采用亲和层析纯化克隆酶,用SDS-PAGE法分析蛋白分子量,通过葡萄糖试剂盒检测酶水解产物的能力得到酶活力,用福林酚试剂法测定蛋白质含量。克隆酶BtFFase8的分子质量为57.0 kDa,对蔗糖底物的比酶活力为13.4 U/mg;BtFFase8的最适pH和最适温度分别为pH 6.5和45℃,且在pH 5.0~8.0和40℃及以下温度保持酶活力稳定,残余酶活力大于80%;BtFFase8能耐受碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和胰蛋白酶的水解,残余酶活力大于70%。BtFFase8的发现及克隆酶优良的酶学功能为其未来应用于食品加工,特别是在转化糖的生产中奠定了良好的理论基础。

转化糖注射液多中心临床应用研究70例

目的 :观察转化糖注射液对各种疾病病人血糖水平的影响 ,评价转化糖注射液临床应用的有效性及安全性。方法 :采用多中心临床试验设计 ,选用 18～ 6 5α病人共 139例 ,试验组 (70例 )静脉输注转化糖注射液 5 0 0mL·d- 1,对照组 (6 4例 )静脉输注葡萄糖注射液 5 0 0mL·d- 1,疗程皆为 3～ 5d(在此期间 ,2组病人皆不输注其他含糖制剂 )。结果 :转化糖组血糖波动小于葡萄糖组 (P <0 .0 5 )。 2组病人输液前后、输液后 2h血糖水平P >0 .0 5 ,试验前后血、尿常规 ,肝、肾功能 ,血尿酸均未出现与药物相关变化。结论 :转化糖注射液具有与葡萄糖注射液相当的安全性 。

转化糖注射液对住院患者血糖及胰岛素水平的影响

目的:观察转化糖注射液对各种需要静脉补充能量及体液的住院患者血糖、胰岛素水平的影响,并评价其安全性。方法:采用随机、双盲、对照的多中心临床试验。共入选病例240例,试验组(120例)静脉滴注转化糖注射液500ml/d,对照组(120例)静脉滴注葡萄糖注射液500ml/d,疗程均为3天。给药期间检测患者的血糖、胰岛素,给药前后作心电图、血尿常规、肝肾功能及血尿酸、电解质等检查,密切观察患者的临床症状及体征变化。结果:转化糖组的血糖及胰岛素水平的波动小于葡萄糖组(P<0.05),试验前后的生命体征、血尿常规、肝肾功能、电解质、心电图等均未出现与药物相关的异常变化。结论:转化糖对血糖及胰岛素水平的影响小于葡萄糖,其安全性与葡萄糖注射液相当。

赣南富硒脐橙中糖度、酸度和维生素C含量的测定分析

以美国纽荷尔脐橙为供试品种,采用土施和喷施亚硒酸钠的脐橙富硒试验,系统测定分析了施硒量对富硒脐橙的糖度、有机酸酸度和维生素C含量的影响。结果表明:在施硒量为45 360mg/棵范围时,富硒脐橙中还原糖、转化糖、蔗糖、总糖的含量与施硒量是正相关,提高的最大幅度分别达到36.3%、30.2%、28.5%、20.9%;而富硒脐橙中有机酸含量与施硒量总体呈负相关,当施硒量在90mg/棵时,脐橙中有机酸含量下降最大,有机酸含量为0.85g/100mL果汁(以柠檬酸计),下降幅度达49.4%;在施硒量为45 90mg/棵范围时,维生素C含量与施硒量呈负相关,施硒量在180 360mg/棵范围时,外源硒对脐橙中维生素C的合成有促进作用。施用硒肥改善了脐橙的口感,提高了脐橙的品质。

美洛西林钠在果糖注射液和转化糖注射液中的稳定性考察

目的考察美洛西林钠在果糖注射液和转化糖注射液中的稳定性。方法采用高效液相色谱法测定美洛西林钠与果糖注射液和转化糖注射液配伍一定时间后的含量,并观察其外观、pH值的变化。结果美洛西林钠与这两种注射液配伍,6h内其含量变化不大,溶液澄清,pH值稳定。结论美洛西林钠可与果糖注射液和转化糖注射液配伍使用。

头孢替唑钠、盐酸头孢甲肟在5%转化糖注射液中的配伍稳定性考察

目的考察注射用头孢替唑钠、注射用盐酸头孢甲肟分别与5%转化糖注射液配伍的稳定性,为临床合理用药提供依据。方法在室温(25±1)℃下,将两种注射用抗生素分别与5%转化糖注射液配伍,在8 h内,观察各配伍溶液的pH和外观变化,并采用HPLC法测定各配伍溶液中主药成分的相对含量。结果 8 h内,盐酸头孢甲肟、头孢替唑钠与5%转化糖注射液配伍后,头孢替唑钠的pH、外观和相对含量无明显变化;而盐酸头孢甲肟的pH及含量变化较大,配伍溶液颜色逐渐加深。结论在室温(25±1)℃条件下、8 h内,注射用头孢替唑钠与5%转化糖注射液的配伍液稳定;从医疗安全的角度考虑不提倡盐酸头孢甲肟与5%转化糖注射液配伍使用。

卡络磺钠在转化糖电解质注射液中配伍的稳定性考察

目的考察注射用卡络磺钠在转化糖电解质注射液中配伍的稳定性。方法采用高效液相色谱法,以Hypersil ODS-C18色谱柱,磷酸盐缓冲液-乙腈(85∶15)为流动相,测定卡络磺钠在转化糖电解质注射液中室温下8h内的含量变化,并观察和检测配伍液外观及pH值变化。结果配伍液外观及pH值无明显变化,但卡络磺钠含量下降明显。结论注射用卡络磺钠在转化糖电解质注射液中不稳定。

注射用灯盏花素与注射用转化糖的配伍稳定性考察

目的考察注射用灯盏花素与注射用转化糖在0.9%氯化钠注射液中的稳定性并进行分析。方法观察并测定灯盏花素与转化糖在0.9%氯化钠注射液中配伍后室温放置6 h内的微粒、外观及pH,并采用高效液相色谱法测定配伍液室温放置6 h内的含量变化。结果与配伍0 h比较,配伍液放置6 h内的外观、色泽及含量均无明显变化,pH略有变化,微粒不符合2010年版《中国药典》规定。配伍液中灯盏花乙素含量在6 h内保持在95%以上。结论注射用灯盏花素与注射用转化糖在0.9%氯化钠注射液中不宜配伍。

小麦几种主要次生物质对麦长管蚜几种酶活力的影响

借助麦蚜人工饲料研究明确了小麦几种主要次生物质单宁酸、总酚 (没食子酸 )和香豆素对麦长管蚜Sitobionavenae的存活、生长和发育有明显的抑制作用 ,其抗蚜阈值浓度分别为 0 0 6 %、 0 0 8%和 0 0 6 5 %。用昆虫酶系体外抑制法 ,研究上述三种次生物质的抗蚜阈值浓度对麦长管蚜的糖转化酶和解毒酶活力的影响 ,结果表明 :0 0 6 %单宁酸强烈抑制麦长管蚜蔗糖酶、海藻糖酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽S 转移酶的活力 ;0 0 8%没食子酸显著抑制蔗糖酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽S 转移酶的活力 ;0 0 6 5 %香豆素极显著地抑制谷胱甘肽S 转移酶活力。

转化糖注射液对合并有糖尿病的急性酒精中毒患者血糖的影响

目的探讨转化糖对合并有糖尿病的急性酒精中毒患者血糖的影响。方法将40例合并有糖尿病的急性酒精中毒患者随机分为转化糖组、葡萄糖组两组各20例,分别输注5%转化糖、10%葡萄糖注射液500mL,于治疗前、输液后即刻、输糖液250mL时、输糖液结束时、输糖液后30min及2h监测血糖浓度。结果输液后即刻、输糖液中、后各时点葡萄糖组血糖均高于转化糖组(P<0.05),转化糖组血糖波动小于葡萄糖组(P<0.05)。试验前后心电图,血、尿常规,肝、肾功能,血尿酸均未出现与药物相关的变化。结论转化糖较葡萄糖对合并有糖尿病的急性酒精中毒患者的血糖浓度变化影响小,应用较葡萄糖注射液更为安全。

高效液相色谱法测定注射用转化糖的含量

目的建立测定注射用转化糖含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法采用Intersil氨基柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水(85∶15)为流动相,示差折光检测器。结果葡萄糖和果糖质量浓度在0.8～8μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,果糖和葡萄糖的平均回收率分别为99.19%和99.00%,RSD分别为0.60%和0.72%(n=9)。结论HPLC法灵敏度高、专属性强且便捷,可以很好地控制产品质量。

注射用头孢噻酚钠与3种输液的配伍稳定性

目的考察注射用头孢噻酚钠与果糖注射液、转化糖电解质注射液和木糖醇注射液配伍的稳定性。方法模拟临床用药浓度,在室温(20±1)℃下放置6 h,观察配伍液外观、pH变化,并用高效液相色谱法测定配伍液中头孢噻酚的含量变化。结果头孢噻酚钠与木糖醇注射液的配伍液0～6 h内含量、外观均无显著变化,6 h时pH下降0.5;头孢噻酚钠与转化糖电解质注射液的配伍液0～6 h内pH、外观、含量均无明显变化;头孢噻酚钠与果糖注射液的配伍液,0～6 h内pH、外观均无明显变化,2 h含量>98%,6 h含量下降至95.71%。结论在实验条件下,3种输液与头孢噻酚钠配伍基本稳定,可以作为头孢噻酚钠的溶媒,头孢噻酚钠与果糖注射液配伍时宜在2 h内完成输注。

注射用盐酸头孢甲肟与5种输液的配伍稳定性

目的考察注射用盐酸头孢甲肟与果糖注射液、转化糖注射液、转化糖电解质注射液、木糖醇注射液和木糖醇氯化钠注射液配伍的稳定性。方法模拟临床用药浓度,在室温(25±1)℃下放置6 h,观察配伍液外观、微粒数量及p H变化,并用高效液相色谱法测定配伍液中头孢甲肟的含量变化。结果头孢甲肟与5种输液配伍后在6 h内外观、p H和含量均无显著变化,微粒数量符合要求。结论 5种输液与头孢甲肟配伍稳定,均可作为头孢甲肟的溶媒使用。

非中和下斐林法测定柑桔果汁转化糖的研究

采用标准对照法．研究在不经中和酸的争件下，直接用斐林试剂滴定柑桔果实鲜榨汁水解液中的转化糖，与国标GB8210—1987测定结果相比，回收率迭95％～102％，RSD为0．0087。我国柑桔主产区果实成热期集中，样品量较大，用此方法能简化测定程序，缩短测试时间，极大地提高测定效率。

注射用伏立康唑与2种注射液的配伍稳定性研究

目的:考察注射用伏立康唑与果糖注射液、转化糖注射液的配伍稳定性。方法:参考药品说明书,取注射用伏立康唑200mg经注射用水溶解并定容至20 m L后,分别与果糖注射液250 m L、转化糖注射液250 m L配伍。在室温条件下,分别于配伍后0、1、2、3、4、5 h观察各配伍液的外观,测定其p H和不溶性微粒数,并采用高效液相色谱法测定伏立康唑的含量。结果:在上述条件下,各配伍液在5 h内外观和p H均无明显变化,粒径≥10μm和≥25μm的微粒数均符合2015年版《中国药典》标准;伏立康唑的相对百分含量呈下降趋势(95.28%~100%),但其变化均在±5%范围内(RSD<2%,n=6)。结论:注射用伏立康唑与果糖注射液、转化糖注射液配伍后,在室温条件下5 h内保持稳定。

洛美沙星、哌拉西林/他唑巴坦在转化糖电解质注射液中的配伍稳定性考察

目的:考察门冬氨酸洛美沙星、哌拉西林钠/他唑巴坦钠分别与转化糖电解质注射液配伍的稳定性,为临床合理用药提供科学依据。方法:在室温条件下,将这两种注射用抗生素分别与转化糖电解质注射液配伍,在8 h内,观察各配伍溶液的pH和外观变化,并采用HPLC法测定各配伍溶液中主药成分的相对含量。结果:门冬氨酸洛美沙星、哌拉西林钠/他唑巴坦钠分别与转化糖电解质注射液配伍后,pH、外观无明显变化,相对含量分别在96%及99%/96%以上。结论:门冬氨酸洛美沙星、哌拉西林钠/他唑巴坦钠在室温下与转化糖电解质注射液的配伍液在8 h内稳定。

RP-HPLC考察注射用更昔洛韦钠在转化糖注射液及转化糖电解质注射液中配伍的稳定性

目的考察室温(20±1)℃下,注射用更昔洛韦钠分别与5%转化糖注射液及5%转化糖电解质注射液配伍的稳定性。方法采用反相高效液相色谱法测定配伍液中更昔洛韦0～6 h内的含量变化,并观察配伍液的外观及pH值。结果注射用更昔洛韦与5%转化糖注射液及5%转化糖电解质注射液6 h内配伍液外观、pH及含量均无明显变化。结论在室温(20±1)℃下,注射用更昔洛韦钠分别与5%转化糖注射液及5%转化糖电解质注射液6 h内可配伍使用。

果糖及其相关溶媒的合理应用

果糖是一种葡萄糖的同分异构体,与葡萄糖相比,它不经过磷酸葡萄糖变位酶而直接转化成糖原。短期低剂量使用时,对血糖代谢和胰岛素功能无影响,临床上常作为溶媒应用于糖尿病患者。然而,长期大剂量使用却容易诱发高尿酸血症、乳酸酸中毒、代谢综合征和静脉炎等。此外,果糖与多种碱性药物配伍时,其多羟基酮因裂解而导致稳定性下降。正确掌握果糖及其相关溶媒的适应证和配伍特点,有助于提高用药安全性。

酸水解蔗糖生产转化糖的研究

用盐酸、柠檬酸、酒石酸等常用的食品酸味剂,水解蔗糖生产转化糖,以HPLC分析测定转化过程的蔗糖转化率。结果表明用这几种酸物质都能较方便地制取不同蔗糖水解度的转化糖;当有机酸的用量为0.15%(w/w蔗糖)时,在85℃水解150min,蔗糖转化率约90%;蔗糖的质量也会影响有机酸的水解能力和转化糖产品的质量。

转化糖电解质注射液对择期手术患者血糖及电解质的影响

目的研究转化糖电解质注射液对择期手术患者血糖及电解质水平的影响。方法将60例择期手术患者随机分为3组,分别给予转化糖电解质注射液(A组)、10%葡萄糖注射液(B组)以及乳酸钠林格注射液(C组)静滴,对比3组患者滴完后0 h、1 h以及2 h时血糖以及电解质的变化以及不良反应。结果 A组滴完后血糖水平有所升高,但滴完后2 h迅速恢复至接近输液前水平;B组滴完后血糖水平明显升高,且升高幅度明显高于A组,至滴完后2 h仍显著高于输液前;C组滴完后血糖水平略降低,且持续至滴完后2 h,此时血糖水平明显低于输液前。B组对于K+的补充疗效较A组差,而C组对于Na+、Cl-、Ca2+水平的影响更大。3组不良反应发生率无显著差异。结论转化糖电解质注射液对择期手术患者的能量供给以及电解质平衡的调节具有确切疗效,且安全可靠,值得推广。