以J-Lat 11.1为HIV-1潜伏感染模型再激活效果检测方法的初步探讨

目的：比较3种检测方法的优缺点,探索全面评价人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）潜伏感染再激活剂的检测方法。方法：以HIV-1潜伏细胞株J-Lat 11.1为潜伏感染模型、豆蔻酰佛波醇乙酯（PMA）为潜伏再激活剂,用流式细胞术检测绿色荧光蛋白（GFP）阳性细胞所占比例,酶标仪检测GFP表达强度,活细胞成像系统检测GFP的动态表达情况。结果：流式细胞术检测显示PMA再激活出GFP阳性细胞的比例随作用浓度的增加（0~10 nmol/L）而增加,但当PMA浓度高于10 nmol/L后变化不再明显;酶标仪检测显示PMA处理后24 h内,GFP荧光强度逐渐增高,之后可在高水平保持至48 h;活细胞成像系统则可以动态反映PMA处理后的再激活过程。结论：可采用流式细胞术检测GFP阳性细胞比例对HIV-1潜伏感染再激活剂进行初步筛选,再结合酶标仪或活细胞成像系统动态监测GFP的表达情况,综合评价再激活剂的作用强度和起效时间。