抗氧化治疗对急性重症胰腺炎大鼠的效果及JNK活化的影响

目的探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸对急性重症胰腺炎大鼠的疗效及JNK信号通路活化的影响。方法选择清洁级C57BL/6雄性SD大鼠56只,随机分为空白对照组8只,开腹后仅翻动胰腺,不做任何处理,然后立即关腹;胰腺炎组24只,采用10%的L-精氨酸腹腔注射法诱导大鼠急性重症胰腺炎模型;治疗组24只,于模型制备前30 min内腹腔注射5%的N-乙酰半胱氨酸(200 mg/kg)进行预处理,然后再进行急性重症胰腺炎大鼠模型制备;胰腺炎组和治疗组选取3、6、12 h 3个时间点各8只分为3个小组,观察各组大鼠血清胰淀粉酶、病理学改变、组织中磷酸化c-jun蛋白水平、丙二醛含量TNF-α、IL-6的变化。结果胰腺炎组大鼠各时间点的各项指标明显高于空白对照组;治疗组大鼠3、6 h血浆IL-6水平明显低于胰腺炎组,6、12 h胰腺组织病理学评分均明显低于胰腺炎组,其余各指标明显低于胰腺炎组(P<0.05)。结论急性重症胰腺炎大鼠血清胰淀粉酶、病理学及相关指标均发生了明显的改变,N-乙酰半胱氨酸通过清除氧自由基、减少TNF-α和IL-6的产生等机制对急性重症胰腺炎大鼠发挥治疗和保护作用,还通过改变组织中磷酸化c-jun蛋白水平来影响JNK信号通路的活化。

丹参酮ⅡA磺酸钠影响血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大及p-JNK和丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的表达

目的:观察丹参酮ⅡA衍生物-丹参酮ⅡA磺酸钠对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大及p-JNK,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达的影响。方法:实验于2005-11/2006-03于华中科技大学同济医学院实验中心完成。取1d龄新生清洁级Wistar乳鼠10只,雌雄不拘,取心室肌组织分离培养新生大鼠心肌细胞,将细胞均匀地接种于6孔培养板,每孔2mL。第3天将培养的细胞分为5组,即对照组,血管紧张素Ⅱ组,丹参酮ⅡA磺酸钠2,10,50μmol/L组,分别给予相应药物。对照组给予生理盐水,其余各组均给予血管紧张素Ⅱ1μmol/L进行心肌细胞肥大诱导,在此基础上,丹参酮ⅡA磺酸钠2,10,50μmol/L组再分别给予相应浓度的丹参酮ⅡA磺酸钠,以上浓度为培养基内终浓度。采用考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量;采用[3H]-亮氨酸掺入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;用Western-blot测定p-JNK,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达。观察各组心肌细胞总蛋白质含量、[3H]-亮氨酸掺入测定结果、p-JNK,MKP-1蛋白表达。结果:①用刺激因素处理24h后,2,10,50μmol/L丹参酮ⅡA磺酸钠组总蛋白含量明显低于血管紧张素Ⅱ组[(65.38±1.26),(53.41±3.63),(48.42±2.61),(80.42±3.28)μg/孔,P<0.05～0.01]。②1μmol/L血管紧张素Ⅱ作用24h后,2,10,50μmol/L丹参酮ⅡA磺酸钠组心肌细胞合成速率显著低于血管紧张素Ⅱ组[(140.52±12.04)%,(120.58±8.72)%,(111.88±10.06)%,(163.04±11.38)%,P<0.01]。③1μmol/L血管紧张素Ⅱ作用24h后,2,10,50μmol/L丹参酮ⅡA磺酸钠组p-JNK蛋白表达显著低于血管紧张素Ⅱ组[(145.96±11.98)%,(133.04±6.54)%,(116.56±11.61)%,(167.04±12.72)%,P<0.05～0.01]。④丹参酮ⅡA磺酸钠(10μmol/L)显著上调丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达,在40min时达到高峰达(132.16±7.88)%,随后下降,在60,80min分别为(110.72±10.94)%,(104.32±9.55)%,(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,机制可能与上调丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1表达,降低p-JNK表达有关。

姜黄素对挤压综合征大鼠肾损伤及JNK信号通路活化抑制作用的实验研究

目的:观察姜黄素对挤压综合征大鼠肾损伤和JNK信号通路活化的抑制作用。方法:重物挤压建立大鼠挤压综合征模型,实验分为正常组、模型组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组,造模前2 h腹腔注射给药,观察各组大鼠肾组织及肌肉组织的病理变化,在造模6、12、24 h分别检测肾功指标(BUN、SCr),Western blot法检测各组大鼠肾组织JNK信号通路活化水平。结果:除正常组外,其余各组大鼠均可见肌肉和肾脏损伤,姜黄素组损伤较模型组为轻。与正常组比较,各造模组血清BUN、SCr水平明显升高(P<0.05),肾组织p-JNK表达明显增强(P<0.05),随挤压伤时间延长呈加重趋势;姜黄素组血清BUN、SCr水平较模型组降低(P<0.05),肾组织p-JNK表达明显减弱(P<0.05),高剂量组效果更显著。结论:姜黄素可以有效地减轻挤压综合征大鼠肾损伤,抑制肾组织JNK信号通路活化。

小鼠皮肤切创愈合过程中p-JNK变化及其与时间的相关性

目的探讨小鼠皮肤切创愈合过程中损伤区磷酸化JNK(p-JNK)的变化及不同损伤时间p-JNK的变化规律。方法应用免疫组织化学和Westernblot方法检测小鼠皮肤切创后各个时间段p-JNK的变化情况。结果正常组织中有少量p-JNK阳性着色。伤后3～12h损伤区p-JNK阳性着色主要在中性粒细胞,1～5dp-JNK阳性着色主要为单核细胞和成纤维细胞,7～14dp-JNK阳性着色以成纤维细胞为主。阳性细胞率3h～1d逐渐增高,1d达到峰值,3～5d有所下降,7d阳性细胞率达第二峰值,10～14d逐渐降低。Westernblot显示各个时间段均有p-JNK的阳性条带,其中12h和3d为p-JNK含量的2个高峰。结论小鼠皮肤切创愈合过程中p-JNK在损伤区对诱导中性粒细胞、单核细胞和成纤维细胞的凋亡起非常重要的作用,同时p-JNK的规律性变化可用于损伤时间推断。

绿原酸抑制JNK信号通路对非酒精性脂肪性肝病的防治作用

目的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)与胰岛素抵抗密切相关。绿原酸(CG)能调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗。探讨CG在NAFLD中的作用及其可能的分子基础。方法选取30只SD大鼠,随机分为正常饮食组(NG组)、高脂饮食组(HG组)和绿原酸干预组(CG组)。所有大鼠第1周采用普通饲料适应性喂养,第2周开始NG组喂饲普通饲料,HG组和CG组喂饲高脂饮食。第4周起NG组、HG组给予每周3次生理盐水灌胃,CG组给予每周3次灌胃CG。采用全自动生化仪和放射免疫法检测血清生化指标,采用全波长分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(FFA)。正常血糖高胰岛素钳夹试验技术测定胰岛素抵抗。Western Blot检测自噬及C-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。相关分析采用Pearson相关性分析。结果与NG组相比,HG组体质量、肝指数、肝湿重、ALT、AST、TG、TC、TNFα及肝匀浆MDA、FFA均明显升高,而SOD明显低于NG组(P值均<0.05)。HG组与NG组相比,p-JNK1和JNK1的蛋白及自噬相关LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Atg3和Atg5蛋白水平升高(P值均<0.05)。且JNK1蛋白的表达与胰岛素抵抗呈正相关。CG组体质量、肝湿重及肝指数显著低于HG组;ALT、AST、TG、TC、TNFα及肝匀浆MDA、FFA比HG组均明显降低,SOD高于HG组;LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Atg3、Atg5表达均显著低于HG组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 CG在NAFLD大鼠模型中通过JNK途径失活抑制自噬来改善肝损伤和胰岛素抵抗,CG可能为治疗NAFLD的潜在手段。

JNK通路及HSP70在热化疗抑制人小细胞肺癌细胞生长中的作用

目的:研究热化疗对小细胞肺癌生长的影响及其可能的机制。方法:参考临床常用剂量,采用43℃加热联合120μg/L紫杉醇(热化联合组)、43℃加热联合120μg/L紫杉醇及20μmol/LJNK特异抑制剂SP600125(热化联合+SP600125组)、单纯43℃加热(单纯热疗组)、单纯使用120μg/L紫杉醇(单纯化疗组)处理H446细胞,以未处理的H446细胞作对照。应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测各处理方式下细胞增殖率的变化,通过Western印迹法检测JNK、磷酸化JNK(p-JNK)和HSP70的表达并对数据进行统计学分析。结果:热化联合组细胞增殖率低于对照组、单纯化疗、单纯热疗及热化联合+SP600125组(P<0.05);p-JNK表达水平在热化联合组中表达明显增高(P<0.05),但SP600125可抑制其表达,使热化联合+SP600125组细胞的增殖率相应增高(P<0.05);HSP70在热化联合组的表达低于单纯热疗组(P<0.05),细胞增殖率也发生了相应变化。结论:热疗可以明显增加紫杉醇对H446细胞生长的抑制作用,且这种作用可能是通过激活JNK信号转导通路或抑制HSP70的表达完成的。

丹蛭降糖胶囊联合运动对糖尿病大鼠胰腺JNK信号通路的影响

目的:观察丹蛭降糖胶囊联合运动对糖尿病大鼠胰腺c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路的影响,探讨其治疗糖尿病的可能机制。方法:雄性Wistar大鼠78只,用小剂量链脲佐菌素联合高脂饲料的方法建立糖尿病大鼠模型,并将造模成功的60只大鼠分为模型组、运动组、丹蛭降糖胶囊组及运动联合丹蛭降糖胶囊组;另取12只大鼠作为正常对照。治疗8周后,用免疫组织化学法、蛋白质印迹法检测大鼠胰腺组织中磷酸化JNK(phospho-JNK,p-JNK)、胰腺十二指肠同源异型盒基因1(pancreatic and duodenal homeobox-1,PDX-1)及胰岛素的表达水平。结果:模型组胰腺组织中的p-JNK表达水平明显高于正常对照组(P<0.01),而PDX-1和胰岛素含量则明显低于正常对照组(P<0.01);给予中药、运动干预能明显抑制JNK的活性,提高PDX-1和胰岛素的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:运动及丹蛭降糖胶囊联用可能是通过抑制糖尿病大鼠JNK信号通路,对糖尿病胰岛β细胞起保护作用。

JNK在氢气改善重度脓毒症小鼠肠屏障功能障碍中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)在氢气改善重度脓毒症小鼠肠屏障功能障碍中的作用。方法将80只雄性ICR小鼠按照随机数字表法分为假手术组、氢气对照组、脓毒症组和氢气治疗组,每组20只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备重度脓毒症小鼠模型,假手术组和氢气对照组只进行开腹手术而不行盲肠结扎和穿孔。氢气对照组和氢气治疗组于制模后1 h和6 h分别吸入2%的氢气1 h。于制模后20 h时各组取10只,向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FITC-右旋糖酐),4 h后经心脏穿刺取血并测定血清FITC-右旋糖酐水平。于制模后24 h各组取10只,取腹腔液进行细菌培养并计数菌落形成单位(CFU);取中段小肠组织,采用酶联免疫吸附试验测定肠组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平,采用蛋白免疫印迹法测定肠组织JNK的磷酸化水平(p-JNK)以及紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达,利用光学显微镜和透射电镜分别观察肠组织病理学改变和肠上皮细胞超微结构的变化。结果假手术组和氢气对照组各指标差异均无统计学意义。与假手术组比较,脓毒症组血清FITC-右旋糖酐、腹腔液细菌培养菌CFU和小肠组织TNF-α、IL-1β和HMGB1明显增加,小肠组织p-JNK表达明显增加并伴随ZO-1和Occludin表达下调(均P<0.05),小肠组织明显损伤伴肠上皮细胞超微结构严重受损。与脓毒症组比较,氢气治疗组制模后24 h时血清FITC-右旋糖酐、腹腔液细菌培养CFU和小肠组织TNF-α、IL-1β和HMGB1明显降低,小肠组织p-JNK表达下调并伴随ZO-1和Occludin表达增加(均P<0.05),小肠组织损伤和肠上皮细胞超微结构受损明显减轻。结论氢气可以通过抑制JNK通路降低小肠组织炎症因子的水平并增加紧密连接蛋白的表达,从而改善重度脓毒症引起的肠屏障功能障碍。

IGF-1对大鼠缺血、缺氧神经元p-JNK及p-P38表达的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对缺血、缺氧大鼠脑皮质神经元凋亡的保护作用及作用机制。方法原代培养新生大鼠脑皮质神经元,建立缺血、缺氧细胞模型,观察IGF-1及IGF-1受体抑制剂(AG1024)对该模型细胞存活率(MTT试验)、细胞凋亡(流式细胞法)、JNK、P38表达(Western blot法)和Caspase-3活性(荧光测定法)的影响。结果 IGF-1(HII组)及AG1024(HIIA组)干预细胞模型24h后,模型细胞存活率分别为(77.00±3.80)%、(62.00±4.40)%;凋亡率分别达到14.58%、24.97%。IGF-1组可明显抑制p-JNK及p-P38的表达及Caspase-3的活性。结论 IGF-1对缺血、缺氧神经元损伤有一定的保护作用,并通过调控p-JNK、p-P38及Caspase-3的表达抑制缺血、缺氧神经元的凋亡。

皮肤烧伤愈合过程中磷酸化JNK的变化

目的观察烧伤后人皮肤磷酸化JNK(p-JNK)的变化特点,初步探讨烧伤后创面愈合的分子机制。方法取12例烧伤后住院植皮患者的烧伤周边区皮肤为烧伤周边皮肤组;另取正常皮肤12例为正常皮肤组。应用免疫组织化学方法和常规HE染色检测p-JNK在皮肤烧伤周边区和正常皮肤组织中的变化情况。结果正常皮肤组织中表皮基底层细胞的胞浆和胞核内有p-JNK阳性着色,阳性细胞率为(8.8±1.3)%。在烧伤周边皮肤组中,p-JNK阳性着色主要定位于表皮细胞和部分炎症细胞中,阳性细胞率上升至(31.2±3.3)%,明显高于正常皮肤组织(P<0.01)。结论烧伤后人皮肤p-JNK的变化可能与创面愈合有关。

JNK磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法 20只大鼠均分为4组:假手术组、缺血复灌组、SP600125组和溶剂对照组。制作大鼠全脑缺血模型,应用免疫沉淀和免疫印迹法检测4组大鼠脑缺血复灌12 h海马CA1区神经元14-3-3磷酸化(p-14-3-3)、14-3-3与Bax结合、Bax在胞浆和线粒体的蛋白表达情况。结果与假手术组相比,缺血复灌组、溶剂对照组及SP600125组胞浆中的p-14-3-3蛋白、线粒体中的Bax蛋白均增高,14-3-3与Bax的结合降低,SP600125组的胞浆p-14-3-3蛋白、线粒体Bax蛋白低于缺血复灌组和溶剂对照组,14-3-3与Bax的结合高于缺血复灌组和溶剂对照组(均P<0.05)。结论 JNK磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。

二氮嗪预处理对缺氧复氧后大鼠海马神经元凋亡及JNK表达的影响

目的探讨二氮嗪(DZ)预处理能否抑制C-Jun氨基末端激酶(JNK)表达而减轻缺氧复氧后大鼠海马神经元的凋亡。方法原代培养9～10 d的SD大鼠海马神经元随机分为5组:对照组、DZ 0,30,100μmol/L和DZ 100μmol/L+5-羟癸酸(5-HD)100μmol/L预处理组。除对照组外,其余4组神经元自缺氧前2 d开始,每天实施以上对应浓度DZ预处理1 h,连续3 d。于体外缺氧4 h复氧48 h后,采用四唑蓝比色法测定海马神经元活力,AnnexinⅤ-FITC流式细胞术测定凋亡率,Western blotting法检测JNK蛋白表达。结果与对照组比较,缺氧复氧后海马神经元的活力下降,凋亡率增大,JNK蛋白表达增强(P<0.05)。与其他预处理组比较,DZ100μmol/L预处理组的神经元活力高,凋亡率低(P<0.05),其他预处理组间比较无统计学意义。DZ预处理后,JNK蛋白表达减低,且DZ 100μmol/L组表达弱于DZ 30μmol/L组(P<0.05)。同时给于5-HD预处理后,DZ未能抑制JNK蛋白表达。结论DZ预处理可能抑制JNK表达而减轻缺氧复氧后大鼠海马神经元的凋亡。

ADMA对内皮生长晕细胞凋亡及JNK表达的影响

目的探讨非对称二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOCs)凋亡的影响及凋亡相关c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达水平的变化。方法从脐带血中分离培养EOCs并进行鉴定,与不同浓度ADMA(0、1、5、10、20μmol/L)共同培育48 h。在10μmol/L ADMA培养液中加入不同浓度(0、5、10、20、40μmol/L)JNK特异性抑制剂SP600125,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3及磷酸化JNK(p-JNK)水平。结果 1、5、10、20μmol/L ADMA可诱导EOCs凋亡,浓度越高凋亡率越高(F=5.681,P<0.05)。ADMA还可提高凋亡因子Caspase-3的水平(F=6.733,P<0.05),诱导JNK磷酸化。SP600125可缓解ADMA造成的EOCs细胞凋亡,抑制Caspase-3及p-JNK的表达。结论 ADMA可诱导EOCs细胞凋亡,此作用可能通过激活JNK信号转导途径实现。

JNK信号通路介导ghrelin对乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药蛋白表达的影响

目的探讨ghrelin调控c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号转导通路对乳腺癌细胞P-糖蛋白表达的影响。方法培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,分别加入生长激素释放肽(ghrelin,100 nmol/L,干预72小时)、多柔比星(0.8 mg/L,干预72小时)、ghrelin联合多柔比星(ghrelin 100 nmol/L,多柔比星0.8 mg/L,干预72小时)。采用MTT方法检测细胞增殖,Western blot法检测细胞JNK、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达及p-JNK水平。结果 MTT检测显示,人乳腺癌MDA-MB-231细胞在ghrelin的干预下增殖(P<0.01),存活率在多柔比星的干预下降低(P<0.01),ghrelin联合多柔比星能够抑制多柔比星对MDA-MB-231细胞的杀伤作用(P<0.01)。ghrelin组JNK表达及p-JNK水平上升(均P<0.01),且P-gp蛋白表达上升(P<0.05);多柔比星组JNK表达及p-JNK水平下降(均P<0.01);ghrelin联合多柔比星较多柔比星组JNK表达及p-JNK水平增加,且P-gp表达明显上升(均P<0.05)。结论 ghrelin激活JNK信号通路干预乳腺癌细胞P-gp表达增加从而抑制多柔比星诱导乳腺癌细胞凋亡。

JNK在棕榈酸致骨骼肌细胞胰岛素抵抗中的作用

目的:探讨棕榈酸造成L6GLUT4myc骨骼肌细胞胰岛素抵抗过程中c-JunN-末端激酶(JNK)所起的作用。方法:将L6GLUT4myc成肌细胞培养于24孔和6孔培养板中,随机分为溶剂组和棕榈酸组,分别用0.3mmol/L的棕榈酸盐和溶剂牛血清白蛋白(BSA)孵育16h,在棕榈酸组的后30min加入JNK的抑制剂,于胰岛素刺激前后用酶联免疫吸附测定(ELISA)细胞膜上GLUT4myc的含量,免疫印迹法测定蛋白激酶B(Akt)、JNK和胰岛素受体底物1(IRS1)的磷酸化。结果:与溶剂组相比,棕榈酸组中胰岛素增加的GLUT4myc水平的倍数和Akt的磷酸化降低(P<0.05);JNK和IRS1的丝氨酸位点S307的磷酸化水平变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:棕榈酸导致L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗的机制可能不涉及JNK,或JNK的作用很小。

JNK磷酸化Bad在脑缺血神经元凋亡中的作用

目的探讨JNK磷酸化Bad在大鼠缺血性神经元凋亡中的作用。方法 20只大鼠均分为4组:假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SP600125组。制作大鼠全脑缺血模型,应用免疫沉淀和免疫印迹法检测大鼠脑缺血复灌1 d海马CA1区神经元Bad与14-3-3及Bad与Bcl-Xl的结合、Bad丝氨酸128位磷酸化[p-Bad(S128)]水平、Caspase-3蛋白表达情况。结果与缺血复灌组相比,SP600125组海马CA1区神经元Bad与14-3-3的结合明显增高,Bad与Bcl-Xl的结合、p-Bad(S128)、Caspase-3表达显著减少(均P<0.05)。结论 JNK介导的Bad(S128)磷酸化在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与子宫内膜异位症关系的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是子宫内膜腺体和基质种植于子宫腔以外的雌激素依赖性疾病,系育龄妇女常见病。异位内膜的侵袭性种植是一个多因素参与的复杂过程,涉及多条信号转导通路,其中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路起了非常重要的作用。MAPK信号通路与雌激素受体(estrogen receptor,ER)调控关系密切,两者的相互作用在促异位内膜细胞增殖、促炎症因子生成和促血管生成方面均起了重要作用。就MAPK信号通路与EMs的关系作一综述,为更好地理解EMs的发病机制提供新的思路。

凝聚态Aβ_(25～35)可通过JNK/p38 MAPK途径诱导胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化

目的 探讨JNK／p38MAPK在p淀粉样蛋白多肽片段25-35（Aβ25-35）诱导的阿尔茨海默病（AD）样胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化中的作用。方法 应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法，观察Tau蛋白磷酸化和JNK／p38丝裂原活化的蛋白激酶（JNK／p38MAPK）的表达情况。结果凝聚态Aβ25-35（20μmol／L）作用于皮层神经元12h，Tau蛋白sep396、Ser199/202、Thr205位点的磷酸化水平明显增高，同时JNK／p38MAPK的总量及其活性形式．磷酸化JNK／p38MAPK的蛋白表达水平也增加。结论 Aβ25-35可通过激活JNK／p38MAPK使Tau蛋白的磷酸化水平增高。

慢性间歇低氧对幼鼠脑区JNK表达的影响

目的:研究慢性间歇低氧对幼鼠学习记忆脑区JNK表达的影响。方法:SPF级健康雄性SD幼鼠(3～4周龄)40只,随机分为4组:间歇低氧2周组(2IH组)、间歇低氧4周组(4IH组)、对照2周组(2C组)和对照4周组(4C组)。建立慢性间歇低氧幼鼠模型,以RT-PCR法和Western blot法分别测幼鼠海马及前额叶皮层JNK1 mRNA和磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的表达。结果:2IH、4IH组幼鼠海马、前额叶皮层的JNK1 mRNA和磷酸化JNK(p-JNK)蛋白均明显高于相应对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:JNK的激活可能参与了慢性间歇低氧幼鼠脑损伤过程。

高场强MRI检测JNK抑制剂作用的apoE-/-小鼠颈动脉早期斑块

目的有研究证明,c-Jun NH2-terminal kinase(JNK)在斑块形成中起重要作用。本研究使用高场强活体 MRI 检测 JNK抑制剂抑制低剪切力诱导小鼠颈动脉斑块形成及其机制。材料与方法 20 只 apoE-/-小鼠高脂饮食 2 周,行颈内外动脉结扎术后随机分为溶剂对照组及 JNK 抑制剂 SP600125(JNK-I)组。分别于术后 7 d 和 14 d 行活体小动物 MRI 检查。第 14 天扫描后取颈动脉行病理学检查。采用 Western blot 及 RT-PCR 检测趋化因子及磷酸化 JNK(P-JNK)表达。结果 MRI 分析显示结扎后第 14 天,对照组颈动脉直径(0.31±0.02)mm,斑块体积(1.14±0.13)mm3;而 JNK-I 组颈动脉狭窄显著减轻,颈动脉直径(0.42±0.01)mm,斑块体积(0.58±0.06)mm3,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组化证实 JNK-I 组颈动脉内膜巨噬细胞显著减少。Western bolt和 RT-PCR 结果显示,与对照组相比,JNK-I 组 JNK 磷酸化水平显著下降,趋化因子血管细胞黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白-1表达显著下降。结论 JNK 抑制剂能抑制低剪切力诱导的早期颈动脉斑块形成,MRI 能早期、活体、动态、监测斑块的进程。