Transcriptome characterization of Ishige okamurae(Phaeophyceae)shows strong environmental acclimation

Ishige okamurae, with leathery branched narrow fronds consisting of cylindrical hairs, is the typical species of the genus Ishige, which is considered as one of the most basal genera in the phylogeny of the Phaeophy-ceae. Apart from great public interest from the evolutionary respect, more attention has been brought on the abundant bioactive compounds in I. okamurae for therapeutic or economic considerations, such as di-phlorethohydroxycarmalol and ishigoside. Yet little is known about related key genes or metabolic pathways involved in I. okamurae, which calls upon us to carry out global analyses of transcriptome by next generation sequencing. Altogether, we obtained 78 583 assembled scaffolds with N50 of 1 709 nucleotides, and 25 357 unigenes with significant BLAST matches （E-value cutoff of 10-5）. In terms of characterization of the tran-scriptome of I. okamurae, we focused on anti-stress metabolic pathways and synthetic routes of bioactive compounds in an attempt to obtain a better understanding of the interactive organism-environment regula-tory networks. Pathway-based analysis helped us to deepen our comprehension of the interaction between I. okamurae and its surroundings, with MAPK signal pathway as an example. Furthermore, we discovered a wide range of novel putative functional proteins that could be of wide application, such as Rab family, using sequence-based transcriptome. In conclusion, transcriptome characterization of I. okamurae （Phaeophy-ceae） shows strong environmental acclimation.

铁钉菜乙醇提取物对真菌生长的影响

铁钉菜乙醇粗提物通过薄层层析法分离活性物质,分别采用纸片法和菌饼法测定了铁钉菜提取物及薄层层析带对3种真菌的菌丝生长的影响,用玻片法测定了对孢子萌发的抑制作用。实验结果表明:乙醇提取物对3种真菌孢子萌发的抑制作用最强,其中,浓度在0.005 mg/mL时对绿色木霉和黑曲霉孢子萌发的抑制率均达到99%。

铁钉菜甲醇提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用

为了研究海藻铁钉菜提取物的酪氨酸酶抑制活性,采用多巴速率氧化法测定不同浓度的铁钉菜甲醇提取物对酪氨酸酶活性的抑制率,通过酶促动力学方法与绘制Lineweaver-Burk曲线推断其抑制类型;福林酚法分析其总酚含量、苯酚硫酸法测定其多糖含量、Al Cl3显色法测定其总黄酮含量。结果表明:铁钉菜甲醇提取物能显著抑制酪氨酸酶活性,其半效应浓度IC50为1.823 g/L,抑制类型为非竞争型抑制;化学分析发现该甲醇提取物具有较高含量的总酚、多糖与总黄酮,含量分别为(51.37±2.77)、(35.92±5.27)、(43.16±0.33)mg/g。

海藻铁钉菜抗氧化活性部位研究

以DPPH自由基清除能力、TEAC值与主要化学成分含量为指标,从福建省围头海域的10种海藻中筛选出总酚含量较高、抗氧化活性较强的海藻及其抗氧化活性部位.进一步对该海藻的抗氧化活性部位进行DPPH自由基清除能力、还原力与总抗氧化能力的测定,初步分析金属离子对其抗氧化活性的影响.结果表明:10种海藻中,铁钉菜甲醇提取物具有较高含量的多酚、TEAC值与较强的DPPH自由基清除能力,乙酸乙酯部位是其主要的抗氧化活性部位.铁钉菜乙酸乙酯部位对DPPH自由基清除的半效应浓度EC_(50)为0.17 mg/m L,小于BHT EC_(50)0.23 mg/m L;还原力的EC_(50)为0.30 mg/m L,远远小于维生素C EC_(50)0.91mg/m L;总抗氧化能力约为13.16 U/mg.金属离子对铁钉菜乙酸乙酯部位的DPPH自由基清除的影响表现为K^+、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)、Fe^(3+)等的增效作用与Na^+、Mn^(2+)、Mg^(2+)等的降效作用.

铁钉菜和珊瑚藻提取物抗菌活性的初步研究

采用圆纸片法对铁钉菜、珊瑚藻粗提取物及萃取得到的不同极性组分进行抗菌实验.结果表明:铁钉菜和珊瑚藻均有不同程度的抗菌作用,其中铁钉菜和珊瑚藻提取物的抗细菌活性较强,而对真菌几乎没有抑菌作用.

超声波协同热水提取铁钉菜多糖的研究

应用超声波技术,研究了液固比、超声波强度、提取时间、提取温度和pH对铁钉菜多糖提取率的影响。结果表明,超声波提取铁钉菜多糖最佳工艺条件为:料剂比为3:100(g:m l),不调pH值,在65℃,超声强度为70%(210w),超声30 m in。

铁钉菜乙酸乙酯提取物抗真菌活性的研究

分别采用纸片法、菌饼法及玻片法测定了铁钉菜乙酸乙酯提取物对3种真菌的抑制作用.实验结果表明:乙酸乙酯提取物对3种真菌具有普遍的抑制作用,对绿色木霉的抑菌圈达到2.60 cm;经薄层层析分离后,得到7条层析带,用纸片法测定大部分分离带只对1种真菌显示抑制活性,其中Rf 0.40带和Rf 0.50带活性较强,它们对菌丝生长和孢子萌发也有抑制作用,抑制效果与浓度、培养时间有关.此外,对Rf 0.40带的GC-MS分析表明,其组分中的化合物以酯、烷为主.

铁钉菜水提醇沉上清液部分的抗氧化、抗酪氨酸酶活性及其冲剂的降糖作用

为探讨海藻铁钉菜提取物的抗氧化、抗酪氨酸酶活性与降糖作用,作者采用DPPH、羟基自由基清除体系测定铁钉菜水提醇沉上清液部分(SWEAPI)的抗氧化活性,采用多巴色素法测定其抗酪氨酸酶活性,并以可溶性淀粉、甜蜜素、β-环状糊精为辅料,采用正交实验设计的优化条件制备铁钉菜固体冲剂;通过体外α-葡萄糖苷酶活性抑制实验与体内四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型,研究该冲剂的降血糖作用。结果表明:SWEAPI具有较强的自由基清除能力与抗酪氨酸酶活性,其DPPH自由基清除的半效应质量浓度EC50为1.19 mg/mL,羟基自由基清除的EC50为5.08 mg/mL,酪氨酸酶活性抑制的半效应质量浓度IC50为1.27 mg/mL;这可能与其较高的多酚含量(8.30%)有关。采用SWEAPI:可溶性淀粉:甜蜜素:β-环状糊精为30∶60∶1∶7.5的配比进行铁钉菜冲剂制备可获得较好的产品质量,冲剂的水分质量分数≤10%、总糖质量分数约为18.74%、蛋白质质量分数16.60%、多酚质量分数2.53%。该冲剂具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,半效应质量浓度IC50为0.37 mg/mL。口服冲剂14 d后,与模型组比较,350 mg/kg的使用剂量时可极显着降低糖尿病小鼠血糖,糖耐量实验进一步证实其可以在短时间内降低餐后血糖,总体上,其降糖效果与阳性药物二甲双胍处理组(500 mg/kg)相近。可见,SWEAPI具有较强的抗氧化活性、抗酪氨酸酶活性与降糖作用,具有开发成海藻源护肤品、降糖功能产品的潜在应用价值。