基于数据挖掘、网络药理学、分子模拟和实验验证探究治疗糖尿病足溃疡外用中药复方专利的用药规律及作用机制

目的基于国家知识产权局专利数据库,分析外用中药复方专利治疗糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)的用药规律及作用机制,并通过实验验证相关结果。方法根据纳入和排除标准检索数据库中治疗DFU的外用中药复方专利,去重后构建DFU外用中药复方专利集,对其进行频数、性味归经、关联规则及聚类分析,筛选治疗DFU的外用核心中药数据集;进一步建立疾病-核心中药-活性成分-共有靶点网络模型,通过共有靶点建立蛋白-蛋白互作网络(protein-protein interaction networks,PPI),利用Metascape平台进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析;借助分子对接及动力学模拟评估潜在关键靶标与活性成分之间的结合能力与稳定性;并基于CCK-8法评估关键活性成分对细胞增殖的影响,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)验证活性成分对PI3K及Akt信号通路的调控作用。结果共收集专利98项,包含中药281味。其中,寒性中药应用次数最多,归肝经中药应用最多,清热类中药应用最多。通过数据挖掘获得频数前3位的核心中药为当归、黄柏和红花,进一步筛选得出核心中药包含活性成分85种,其对应疾病靶点889个;与DFU靶点取交集后得到166个共有靶点,通过PPI网络拓扑分析,确定了包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)等8个核心靶点。GO和KEGG通路富集分析证实,核心中药的活性成分主要作用于炎症反应及细胞凋亡等相关靶点,通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)等信号通路治疗DFU。分子对接和动力学模拟表明关键靶点与其对应的核心成分之间具有良好的结合能力及稳定性。实验研究表明,关键活性成分豆甾醇具有较高的生物安全性,其可明显上调PI3K及Akt的转录水平。结论通过多维数据挖掘分析证实治疗DFU的外用复方大多具有清热解毒、活血化瘀特性,其关键活性成分豆甾醇、二氢尼洛替星主要作用于PPARγ及TNF-α等DFU靶点;豆甾醇可明显上调PI3K及Akt信号通路发挥治疗DFU的效果。

活血散结中药复方含药血浆对PDGF干预下兔RPE细胞增殖的影响

目的:观察活血散结中药复方含药血浆对血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)干预下兔RPE细胞增殖的影响。方法:酶消化法获取RPE原代细胞,进行RPE细胞的原代培养和传代;制备活血散结中药复方含药血浆;选取第4代兔RPE细胞为实验细胞,PDGF低、中、高剂量(5、10、20μg/L)干预48h后,CCK-8法检测并选取适宜细胞实验干预浓度;建立PDGF干预下RPE细胞增殖模型。实验分组为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%含药血浆组,PDGF(10μg/L)+20%含药血浆组,分别加入相应处理因素干预24h后,Transwell法测定兔RPE细胞迁移力;而干预48h后,CCK-8法测定兔RPE细胞的细胞活力OD值。结果:10%和20%浓度的活血散结中药复方含药血浆能有效抑制PDGF干预下RPE细胞的细胞活力、细胞迁移。结论:活血散结中药复方含药血浆能够抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖,这可能是其有效治疗增殖性玻璃体视网膜病变的机制之一。

益气活血汤对慢性充血性心力衰竭患者抗炎细胞因子及心功能的影响

目的观察益气活血汤对气虚血瘀型慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清细胞因子及心功能的影响。方法60例气虚血瘀型CHF患者,随机分为治疗组和对照组各30例,对照组给予常规CHF西药治疗,治疗组在常规西药治疗基础上加服益气活血汤,连续治疗6周。测定2组患者治疗前后血清炎性细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6),抗炎细胞因子:白细胞介素10(IL-10)、转换生长因子β1(TGF-β1)]水平的变化;同时测量2组患者治疗前后心脏收缩功能指标:左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、心输出量(CO);心脏舒张功能指标:二尖瓣舒张早期最大血流速度(E)、舒张晚期最大血流速度(A),计算E/A比值的变化。结果治疗后2组均可降低炎性细胞因子TNF-α、IL-6水平,升高抗炎性细胞因子IL-10、TGF-β1水平,明显改善心力衰竭患者的LVESD、LVEDD、LVEF、CO及E/A,治疗组改善程度尤为显著(P<0.05,P<0.01)。结论益气活血汤可能通过调控细胞因子的水平改善心功能,治疗心力衰竭。

活血散结方药物血浆对PDGF干预下兔视网膜色素上皮细胞增殖相关因子及ERK1/2信号转导通路的影响

目的观察活血散结方对血小板源性生长因子(PDGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖的影响,探讨其分子机制。方法以RPE细胞为研究对象,体外进行RPE细胞原代培养及传代,建立PDGF干预下兔RPE细胞增殖模型,并选取PDGF最佳干预浓度。制备活血散结方药物血浆,对兔RPE细胞增殖与毒性的影响进行测定,选取最佳的实验浓度。实验分为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%药物血浆组、PDGF(10μg/L)+20%药物血浆组。分别加入相应处理因素干预48 h,Transwell流式细胞仪检测细胞周期变化;Western blot检测兔RPE细胞cyclinD1蛋白、pERK1/2及ERK1/2蛋白表达。结果 10%、20%活血散结方药物血浆对RPE细胞周期、cyclin D1蛋白及p ERK1/2、ERK1/2蛋白有抑制作用,与AG1296抑制剂作用相当(P>0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论活血散结方药物血浆可能通过影响ERK信号通路及对周期蛋白的调控,抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖。

活血散结中药复方含药血浆对bFGF干预下兔RPE细胞Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探索活血散结中药复方含药血浆对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:选用对数生长期兔RPE细胞,分为正常血浆组、bFGF组、bFGF+BGJ398组、bFGF+含药血浆组,Western blotting法检测各组兔RPE细胞Bcl-2、Bax蛋白表达情况,观察活血散结中药复方含药血浆作用后RPE细胞Bcl-2、Bax蛋白在兔RPE细胞中的表达。结果:bFGF+含药血浆组与bFGF比较,Bax蛋白表达明显增强,Bcl-2蛋白表达明显抑制,差别均有显著统计学意义(P<0.01)。结论:活血散结中药复方含药血浆作用于bFGF干预下所致增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的细胞模型,可促进RPE细胞Bax蛋白的表达,同时抑制Bcl-2蛋白的表达,使Bax/Bcl-2构成比升高。

软坚散结活血行气法对肾功能不全代偿期及失代偿期的多囊肾患者的治疗效果研究

目的:探讨软坚散结活血行气法对肾功能不全代偿期及失代偿期的多囊肾患者的治疗效果研究。方法:选取2016年6月至2017年6月石家庄肾病医院收治的肾功能不全的多囊肾患者150例作为研究对象,按照随机数字的方法将患者分为对照组和观察组,每组75例,对照组患者使用常规西医治疗方法,观察组在对照组患者治疗方案基础上使用软坚散结活血行气法进行治疗,对治疗的效果进行比较。结果:经过治疗后,对照组患者的血肌酐、尿酸、肾小球滤过率等肾功能指标均有所改善,肾脏体积和最大囊肿直径有所增大,观察组患者的血肌酐、尿酸、肾小球滤过率等肾功能指标均有明显改善,肾脏体积、最大囊肿直径均减小,观察组患者的改善幅度大于对照组患者,数据差异均有统计学意义(P<0.05),所有项目的处理因素与时间均存在交互作用(P<0.05),观察组患者的治疗效果优于对照组患者,数据差异有统计学意义(Z=-5.685,P<0.05),2组患者的各类不良反应发生率的数据差异均无统计学意义(χ^2=0.150,0.694,0.340,1.027,0.207,0.528,P>0.05)。结论:利用软坚散结活血行气法对肾功能不全代偿期及失代偿期的多囊肾患者进行治疗,可以明显改善血肌酐,尿酸,肾小球滤过率血红蛋白,肾脏体积,最大囊肿直径的水平,提升治疗效果,值得在临床工作中使用。

中药汤剂联合非布司他及体外冲击波治疗痰浊阻滞型痛风石的疗效观察

【目的】观察补肾活血、化痰散结中药汤剂联合非布司他及体外冲击波治疗痰浊阻滞型痛风石的临床疗效。【方法】将78例痰浊阻滞型慢性痛风性关节炎伴痛风石患者随机分成西药组、中西医结合组和综合治疗组,每组各26例。3组患者均给予痛风患者生活饮食指导和碱化尿液治疗,在此基础上,西药组给予口服非布司他片治疗,中西医结合组给予口服非布司他片和中药汤剂治疗,综合治疗组给予口服中药汤剂和非布司他片的同时联合体外冲击波治疗,疗程为3个月。观察3组患者治疗前后关节疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、关节肿胀指数、活动度指数以及血尿酸(SUA)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和痛风石最大直径的变化情况,评价3组患者的尿酸达标率和安全性。【结果】(1)治疗后,3组患者疼痛VAS评分、关节肿胀指数和活动度指数均较治疗前明显下降(P<0.01),但3组患者治疗后组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后,3组患者的SUA、CRP、ESR、IL-1β、TNF-α水平均较治疗前明显下降(P<0.01),且中西医结合组和综合治疗组对SUA、CRP、ESR、IL-1β、TNF-α水平的下降作用均明显优于西药组(P<0.05),而中西医结合组与综合治疗组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)治疗后,西药组的尿酸恢复正常率和尿酸控制理想率分别为76.92%(20/26)和34.62%(9/26),中西医结合组分别为92.31%(24/26)和53.85%(14/26),综合治疗组分别为84.62%(22/26)和53.85%(14/26),组间比较,中西医结合组和综合治疗组的尿酸恢复正常率和尿酸控制理想率均高于西药组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)治疗后,3组患者的痛风石最大直径均较治疗前明显下降(P<0.05),且综合治疗组的下降程度优于西药组和中西医结合组(P<0.05)。(5)治疗过程中,中西医结合组和综合治疗组的不良事件发生率分别为7.69%(2/26)、11.54%(3/26),略低于西药组的19.23%(5/26),但差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】中药汤剂联合非布司他及体外冲击波治疗痰浊阻滞型痛风石疗效确切,相比纯西药治疗方案,联合中药治疗在降尿酸、控制炎症反应及安全性上具有较强的优势,在此基础上辅以体外冲击波治疗,可在一定程度上缩小痛风石的大小。

温阳益气活血化瘀辨治慢性疾病

慢性疾病常见有冠心病、高血压、脑卒中、糖尿病、慢阻肺和恶性肿瘤等,共同特征是年龄偏高,病程较长,伤及多脏,并发症多,人体阳气不足,导致血运受阻而出现诸多症状。根据中医基本理论,辨证论治、审因论治、异病同治的方法,以温阳益气,活血化瘀为治疗大法,兼顾受损之脏,使脏损得复,气运如常,浊瘀得去,疾病向愈。既是中医治病求本,异病同治的具体体现,也是临床经验总结的验证。附恶性肿瘤(积症)、高血压(眩晕)、冠心病(胸痹)、脑卒中(内中风)、糖尿病(消渴)、慢性阻塞性肺疾病(肺胀)验案6则。

益气固本消癌方联合化疗治疗老年非小细胞肺癌(气虚血瘀)随机平行对照研究

[目的]观察益气固本消癌方联合化疗治疗老年非小细胞肺癌(气虚血瘀)疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将80例住院患者按病志号抽签简单随机分为两组。对照组40例NP方案:DDP 80mg/m^2,d1+vinorelbine 25mg/m^2,d1,d8;3周1次,共2次;PT方案:PTX150～175mg/m^2,d_1+DDP 75mg/m^2,d_2;3周1次,共2次;PD:DDP 75mg/m^2,d1+Docetaxel 75mg/m^2,d1;3周1次,共2次; PG方案:DDP 75mg/m^2,d_1+Gemcitabine 1250mg/m^2,d_1,8;3周1次,共2次。治疗组40例益气固本消癌方(黄芪30g,党参、白术各15g,茯苓、半夏、莪术、三棱、水蛭各10g,蜈蚣2条,延胡索20g),水煎200mL,1剂/d,早晚温服;连续服5d,暂停2d;化疗方案同对照组。连续治疗4周为1疗程。观测临床表现、免疫功能、行为状况评分、体质量、不良反应。治疗1疗程(4周),判定疗效。[结果]CD^(3+),CD^(4+),CD^(8+),NK两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.01),CD^(4+)/CD^(8+)治疗组显著改善(P<0.01),对照组无明显变化(P>0.05);行为状况稳定率治疗组优于对照组(P<0.05);体质量稳定率治疗组优于对照组(P<0.05)。[结论]益气固本消癌方联合化疗治疗老年非小细胞肺癌(气虚血瘀),可提高患者免疫力,保持体质量稳定,改善生活质量,值得推广。

活血散结类中成药抗乳腺增生作用机制及联合用药的研究进展

乳腺增生(hyperplasia of mammary gland,HMG)是由内分泌激素紊乱导致的一种增生性疾病,发病趋势呈年轻化、上升化,并有癌变风险,严重危害女性健康,因此对HMG的防治越来越重视。随着中医药的发展,许多学者发现中成药在治疗内分泌紊乱方面有着独特优势和巨大潜力,尤其以具有活血散结作用的小金丸、消癥丸等已是临床常用治疗HMG的中成药,具有多靶点调控、疗效显著、副作用小、便于携带和服用的优点。有临床研究发现中成药联合用药后不仅可以提高疗效、缓解增生及疼痛等症状,还可降低西药的毒副作用,因此使用中成药及联合用药逐渐成为了临床治疗HMG的常用手段。在查阅了相关的药理及临床研究文献基础上,以活血散结类中成药和联合用药2个方面,从调节体内激素及受体水平、促进细胞凋亡、抑制新血管形成、改善血液流变学、增强免疫力、提高抗氧化能力等角度进行综述,深入阐述其作用机制,并且针对其现状提出不足之处和有待解决的问题,为活血散结类中成药及联合用药抗HMG的进一步研究和临床应用提供理论依据。

活血散结中药复方含药血浆对bFGF干预下兔视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的:探索活血散结中药复方含药血浆对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖的影响。方法:选用对数生长期兔RPE细胞,分成空白对照组、正常血浆组、bFGF组、bFGF+BGJ398组、bFGF+含药血浆组5组,CCK法测定各组兔RPE细胞的细胞活力,流式法检测各组兔RPE细胞的凋亡率。结果:与bFGF组比较,bFGF+BGJ398组、bFGF+含药血浆组细胞活力显著抑制(P<0.01);细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论:活血散结中药复方含药血浆能有效抑制bFGF干预下兔RPE细胞增殖,促进兔RPE细胞的凋亡。