丝裂原活化蛋白激酶ERKs和JNKs在脑缺血损伤中的差异激活及其调控机制(英文)

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶家族 (MAPK)两成员ERK1/2和JNK1/2在全脑缺血损伤中的激活及其可能的分子机制。 方法 采用四动脉结扎模型诱导SD大鼠前脑缺血 ,免疫印迹的方法观察ERK1/2和JNK1/2蛋白激酶特异性Thr和Tyr双位点磷酸化的变化及NMDA受体选择性拮抗剂对其双磷酸化的影响。结果 缺血诱导海马脑区MAPK家族蛋白激酶两成员显著去磷酸化 ,严重缺血 (30min)ERK1/2而不是JNK1/2活性反弹 ;缺血再灌注ERK1/2活性在 15min首先升至最高而JNK1/2 1h后才逐渐升至峰值 (P <0 .0 5 ) ,2 4h再灌注能诱导两者的再次激活 ,且氯胺酮能显著抑制缺血诱导的ERK1/2而不是JNK1/2的激活。 结论 前脑缺血明显诱导ERK1/2和JNK1/2的差异激活 ,提示两者可能分享不同的分子机制 ,其中ERK1/2的激活明显与NMDA受体功能上调有关。

补阳还五汤调控丝裂原活化蛋白激酶信号通路对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的观察补阳还五汤调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢的影响。方法选取Wistar大鼠60只,随机分为空白组、模型组、阳性对照组及补阳还五汤低、中、高剂量组,每组10只。空白组予基础饲料,其余5组大鼠予高脂饲料喂养,制备T2DM模型。造模成功后,补阳还五汤低、中、高剂量组分别予补阳还五汤药液1.6、3.2、6.4 g/kg生药灌胃,阳性对照组予二甲双胍片混悬液0.2 g/kg生药灌胃,空白组、模型组均予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,持续给药12周。比较各组大鼠体质量、饮水量、摄食量和尿量,空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA_(1)c)水平,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;观察各组大鼠肝脏组织病理学变化,MAPK、磷酸化MAPK(p-MAPK)蛋白表达以及肝脏组织MAPK mRNA、成纤维细胞生长因子21(FGF21)mRNA表达。结果补阳还五汤可明显改善T2DM大鼠体质量、12 h饮水量、摄食量、尿量,FPG、FINS、HbA_(1)c水平,TC、TG、LDL-C、HDL-C水平(P<0.05),随着补阳还五汤剂量增加,大鼠体质量递增,12 h饮水量、摄食量、尿量,FPG、FINS、HbA_(1)c水平,TC、TG、LDL-C水平均递减,HDL-C水平递增。补阳还五汤各剂量组大鼠肝脏组织均在不同程度上有明显改善,且高剂量组效果最显著。补阳还五汤可明显改善T2DM大鼠MAPK、p-MAPK蛋白,MAPK mRNA、FGF21 mRNA表达(P<0.05),随着补阳还五汤剂量增加,MAPK、p-MAPK蛋白,MAPK mRNA、FGF21 mRNA表达均递增。结论补阳还五汤可有效改善T2DM大鼠糖脂代谢,其作用机制可能与激活MAPK信号通路有关。

丹参酮ⅡA磺酸钠影响血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大及p-JNK和丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的表达

目的:观察丹参酮ⅡA衍生物-丹参酮ⅡA磺酸钠对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大及p-JNK,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达的影响。方法:实验于2005-11/2006-03于华中科技大学同济医学院实验中心完成。取1d龄新生清洁级Wistar乳鼠10只,雌雄不拘,取心室肌组织分离培养新生大鼠心肌细胞,将细胞均匀地接种于6孔培养板,每孔2mL。第3天将培养的细胞分为5组,即对照组,血管紧张素Ⅱ组,丹参酮ⅡA磺酸钠2,10,50μmol/L组,分别给予相应药物。对照组给予生理盐水,其余各组均给予血管紧张素Ⅱ1μmol/L进行心肌细胞肥大诱导,在此基础上,丹参酮ⅡA磺酸钠2,10,50μmol/L组再分别给予相应浓度的丹参酮ⅡA磺酸钠,以上浓度为培养基内终浓度。采用考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量;采用[3H]-亮氨酸掺入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;用Western-blot测定p-JNK,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达。观察各组心肌细胞总蛋白质含量、[3H]-亮氨酸掺入测定结果、p-JNK,MKP-1蛋白表达。结果:①用刺激因素处理24h后,2,10,50μmol/L丹参酮ⅡA磺酸钠组总蛋白含量明显低于血管紧张素Ⅱ组[(65.38±1.26),(53.41±3.63),(48.42±2.61),(80.42±3.28)μg/孔,P<0.05～0.01]。②1μmol/L血管紧张素Ⅱ作用24h后,2,10,50μmol/L丹参酮ⅡA磺酸钠组心肌细胞合成速率显著低于血管紧张素Ⅱ组[(140.52±12.04)%,(120.58±8.72)%,(111.88±10.06)%,(163.04±11.38)%,P<0.01]。③1μmol/L血管紧张素Ⅱ作用24h后,2,10,50μmol/L丹参酮ⅡA磺酸钠组p-JNK蛋白表达显著低于血管紧张素Ⅱ组[(145.96±11.98)%,(133.04±6.54)%,(116.56±11.61)%,(167.04±12.72)%,P<0.05～0.01]。④丹参酮ⅡA磺酸钠(10μmol/L)显著上调丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达,在40min时达到高峰达(132.16±7.88)%,随后下降,在60,80min分别为(110.72±10.94)%,(104.32±9.55)%,(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,机制可能与上调丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达,降低p-JNK表达有关。

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与子宫内膜异位症关系的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是子宫内膜腺体和基质种植于子宫腔以外的雌激素依赖性疾病,系育龄妇女常见病。异位内膜的侵袭性种植是一个多因素参与的复杂过程,涉及多条信号转导通路,其中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路起了非常重要的作用。MAPK信号通路与雌激素受体(estrogen receptor,ER)调控关系密切,两者的相互作用在促异位内膜细胞增殖、促炎症因子生成和促血管生成方面均起了重要作用。就MAPK信号通路与EMs的关系作一综述,为更好地理解EMs的发病机制提供新的思路。

芪桂益脉灵对大鼠心肌缺血再灌注损伤基质金属蛋白酶9及c-Jun氨基末端蛋白激酶表达的影响

目的观察芪桂益脉灵对大鼠心肌缺血再灌注损伤基质金属蛋白酶9(MMP-9)和c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)信号通路的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为空白组(N)、假手术组(Sham)、单纯缺血再灌注组(I/R)、芪桂益脉灵高剂量组(QGYMLH)、芪桂益脉灵低剂量组(QGYML),每组10只,分别给予0.9%氯化钠注射液、芪桂益脉灵(高、低剂量),连续灌服7 d,结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,腹主动脉采血,离心取上层血清,采用酶联免疫法检测MMP-9的表达;取心肌组织,用中性福尔马林固定,应用免疫组化法检测磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶(P-JNK)表达。结果 Sham组MMP-9、P-JNK表达水平与N组比较差异无统计学意义(P>0.05);I/R组、QGYMLL组、QGYMLH组MMP-9、P-JNK表达水平均高于N组(P<0.05);QGYML组、QGYMLH组MMP-9、P-JNK表达水平均低于I/R组(P<0.05);QGYMLH组MMP-9、P-JNK表达水平低于QGYMLL组(P<0.05)。结论芪桂益脉灵对缺血再灌注损伤心肌具有保护作用,其机制与抑制心肌组织中JNK磷酸化程度及MMP-9表达有关,且与中药剂量相关。

Egb761对大鼠局灶脑缺血/再灌注诱导JNK1/2活化的影响

目的观察大鼠局灶性脑缺血/再灌注后丝裂原活化蛋白激酶家族中JNK1/2(c-Jun氨基末端激酶1/2)的活化情况以及银杏叶提取物Egb761对其影响。方法雄性成年SD大鼠随机分成3组(n=5):假手术组、生理盐水对照组和Egb761组。分别于缺血前6天每天用生理盐水4 m l和Egb761 150 mg/kg(Egb761用4 m l生理盐水溶解)灌胃。采用线栓法致大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,在脑缺血再灌注后处死大鼠,对缺血侧海马进行免疫印迹法检测JNK1/2磷酸化水平。结果局灶脑缺血/再灌注可以诱导JNK1/2激活,30 m in达第1个高峰,3天达第2个高峰;Egb761可显著抑制脑缺血再灌注后JNK1/2的激活(P<0.05),JNK1/2的蛋白表达量在以上不同处理条件下没有明显变化。结论局灶性脑缺血再灌注可诱导缺血侧海马JNK1/2活化,Egb761干预可使缺血侧海马JNK1/2活化受到抑制,减轻缺血侧海马的损伤。

朝医麻黄定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织中p38蛋白激酶表达的影响

[目的]探讨朝医麻黄定喘汤对支气管哮喘模型小鼠肺组织中p38蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响.[方法]应用卵清蛋白腹腔注射致敏和反复超声雾化吸入方法刺激复制小鼠哮喘模型,随机分成正常对照组、哮喘模型组和麻黄定喘汤小、大剂量组.分别采用酶联免疫吸附法和蛋白质印迹法检测支气管肺泡灌洗液中的嗜酸性粒细胞总数(EOS)、白细胞介素5(IL-5)含量和肺组织磷酸化p38MAPK表达的变化.[结果]朝医麻黄定喘汤小、大剂量组小鼠肺组织磷酸化p38MAPK表达水平、IL-5含量及EOS计数均较哮喘模型组显著降低(P<0.05),而且p38MAPK表达水平与IL-5含量和EOS计数呈正相关.[结论]朝医麻黄定喘汤可能通过p38MAPK信号转导途径对哮喘起治疗作用.

帕金森病与丝裂原活化蛋白激酶信号通路的相关性及中医药干预作用

帕金森病(PD)是一种进行性多系统神经退行性疾病,其中黑质多巴胺能神经元丧失是其重要的病理改变。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路能调节细胞的生长、分化、凋亡、炎症等多种生理病理过程,近年来其已成为PD机制研究的热点。本文主要综述了PD与MAPK亚家族〔p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和细胞外信号调节激酶(ERK)〕的相关性及中医药干预作用,以期为PD的诊疗提供新的思路。

IGF-1对大鼠缺血、缺氧神经元p-JNK及p-P38表达的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对缺血、缺氧大鼠脑皮质神经元凋亡的保护作用及作用机制。方法原代培养新生大鼠脑皮质神经元,建立缺血、缺氧细胞模型,观察IGF-1及IGF-1受体抑制剂(AG1024)对该模型细胞存活率(MTT试验)、细胞凋亡(流式细胞法)、JNK、P38表达(Western blot法)和Caspase-3活性(荧光测定法)的影响。结果 IGF-1(HII组)及AG1024(HIIA组)干预细胞模型24h后,模型细胞存活率分别为(77.00±3.80)%、(62.00±4.40)%;凋亡率分别达到14.58%、24.97%。IGF-1组可明显抑制p-JNK及p-P38的表达及Caspase-3的活性。结论 IGF-1对缺血、缺氧神经元损伤有一定的保护作用,并通过调控p-JNK、p-P38及Caspase-3的表达抑制缺血、缺氧神经元的凋亡。

JNK磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法 20只大鼠均分为4组:假手术组、缺血复灌组、SP600125组和溶剂对照组。制作大鼠全脑缺血模型,应用免疫沉淀和免疫印迹法检测4组大鼠脑缺血复灌12 h海马CA1区神经元14-3-3磷酸化(p-14-3-3)、14-3-3与Bax结合、Bax在胞浆和线粒体的蛋白表达情况。结果与假手术组相比,缺血复灌组、溶剂对照组及SP600125组胞浆中的p-14-3-3蛋白、线粒体中的Bax蛋白均增高,14-3-3与Bax的结合降低,SP600125组的胞浆p-14-3-3蛋白、线粒体Bax蛋白低于缺血复灌组和溶剂对照组,14-3-3与Bax的结合高于缺血复灌组和溶剂对照组(均P<0.05)。结论 JNK磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号转导通路在脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion,I/R)中的作用及机制。方法将大鼠随机分为6组:未使用p38MAPK抑制剂SB203580的假手术组(Sham组)、使用抑制剂的假手术组(Sham/SB组)、未使用抑制剂再灌注24 h组(I/R 24 h组)、未使用抑制剂再灌注48 h组(I/R 48 h组)、使用抑制剂再灌注24 h组(SB 24 h组)和使用抑制剂再灌注48 h组(SB 48 h组)。采用大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,使用抑制剂的各组于造模前30 min经腹腔注射SB203580(5 mg/kg,溶于5 mg/ml DMSO)。采用免疫荧光双标法检测大鼠大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)和脑微血管(microvascular,Mic.V)周围IgG的渗出;Western blot和RT-PCR法检测大鼠脑组织中p38、一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)、胶原Ⅳ型(collagenⅣ)蛋白和基因表达的变化。结果随着再灌注时间的延长,大鼠脑血管内IgG渗出量增加(P<0.01);经p38MAPK抑制剂预处理后,IgG的渗出程度有所减轻。脑缺血再灌注后,大鼠脑组织中p38、iNOS、MMP-9蛋白的表达水平和基因mRNA的转录水平均明显升高(P<0.05),经p38MAPK抑制剂预处理后,能显著抑制p38、iNos、MMP-9蛋白的表达水平和基因mRNA的转录水平(P<0.05);collagenⅣ蛋白的表达水平和基因mRNA的转录水平随着缺血时间的延长而逐渐下降(P<0.05),经p38MAPK抑制剂预处理后,其下降程度有所减轻(P<0.05)。结论 MAPK通路中的关键蛋白p38、iNOS、MMP-9在脑缺血时表达显著增加,其过度表达直接导致血脑屏障的破坏,抑制其表达,从而遏制对血脑屏障的破坏,有望为I/R的治疗提供新的途径。

JNK信号通路介导ghrelin对乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药蛋白表达的影响

目的探讨ghrelin调控c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号转导通路对乳腺癌细胞P-糖蛋白表达的影响。方法培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,分别加入生长激素释放肽(ghrelin,100 nmol/L,干预72小时)、多柔比星(0.8 mg/L,干预72小时)、ghrelin联合多柔比星(ghrelin 100 nmol/L,多柔比星0.8 mg/L,干预72小时)。采用MTT方法检测细胞增殖,Western blot法检测细胞JNK、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达及p-JNK水平。结果 MTT检测显示,人乳腺癌MDA-MB-231细胞在ghrelin的干预下增殖(P<0.01),存活率在多柔比星的干预下降低(P<0.01),ghrelin联合多柔比星能够抑制多柔比星对MDA-MB-231细胞的杀伤作用(P<0.01)。ghrelin组JNK表达及p-JNK水平上升(均P<0.01),且P-gp蛋白表达上升(P<0.05);多柔比星组JNK表达及p-JNK水平下降(均P<0.01);ghrelin联合多柔比星较多柔比星组JNK表达及p-JNK水平增加,且P-gp表达明显上升(均P<0.05)。结论 ghrelin激活JNK信号通路干预乳腺癌细胞P-gp表达增加从而抑制多柔比星诱导乳腺癌细胞凋亡。

大鼠缺血半暗带区神经元凋亡与磷酸化C-Jun氨基末端激酶及原癌基因c-Myc表达的相关性

目的观察大鼠永久性局灶脑缺血皮质缺血半暗带区(IP)磷酸化应激活化激酶/C-Jun氨基末端激酶(P-SAPK/JNK)及原癌基因c-Myc mRNA转录的表达情况,探讨IP区神经细胞凋亡的可能机制。方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠72只,随机分为假手术组和永久性大脑中动脉阻塞(pMCAO)后1、3、6、12、24 h组,每组12只。线栓法制备大鼠pMCAO模型,提取缺血不同时间点大鼠脑皮质IP区的组织。应用原位细胞凋亡(TUNEL)检测法分析IP区皮质神经元的凋亡情况,采用免疫组织化学法分析脑缺血后P-SAPK/JNK细胞的表达情况,采用Western-blot检测P-SAPK/JNK蛋白含量;采用实时定量PCR技术检测c-Myc mRNA的转录水平。结果①大鼠pMCAO后3 h,IP区TUNEL阳性细胞和P-SAPK/JNK阳性细胞均明显增加,12 h达高峰,与假手术组比较,差异有统计学意义,P<0.01。②Western-blot结果证明,大鼠pMCAO后3 h,P-SAPK/JNK蛋白水平增加,12 h达高峰,各时间点与假手术组比较,差异有统计学意义,P<0.01。③实时定量PCR结果表明,大鼠pMCAO后6 h,IP区c-Myc mRNA的转录水平明显上调,12 h达高峰,均高于假手术组,差异有统计学意义,P<0.01。④IP区皮质P-SAPK/JNK蛋白水平与神经元凋亡及c-Myc mRNA转录水平均呈正相关系(r=0.985,P<0.01;r=0.887,P<0.05)。结论 pMCAO模型IP区神经元的凋亡可能与JNK/c-Myc信号通路的激活有关。

JNK磷酸化Bad在脑缺血神经元凋亡中的作用

目的探讨JNK磷酸化Bad在大鼠缺血性神经元凋亡中的作用。方法 20只大鼠均分为4组:假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SP600125组。制作大鼠全脑缺血模型,应用免疫沉淀和免疫印迹法检测大鼠脑缺血复灌1 d海马CA1区神经元Bad与14-3-3及Bad与Bcl-Xl的结合、Bad丝氨酸128位磷酸化[p-Bad(S128)]水平、Caspase-3蛋白表达情况。结果与缺血复灌组相比,SP600125组海马CA1区神经元Bad与14-3-3的结合明显增高,Bad与Bcl-Xl的结合、p-Bad(S128)、Caspase-3表达显著减少(均P<0.05)。结论 JNK介导的Bad(S128)磷酸化在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。

沙利度胺对肺纤维化大鼠肺组织中c-jun氨基末端激酶及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响及意义

目的观察沙利度胺在大鼠肺纤维化中的干预作用及对磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,进一步分析沙利度胺在肺纤维化过程中可能的作用机制。方法将54只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、沙利度胺组,每组各18只,于气管内滴注博莱霉素注射液制备肺纤维化模型,对照组给予气管内滴注0.9%氯化钠注射液。沙利度胺组于造模当日起给予沙利度胺(100mg/kg)灌胃,对照组和模型组给予等量0.9%氯化钠注射液,每日1次。各组分别于第7、14、28天随机处死6只大鼠,取肺组织行苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色,碱水解法测大鼠肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组织化学法测肺组织中p-JNK蛋白及α-SMA的表达。结果模型组第7天时肺泡炎症明显,第28天时可见明显纤维化改变;随着时间的推移,羟脯氨酸含量呈逐渐上升趋势,第28天时含量最高;p-JNK蛋白及α-SMA的表达较对照组明显增加。沙利度胺组与模型组比较,肺泡炎症及纤维化程度均有所减轻;第14、28天时Hyp含量有所降低,p-JNK蛋白及α-SMA的表达有所减少(P<0.05);模型组α-SMA与p-JNK蛋白含量呈正相关。结论沙利度胺可减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的程度,其机制可能是通过抑制p-JNK蛋白的活化及α-SMA的表达实现的。

磷酸化c-jun氨基末端激酶蛋白和α-平滑肌肌动蛋白在肺纤维化大鼠中的表达及意义

目的观察肺纤维化大鼠中磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,进一步分析JNK信号通路在该病理生理过程中的作用。方法将54只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和SP600125组。气管内注入博莱霉素制备肺纤维化模型,于造模当日起,各组给予相应药物,分别于第7、14、28天处死大鼠,取肺组织行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察大鼠肺组织病理学变化;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量;应用免疫组织化学法检测肺组织中p-JNK和α-SMA的蛋白表达水平。结果模型组第7天肺泡炎程度最严重,于第28天形成显著肺纤维化,Hyp含量于第28天达高峰,其p-JNK、α-SMA的含量与对照组比较均明显升高;SP600125组各时间点肺泡炎和纤维化程度低于模型组,且Hyp、p-JNK、α-SMA的含量亦低于模型组;模型组α-SMA与p-JNK蛋白含量呈显著正相关。结论肺纤维化病理过程可能与p-JNK表达增加并活化α-SMA的表达有关,应用SP600125对肺纤维化有抑制作用。

一氧化碳中毒后迟发性脑病患者S100β、JNK通路蛋白及相关细胞因子水平变化及其临床意义

目的探讨急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning,DEACMP)患者脑脊液中S100β、Jun氨基末端激酶(jun amino-terminal kinase,JNK)通路蛋白、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-10、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)及干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的变化及其临床意义。方法选取2010-01—2016-12作者医院收治的DEACMP患者20例(DEACMP组),另收集同期发生一氧化碳中毒但未发生迟发性脑病的患者37例作为对照组,检测两组患者入院后第2天脑脊液中S100β、JNK通路蛋白(JNK1、JNK2)及TNF-ɑ、IL-4、IL-10、TGF-β1、IFN-γ水平,并于治疗2周后对两组患者进行简易精神状态量表(mini-mental state examination,MMSE)评分,分析脑脊液S100β蛋白、JNK通路蛋白及相关细胞因子与MMSE评分的相关性。结果DEACMP组脑脊液中S100β、JNK1、JNK2、TNF-ɑ、IFN-γ水平均高于对照组(P<0.05),而IL-4、IL-10、TGF-β1水平及MMSE评分均低于对照组(P<0.05)。DEACMP组患者MMSE评分与患者脑脊液中S100β、JNK1、JNK2、TNF-ɑ、IFN-γ水平呈负相关(P<0.05),与IL-4、IL-10、TGF-β1水平呈正相关(P<0.05)。结论 DEACMP患者脑脊液中S100β、JNK通路蛋白及相关细胞因子发生明显改变,且其水平与患者恢复期认知功能损害有关。

氯化镉对大鼠肾上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶表达及其磷酸化的影响

目的 探讨氯化镉染毒大鼠正常肾上皮（normal rat kidney epithelial,NRK）细胞对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）表达及其磷酸化水平的影响.方法 应用不同剂量（0、1、5、10、20、40 μmol/L）氯化镉染毒NRK细胞24 h和同一剂量氯化镉（10 μmol/L）于不同时间（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h）染毒NRK肾细胞.采用蛋白免疫印迹法检测氯化镉染毒后NRK细胞中MAPK表达水平,并用磷酸化抗体检测MAPK磷酸化水平.结果 不同氯化镉剂量和不同染毒时间染毒NRK细胞,发现MAPK表达无明显改变,但MAPK磷酸化蛋白表达量较对照组升高.氯化镉浓度在10 μmol/L时p-ERK1/2表达明显,表达量为1. 00±0.06;20 μmol/L和40 μmol/L剂量组表达量分别为2.58±0.11、2.76±0.23,比10 μmol/L组高1.58倍和1.76倍,差异有统计学意义（F=827.70,P＜0.01）;氯化镉浓度为20 μmol/L（2.47±0.20）和40 μmol/L（3.73±0.25）时p-p38MAPK表达量比对照组（1.00±0.02）高1.47倍和2.73倍,差异有统计学意义（F=280.06,P＜0.01）.p-ERK1/2和p-p38MAPK表达量与氯化镉浓度存在剂量-效应关系（p-ERK1/2相关系数为r=0.919,t=4.69,P=0.009;p-p38MAPK相关系数为r=0.945,t=5.79,P=0.004）.MAPK磷酸化蛋白表达水平也与染毒时间相关,p-ERK1/2在染毒1 h（1.26±0.11）时表达明显,染毒4 h（1.51±0.07）和8 h（3.53±0.23）时表达量是对照组（1.00±0.02）的1.5倍和3.5倍,差异有统计学意义（F=427.82,P＜0.001）;p-p38MAPK在染毒1 h（1.31±0.07）时表达也明显增加,染毒4 h（3.53±0.32）和8 h（4.41±0.38）时表达水平是对照组（1.00±0.03）的3.5倍和4.4倍,差异有统计学意义（F=280.06,P＜0.001）.结论 氯化镉染毒NRK细胞可引起MAPK蛋白磷酸化水平明显升高,可能与MAPK的激活有关.

磷酸化c—Jun氨基末端激酶和P38丝裂原活化蛋白激酶在寻常性银屑病皮损中的表达

目的探讨磷酸化c—Jun氨基末端激酶（p—JNK）和P38丝裂原活化蛋白激酶（p—P38MAPK）在寻常性银屑病皮损中的表达。方法收集30例确诊的寻常性银屑病患者皮损，同时收集30例健康人皮肤组织作为对照组。采用免疫组化及Western印迹法分别检测p-JNK和p-P38MAPK蛋白在寻常性银屑病皮损组织和正常人皮肤中的表达情况。结果免疫组化结果显示，寻常性银屑病皮损组织p-JNK和p-P38MAPK表达的平均吸光度（AOD）值分别为0．663±0．016和0．436±0．011，均明显高于对照组（0．333±0．009和0．306±0．010），差异有统计学意义（t=44．869、21．913，均P〈0．001）。Western印迹法同样显示，寻常性银屑病皮损p-JNK和p-P38MAPK蛋白相对表达量均显著高于对照组，差异均有统计学意义（t值分别为20．477和165．084，均P〈0．05）。结论JNK和P38MAPK的活化可能参与了寻常性银屑病表皮细胞的过度增殖。

丝裂原活化蛋白激酶激酶-4在骨肉瘤中表达的意义

目的 检测丝裂原活化蛋白激酶激酶-4（MKK4）在骨肉瘤中的表达,探讨MKK4与骨肉瘤发生发展及其预后的关系.方法 应用免疫组织化学法检测骨肉瘤标本30例中MKK4蛋白的表达.结果 MKK4在骨肉瘤细胞核和细胞质中的表达明显,MKK4在骨肉瘤细胞质的表达与临床分期成正相关（r=0.72,P =0.000）,MKK4在骨肉瘤细胞核中的表达与临床分期无相关性（r=0.44,P=0.080）;MKK4在有转移的骨肉瘤细胞质中的表达明显高于无转移的骨肉瘤（χ^2=9.69,P＜0.01）,而在细胞核中中表达差异无统计学意义（χ^2=1.00,P=1.000）.结论 MKK4在骨肉瘤细胞质和细胞核中表达明显,提示MKK4对骨肉瘤的发生发展可能有促进作用;MKK4在细胞质中的表达强度与骨肉瘤的恶性程度、转移及预后有关,可能可作为一个潜在的判断骨肉瘤预后的指标之一.