运动对正常大鼠心肌JNK激活及MKP-1表达的影响

目的 探讨运动对大鼠心肌c Jun氨基末端活化蛋白激酶 (JNK)活性及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 1(MKP 1)表达的影响 ,从JNK失活的角度探讨运动对心肌组织生长的影响。方法 14周龄雄性SD大鼠 40只 ,随机分为对照组、急性运动组和运动训练 1周组、2周组、3周组。采用运动平板进行运动训练 ,坡度为 10 % ,速度为 15m/min ,每次运动 3 0min。急性运动组仅运动 3 0min ;运动训练各组 ,每日 1次。采用免疫沉淀法检测左室心肌JNK活性 ,Westernblot检测MKP 1蛋白表达水平。结果 急性运动显著增加心肌p46JNK、p5 4JNK活性 ,分别为对照组的 2 .2 ,2 .6倍 ;MKP 1的表达水平与对照组相比有增加趋势 ,但无统计学意义。运动训练呈时间依赖性促进运动后心肌MKP 1表达水平、抑制JNK活化。结论 运动训练能增强正常大鼠心肌组织MKP 1的可诱导性 ,抑制JNK过度活化。

电针对慢性应激抑郁大鼠海马神经元凋亡及JNK信号转导通路的影响

目的:通过观察慢性应激抑郁模型大鼠接受电针刺激后海马神经元凋亡的情况和JNK信号转导通路的变化,探讨电针治疗抑郁症的作用机制。方法:65只SD大鼠,随机分为空白组、空白电针组、模型组、电针组、百优解组。采用慢性应激结合孤养的方式造模。电针组给予电针"百会""印堂"穴,每次20 min,每日1次,共治疗21 d;百优解组给予百优解1.8 mg/kg灌胃治疗,共21 d。采用旷场实验进行行为学评价;采用AnnexinV-FITC流式细胞凋亡检测方法检测海马神经元凋亡;采用免疫印迹技术半定量检测JNK碱性磷酸酶活化水平。结果:模型组大鼠旷场实验3 min内水平穿越格数、竖立次数均明显低于空白组(均P<0.05);海马神经元细胞凋亡率明显高于空白组(P<0.05)。3 min内旷场实验各指标电针组、百优解组均明显高于模型组(P<0.05);电针组和百优解组海马神经元细胞凋亡率均明显低于模型组(P<0.05)。各组大鼠海马组织中JNK磷酸酶活化水平,模型组高于空白组(P<0.05),电针组、百优解组均低于模型组(P<0.05)。空白电针组各指标的变化与空白组相似(P>0.05)。结论:电针可能通过有效地抑制JNK磷酸酶活化,同时抑制海马神经元凋亡而改善慢性应激抑郁大鼠的行为学症状。

永久性大脑中动脉闭塞大鼠纹状体P—SAPK/JNK表达与神经元凋亡的相关性

目的探讨永久性大脑中动脉闭塞（permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO）大鼠纹状体P-SAPK／JNK表达与神经元凋亡的相关性。方法54只Sprague—Dawley雄性大鼠随机分为假手术组以及pMCAO1h、3h、6h、12h和24h组，每组9只。应用TUNEL法检测纹状体凋亡神经元，免疫组织化学染色法检测纹状体P—SAPK／JNK核转位，Western印迹法检测P-SAPK／JNK蛋白表达。结果pMCAO 1h纹状体TUNEL和P—SAPK／JNK阳性细胞数量显著增多（P=0．0001），6h达高峰，12h时TUNEL阳性细胞减少，但仍高于假手术组（P=0．0002）。Western印迹分析显示，pMCAO后纹状体P—SAPK／JNK蛋白表达水平显著增高，且时程变化与免疫组化染色结果一致。纹状体神经元凋亡与P—SAPK／JNK蛋白表达呈显著正相关（r=0．984，P=0．0004）。结论脑缺血可能通过激活P-SAPK／JNK诱导纹状体神经元凋亡。

基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响

目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤的可能机制。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型,将48只造模成功的小鼠随机分为三七总皂苷低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1)和模型组,每组12只,三七总皂苷各剂量组腹腔注射剂量为10 mL·kg^-1,模型组给予相同剂量的生理盐水,连续给药28 d。给药结束后分离肿瘤组织、称质量、切片、匀浆等,采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1蛋白表达。结果:与模型组比较,三七总皂苷中、高剂量组的肿瘤质量明显下降(P<0.05);肿瘤细胞凋亡数量随三七总皂苷剂量的升高明显升高(P<0.05);三七总皂苷中、高剂量组肿瘤组织中MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型具有抑制作用,其作用机制可能与激活MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1信号通路有关。

岩白菜素对D-GalN诱导大鼠急性肝损伤影响

目的了解岩白菜素对D-GalN诱导急性肝损伤的保护作用及其作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素组(120 mg/kg)及岩白菜素低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg),每组10只,各剂量组大鼠每天同一时间按10 mL/kg灌胃给药,对照组和模型组大鼠灌胃相应体积蒸馏水,每天1次,连续7 d。末次给药2 h后,按4 mL/kg腹腔注射D-GalN(700 mg/kg)建立动物急性肝损伤模型。16 h后,收集血液,采集肝组织。生化法检测大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总抗氧化能力(T-AOC)、总胆红素(TBIL)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性或含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肝组织中γ–干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子–α(TNF-α)、白介素–1β(IL-1β)和IL-6含量;蛋白免疫印记法(Western blot)分析肝组织p-JNK、JNK、c-Jun、p-AMPK和AMPK的蛋白表达情况;HE染色检查肝组织病变程度。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中AST、ALT、TBIL活性和MDA含量明显升高(P <0.01);与模型组比较,各岩白菜素组大鼠血清中AST、ALT、TBIL活性和MDA含量明显降低(P <0.05),岩白菜素高、中剂量组大鼠血清中T-AOC、T-SOD和GSH-Px含量均升高(P <0.01);与模型组比较,岩白菜素高、中剂量组大鼠肝组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量下降、IFN-γ含量升高(P <0.01),p-JNK和c-Jun蛋白表达下调(P <0.05)、p-AMPK表达上调(P <0.01)。结论岩白菜素对D-GalN诱导的大鼠急性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与激活AMPK/JNK信号通路抑制氧化应激与炎症反应有关。