九节茶药材质量标准研究

目的 对九节茶药材开展全面的质量标准研究,建立完善的九节茶质量标准。方法 收集13批九节茶药材,以异嗪皮啶对照品和九节茶对照药材建立薄层色谱鉴别方法;参考《中国药典》(2020年版)四部通则,对九节茶水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物进行检查;采用高效液相色谱法测定九节茶中异嗪皮啶和迷迭香酸的含量。结果 九节茶薄层鉴别特征斑点清晰,分离度良好;13批九节茶药材水分平均为9.4%,总灰分平均为5.2%,酸不溶性灰分平均为0.5%,浸出物平均为12.6%;异嗪皮啶平均含量为0.026%,迷迭香酸平均含量为0.030%。结论 本研究建立的薄层鉴别、检查及含量测定方法专属性强、准确度高、操作简便,可用于九节茶药材质量标准研究。

HPLC-VWD-ELSD法同时测定消炎宁胶囊中7个成分的含量

目的 采用高效液相色谱-紫外检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-VWD-ELSD)法同时测定消炎宁胶囊中苦玄参苷IA、异嗪皮啶、迷迭香酸、金丝桃苷、甘草苷、冬青素A和毛冬青皂苷A1的含量。方法 采用Waters Symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈(A)-0.15%醋酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1)。苦玄参苷IA、异嗪皮啶、迷迭香酸、金丝桃苷、甘草苷采用VWD进行检测,切换波长分别为270 nm及342 nm;冬青素A和毛冬青皂苷A1采用ELSD进行检测,漂移管温度为85℃,载气流速3.5 L·min^(-1)。结果 苦玄参苷IA、异嗪皮啶、迷迭香酸、金丝桃苷、甘草苷、冬青素A和毛冬青皂苷A1进样量分别在1.764~35.28μg、0.6903~13.81μg、0.9524~19.05μg、0.4067~8.134μg、0.2136~4.272μg、0.9182~18.36μg和0.7665~15.33μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9991),平均回收率及RSD分别为100.01%(0.81%)、99.14%(0.84%)、99.40%(0.92%)、99.34%(1.02%)、99.20%(1.04%)、98.83%(1.09%)、98.99%(1.08%)。4批消炎宁胶囊中上述7个成分的含量测定结果分别为6.812~6.901 mg·g^(-1)、1.726~1.789 mg·g^(-1)、2.391~2.422 mg·g^(-1)、1.134~1.155 mg·g^(-1)、0.6087~0.6105 mg·g^(-1)、2.306~2.324 mg·g^(-1)和1.995~2.016 mg·g^(-1)。结论 所建立的方法简捷,重复性好,可用于消炎宁胶囊中7个成分的含量测定,为消炎宁胶囊全面的质量控制提供科学依据。

熵权法结合Box-Behnken响应面法优化肿节风药材的提取工艺

目的优化肿节风药材的提取工艺。方法以高效液相色谱(HPLC)法测定的肿节风中迷迭香酸与异嗪皮啶含量为考察指标,对超声时间、超声温度、液料比(mL/g)、甲醇体积分数进行单因素实验。基于单因素实验结果,采用Box-Behnken响应面法设计实验,运用熵权法赋予各指标权重并计算综合评分,再以综合评分为评价指标,优化肿节风药材的提取工艺,并对优化后的提取工艺进行验证。结果肿节风药材最佳提取工艺为超声时间40 min,超声温度45℃,液料比50∶1,甲醇体积分数70%。3次验证实验结果显示,平均综合评分为0.9886,RSD为0.50%,各综合评分实际值与预测值(0.9851)之间的偏差均在±1%以内。结论本研究优化后的工艺稳定可行、重复性好,可为肿节风药材的提取提供参考。

刺五加茎叶化学成分

目的：研究五加科植物刺五加Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ（Ｒｕｐｒ．ｅｔＭａｘｉｍ．）Ｈａｒｍｓ茎叶中的化学成分。方法：利用各种色谱技术进行分离纯化，根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果：得到３个化合物，分别鉴定为刺五加酮（ｃｉｗｕｊｉａｔｏｎｅ，ＩＩ），异秦皮定（ｉｓｏｆｒａｘｉｄｉｎ，Ｉ），五加甙Ｂ１（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｓｉｄｅＢ１，Ｉ）。结论：ＩＩ为新化合物。

肿节风药材中反丁烯二酸和异秦皮啶的含量测定

目的 建立肿节风药材中反丁烯二酸和异秦皮啶的含量测定方法。方法 采用RP -HPLC外标法 ,AgilentZorbaxE clipseXDB -C18色谱柱 (4.6mm× 15. 0mm ,5 μm) ,以 2 %乙腈和 0 .1%磷酸溶液为流动相A ,以乙腈为流动相B ,梯度洗脱 ,检测波长 2 .10nm。结果 反丁烯二酸在 11.6 6～ 1 .17× 10. 3 μg范围内线性关系良好 ,平均回收率为 10 1.5 % ,RSD =2 .5 % ;异秦皮啶在 4 0 .10～ 96 2 .4 0 μg范围内线性关系良好 ,异秦皮啶平均回收率为 98.9% ,RSD =3.3%。 结论 所用方法简便、准确 ,重复性好 ,在同一色谱条件下可同时测定反丁烯二酸和异秦皮啶的含量。

不同种源肿节风反丁烯二酸和异秦皮啶含量研究

目的:揭示肿节风反丁烯二酸和异秦皮啶质量分数的变异规律,为肿节风资源利用与药材质量优化提供依据。方法:分别建立异秦皮啶与反丁烯二酸的HPLC测定方法,并测定全国21个不同种源肿节风药材中异秦皮啶与反丁烯二酸的质量分数。结果:不同种源肿节风反丁烯二酸和异秦皮啶质量分数存在显著差异,海拔从低到高,两者质量分数都逐渐减少;与经度、纬度关系密切,其中异秦皮啶质量分数在肿节风自然分布中心区最高;肿节风反丁烯二酸和异秦皮啶质量分数地理变异规律不同药材部位表现不一,茎比叶密切。结论:本研究建立的肿节风反丁烯二酸和异秦皮啶质量分数测定方法简便、准确、重现性好,可用于肿节风药材中此2种成分的质量控制。研究结果基本代表了我国肿节风药材质量及其差异的现状,与传统观点认为"江西、福建、浙江所产肿节风药材质量较佳"一致,建议上述区域列为今后肿节风药材良种选育与基地建设的重点。

刺五加注射液在正常大鼠与脑缺血-再灌注损伤疾病大鼠体内药动学比较

目的比较刺五加注射液(紫丁香苷、刺五加苷E、异嗪皮啶等)在正常大鼠与脑缺血-再灌注损伤大鼠体内药代动力学行为。方法采用longa法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤疾病模型,采用液相色谱-串联四级杆质谱法测定不同时间点大鼠血浆中紫丁香苷、刺五加苷E及异嗪皮啶的含有量,用药代动力学软件DAS 2.0非房室模型计算药动学参数并用统计软件SPSS 17.0对主要药动学参数进行比较。结果与正常大鼠体内药动学相比较,脑缺血-再灌注损伤对刺五加注射液中紫丁香苷产生蓄积,对异嗪皮啶的消除发生改变,对刺五加苷E无影响。结论初步推测脑缺血-再灌注损伤大鼠体内,紫丁香苷及异嗪皮啶与血浆蛋白结合能力发生改变,有待进一步研究。

草珊瑚浸膏的絮凝和膜分离纯化研究

目的探讨草珊瑚浸膏的不同预处理方法及对膜分离效果的影响。方法采用各种预处理方法初步比较、通过ZTC1+1Ⅲ型、壳聚糖、明矾絮凝的正交试验设计进一步试验,以与异秦皮啶相关的各种指标考察各种预处理方法的效果及对膜分离效果的影响。结果与ZTC1+1Ⅲ型、壳聚糖、明矾的最佳絮凝工艺相比,微滤预处理后超滤膜分离草珊瑚浸膏的膜通量及异秦皮啶膜透过率最大、运行时间最短、干膏中异秦皮啶的质量分数最高。结论微滤是草珊瑚浸膏膜分离纯化新工艺中较为理想的预处理方法。

高效液相色谱法测定刺五加超临界提取物中异嗪皮啶的含量

用高效液相色谱法在线检测刺五加超临界提取物中异嗪皮啶的含量 ,采用ODS色谱柱 ,检测波长为 345nm ,流动相为乙腈 /超纯水 (v/v) =2 /8,异嗪皮啶加样回收率1 0 0 .8% ,RSD为 2 .0 % ,该方法简便 ,结果准确可靠。

中药草珊瑚中异嗪皮啶和总黄酮含量的分析研究

目的建立草珊瑚中主要有效成分异嗪皮啶和总黄酮的含量测定方法。方法异嗪皮啶的测定采用高效液相 色谱法,μ-Bondapak C18柱,流动相为乙腈-0．1％磷酸(17:83),检测波长为344 nm;总黄酮采用比色法测定。 结果不同产地和采收季节草珊瑚药材中总黄酮和异嗪皮啶含量差异较大,总黄酮和异嗪皮啶含量在10～12月份 期间较高。结论提供了对草珊瑚质量控制的方法,草珊瑚的采收季节应为每年10-12月。

HPLC法同时测定无梗五加果中东莨菪内酯和异嗪皮啶的含量

目的建立同时测定无梗五加（Acanthopanax sessiliflorusr（Rupr．et Maxim．）Seem．）果中东莨菪内酯和异嗪皮啶含量的HPLC法。方法采用Zirchrom Kromasil ODS C18（4．6mm×200mm，5／lm）色谱柱，流动相为乙腈-甲醇-水-冰醋酸（体积比为13：1：86：1），流速为1．0mL·min^-1。柱温为室温，检测波长为344nm。结果东莨菪内酯和异嗪皮啶分别在0．975～7．80mg·L^-1和0．360～2．88mg·L^-1内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程分别为A=2．150×10^4P^- 2．964×100（r=0．9991）和A=1．776×10^p-1．947×10^3（r=0．9997），平均回收率分别为101．2％和98．8％，测得样品中东莨菪内酯和异嗪皮啶的含量分别为30．5μg·g^1（RSD=1．7％）和7．90μg·g^-1（RSD=2．4％）。结论方法准确、可靠，可为无梗五加果的质量控制提供参考依据。

超声波提取刺五加主要酚苷及苷元的工艺优化

采用超声波提取的方法从刺五加根茎中提取紫丁香苷、刺五加苷E和异秦皮啶等有效成分,考察超声波提取时间、乙醇体积分数、料液比和超声波功率等因素对提取的影响。应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,分别以3种目标产物的得率与纯度作为响应值进行工艺优化。响应面法优化后提取工艺条件为:乙醇体积分数59.66%、刺五加与乙醇的料液比1∶6(g∶mL)、提取时间44.9min、超声波功率150W。最佳条件下浸膏中刺五加主要酚苷及苷元的质量分数为2.923%,其中含紫丁香苷1.3%,刺五加苷E1.53%,异秦皮啶0.093%;浸膏得率为6.77%。

HPLC同时测定肿节风中3种成分的含量

目的:建立 HPLC 法同时测定肿节风中异嗪皮啶-7-O-β-D-葡萄糖苷、异嗪皮啶和山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖酸苷的含量。方法:色谱柱:Waters XBridge C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%醋酸甲醇溶液(A)-0.1%醋酸水溶液(B),梯度洗脱(0～17 min,A:25%,B:75%;17～65 min,A:25%→55%,B:75%→45%);流速为0.5 mL·min^(-1);检测波长为344 nm;柱温26℃。结果:异嗪皮啶-7-O-β-D-葡萄糖苷、异嗪皮啶和山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖酸苷的线性范围分别为0.2～4.0μg(r=0.9999),0.2～4.0μg(r=0.9999),0.5～10μg(r=0.9999);平均回收率(n=5)分别为100.6%(RSD=1.7%),99.8%(RSD=1.1%),99.6%(RSD=0.4%)。结论:所建立的 HPLC 方法操作简便,准确可靠,分离度好,为全面评价肿节风药材的质量提供了实验依据。

高效液相色谱法测定肿节风含片中异嗪皮啶含量

目的建立肿节风含片中异嗪皮啶的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为KromasilODSC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸(28∶72),流速为1mL/min,检测波长为344nm。结果异嗪皮啶进样量在0.1098～0.8781μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9994,平均回收率为100.23%。结论所建立的方法简便、准确、专属性强、重现性好,可作为肿节风含片的质量控制方法。

刺五加及短梗五加茎皮有效成分含量对比研究

目的：建立刺五加及短梗五加茎皮刺五加苷B、刺五加苷E及异嗪皮啶的高效液相测定方法,测定刺五加及短梗五加中上述成分的含量,对比研究刺五加及短梗五加茎中的成分含量差异。方法：采用高效液相色谱法,Agilent TC-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇（A）-水（B）为流动相,梯度洗脱（：0~15 min：20A;15~20 min：21A;20~35 min：30A）,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长210 nm。结果：样品进样量在各自浓度范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.1%、97.3%和99.9%,RSD为0.7%、1.3%和0.6%。结论：本法操作简便,分离效果好,可用于刺五加及短梗五加茎皮刺五加苷B、刺五加苷E及异嗪皮啶的含量测定。

高效液相色谱法测定小儿开胃口服液中异嗪皮啶含量

目的 :建立用反相HPLC法测定小儿开胃口服液 (刺五加 ,鸡内金 ,草豆蔻 ,牵牛子 )中异嗪皮啶含量的方法。方法 :使用Symmetry C18色谱柱 (5 μm ,3.9× 15 0mm) ,以甲醇 - 0 .1%甲酸水溶液 (30∶70 )为流动相 ,流速 0 .8mL·min-1,检测波长为 342nm。柱温为 (30± 1)℃。结果 :在一定范围内异嗪皮啶含量呈现良好的线性关系 (r =0 .9993) ;精密度可靠 (RSD =1.87% ) ;样品在 6h内基本稳定。结论

HPLC-PDA测定银屑灵流膏中5种成分含量

目的:建立银屑灵流膏(当归、赤芍、川芎等)中绿原酸、芍药苷、异秦皮啶、阿魏酸和落新妇苷5种成分含量的测定方法,控制产品质量。方法:采用HPLC-PDA法,色谱柱为Kromasil100-5C18,流动相为甲醇-0.1%冰醋酸,梯度洗脱,梯度为0～10min(10∶90～30∶70),10～40min(30∶70～40∶60);流速为1.0mL/min;检测波长绿原酸、异秦皮啶、阿魏酸为320nm,落新妇苷为289nm,芍药苷为230nm。结果:上述条件下5种成分分离良好,绿原酸在2.66～31.86μg/mL(r=0.9999),芍药苷在34.95～419.37μg/mL(r=0.9999);异秦皮啶在0.96～11.55μg/mL(r=0.9999);阿魏酸在0.82～9.84μg/mL(r=0.9999);落新妇苷在6.58～78.92μg/mL(r=0.9999)范围内线性关系良好,5种成分的加样回收率在96.6%～103.7%之间;RSD小于3.83%。结论:该方法方便、准确、灵敏度高,可作为银屑灵流膏中绿原酸、芍药苷、异秦皮啶、阿魏酸和落新妇苷5种成分的质量控制方法。

异嗪皮啶对人乳腺癌干细胞凋亡相关基因Bcl-2与Caspase家族表达的影响

目的:研究草珊瑚中异嗪皮啶成分对乳腺癌干细胞中凋亡相关基因通路Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8基因表达影响,进而明确其抑制增殖、迁移和促凋亡的机制。方法:无血清培养法诱导MDA-MB-231细胞株富集乳腺癌干细胞,流式细胞仪分选CD44^+/CD24^(-/low)干细胞群。各组分别给予0、17、50、150、450μmol/L异嗪皮啶,CCK-8法观察给药后24、48、72 h的细胞活力;细胞划痕实验法检测给药后细胞痕道宽度变化值并判断其对细胞迁移能力的影响;Annexin V-FITC/PI染色法检测给药后细胞总凋亡率变化;实时荧光定量PCR测定各组Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8基因的mRNA水平;Western blot检测上述基因的蛋白水平。结果:与对照组比较,50、150和450μmol/L异嗪皮啶组24、48、72 h的细胞活力降低,细胞迁移能力下降。与对照组比较,50、150和450μmol/L异嗪皮啶组细胞总凋亡率高于对照组,Bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平降低,Caspase-3和Caspase-8基因mRNA和蛋白表达水平升高。以上结果均呈明显剂量效应关系。结论:异嗪皮啶能通过下调Bcl-2基因表达与激活Caspase基因家族诱导乳腺癌干细胞的凋亡,同时能抑制其增殖与迁移。

罗布麻叶镇静化学成分的研究

从罗布麻叶镇静有效部分中分得三十烷醇,β-谷甾醇、檞皮素、金丝桃甙、长链脂肪酸,羽扇豆醇、茛菪亭、异秦皮定等8个化合物,异秦皮定及金丝桃甙为镇静有效成分。

清炎滴丸的质量控制

目的:建立清炎滴丸的质量控制标准。方法:采用薄层色谱法鉴别本品中的肿节风、苦玄参等成分;以高效液相色谱法测定本品中有效成分异嗪皮啶的含量;并建立其他相关质控指标。结果:薄层色谱斑点清晰,重复性好,专属性强。含量测定方法准确可靠,线性范围为0.042~0.839μg,线性关系良好(R^2=0.999 4),平均回收率为98.28%(RSD=1.02%),精密度良好。结论:建立的质量控制方法可靠、准确、全面,可用于本品的质量控制。