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叶酸通过JNK/p38 MAPK信号通路调节小鼠C2C12成肌细胞分化
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作者 孙缦利 邓海峰 +3 位作者 金少举 陈旭东 王兴红 范文娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期317-325,共9页
目的:观察叶酸(folic acid,FA)对小鼠C2C12成肌细胞增殖和分化的影响并探讨其作用机制。方法:(1)在小鼠C2C12成肌细胞增殖阶段,采用不同浓度(0、2.5、5、10和20μmol/L)的FA处理C2C12细胞,显微镜下观察各组细胞的状态,MTT法检测细胞活力... 目的:观察叶酸(folic acid,FA)对小鼠C2C12成肌细胞增殖和分化的影响并探讨其作用机制。方法:(1)在小鼠C2C12成肌细胞增殖阶段,采用不同浓度(0、2.5、5、10和20μmol/L)的FA处理C2C12细胞,显微镜下观察各组细胞的状态,MTT法检测细胞活力,EdU法检测细胞增殖情况。(2)在小鼠C2C12成肌细胞分化阶段,将细胞分为对照(control,Ctrl)组(0μmol/L FA)和FA组(10μmol/L FA),于分化的第2天和第4天,采用免疫荧光染色和Western blot检测成肌细胞分化相关蛋白成肌细胞决定蛋白1(myoblast determination protein 1,MyoD)、成肌蛋白(myogenin,MyoG)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)的表达水平,并统计各组细胞肌管形成情况。(3)在小鼠C2C12成肌细胞分化第4天时,加入FA处理0、1、3和6 h,采用Western blot检测各时点c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(phosphorylated JNK,p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和磷酸化p38 MAPK(phosphorylated p38 MAPK,p-p38 MAPK)蛋白水平。(4)将分化4 d的小鼠C2C12成肌细胞分为Ctrl组、FA组、SP600125(JNK特异性抑制剂)组、SB2035805(p38 MAPK特异性抑制剂)组、FA+SP600125组和FA+SB203580组。C2C12成肌细胞先接受10μmol/L的SP600125或SB203580处理1 h,再经10μmol/L的FA处理24 h,FA组经10μmol/L FA处理24 h,Ctrl组不作处理。采用Western blot检测p-JNK、JNK、p-p38 MAPK、p38 MAPK和MyHC蛋白水平。结果:(1)与0μmol/L FA组相比,其余各浓度组的细胞数量明显增多,细胞活力显著提高(P<0.05),EdU阳性细胞率均显著增加(P<0.05)。(2)与Ctrl组相比,FA组MyoD、MyoG和MyHC的表达水平均显著提高(P<0.05),肌管融合指数显著增加(P<0.05或P<0.01)。(3)与0 h组相比,FA处理1、3和6 h后p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值均显著升高(P<0.05或P<0.01),且随着处理时间的延长,p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值呈现逐渐升高的趋势。(4)与Ctrl组相比,FA组p-JNK、p-p38 MAPK和MyHC蛋白水平显著升高(P<0.01);与FA组相比,FA+SP600125组p-JNK和MyHC蛋白水平显著降低(P<0.05),FA+SB203580组p-p38 MAPK和MyHC蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:FA可以通过激活JNK/p38 MAPK信号通路促进小鼠C2C12成肌细胞分化。 展开更多
关键词 叶酸 C2C12成肌细胞 骨骼肌 细胞分化 jnk/p38 MApK信号通路
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杨桃根DMDD调控JNK/P38MAPK通路抑制2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝小鼠肝脏内质网应激 被引量:1
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作者 谢静晓 王誉湘 +7 位作者 张晓萍 陈秋燕 王璐 庞川皓 李吉星 陈林倩 黄仁彬 韦晓洁 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第5期786-791,共6页
目的:探讨杨桃根2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)通过调控JNK/P38MAPK抑制2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠内质网应激的机制。方法:将C57BL/6J小鼠分为正常组、模型组、4-苯基丁酸(4-PBA)组、衣霉素(TM... 目的:探讨杨桃根2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)通过调控JNK/P38MAPK抑制2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠内质网应激的机制。方法:将C57BL/6J小鼠分为正常组、模型组、4-苯基丁酸(4-PBA)组、衣霉素(TM)组及DMDD高、中、低剂量组(DMDD_(H)组、DMDD_(M)组、DMDD_(L)组)。连续予高脂饲料喂养4周后,再一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM合并NAFLD小鼠模型。连续给药8周后检测小鼠空腹血糖水平及肝组织丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和血脂水平。采用苏木精—伊红(HE)染色、油红O染色观察肝组织病理学改变,western blotting法检测肝组织grp78、Chop、JNK、磷酸化(P)-JNK、P38MAPK、P-P38MAPK、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:与模型组相比,DMDD各剂量组空腹血糖、ALT、AST、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平增高(P<0.05),肝组织病理损伤减轻,grp78、Chop、P-JNK、Bax和P-P38MAPK蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。结论:杨桃根DMDD可能通过抑制JNK/P38MAPK通路减轻T2DM合并NAFLD小鼠肝脏内质网应激及肝细胞损伤和凋亡。 展开更多
关键词 杨桃根 内质网应激 2型糖尿病 非酒精性脂肪肝 jnk/p38MApK 细胞凋亡
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比索洛尔通过ASK1-JNK/p38 MAPK信号通路改善缺血再灌注诱导的H9C2心肌细胞损伤的研究 被引量:1
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作者 吴媛媛 高元标 +2 位作者 冼笃标 吴岳畅 赵映 《中国医院用药评价与分析》 2023年第7期805-810,共6页
目的:探讨比索洛尔对缺血再灌注(I/R)诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法:体外培养H9C2心肌细胞,将H9C2心肌细胞分为对照组(Control组)、缺氧/复氧(H/R)模型组(Model组)、比索洛尔组(Bisoprolol组)、比索洛尔+凋亡信号调... 目的:探讨比索洛尔对缺血再灌注(I/R)诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法:体外培养H9C2心肌细胞,将H9C2心肌细胞分为对照组(Control组)、缺氧/复氧(H/R)模型组(Model组)、比索洛尔组(Bisoprolol组)、比索洛尔+凋亡信号调节激酶1(ASK1)重组蛋白组(Bisoprolol+ASK1组)。除Control组外,其余各组H9C2心肌细胞均进行H/R损伤处理。采用细胞计数试剂盒(CCK8)法检测细胞活力;采用流失细胞术检测细胞凋亡;采用酶联免疫吸附试验检测细胞中心肌损伤标志物[乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)]和炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;采用激光共聚焦检测细胞中钙离子浓度;采用蛋白质印迹法检测细胞中ASK1-c-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38丝分裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路相关蛋白表达水平。结果:与Control组比较,Model组H9C2细胞活力、LDH和cTnT水平均降低,细胞凋亡率、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高,细胞内钙离子浓度、p-ASK1/ASK1、p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Model组比较,Bisoprolol组和Bisoprolol+ASK1组H9C2细胞活力、LDH和cTnT水平均升高,细胞凋亡率、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低,细胞内钙离子浓度、p-ASK1/ASK1、p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Bisoprolol组比较,Bisoprolol+ASK1组H9C2细胞活力、LDH和cTnT水平均降低,细胞凋亡率、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高,细胞内钙离子浓度、p-ASK1/ASK1、p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:比索洛尔能够通过抑制炎症反应和钙超载,改善I/R诱导的H9C2心肌细胞损伤,其作用机制可能与抑制ASK1-JNK/p38 MAPK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 比索洛尔 缺血再灌注损伤 心肌细胞 炎症反应 钙超载 ASK1-jnk/p38 MApK信号通路
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miR-149-3p调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎性反应的影响 被引量:2
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作者 王惟达 蒋林 史桂霞 《河北医药》 CAS 2023年第4期513-517,共5页
目的探讨miR-149-3p通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎症反应的影响。方法体外分离大鼠髓核细胞,用IL-1β浓度为10 ng/ml建立模型组,细胞分为Con组(空白对照)、IL-1β组(IL-1β处理)、IL-1β+miR-NC组(IL-1β处理,... 目的探讨miR-149-3p通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎症反应的影响。方法体外分离大鼠髓核细胞,用IL-1β浓度为10 ng/ml建立模型组,细胞分为Con组(空白对照)、IL-1β组(IL-1β处理)、IL-1β+miR-NC组(IL-1β处理,转染miR-NC)、IL-1β+miR-149-3p组(IL-1β处理,转染miR-149-3p)、IL-1β+miR-149-3p+Anisomycin组(IL-1β和通路激活剂Anisomycin处理,转染miR-149-3p)。采用qRT-PCR检测miR-149-3p相对表达水平;MTT、流式细胞术实验检测细胞增殖和凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2、Beclin 1、LC3II/LC3I、JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白表达;ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-8表达水平。结果IL-1β组内miR-149-3p相对表达量、细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显低于Con组,凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平、p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达明显高于Con组(P<0.05)。IL-1β+miR-149-3p组内miR-149-3p相对表达量、细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显高于IL-1β+miR-NC组(P<0.05),凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平、p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达明显低于IL-1β+miR-NC组。IL-1β+miR-149-3p+Anisomycin组的p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达、凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平明显高于IL-1β+miR-149-3p组,细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显低于IL-1β+miR-149-3p组(P<0.05)。结论上调miR-149-3p能促进IL-1β诱导的髓核细胞增殖,抑制细胞凋亡、自噬和炎性反应,其作用机制可能与激活JNK/p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-149-3p jnk/p38 MApK信号通路 髓核细胞 凋亡 自噬 炎症反应
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黄芩苷通过激活JNK/p38 MAPK通路诱导ALL Reh细胞凋亡 被引量:1
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作者 肖李 王广 +4 位作者 练高建 李程悦 龚慧芳 王俊涵 苏泽红 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第3期325-329,共5页
目的 探究黄芩苷对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株Reh增殖和凋亡的影响及c-Jun氨基蛋白激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路在其机制中的作用。方法 黄芩苷处理或联合活性氧(ROS)清除剂NAC共处理Reh细胞;流式细胞术检测细胞... 目的 探究黄芩苷对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株Reh增殖和凋亡的影响及c-Jun氨基蛋白激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路在其机制中的作用。方法 黄芩苷处理或联合活性氧(ROS)清除剂NAC共处理Reh细胞;流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS水平和线粒体膜功能(MMP);免疫荧光实验观察凋亡细胞的数目及其形态变化。Western blotting免疫印迹检测Reh细胞内凋亡蛋白和信号通路蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,黄芩苷组Reh细胞增殖被抑制,细胞凋亡率、促凋亡蛋白、ROS、JNK和p38磷酸化水平显著上升,抗凋亡蛋白表达下调,MMP明显受损(P<0.01)。NAC清除ROS后明显恢复细胞增殖,JNK和p38磷酸化水平明显下降,Survivin表达恢复(P<0.01)。结论 黄芩苷经激活JNK/p38 MAPK通路活化Caspase3/7,诱导Reh细胞凋亡。 展开更多
关键词 ALL 细胞凋亡 黄芩苷 Reh细胞 活性氧 jnk/p38 MApK
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氟氯氰菊酯通过GADD45B介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响
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作者 孙祎平 李晓玉 +5 位作者 谢永鑫 赵吉 孙健 王瑞 宋亚男 杨惠芳 《宁夏医科大学学报》 2023年第3期230-235,257,共7页
目的 探讨氟氯氰菊酯暴露通过影响生长停滞和DNA损伤诱导β(GADD45B)水平并介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响。方法 将40只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为4组,即对照组、氟氯氰菊酯低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10... 目的 探讨氟氯氰菊酯暴露通过影响生长停滞和DNA损伤诱导β(GADD45B)水平并介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响。方法 将40只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为4组,即对照组、氟氯氰菊酯低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。隔天灌胃连续染毒28 d,取肾脏组织称量后计算脏器系数。HE染色光镜下观察大鼠肾脏组织病理形态变化;透射电镜观察肾脏细胞超微结构变化;应用试剂盒检测肾脏组织中氧化损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化;应用Western blot、qPCR检测GADD45B、p38MAPK、p-p38MAPK、JNK、p-JNK mRNA及蛋白表达水平变化。结果 与对照组相比,氟氯氰菊酯染毒大鼠体质量增长、肾脏质量和脏器系数的差异均无统计学意义(P均>0.05);HE染色结果显示:与对照组相比,随着氟氯氰菊酯染毒剂量的增加,肾小管肿胀越发明显,肾小管上皮细胞大量脱落,肾小球萎缩。透射电镜结果显示:与对照组相比,随着氟氯氰菊酯染毒剂量的增加,基底膜逐渐增厚,线粒体和内质网出现不同程度损伤。与对照组比较,低、中、高剂量组MDA含量均升高(P均<0.05)、SOD活力均降低(P均<0.05)。与对照组相比,氟氯氰菊酯低、中、高剂量组中GADD45B的mRNA表达水平均升高(P均<0.05);JNK和p38MAPK的mRNA表达水平均降低(P均<0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,氟氯氰菊酯低、中、高剂量组中GADD45B、p-JNK、p-p38的蛋白表达水平均升高(P均<0.05);JNK和p38的蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。结论 在氟氯氰菊酯致大鼠肾脏损伤中,GADD45B可通过激活JNK/p38MAPK通路诱导大鼠肾脏损伤。 展开更多
关键词 GADD45B 氟氯氰菊酯 肾脏 jnk/p38MApK通路
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人参皂苷Rb1通过JNK/p38 MAPK途径减轻Aβ_(25-35)诱导的胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化 被引量:35
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作者 宋锦秋 陈晓春 +4 位作者 张静 黄天文 曾育琦 沈杰 陈丽敏 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期29-34,共6页
探讨在Aβ25-35(beta-amyloid peptide(25-35),Aβ25-35)诱导的拟阿尔茨海默病样胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中,人参皂苷Rb1对tau蛋白磷酸化及JNK/p38 MAPK的可能作用。应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察tau蛋白磷酸... 探讨在Aβ25-35(beta-amyloid peptide(25-35),Aβ25-35)诱导的拟阿尔茨海默病样胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中,人参皂苷Rb1对tau蛋白磷酸化及JNK/p38 MAPK的可能作用。应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察tau蛋白磷酸化和JNK(c-jun N-terminal kinase)/p38 MAPK的表达情况。凝聚态Aβ25-35(20μmol.L-1)作用于皮层神经元12 h,tau蛋白的磷酸化水平明显增高,同时JNK/p38 MAPK的总量及其活性形式——磷酸化JNK/p38 MAPK的蛋白表达水平也增加,人参皂苷Rb1可以减轻tau蛋白的磷酸化水平及JNK/p38MAPK的蛋白水平。人参皂苷Rb1可通过JNK/p38 MAPK途径减轻Aβ25-35诱导的tau蛋白过度磷酸化。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 Β淀粉样蛋白25-35 TAU蛋白 磷酸化 jnk/p38 MApK
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凝聚态Aβ_(25~35)可通过JNK/p38 MAPK途径诱导胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化 被引量:7
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作者 宋锦秋 陈晓春 +4 位作者 张静 黄天文 曾育琦 沈杰 陈丽敏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期532-536,共5页
目的 探讨JNK/p38MAPK在p淀粉样蛋白多肽片段25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)样胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化中的作用。方法 应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察Tau蛋白磷酸化和JNK/p38丝裂原活化的蛋白... 目的 探讨JNK/p38MAPK在p淀粉样蛋白多肽片段25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)样胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化中的作用。方法 应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察Tau蛋白磷酸化和JNK/p38丝裂原活化的蛋白激酶(JNK/p38MAPK)的表达情况。结果凝聚态Aβ25-35(20μmol/L)作用于皮层神经元12h,Tau蛋白sep396、Ser199/202、Thr205位点的磷酸化水平明显增高,同时JNK/p38MAPK的总量及其活性形式.磷酸化JNK/p38MAPK的蛋白表达水平也增加。结论 Aβ25-35可通过激活JNK/p38MAPK使Tau蛋白的磷酸化水平增高。 展开更多
关键词 β淀粉样蛋白多肽片段25-35 jnk/p38丝裂原活化的蛋白激酶 TAU蛋白 阿尔茨海默病 免疫印迹 免疫细胞化学 大鼠
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全反式维甲酸通过作用于JNK/P38 MAPK信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注引起的血脑屏障损伤 被引量:13
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作者 李明航 田晓翠 +6 位作者 安瑞娣 张倩 杨梅 向菲 王钰淳 徐露 董志 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期112-118,共7页
目的:观察全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对脑缺血再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)损伤大鼠血脑屏障的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将SD雄性大鼠随机分组为假手术(sham)组、模型(CIR)组及CIR+ATRA(10、3... 目的:观察全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对脑缺血再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)损伤大鼠血脑屏障的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将SD雄性大鼠随机分组为假手术(sham)组、模型(CIR)组及CIR+ATRA(10、30和90 mg/kg)组。采用MCAO线栓法建立大鼠CIR损伤模型,缺血1. 5 h,再灌注24 h后,进行神经功能行为学评分及脑梗死体积、脑含水量和伊文思蓝含量的测定;明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性; Western blot法检测脑组织中紧密连接蛋白(claudin-5、occludin和ZO-1)、JNK、p-JNK、P38、p-P38和MMP-9的蛋白水平。结果:与CIR模型组相比,ATRA(30 mg/kg)可明显改善大鼠神经功能,减少脑梗死体积,降低脑含水量和伊文思蓝含量,降低缺血区紧密连接蛋白的降解(P <0. 01),降低缺血脑组织中MMP-9的活性及蛋白的表达(P <0. 01),抑制JNK/P38 MAPK通路中JNK和P38的磷酸化并减少p-JNK和p-P38的蛋白水平(P <0. 01)。结论:ATRA能够减轻CIR对大鼠脑组织的损伤和血脑屏障的破坏,其保护作用可能与抑制JNK/P38 MAPK信号通路和MMP-9的激活有关。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 脑缺血再灌注损伤 血脑屏障 基质金属蛋白酶9 jnk/p38MApK通路
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基于JNK/p38 MAPK信号通路探讨夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎大鼠的作用 被引量:4
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作者 尹谢添 赵诗超 +3 位作者 向楠 陈继东 曾明星 周广文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期3817-3823,共7页
目的研究夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺滤泡细胞凋亡和c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法60只大鼠随机分为正常组、模型组、硒酵母组及夏枯草胶囊低、中、高剂量组,每组10... 目的研究夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺滤泡细胞凋亡和c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法60只大鼠随机分为正常组、模型组、硒酵母组及夏枯草胶囊低、中、高剂量组,每组10只,使用高碘水喂养配合皮下注射猪甲状腺球蛋白(pTg)与弗氏佐剂(CFA、IFA)诱导AIT大鼠模型,造模后连续灌胃给药4周。ELISA法检测大鼠甲状腺功能(FT3、FT4、TSH)、甲状腺抗体(TPOAb、TGAb)及相关炎性指标(INF-γ、IL-10、IL-17、IL-35)水平,HE染色观察大鼠甲状腺病理变化,Western blot法检测大鼠甲状腺组织中磷酸化的JNK(p-JNK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白表达,免疫组化(IHC)法检测大鼠甲状腺组织B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)阳性细胞表达。结果与模型组比较,夏枯草胶囊各剂量组及硒酵母组大鼠甲状腺淋巴浸润与滤泡破坏均有明显改善,血清FT3、FT4、TPOAb、TGAb、IFN-γ、IL-17水平,甲状腺组织中p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达及caspase-3阳性细胞比例均降低(P<0.05),血清TSH、IL-10、IL-35水平及甲状腺组织Bcl-2阳性细胞比例均升高(P<0.05)。结论夏枯草胶囊对AIT大鼠甲状腺的破坏具有保护作用,该作用与降低促炎细胞因子水平,抑制JNK/p38 MAPK信号通路的活化,进而减少甲状腺滤泡细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 夏枯草胶囊 自身免疫性甲状腺炎(AIT) jnk/p38 MApK信号通路 凋亡 炎症因子
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MiRNA-138抑制JNK/p38 MAPK通路保护新生大鼠心肌细胞凋亡 被引量:4
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作者 郭伟伟 张晓鹏 +2 位作者 李霞 刘平洋 李树立 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期86-94,共9页
[目的]探究miRNA-138抑制JNK/p38MAPK通路保护新生大鼠心肌细胞凋亡。[方法]收集2018年1月至12月急性心肌缺血患者全血样本33例,另招募同期体检健康者全血样本33例作对照;构建新生大鼠缺血再灌注(I/R)模型,将40只新生大鼠随机分为空白... [目的]探究miRNA-138抑制JNK/p38MAPK通路保护新生大鼠心肌细胞凋亡。[方法]收集2018年1月至12月急性心肌缺血患者全血样本33例,另招募同期体检健康者全血样本33例作对照;构建新生大鼠缺血再灌注(I/R)模型,将40只新生大鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(I/Rmodel)、阴性对照组(注射无序序列,Scramble)及miRNA-138过表达组(A d-miRNA-138),每组10只。采用qRT-PCR检测全血和心肌组织中miRNA-138、Bcl2及BaxmRNA的表达,电生理记录仪检测大鼠血流动力学指标水平,HE染色观察大鼠心肌组织病理损伤,免疫组法化检测心肌组织中Casapse-3的表达,TUNEL染色观察大鼠心肌组织细胞的凋亡情况,ELISA法检测心肌组织活性氧(R OS)的含量,Westernblotting检测JNK/p38MAPK通路蛋白的表达。[结果]与健康对照相比,急性心肌缺血患者全血中miRNA-138的水平显著降低(P<0.05);与I/R模型组相比,Ad-miRNA-138组大鼠心肌细胞间隙更小、排列更整齐性、结构更完整,miRNA-138表达、心功能指标+dp/dtmax、HR、LVSP及Bcl2/Bax水平显著上升,凋亡细胞数、Caspase-3阳性表达细胞率、ROS、p-p38/p38、p-c-jun/c-jun及p-JNK1/2/JNK1/2显著下调(P<0.05)。[结论]m iRNA-138可通过抑制JNK/p38MAPK通路,抑制大鼠心肌细胞的凋亡,并减轻活性氧损伤,从而保护新生大鼠心肌细胞。 展开更多
关键词 miRNA-138 jnk/p38 MApK通路 心肌细胞 凋亡
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原薯蓣皂调控JNK/P38 MAPK信号通路对卵巢癌SKOV3细胞系增殖、凋亡及迁移侵袭的影响 被引量:10
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作者 朱利红 段树鹏 +4 位作者 秦海霞 张秀玲 赵淑珍 李少儒 王世进 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1728-1734,共7页
目的:探索原薯蓣皂苷(PD)对卵巢癌细胞系SKOV3生存及运动能力的影响。方法:利用不同浓度的PD处理SKOV3细胞,探究PD用药浓度。将细胞分为Control、PD(2μmol/L)、PD(5μmol/L)、PD(10μmol/L)、PD+SB203580及PD+SP600125组,细胞经PD、SB2... 目的:探索原薯蓣皂苷(PD)对卵巢癌细胞系SKOV3生存及运动能力的影响。方法:利用不同浓度的PD处理SKOV3细胞,探究PD用药浓度。将细胞分为Control、PD(2μmol/L)、PD(5μmol/L)、PD(10μmol/L)、PD+SB203580及PD+SP600125组,细胞经PD、SB203580和SP600125分别或共同处理后,用MTT法检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫印迹实验检测Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)、cleaved caspase-3、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、磷酸化p38激酶(p-p38)、p38、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2(p-JNK1/2)和JNK1/2的表达。结果:PD浓度达到20μmol/L时,SKOV3细胞存活率不足80%,故将PD用药浓度分别设为2、5、10μmol/L。与Control组比较,PD(2μmol/L)、PD(5μmol/L)和PD(10μmol/L)组SKOV3细胞增殖速率及Bcl-2表达显著降低,细胞凋亡百分比及Bax和cleaved Caspase-3表达显著升高,PD(2μmol/L)组中Ki67表达无显著差异,PD(5μmol/L)和PD(10μmol/L)组中Ki67表达显著减少。同时,与Control组比较,PD(2μmol/L)、PD(5μmol/L)和PD(10μmol/L)组SKOV3细胞划痕闭合率显著降低,PD(2μmol/L)组中侵袭细胞数及VEGF、MMP-2、MMP-9的表达无显著差异,PD(5μmol/L)和PD(10μmol/L)组中侵袭细胞数及VEGF、MMP-2、MMP-9的表达显著减少。此外,与Control组比较,PD(2μmol/L)组、PD(5μmol/L)组和PD(10μmol/L)组中p-p38/p38和p-JNK1/2/JNK1/2的比值显著升高,p-ERK1/2/ERK1/2的比值无显著差异。SB203580显著抑制SKOV3细胞P38MAPK亚通路的激活,SP600125显著抑制SKOV3细胞JNKMAPK亚通路的激活。与PD(10μmol/L)组比较,PD+SB203580及PD+SP600125组中细胞增殖速率和Ki67表达显著升高,凋亡细胞百分比和cleaved Caspase-3表达显著降低,细胞划痕闭合率、侵袭细胞数及MMP-9表达显著升高。结论:PD通过激活JNK/P38MAPK信号通路降低卵巢癌SKOV3细胞生存及运动能力。 展开更多
关键词 原薯蓣皂苷 jnk/p38 MApK信号通路 卵巢癌 细胞生存 细胞运动
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丁苯酞通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路减少脑梗死大鼠神经细胞的凋亡 被引量:9
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作者 孙炎 邹玉安 +1 位作者 薛茜 王小琴 《海南医学院学报》 CAS 2020年第8期566-570,共5页
目的:探讨丁苯酞通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路减少脑梗死大鼠神经细胞的凋亡。方法:将48只SD雄性大鼠分为DZ组(对照组)、CI组(模型组)与NBP组(丁苯酞组),CI组和NBP组大鼠建立脑梗死模型,NBP组采用NBP溶液80 mg·kg^-1·d^-1灌... 目的:探讨丁苯酞通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路减少脑梗死大鼠神经细胞的凋亡。方法:将48只SD雄性大鼠分为DZ组(对照组)、CI组(模型组)与NBP组(丁苯酞组),CI组和NBP组大鼠建立脑梗死模型,NBP组采用NBP溶液80 mg·kg^-1·d^-1灌胃,剩余两组采用同体积的花生油灌胃,连续14 d处理后,采用Zea Longa评分对DZ组、CI组及NBP组的神经功能进行评分,TTC染色法观察DZ组、CI组和NBP组脑梗死体积,HE染色法观察DZ组、CI组和NBP组脑组织病理形态,TUNEL法检测DZ组、CI组和NBP组脑组织神经细胞凋亡情况,Western blot检测DZ组、CI组和NBP组脑组织p-JNK和p-p38MAPK的蛋白表达。结果:CI组神经功能高于DZ组,差异具有统计学意义(P<0.05);NBP组神经功能评分减轻与CI组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);CI组脑梗死体积高于DZ组,差异具有统计学意义(P<0.05);NBP组出现轻微梗死体积少于CI组,差异具有统计学意义(P<0.05);DZ组神经细胞排序整齐,数量较多,CI组血管与脑间质之间空隙增大,细胞固缩严重,神经元结构不完整;NBP组与CI组相比神经元固缩减轻,数量增多;凋亡的神经细胞为褐色,CI组神经细胞的凋亡率高于DZ组,差异具有统计学意义(P<0.05);NBP组神经细胞凋亡率与CI组相比减少,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:CI组p-JNK和p-p38MAPK蛋白表达高于DZ组,差异具有统计学意义(P<0.05),NBP组p-JNK和p-p38MAPK蛋白水平低于CI组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:丁苯酞能够改善脑梗死大鼠神经功能损伤,减少凋亡神经细胞,降低梗死体积,与抑制JNK/p38 MAPK通路表达相关。 展开更多
关键词 脑梗死 丁苯酞 神经细胞 梗死面积 jnk/p38 MApK信号通路
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棉子酚通过干扰氧化应激反应、抑制JNK/p38 MAPK信号通路的激活减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤 被引量:10
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作者 贾蕾蕾 王爱玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第10期1424-1429,共6页
目的研究棉子酚(Gossypol)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用,并对其可能的机制进行初步探讨。方法 SD雄性大鼠40只,随机分成4组:空白组、心肌缺血再灌注组(MI/R组)、Gossypol高、低剂量组(40、20 mg/L)。采用Langendorff法造模,... 目的研究棉子酚(Gossypol)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用,并对其可能的机制进行初步探讨。方法 SD雄性大鼠40只,随机分成4组:空白组、心肌缺血再灌注组(MI/R组)、Gossypol高、低剂量组(40、20 mg/L)。采用Langendorff法造模,检测Gossypol对血流动力学指标的影响及不同时间点各组动物心脏冠脉流出液中心肌酶谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,检测炎性细胞因子核转录因子(NF)-κB、细胞间黏附分子(ICAM)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6生成量,从氧化应激反应、JNK/p38 MAPK信号通路方面探讨Gossypol对早期MI/R的保护机制。结果各组Gossypol均可显著改善MI/R大鼠的心功能,减少AST、LDH释放,增加超氧化物歧化酶的活性,减少丙二醛的产生,减少再灌注的心肌组织中炎性细胞因子生成量。机制研究表明其可能通过清除自由基、抗脂质过氧化、阻断JNK/p38 MAPK信号通路途径的激活缓解心脏缺血再灌注所造成的氧化应激损伤和凋亡损伤。结论Gossypol对MI/R具有保护作用,其机制可能与干扰氧化应激反应及阻断JNK/p38 MAPK信号通路途径的激活有关。 展开更多
关键词 棉子酚 心脏缺血再灌注损伤 氧化应激反应 jnk/p38 MApK信号通路
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To investigate the effects of butylphthalide on reducing neuronal apoptosis in rats with cerebral infarction by inhibiting the JNK/P38 MAPK signaling pathway
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作者 Yan Sun Yuan Zou +1 位作者 Qian Xue Xiao-Qin Wang 《Journal of Hainan Medical University》 2020年第8期7-11,共5页
Objective:To investigate the effects of butylphthalide on reducing neuronal apoptosis in rats with cerebral infarction by inhibiting the JNK/P38 MAPK signaling pathway.Methods:Forty-eight SD male rats were divided int... Objective:To investigate the effects of butylphthalide on reducing neuronal apoptosis in rats with cerebral infarction by inhibiting the JNK/P38 MAPK signaling pathway.Methods:Forty-eight SD male rats were divided into DZ group(control group),CI group(model group)and NBP group(butylphthalide group).Rats in CI group and NBP group were used to establish cerebral infarction models.NBP group used NBP.The solution(80 mg/(kg?d))was administered orally,and the remaining two groups were administered with the same volume of peanut oil.After 14 consecutive days of treatment,the Zea Longa score was used to evaluate the neurological function of DZ,CI and NBP rats.Scoring,TTC staining was used to observe the cerebral infarction volume of rats in DZ group,CI group and NBP group,HE staining was used to observe the pathological morphology of brain tissue in DZ group,CI group and NBP group.Neuronal apoptosis,Western blot was used to detect the expression of p-JNK and p-p38MAPK in brain tissues of DZ group,CI group and NBP group.Results:The neurological function of the rats in the CI group was higher than that in the DZ group,and the difference was statistically significant(P<0.05).The neurological function score of the rats in the NBP group was reduced compared with the CI group,and the difference was statistically significant(P<0.05).The cerebral infarction volume in the group was 35.56%higher than that in the DZ group,and the difference was statistically significant(P<0.05).The minor infarct volume in the NBP group was 21.59%,which was less than that in the CI group,and the difference was statistically significant(P<0.05).Nerve cells are neatly sorted,with a large number.The gap between blood vessels and interstitial tissue in the CI group is enlarged,the cells are severely contracted,and the neuron structure is incomplete.Compared with the CI group,the NBP group has reduced neuron contraction and increased number;The dead nerve cells were brown.The apoptosis rate of nerve cells in the CI group was 79.65%higher than that in the DZ group was 5.82%.The difference was statistically significant(P<0.05).The nerve cell apoptosis rate in the NBP group was 30.23%.Compared with CI group,the difference was statistically significant(P<0.05);Western blot results showed that p-JNK and p-p38MAPK protein expression in CI group was higher than that in DZ group,and the difference was statistically significant(P<0.05).The levels of p-JNK and p-p38MAPK proteins in the NBP group were lower than those in the CI group.There was statistically significant(P<0.05).Conclusion:Butylphthalide can improve neurological damage,reduce apoptotic nerve cells,and reduce infarct volume in rats with cerebral infarction,which is related to the inhibition of JNK/P38 MAPK pathway expression. 展开更多
关键词 Cerebral infarction BUTYLpHTHALIDE Nerve cells Infarct size jnk/p38 MApK signaling pathway
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培本固疏方对去卵巢大鼠炎性因子、骨生物力学及JNK/p38信号通路的影响 被引量:3
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作者 李佳洋 沈沐瑶 +4 位作者 孙菁 王馨诣 郭海英 徐道明 朱媛媛 《中医药信息》 2021年第6期35-40,共6页
目的:观察培本固疏方对绝经后骨质疏松的治疗作用,探讨其作用机制。方法:36只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、培本固疏方低剂量组(Low)、培本固疏方中剂量组(Medium)、培本固疏方高剂量组(High)与阿仑膦酸钠组(Alen),每... 目的:观察培本固疏方对绝经后骨质疏松的治疗作用,探讨其作用机制。方法:36只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、培本固疏方低剂量组(Low)、培本固疏方中剂量组(Medium)、培本固疏方高剂量组(High)与阿仑膦酸钠组(Alen),每组6只。假手术组仅将卵巢旁脂肪组织切除,其余组通过去卵巢法(OVX)建立大鼠绝经后骨质疏松模型。造模4周后采用灌胃方式开始给药,假手术组与模型组均每日给予生理盐水1 mL/200 g;培本固疏方低、中、高剂量组每日分别给予低、中、高剂量的培本固疏方制剂1 mL/200 g(生药浓度分别为1.0605、2.121、4.242 g/mL);阿仑膦酸钠组给予阿仑膦酸钠溶液1 mL/200 g(浓度为0.21 mg/mL)。干预8周后进行指标检测。骨密度仪检测大鼠腰椎L5的骨密度,三点弯曲试验仪检测左侧股骨屈服载荷、断裂载荷、刚度,HE切片染色观察右侧股骨微结构,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β含量,Western Blot法检测股骨JNK、与股骨p38表达量。结果:和假手术组相比,模型组大鼠L5腰椎骨密度显著减少(P<0.01),左侧股骨的屈服载荷、断裂载荷、刚度均下降(P<0.01),骨微结构破坏,血清TNF-α、IL-1β,骨组织JNK、p38蛋白含量均升高(P<0.01);与模型组比较,中、高剂量及阿仑膦酸钠组骨密度、屈服载荷均显著上升(P<0.01);高剂量组、阿仑膦酸钠组断裂载荷显著上升(P<0.01,P<0.001);中剂量组、阿仑膦酸钠组刚度显著上升(P<0.05)。各干预组骨微结构逐渐好转,血清TNF-α、IL-1β含量均降低(P<0.01),骨组织JNK、p38蛋白含量均降低(P<0.05)。结论:培本固疏方可提高大鼠骨密度,提升骨组织载荷能力、骨刚度,改善骨质疏松病理状态,其机制为通过抑制炎性因子TNF-α、IL-1β分泌,下调JNK/p38信号通路而起到治疗骨质疏松的作用。 展开更多
关键词 培本固疏方 骨质疏松 骨生物力学 炎性因子 c-jun氨基活化激酶 p38丝裂原蛋白活化激酶
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橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及JNK/p38 MAPK信号通路的影响 被引量:11
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作者 徐祖清 王诗洋 +2 位作者 王枭 刘悦 金华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期334-338,共5页
目的研究橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(0.5 mg/kg)及橄榄苦苷高、低剂量组(40、20 mg/kg),每... 目的研究橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(0.5 mg/kg)及橄榄苦苷高、低剂量组(40、20 mg/kg),每组14只。连续灌胃给药14 d,末次给药结束后采用线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型,进行2 h缺血后再灌注24 h,测定神经症状评分、脑梗死面积、脑组织含水量、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关的x蛋白(Bax)mRNA表达及磷酸化的JNK(p-JNK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38)蛋白表达等指标。结果与模型组比较,橄榄苦苷高、低剂量组大鼠神经症状评分、脑梗死面积及橄榄苦苷高剂量组脑组织含水量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,橄榄苦苷高、低剂量组大鼠Caspase-3、Bax mRNA及p-JNK、p-p38蛋白表达均明显降低(P<0.05),而Bcl-2 mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论橄榄苦苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,该作用与抑制JNK/p38 MAPK信号通路的活化进而减少神经元凋亡有关。 展开更多
关键词 橄榄苦苷 脑缺血再灌注损伤 凋亡 c-Jun氨基末端激酶(jnk)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MApK)信号通路
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夏枯草对自身免疫性甲状腺炎大鼠Th相关细胞因子表达及JNK/p38 MAPK信号通路的影响
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作者 尹谢添 赵诗超 +3 位作者 向楠 陈继东 曾明星 周广文 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期588-592,共5页
目的研究夏枯草对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺辅助性T细胞(Th)相关细胞因子γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素17(IL-17)和白细胞介素35(IL-35)的调节作用,和对c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p... 目的研究夏枯草对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺辅助性T细胞(Th)相关细胞因子γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素17(IL-17)和白细胞介素35(IL-35)的调节作用,和对c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法40只SPF级雌性SD大鼠按随机数表分为正常组、模型对照组、夏枯草组和硒酵母组,每组均10只。除正常组外其他组使用高碘水(NaI)喂养联合注射猪甲状腺球蛋白(pTg)与弗氏佐剂(CFA、IFA)诱导AIT大鼠模型,造模后连续灌胃给药4周。实验过程中动态观察大鼠状态,包括一般情况和行为学情况,实验结束后取大鼠血清、甲状腺组织,ELISA检测大鼠甲状腺功能(FT3、FT4、TSH),甲状腺抗体(TPOAb、TGAb)及Th相关细胞因子(INF-γ、IL-10、IL-17、IL-35),HE染色观察大鼠甲状腺病理变化,Western blot检测大鼠甲状腺组织中磷酸化的JNK(P-JNK)、磷酸化的p38 MAPK(P-p38 MAPK)蛋白表达。结果与模型对照组比较,夏枯草及硒酵母组大鼠在体重、摄食量和粪便含水量方面均明显改善(P<0.05),在5min内运动距离、中央穿格次数和中央停留时间方面均明显下降(P<0.05),在淋巴细胞浸润和滤泡破坏上均有明显恢复。与模型对照组比较,夏枯草及硒酵母组大鼠血清FT3、FT4、TPOAb、TGAb、IFN-γ、IL-17水平降低(P<0.05),而TSH、IL-10、IL-35水平升高(P<0.05),甲状腺组织中p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达降低(P<0.05)。结论夏枯草对AIT大鼠甲状腺破坏具有保护作用,该作用与平衡Th相关细胞因子表达,抑制JNK/p38 MAPK信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 夏枯草 自身免疫性甲状腺炎 jnk/p38 MApK信号通路 细胞因子
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对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡、PI3K/Akt和JNK/p38 MAPK信号通路的影响 被引量:4
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作者 林思 秦慧真 +7 位作者 李泽宇 许立拔 邓玲玉 罗静 谢凤凤 张淼 朱华 王孝勋 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期69-76,共8页
目的:探讨对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路的影响。方法:以人肺癌A549细胞为研究对象,设置空白组和不同质量浓度(100、... 目的:探讨对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路的影响。方法:以人肺癌A549细胞为研究对象,设置空白组和不同质量浓度(100、150、200、250、300 mg·L^(-1))对叶百部总生物碱组。利用噻唑蓝(MTT)比色法、平板克隆实验观察对叶百部总生物碱对A549细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法和流式细胞术膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙锭(PI)双染法观察细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)和Bcl-2表达及PI3K、磷酸化(p)-PI3K、Akt、p-Akt、JNK、p-JNK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白的表达。结果:与空白组比较,对叶百部总生物碱组(150、200、250、300 mg·L^(-1))细胞增殖抑制率显著增高(P<0.01);对叶百部总生物碱组(150、200、250、300 mg·L^(-1))细胞克隆抑制率显著升高,细胞克隆形成率显著降低(P<0.01)。与空白组比较,对叶百部总生物碱组细胞出现染色质凝聚,荧光反应加强等典型的细胞凋亡特征。与空白组比较,对叶百部总生物碱组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);对叶百部总生物碱(150、200、250、300 mg·L^(-1))能够明显上调Caspase-3、Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01),显著下调Bcl-2蛋白表达(P<0.01);对叶百部总生物碱对PI3K、Akt、JNK、p38 MAPK总蛋白表达无明显影响,对叶百部总生物碱(150、200、250、300 mg·L^(-1))能够明显下调PI3K、Akt磷酸化水平(P<0.05,P<0.01);明显上调p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05,P<0.01);对叶百部总生物碱(200、250、300 mg·L^(-1))能够明显上调JNK磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱可抑制人肺癌A549细胞的增殖,并能诱导A549细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路和激活JNK/p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 对叶百部总生物碱 肺癌 A549细胞 凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(pI3K/Akt)信号通路 c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(jnk/p38 MApK)信号通路
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基于Akt/JNK/p38 MAPK信号通路探讨健脾活骨方对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用 被引量:1
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作者 王潇潇 何莲花 +7 位作者 方罗昌婷 李群 杨超 胡智星 陈卫衡 刘春芳 韩岚 林娜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期64-71,共8页
目的:观察健脾活骨方(JPHGP)对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用,并基于蛋白激酶B/c-Jun氨基末端激酶/p38 MAPK(Akt/JNK/p38 MAPK)信号通路探索相关作用机制。方法:通过鸡胚尿囊膜实验、胸主动脉环实验和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)... 目的:观察健脾活骨方(JPHGP)对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用,并基于蛋白激酶B/c-Jun氨基末端激酶/p38 MAPK(Akt/JNK/p38 MAPK)信号通路探索相关作用机制。方法:通过鸡胚尿囊膜实验、胸主动脉环实验和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的迁移、侵袭、黏附和管腔形成实验,在有或无酒精诱导条件下,观察JPHGP不同质量浓度8、16、32μg·L^(-1)对血管新生的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HUVEC中Akt、JNK、p38 MAPK等磷酸化表达水平。结果:与正常组比较,模型组动脉环周围微血管数目及长度均减少,HUVEC的迁移、侵袭、和管腔形成能力降低(P<0.05,P<0.01);JPHGP16、32μg·L^(-1)组作用后能明显升高鸡胚尿囊膜新生血管长度(P<0.05,P<0.01),与模型组比较,JPHGP 8、16、32μg·L^(-1)组能浓度依赖地增加胸主动脉环周围微血管数量(P<0.05,P<0.01),JPHGP 32μg·L^(-1)组能升高胸主动脉环周围微血管长度(P<0.05);JPHGP 16、32μg·L^(-1)组均能增强HUVEC的迁移、侵袭、和管腔形成能力。Western blot检测结果表明,与正常组比较,模型组中的p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-Akt/Akt蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,JPHGP 8、16、32μg·L^(-1)组的p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-Akt/Akt蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),JPHGP 16、32μg·L^(-1)组的p-JNK/JNK的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:JPHGP对酒精致血管内皮细胞功能损伤具有保护作用,其机制可能与激活Akt/JNK/p38MAPK信号通路有关,相关研究结果将为JPHGP“健脾活血”功效阐明提供一定的科学依据。 展开更多
关键词 健脾活骨方 人脐静脉内皮细胞 蛋白激酶B/c-Jun氨基末端激酶/p38 MApK(Akt/jnk/p38 MApK)信号通路 血管生成
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