狭基线纹香茶菜(溪黄草)的化学成分与抗乙肝病毒作用研究

目的从狭基线纹香茶菜(溪黄草)Isodon lophanthoides var.gerardianus抗乙型肝炎病毒有效部位及其他相关部位中鉴定有效成分和其他化学成分。方法溶剂萃取部位经硅胶柱色谱分离单一成分;利用光谱技术鉴定结构。用2.2.15细胞与鸭乙肝模型测试提取物和化合物的抗乙肝病毒活性。结果鉴定了7个成分,化学结构分别确定为线型呋喃香豆素、β-谷甾醇、胡萝卜苷、熊果酸、2α-羟基熊果酸、2α,19-二羟基熊果酸和迷迭香酸。结论所有成分均为首次从该种植物中分离得到。线型呋喃香豆素系首次从香茶菜属植物中发现。首次发现醋酸乙酯部位有显著抗病毒作用,其中的2α-羟基熊果酸和2α,19-二羟基熊果酸具有体外抗乙肝病毒的作用。

狭基线纹香茶菜对刀豆蛋白所致小鼠免疫肝损伤的保护作用

目的研究狭基线纹香茶菜对免疫性肝损伤的保护作用。方法采用小鼠尾静脉注射刀豆蛋白(ConA)致肝损伤模型,小鼠108只随机分为9组,即正常对照组,模型组,狭基线纹香茶菜提取物组(提取物分为水提物、醇提物,各提取物再分为高、中、低剂量组),阳性对照组,每组12只。受试组按18.20,9.10,4.55g·kg-1灌胃给药,阳性对照组口服联苯双酯45mg·kg-1,每天1次,连续5d。末次给药后4h除正常对照组外,各组动物一次性尾静脉注射ConA20mg/kg,禁食不禁水8h后摘[球取血处死,分离血清,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,求脏器系数。同部位肝脏(肝左叶)用4%福尔马林溶液固定,并取肝组织作病理观察。结果狭基线纹香茶菜可显著降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST,对肝重量增大和胸腺萎缩有抑制作用。病理检查结果也显示有明显的保肝作用。结论狭基线纹香茶菜对刀豆蛋白所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用。

HPLC法测定纤花线纹香茶菜中异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸

目的建立反相高效液相色谱法测定纤花线纹香茶菜中异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸的量。方法采用HPLC法分析,实验条件为Dikma-C18柱,甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长270 nm,柱温为室温。结果异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸的平均加样回收率分别为99.4%、99.9%、95.8%,RSD分别为3.46%、3.40%、2.55%。结论该法稳定、可靠、简便。

外植体类型和培养基中激素浓度对香茶菜愈伤组织诱导的影响

香茶菜〔Isodon amethystoides （Benth.）H.Hara〕为唇形科（Lamiaceae）香茶菜属〔Isodon （Schrader ex Benth.）Spach〕植湖北和广西等省（自治区）,为安徽宿州著名的传统药食两用植物，以茎叶入药。

狭基线纹香茶菜对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的研究狭基线纹香茶菜对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法 72只小鼠随机分为正常组,模型组,高、中、低剂量给药组(20,10,5g·kg-1),阳性对照组(联苯双酯60mg·kg-)1,每天给药1次,连续12d。第1天,除正常组外,各组每只小鼠尾静脉注射BCG0.2mL(10mg·mL-)1。末次给药后,除正常组外,各组小鼠尾静脉注射LPS0.2mL(37.5μg·mL-1)造模。造模16h后取血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),肝组织超氧化物岐化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量,同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,求脏器指数,并观察肝组织病理学变化。结果狭基线纹香茶菜高、中、低剂量组均能显著降低ALT、AST值和MDA含量(P<0.05或P<0.01),对肝重量和脾重量增加及胸腺萎缩有抑制作用(P<0.05或P<0.01)。病理检查结果也显示有明显的保肝作用。结论狭基线纹香茶菜对BCG和LPS所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用,其保肝机制与其抗脂质过氧化损伤有关。

王枣子三萜成分的研究

目的研究王枣子中三萜类成分的化学结构。方法利用层析方法进行成分分离,根据物理化学性质和波谱分析结果对化合物进行结构鉴定。结果 3个五环三萜经鉴定分别为2α,3α-二羟基乌苏酸(Ⅰ)、2α-羟基齐墩果酸(Ⅱ)和齐墩果酸(Ⅲ)。结论成分Ⅰ和Ⅱ在该植物中系首次分得。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用

目的:探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO_2细胞的保护作用。方法:通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢(H2O_2)致LO_2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法测定细胞活力,检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙二醛(MDA)的水平,评价WSTF对肝细胞损伤的保护作用。检测细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧簇(ROS)水平,分析WSTF抑制H2O_2诱导LO_2细胞凋亡情况。结果:0.3 mmol·L^(-1)H2O_2处理LO_2细胞4 h构建H2O_2损伤LO_2细胞模型,确定0.031 2~0.125 mg·ml^(-1)WSTF为保护LO_2细胞损伤的给药浓度范围。WSTF可抑制H2O_2对肝细胞的损伤,并明显降低H2O_2致急性损伤肝细胞的ALT、AST释放量和MDA水平,逆转H2O_2诱导LO_2肝细胞线粒体膜电位去极化和细胞内ROS升高。结论:WSTF体外给药对肝细胞损伤有保护作用。

安徽几种香茶菜属植物显微鉴别研究

目的研究安徽几种香茶菜属植物叶表面的毛茸和气孔的显微特征差异。方法应用表面制片法对4种香茶菜属植物香茶菜、歧伞香茶菜、大萼香茶菜、显脉香茶菜的叶表面特征进行显微观察。结果 4种香茶菜属植物叶表面特征有显著差异:香茶菜具有长短两种腺毛,歧伞香茶菜和大萼香茶菜仅具短腺毛,显脉香茶菜仅具长腺毛且腺头较大;歧伞香茶菜的非腺毛最长,细胞数最多;大萼香茶菜气孔密度高且较大。结论可从叶表面毛茸和气孔的特征鉴别4种香茶菜。

王枣子提取物抗氧化活性的研究

通过测定王枣子提取物的还原能力和对化学模拟体系中羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O-2·)及二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除能力,研究了王枣子水提取物及醇提取物的体外抗氧化活性。结果表明,王枣子水提取物及醇提取物在一定的质量浓度范围内均具有抗氧化活性及清除自由基的作用,抗氧化活性与质量浓度呈显著的量效关系(P<0.01),醇提取物的还原能力显著大于水提取物的还原能力(P<0.01);在王枣子提取物质量浓度为1.0 g·L-1时,王枣子水提取物对·OH、O-2·和DPPH·的清除率分别为65.25%、82.30%和65.18%,而体积分数为65%的乙醇提取物对相应自由基的清除率分别为72.51%、98.54%和91.64%,王枣子醇提取物对自由基的清除效果更好。

4种香茶菜属植物微性状特征研究

目的研究香茶菜及同属植物微性状鉴别特征。方法采用500万像素电子摄像目镜,应用景深合成技术合成微性状鉴别图片,观察4种香茶菜属植物的新鲜及干燥叶片的微性状特征。结果在叶尖突起程度、毛茸的长短与分布方面,4种香茶菜属植物叶片的微性状有明显不同:岐伞香茶菜和显脉香茶菜密被较长毛茸,叶尖极度突起或明显突起;香茶菜和大萼香茶菜稀被较短毛茸,毛茸多分布在叶脉、叶缘,叶尖微凹或突起。结论微性状鉴别方法简便,可以区别香茶菜属不同植物。

溪黄草药材种质资源的表型多样性分析

目的:分析和评价溪黄草药材种质资源的表型多样性,为其种质资源的创新利用和线纹香茶菜2个变种的分类学研究提供依据。方法:观测来自23个居群的溪黄草、纤花香茶菜和狭基线纹香茶菜的9个表型性状,并进行方差分析、主成分分析和聚类分析。结果:9个表型性状在居群间存在显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01),在居群内差异不明显,其中溪黄草表型性状变异系数为7.93%~31.24%,纤花香茶菜、狭基线纹香茶菜为7.78%~29.71%;主成分分析显示,前三个主成分累积贡献率为溪黄草85.69%,纤花香茶菜和狭基线纹香茶菜81.78%,叶长宽比和千粒重均未被提取;系统聚类将溪黄草居群聚为3类,狭基线纹香茶菜未单独聚为一类,与纤花香茶菜一起聚为5类。结论:溪黄草药材种质资源具有较丰富的表型多样性,P2、P3、P7、P8、P10、P11、P18、P19居群长势较优,可考虑从中筛选优良种质;基于表型性状多样性分析纤花香茶菜与狭基线纹香茶菜差异不明显,建议将二者合并为纤花香茶菜。

王枣子叶总黄酮纤维素酶-超声辅助提取工艺的优化及其抗氧化活性

目的优化王枣子叶总黄酮纤维素酶-超声辅助提取工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、料液比、超声功率、超声时间为影响因素,总黄酮得率为评价指标,响应面法优化提取工艺。考察总黄酮对DPPH·、·OH的清除作用。结果最佳条件为乙醇体积分数64%,料液比1∶39,超声功率130 W,超声时间16 min,总黄酮得率为13.92%。总黄酮对DPPH·的清除作用与其质量浓度呈正相关,在0.25 mg/mL时清除率达93.55%,而在0.09 mg/mL时对·OH的清除率达88%。结论该方法稳定可靠,可用于纤维素酶-超声辅助提取具有较强抗氧化活性的王枣子叶总黄酮。

香茶菜总三萜及齐墩果酸、熊果酸的含量测定

目的建立香茶菜总三萜及齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法,为其质量评价提供依据。方法采用紫外-可见分光光度法,以熊果酸为对照品,5%香草醛冰醋酸-高氯酸为显色剂,于547 nm测定香茶菜中总三萜的含量;采用高效液相色谱法,色谱柱为Welch XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（85：15）,流速为0.6 ml·min-1,柱温为30℃,检测波长为210 nm,测定香茶菜中齐墩果酸和熊果酸的含量。结果不同产地、批次和药用部位的香茶菜总三萜含量为0.13%-1.14%;齐墩果酸和熊果酸在不同的药用部位含量差异显著：根中未检测到,全草中含量分别为0.0128%、0.0388%,地上部位中含量为0.0230%-0.0514%、0.0756%-0.1891%。结论该方法简便、准确,重复性好,可用于香茶菜的质量控制;明确和规范药用部位是其质量控制的前提。

荔波产香茶菜化学成分研究

目的研究荔波产香茶菜Isodon amethystoides的化学成分。方法选用硅胶、MCI gel CHP 20P、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法进行分离和纯化,通过波谱数据、理化性质结合参考文献鉴定化合物结构。结果从荔波产香茶菜甲醇提取物中分离得到了18个化合物,分别鉴定为线纹香茶菜酸(1)、雪花草丁素(2)、4,9α-环氧-3,4-开环异海松烷-7,15-二烯-3-酸(3)、3,4-开环异海松烷-4(18),7,15-三烯-3-酸甲酯(4)、3,4-开环异海松烷-4(18),7,15-三烯-3-酸(5)、异海松烷-7,15-二烯-3-酮(6)、异海松烷-7,15-二烯-3β-醇(7)、山姜萜醇(8)、(-)-丁香三环烷-2,9-二醇(9)、乌苏酸(10)、齐墩果酸(11)、3-表-马斯里酸(12)、7α-羟基谷甾醇(13)、β-谷甾醇(14)、豆甾醇(15)、芝麻素(16)、泡桐素乙酯(17)、邻苯二甲酸二丁酯(18)。结论化合物4为首次分离得到的天然产物,2~9、15~18为首次从香茶菜中分离到。

毛萼香茶菜中1个新的对映-贝壳杉烷二萜类化合物

目的对毛萼香茶菜Isodoneriocalyx茎叶的化学成分进行研究。方法采用多种色谱方法进行分离纯化,通过理化性质及光谱数据对化合物进行结构鉴定。结果从毛萼香茶菜茎叶中分离得到1个二萜类化合物,鉴定为15β-乙酰氧基-1α-羟基-7α,20-环氧-对映-贝壳杉-16-烯-6-酮。结论该化合物为新的对映-贝壳杉烷二萜类化合物,命名为毛萼辛素。