瑞香素抑制c-Jun氨基末端激酶/核因子κB(JNK/NF-κB)通路减轻大鼠心肌缺血损伤

目的研究瑞香素(DAP)对于心肌缺血损伤大鼠的保护作用及其作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、(30、60、90)mg/kg DAP处理组。模型的建立则是采用皮下注射85 mg/kg异丙基肾上腺素(ISO)连续2 d建立大鼠心肌缺血模型,持续灌胃给予相应剂量DAP处理7 d,观察DAP对心肌损伤的保护作用。采用大鼠心电图测量装置测定各组实验大鼠的心电图变化,采用分光光度法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)酶活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA检测血清肌肉B型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)水平以及心肌组织匀浆白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化;采用HE染色以及Masson染色观察心肌细胞的损伤及纤维化情况,实时定量PCR检测心肌组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核因子κB(NF-κB)的mRNA水平,Western blot法检测JNK、NF-κB的磷酸化情况。结果DAP能增加心肌组织SOD、CAT、GSH-Px酶活性,降低MDA,并能降低血清组织中CK-MB、LDH、CPK、TNF-α和IL-1β水平,减少心肌细胞纤维化,抑制JNK和NF-κBp65的表达和磷酸化。结论DAP通过抑制JNK/NF-κB信号通路活化,抑制心肌缺血诱发的心肌细胞凋亡和纤维化。

酒石酸布托啡诺基于JNK/NF-κB信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的改善作用

目的探讨酒石酸布托啡诺对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的改善作用,并分析相关作用机制。方法80只大鼠随机分为假手术组、模型组、酒石酸布托啡诺组、尼莫地平组,每组20只。采用Zea Longa法评估大鼠神经功能,检测大鼠脑含水量,TTC染色法检测大鼠脑梗死体积比,HE染色观察大鼠脑组织病理性改变,TUNEL法检测大鼠脑组织细胞凋亡,Western blot法检测炎性因子和通路相关蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠存在明显脑组织病理损伤,大鼠神经功能评分、脑含水量、脑梗死体积比均增高,脑组织细胞凋亡水平和炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达升高,磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、核因子-κB(NF-κB)、核因子κB磷酸化65(p65)蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,酒石酸布托啡诺和尼莫地平能够有效改善CIRI大鼠脑组织病理损伤,降低神经功能评分,减少大鼠脑含水量和脑梗死体积比,并降低脑组织细胞凋亡水平和炎性因子表达,下调p-JNK、NF-κB、p65蛋白表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论酒石酸布托啡诺能够通过调控JNK/NF-κB信号通路发挥抗炎和抗凋亡作用,改善大鼠脑缺血再灌注损伤。

基于ROS-ASK1-JNK/NF-κB通路探讨三才连梅颗粒调控2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝肝细胞凋亡水平的研究

目的探讨三才连梅颗粒对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝细胞凋亡的作用及机制。方法以高脂高糖+链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病合并脂肪肝SD大鼠为模型,三才连梅颗粒进行干预,实验结束对各组大鼠进行腹腔葡萄糖耐量实验;ELISA法检测各组大鼠血清中生化及肝脏匀浆中炎症水平;测定肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平反应氧化应激情况;Real-time PCR检测肝脏组织凋亡信号调节激酶1(ASK1)、氨基末端激酶(c-Jun,JNK)、核因子-κB(NF-κB)mRNA的表达;Western blot检测肝脏凋亡蛋白的表达及TUNEL法检测肝细胞凋亡情况;苏木素伊红(HE)染色观察肝脏病理组织结构。结果三才连梅颗粒能减轻T2DM合并NAFLD模型大鼠的体质量,降低血清血糖、胰岛素水平;降低肝脏匀浆白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,改善胰岛素抵抗、血脂代谢紊乱及氧化应激,减轻肝细胞脂肪变性。三才连梅颗粒可下调T2DM合并NAFLD模型大鼠肝脏组织ASK1、JNK、NF-κB mRNA表达,调节凋亡相关蛋白Bax、caspase-3、Bcl-2的表达以减轻肝细胞凋亡情况。结论本研究证明三才连梅颗粒可以通过抑制ROS-ASK1-JNK/NF-κB信号通路,调节细胞凋亡而改善肝脏胰岛素抵抗及氧化应激,延缓或逆转NAFLD病程进展。

隐丹参酮通过TLR4/NF-κB/JNK信号通路减轻脂多糖对肺泡上皮细胞炎性损伤的作用研究

目的 本研究旨在探讨隐丹参酮(CTS)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞(MLE-12)的影响。方法 通过CCK-8法检测细胞活力,酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR(q-PCR)检测IL-1β、IL-6、TNF-α含量及基因表达水平,筛选出具有最佳造模效果的LPS浓度;之后通过CCK-8考察CTS对细胞的非毒性剂量范围;将试验分为对照组、LPS组和CTS+LPS组3个组,ELISA检测细胞上清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,qPCR检测细胞内IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax和Bcl-2基因表达水平,Western Blot检测Bax、Bcl-2、TLR4、p-p65和p-JNK蛋白水平。结果 与对照组相比,LPS浓度≥1.0μg/mL时细胞活力显著下降(P<0.01);2.0和5.0μg/mL LPS组IL-1β、IL-6和TNF-α含量及基因表达水平显著上升(P<0.05);CTS浓度为0~5.0μM时,细胞活力无显著变化(P>0.05),即药物的无毒范围。与LPS组相比,CTS+LPS组IL-1β、IL-6和TNF-α含量及基因表达水平显著下降(P<0.05);CTS+LPS组Bax蛋白及基因表达水平显著下降(P<0.01)、Bcl-2蛋白及基因表达水平显著上升(P<0.05)。另外,与对照组相比,LPS组TLR4、p-p65、p-JNK蛋白水平显著上升(P<0.01);与LPS组相比,CTS+LPS组TLR4、p-p65、p-JNK蛋白水平显著下降(P<0.01)。结论 CTS可能通过抑制TLR4/NF-κB/JNK信号通路减轻LPS诱导的MLE-12细胞炎性损伤作用。

基于外周血JNK/NF-κB通路研究健脾益肾方治疗糖尿病肾病的疗效及抗炎作用

基于外周血c-Jun氨基末端激酶(JNK)/核因子-κB(NF-κB)通路研究健脾益肾方治疗糖尿病肾病的疗效及抗炎作用。选择2019年1月~2020年6月期间该院收治的糖尿病肾病患者,随机分为接受坎地沙坦酯治疗的对照组、坎地沙坦酯联合健脾益肾方治疗的观察组,治疗12 w后评价疗效及中医证候评分,检测实验室指标空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿蛋白排泄率及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6含量,外周血JNK、NF-κB表达水平。治疗12 w后,观察组患者的总有效率高于对照组(P<0.05),两组患者的各项中医证候评分、FBG、HbA1c、Scr、BUN、尿蛋白排泄率及血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量,外周血JNK、NF-κB表达水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组患者FBG、HbA1c与对照组比较无差异(P>0.05),观察组各项中医证候评分、Scr、BUN、尿蛋白排泄率及血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量,外周血JNK、NF-κB表达水平均低于对照组(P<0.05)。健脾益气方治疗糖尿病肾病能够改进疗效、改善肾功能、抑制炎症反应,这一作用可能与抑制JNK/NF-κB通路有关。

肌肽通过调节JNK和NF-kappaB通路抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡(英文)

高血糖症是糖尿病并发心血管疾病的重要危险因素.高血糖诱导产生的活性氧(ROS)能够引起糖尿病心肌病.我们的前期工作已经证实,肌肽对高糖环境下细胞凋亡具有保护作用,但其机制尚未明确.为研究肌肽对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,以高糖诱导心肌细胞H9c2为模型,采用Brdu-ELISA法检测细胞增殖过程中DNA合成情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹实验检测JNK/c-Jun、NF-κB的磷酸化水平,RT-PCR检测TNF-α的mRNA表达.实验结果显示,肌肽能够提高高糖损伤的H9c2细胞增殖能力,降低心肌细胞凋亡,抑制高糖激活的JNK、c-Jun和NF-κB磷酸化水平及TNFα的mRNA表达.上述结果表明,肌肽拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡机制与抑制p-JNK/p-c-Jun、p-NF-κB水平和TNF-α表达有关.

川崎病中IgM-AECA通过JNK、p38及NF-κB诱导内皮细胞ICAM-1的表达

目的川崎病(Kawasaki Disease,KD)大部分病人血清中存在抗内皮细胞受体抗体-IgM(IgM An-ti-endothelial cell antibodies,IgM-AECA)。该研究旨在探讨抗内皮细胞受体抗体(AECA)通过何种途径诱导内皮细胞细胞内吸附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达以激活血管内皮细胞。方法检测30名KD患儿血清IgM-AECA浓度,并从17名AECA阳性KD患儿血清中提纯IgM-AECA,用IgM-AECA直接刺激人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)后,通过R T-PCR及ELISA方法检测ICAM-1 mR NA及蛋白的表达,同时应用了PD98059,SB203580,dimethylaminopurine(DMAP)和parthenolide,4种蛋白激酶阻断剂观察IgM-AECA通过何种途径激活HCAEC。结果 KD病人血清中的IgM-AECA可使HCAEC的ICAM-1 mRNA及蛋白表达明显增加,SB203580(p38阻断剂)、DMAP(JNK阻断剂)及parthenolide(NF-κB阻断剂)明显抑制ICAM-1的表达(均P<0.01),而PD98059(ERK1/2阻断剂)不能抑制ICAM-1的表达(P>0.05)。结论 KD病人血清中的IgM-AECA通过增强ICAM-1的表达来激活内皮细胞,IgM-AECA通过p38、JNK MAPK及NF-κB通路诱导ICAM-1的表达,IgM-AECA可能在KD冠状动脉病变的发生中发挥重要作用。

白藜芦醇抑制海马组织NF-κB/JNK通路改善严重烧伤大鼠认知功能

目的探讨白藜芦醇(RSV)对严重烧伤大鼠认知功能的改善作用及其可能的机制。方法将雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和RSV组,每组6只。建模成功后,RSV组大鼠每日灌胃20 mg/kg的RSV,对照组和模型组每日灌胃等体积的生理盐水溶液。4周后,跳台实验检测大鼠认知功能;ELISA检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量;实时定量PCR和Western blot法分别检测海马组织中TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白的表达;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测海马神经细胞凋亡情况;Western blot法检测海马组织中核因子κB/c-Jun N-氨基末端激酶(NF-κB/JNK)通路相关蛋白表达情况。结果与模型组大鼠相比,RSV组大鼠认知功能提高,大鼠血清TNF-α和IL-6含量明显降低,海马组织中TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白表达降低,海马神经元凋亡率降低,磷酸化的NF-κB p65/NF-κB p65(p-NF-κB p65/NF-κB p65)、p-JNK/JNK比值降低。结论RSV通过阻断NF-κB/JNK信号通路,抑制炎症反应和海马神经元凋亡,从而改善严重烧伤大鼠认知功能。

雷公藤红素下调p-p38、p-JNK、NF-κB减轻脑梗死后的炎症反应

目的探讨脑缺血后磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、核因子-κB(NF-κB)的表达变化,观察雷公藤红素的脑保护作用及机制。方法用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉永久性脑梗死(pMCAO)模型。实验分为3组:溶剂对照组,假手术组和雷公藤红素组(3mg·kg^(-1)腹腔注射)。采用RT-qPCR和Western blot观察p-p38、p-JNK、NF-κB基因和蛋白表达变化,比较各组的患侧脑水肿、脑梗死体积和神经功能评分。结果与溶剂对照组相比,雷公藤红素组脑水肿明显低于溶剂对照组(P<0.05);梗死体积明显小于溶剂对照组(P<0.05);神经功能评分明显小于溶剂对照组(P<0.05);p-p38、p-JNK、NF-κB的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05)。结论雷公藤红素对脑梗死大鼠具有脑保护作用,雷公藤红素通过调节p-p38,p-JNK和NF-κB的表达可能是其脑保护作用机制之一。

黄芪多糖通过抑制NF-κB和JNK信号通路减轻LPS诱导的小鼠心肌细胞凋亡

目的研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外实验采用H9c2细胞预先给予APS,30 min后加入LPS(1 mg·L^(-1))共孵育24 h,建立心肌细胞凋亡模型。体内实验采用SPF级昆明小鼠预防性给予APS 14 d后,腹腔注射LPS(10 mg·kg^(-1))建立心肌细胞凋亡模型。8 h后采用超声心动测定小鼠心脏射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)等;TUNEL测心肌细胞凋亡;ELISA检测血清中IL^(-1)β、TNF-α含量;Western blot检测组织和体外心肌细胞中JNK、NF-κB信号通路及Bcl-2家族、caspase-3相关蛋白表达。结果 LPS能明显抑制小鼠的左心室收缩功能;促使心肌细胞凋亡;增加血清中IL^(-1)β、TNF-α,心肌细胞中JNK、p-JNK、Bax、caspase-3,胞核中NF-κB蛋白浓度;降低Bcl-2和胞质中NF-κB、IκB-α蛋白浓度。APS能明显保护LPS诱导的小鼠心肌收缩功能,减少心肌细胞凋亡;减少血清中IL^(-1)β、TNF-α,心肌组织细胞中p-JNK、Bax、caspase-3和胞核NF-κB蛋白含量;相对增加Bcl-2和胞质中NF-κB、IκB-α蛋白含量。而JNK蛋白表达无明显变化。结论 APS通过抑制NF-κB和JNK信号通路,减轻LPS诱导的小鼠心肌细胞凋亡。

度洛西汀通过调控JNK和NF-κB信号通路对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的探究度洛西汀通过调控c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路和核因子(NF)-κB信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响。方法40只大鼠随机分为Sham组、AMI组、AMI+低剂量度洛西汀(AMI+L)组和AMI+高剂量度洛西汀(AMI+H)组(n=10)。通过结扎建立AMI模型,AMI+L组和AMI+H组大鼠使用度洛西汀灌胃,剂量分别为40 mg/kg和80 mg/kg。干预7 d后检测大鼠左室收缩末期压力(LVESP)、左室舒张末期压力(LVEDP)、心室收缩期间左心室压力的最大上升和下降速率(±dP/dt max)、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数的影响。并通过ELISA检测各组细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),比较各组心肌组织中JNK和NF-κB mRNA和蛋白的水平。结果四组的上述指标比较差异显著(P<0.05)。AMI组的LVESP、±dP/dt max、SOD显著低于Sham组,LVEDP、梗死面积(2.41±0.39 mm^(2))、凋亡指数(32.75±3.67%)、IL-6、TNF-α、MDA、JNK和NF-κB mRNA和蛋白的水平显著高于Sham组(P<0.05)。AMI+L组的LVESP、±dP/dt max、SOD显著高于AMI组,LVEDP、梗死面积(2.02±0.42 mm^(2))、凋亡指数(21.12±2.74%)、IL-6、TNF-α、MDA、JNK和NF-κB mRNA和蛋白的水平显著低于AMI组(P<0.05)。AMI+H组的LVESP、±dP/dt max、SOD显著高于AMI组和AMI+L组,LVEDP、梗死面积(1.69±0.41 mm^(2))、凋亡指数(16.64±3.11%)、IL-6、TNF-α、MDA、JNK和NF-κB mRNA和蛋白的水平显著低于AMI组和AMI+L组(P<0.05)。结论度洛西汀可能通过抑制JNK和NF-κB通路抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡,从而发挥保护心功能的作用。

护阳养坤方通过JNK-p38/P65-NF-κB通路对卵巢颗粒细胞的保护机制研究

目的基于RNA-seq测序结果,探索护阳养坤方(HYYKF)对去氧乙烯基环乙烯(VCD)诱导的人卵巢颗粒细胞(COV434)凋亡的保护作用及可能的机制。方法根据动物实验RNA-seq测序结果,用实时荧光定量聚合酶链式反应法和蛋白免疫印迹法验证差异富集通路基因和蛋白表达情况;在此基础上,进行体外实验:选用人卵巢颗粒细胞COV434,通过MTT法观察VCD和HYYKF对COV434细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;用蛋白免疫印迹法检测COV434细胞中JNK/p38MAPK/P65 NF-κB信号通路蛋白表达。结果转录组验证结果提示JNK/p38和P65 NF-κB通路可能参与HYYKF防治大鼠卵巢衰退;体外结果表明HYYKF可以部分减弱VCD诱导的COV434细胞增殖抑制,以2mg/mL作用最显著;与VCD组比较,HYYKF干预可降低VCD诱导COV434细胞凋亡(0.5mg/mL,31%;2.0mg/mL,28%),VCD显著上调c-Caspase-3的蛋白表达(P<0.05),与VCD模型组相比较,HYYKF组细胞p-JNK、p-P38及c-Caspase-3的蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论护阳养坤方对卵巢的保护作用与调控JNK/p38/P65 NF-κB通路减少颗粒细胞凋亡有关。

基于NF-κB/JNK信号通路研究他克莫司对脊髓损伤模型大鼠的调节作用

目的探究他克莫司对大鼠脊髓损伤的治疗作用及其对NF-κB/JNK信号通路的调节作用。方法实验大鼠随机分为三组(n=15):假手术组、模型组、他克莫司治疗组;采用Allen’s法建立脊髓损伤动物模型。造模后给予实验大鼠他克莫司(0.3 mg/kg),连续给予21 d。分别在第0、1、7、14、21天进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)脊髓损伤的行为学评分测试。采用HE染色观察实验大鼠脊髓损伤状态并测定脊髓组织中抗氧化酶活性;采用RT-PCR测定脊髓组织中的IL-4 mRNA和TGF-βmRNA表达量;采用Western blot实验测定脊髓组织中NF-κB/JNK信号通路相关蛋白表达。结果他克莫司能够显著性改善脊髓损伤大鼠的BBB评分(P<0.05),升高SOD、CAT、GPX酶活性并降低MDA含量(P<0.05);并减少脊髓神经元的异常凋亡,降低脊髓组织中IL-4 mRNA、TGF-βmRNA表达和NF-κB p-p65/NF-κB p-p65和p-JNK/JNK蛋白表达量的比值(P<0.05)。结论他克莫司能够显著性改善脊髓损伤,其可能是通过抗氧化、抗炎反应、抗脊髓神经元凋亡,以及抑制NF-κB/JNK信号通路活化而发挥作用的。

Caffeoylquinic acid derivatives extract of Erigeron multiradiatus alleviated acute myocardial ischemia reperfusion injury in rats through inhibiting NF-kappaB and JNK activations

Erigeron multiradiatus(Lindl.)Benth.,has been used in Tibet folk medicine to treat various inflammatory diseases.The aim of this study was to investigate anti-myocardial ischemia and reperfusion(I/R)injury effect of caffeoylquinic acids derivatives of E.multiradiatus(AE)in vivo and to explain underling mechanism.AE was prepared using the whole plant of E.multiradiatus and contents of 6 caffeoylquinic acid determined through HPLC analysis.Myocardial I/R were induced by left anterior descending coronary artery occlusion for 30 min followed by 24 h of reperfusion in rats.AE administration(10,20 and 40 mg·kg-1)inhibited I/R-induced injury as indicated by decreasing myocardial infarct size,reducing of CK and LDH activities and preventing ST-segment depression in dose-dependent manner.AE decreased cardiac tissue levels of pro-inflammatory factors TNF-αand IL-6 and attenuated leukocytes infiltration.AE was further demonstrated to significantly inhibit I-κB degradation,nuclear translocation of p-65 and phosphorylation of JNK.Our results suggested that cardioprotective effect of AE could be due to suppressing myocardial inflammatory response and blocking NF-κB and JNK activation pathway.Thus,caffeoylquinic acids might be the active compounds in E.multiradiatus on myocardial ischemia and be a potential natural drug for treating myocardial I/R injury.

NF-κB信号通路对糖尿病血管内皮的影响

目的研究糖尿病血管内皮细胞NF-κB信号途径,从而为防治糖尿病血管并发症提供新的治疗策略。方法设计、合成针对NF-κB基因ShRNA的寡核苷酸序列;构建腺病毒载体质粒,转染293A细胞,进行病毒包装、扩增;腺病毒载体转导血管内皮细胞,通过RT-PCR和Western blot从mRNA以及蛋白质水平验证构建的病毒载体对血管内皮细胞NF-κB表达的抑制效应;用Western blot验证NF-κB干扰的血管内皮细胞中JNK(c-Jun氨基末端激酶)的变化。结果高浓度葡萄糖的条件下,内皮细胞NF-κB的表达量显著升高;干扰RNA有效干扰了正常血糖和高血糖环境下NF-κB及p-JNK的表达;p-JNK的表达随着NF-κB表达的下降而下降。结论高糖通过NF-κB及JNK的信号传导通路影响内皮细胞的凋亡。

NF-κB和MAPK信号通路参与金雀异黄酮诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的体外研究

目的探讨金雀异黄酮(genistein)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的可能机制。方法采用MTT法观察金雀异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;集落形成法观察金雀异黄酮对MDA-MB-231细胞集落形成能力的影响;金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3及NF-κB、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK蛋白的表达。结果 MTT结果显示,金雀异黄酮呈时间、浓度依赖性抑制乳腺癌MDAMB-231细胞增殖;集落形成实验结果显示,金雀异黄酮能明显抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的集落形成(P<0.05);Western blot结果显示,金雀异黄酮干预乳腺癌MDA-MB-231细胞36 h后,与对照组相比,Bcl-2、NF-κB、p-ERK蛋白表达水平明显下调(P<0.05),Bax、caspase-3、p-JNK蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。结论金雀异黄酮能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞生长,且能诱导其凋亡,其机制可能与抑制NF-κB、ERK,激活JNK信号转导通路有关。

TNF-α信号传导通路的分子机理

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)是一种具有多效生物学效应的细胞因子.TNF的生物学效应都是通过细胞表面的2种TNF受体(TNFR)引发,其信号传导通路主要包括caspase家族介导的细胞凋亡、衔接蛋白TRAF介导的转录因子NF-κB和JNK蛋白激酶的活化.TNFR1和TNFR2的生物学功能不是独立的,许多生物学活性由二者共同完成.3条信号传导通路之间及各通路内部含有各种调节机制,使TNF的各种生物学功能协调发挥出来.本文评述了3条信号传导通路最新进展、关键激酶的研究状况及其在整个信号网络中的作用机理,如IKK的激活以及重要的信号转导分子RIP、TRAF2、TRUSS的结构、相互作用的方式等.

基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响

目的基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响。方法将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、SP600125组(JNK抑制剂)和豨莶草高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)组,对照组和模型组灌胃给予生理盐水,其他各组给予相应的药物,连续7天,第5天给药1 h后向大鼠膝关节腔注射尿酸钠建立痛风性关节炎模型,对照组不做处理,采用HE染色观察滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量,western bloting测定JNK和p-JNK蛋白含量和RTPCR测定c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结果与对照组比较,模型组炎性细胞浸润,滑膜细胞增生,成纤维细胞,SP600125组和不同浓度豨莶草组对滑膜组织炎性细胞浸润明显减少,滑膜细胞增生和成纤维细胞增生明显减轻;模型组大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显增高,SP600125组和不同浓度豨莶草组血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显降低;western bloting和RT-PCR结果显示模型组滑膜组织中JNK和p-JNK蛋白含量明显增加,AP-1、c-jun和NF-κB mRNA表达明显增加,不同浓度豨莶草组和SP600125组能够明显降低痛风性关节炎大鼠JNK和p-JNK蛋白含量及c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结论豨莶草能够改善急性痛风性关节炎症状,其可能机制是调控JNK信号通路异常激活。

CD11b调控LPS刺激下巨噬细胞表达IL-12的分子机制

CD11b是白细胞整合素家族成员之一,在炎症的发生和发展中发挥重要作用.在内毒素血症小鼠模型,发现脂多糖(LPS)导致外周血白细胞介素12(IL-12)水平降低,而CD11b抑制剂能防止此现象发生.为阐明CD11b调控LPS刺激下IL-12产生的分子机制,本文利用RAW264.7细胞开展了进一步研究.酶联免疫吸附、实时定量PCR和Western Blot等检测结果表明,CD11b可抑制LPS刺激下RAW264.7细胞IL-12的表达;利用sh RNA敲低CD11b的表达则能提高LPS刺激下RAW264.7细胞IL-12p35、IL-12p40的转录水平和蛋白水平的表达;JNK和NF-κB信号通路与CD11b调控IL-12的产生关系密切,而p38、ERK信号通路影响较小.因此,研究结果提示,CD11b通过JNK和NF-κB信号通路抑制LPS刺激下巨噬细胞IL-12的产生,抑制CD11b的功能可能有助于削弱LPS引起的炎症反应.

阿尔茨海默病模型大鼠血浆内毒素激活小胶质细胞中P38和JNK及NF-κB作用的研究

目的研究阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)模型大鼠脑组织P38、JNK、NF-κB在血浆内毒素(lipopolysaccharide,LPS)激活小胶质细胞(microglia,MG)中的作用。方法选用雄性Wistar大鼠,腹腔注射D-半乳糖和AlCl3,连续90d,制备AD大鼠模型。采用鲎试剂法检测模型大鼠血浆中LPS含量,免疫印迹法(western-blot)检测大鼠脑组织P38、JNK、NF-κB表达水平,免疫荧光法检测大鼠脑组织OX-42表达。采用SPSS 16.0软件分析,计量资料实验数据以均数±标准差(x±s)表示,用多因素重复测量方差分析及t检验进行两组间比较,P<0.05为差异有统计学意义。结果大鼠脑组织OX-42表达对照组与模型组均可见阳性荧光颗粒,荧光强度(767.2±35.4)vs(1 054.2±128.4),两组相比,t=2.534,P<0.01,差异有统计学意义。模型组与对照组大鼠脑组织P38、JNK蛋白各组均存在表达[(65.3±4.4)vs(684.9±6.1),(169.4±15.3)vs(183.2±17.5)],组间差异无统计学意义;而模型组大鼠脑组织p-P38、p-JNK表达水平明显高于对照组[64.3±5.8)vs(109.7±12.9),t=4.259,P<0.01;(21.9±2.8)vs(171.9±20.8),t=4.657,P<0.01]。模型组大鼠脑组织NF-κB表达水平(51.9±7.6)%明显高于对照组(34.7±4.6)%,两组相比差异有统计学意义(t=4.631,P<0.01)。结论 P38、JNK、NF-κB信号转导通路在AD模型大鼠血浆LPS激活MG进一步诱发AD过程中发挥了重要作用。