肾脏缺血预适应防治脓毒症急性肾损伤的实验研究

目的探讨肾脏缺血预适应(IPC)对脓毒症诱发急性肾损伤(AKI)的防治作用。方法将32只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、假手术组和IPC组,每组8只。模型组小鼠给予一次性腹腔内注射脂多糖(LPS,20mg/kg);对照组小鼠予腹腔内注射等剂量0.9%氯化钠溶液;IPC组小鼠在注射LPS前24h给予双侧肾脏IPC(双侧肾蒂夹闭15min);假手术组操作过程基本同IPC组,但仅分离双侧肾蒂,不夹闭。注射后24h,采用酶法测定血肌酐(sCr)浓度,尿素酶-谷氨酸脱氢酶(GLDH)法测定尿素氮(BUN)浓度;在光学显微镜下观察肾组织形态学变化;采用ELISA法检测小鼠血清和肾组织匀浆中TNF-α和IL-6水平,采用PCR检测TNF-α和IL-6mRNA表达;采用TUNEL法检测肾脏细胞凋亡情况。结果 LPS注射后24h,模型组和假手术组小鼠sCr和BUN浓度、血液和肾组织匀浆中TNF-α和IL-6水平、肾组织中TNF-αmRNA和IL-6mRNA表达、肾脏细胞凋亡数均显著高于对照组(P值均<0.01);IPC组小鼠sCr和BUN浓度、血液和肾组织匀浆中TNF-α和IL-6水平、肾组织中TNF-αmRNA和IL-6mRNA表达、肾脏细胞凋亡数均显著低于模型组和假手术组(P值均<0.01),但仍显著高于对照组(P值均<0.01)。模型组和假手术组小鼠在LPS注射后24h,可见肾脏皮髓交界处散在的肾小管上皮细胞坏死脱落,基底膜断裂,少许管型和明显的炎性细胞浸润等;而IPC组小鼠的肾组织损伤较轻,仅表现为肾脏间质水肿,少许炎性细胞浸润。结论肾脏IPC可以减轻脓毒症诱发的AKI,减轻炎性反应,抑制细胞凋亡。

Toll样受体4单克隆抗体预处理对脂多糖诱发小鼠急性肺损伤的影响

目的探讨预先使用Toll样受体4单克隆抗体（TLR4mAb）对LPS诱发的小鼠脓毒症肺损伤的保护作用。方法45只健康清洁级雄性BALB／c小鼠以随机数字法分为对照组（C组）、脓毒症组（S组）、预处理组（P组），每组15只。P组小鼠在造模前1h预先腹腔注射TLR4mAb5μg／g。S组、P组均腹腔注射LPS10mg／kg以制备脓毒症急性肺损伤模型，C组经腹腔注射等量生理盐水。各组分别于注射后6，12，24h，采用酶联免疫吸附法测定血清TNF-α和IL-6浓度；取肺脏组织，分别检测TLR4mRNA的表达、肺组织含水量、病理学改变。组内比较采用双因素方差分析，组间比较采用单因素方差分析，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果与C组比较，S组、P组肺组织含水量在12，24h时均显著性升高；与S组比较，P组肺组织含水量在12，24h时均显著性降低。与C组比较，S组、P组血清IL-6，TNF-α质量浓度在各时点均显著性升高；与S组比较，P组IL-6，TNF-α质量浓度在各时点均显著性降低。与C组比较，S组、P组TLR4mRNA在各时点时均显著性升高；与S组比较，P组TLR4mRNA在各时点均显著性降低。与S组比较，P组病理改变程度均明显减弱。结论预先使用TLR4mAb可以减轻LPS所诱发的急性肺损伤程度，可抑制炎性因子的过度表达；调控TLR4通路可能是治疗脓毒症及其肺损伤的有效靶点。