雷公藤红素通过ROS/JNK途径诱导Saos-2细胞发生caspase依赖的凋亡

目的:探讨雷公藤红素对人骨肉瘤细胞Saos-2的杀伤作用及相关机制。方法:将人骨肉瘤细胞Saos-2用各种不同的浓度的雷公藤红素治疗后,采用MTT法检测雷公藤红素对Saos-2细胞活力的抑制作用;采用流式细胞术检测用雷公藤红素处理后Saos-2细胞的凋亡及活性氧簇(ROS)的产生;Western blot检测雷公藤红素处理后Saos-2细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和磷酸化JNK的表达水平。结果:雷公藤红素有显著的体外抗骨肉瘤作用,能显著抑制Saos-2细胞的活力。雷公藤红素可显著诱导Saos-2细胞发生凋亡,产生ROS。雷公藤红素处理后Saos-2细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和磷酸化JNK的表达水平均显著上升。结论:雷公藤红素通过ROS/JNK途径诱导人骨肉瘤Saos-2细胞发生caspase依赖的凋亡。

EB病毒潜伏膜蛋白1通过TRAF/TRADD激活JNK信号途径

为了探讨在鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活c Jun氨基端激酶 (JNK)信号途径的分子机制 ,利用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7,蛋白质印迹检测 ,发现LMP1能够促进JNK的活化 ;利用稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1及其三种突变体HNE2 LMP1ΔCTAR 1、HNE2 LMP1ΔCTAR2、HNE2 LMP1ΔCTAR 1,2及LMP1阴性的HNE2 为材料 ,采用蛋白质印迹和报告基因法分析JNK和活化蛋白 1(AP1)活化情况 ,结果显示HNE2 LMP1和HNE2 LMP1ΔCTAR1中磷酸化JNK蛋白表达量和AP1活性都无显著差异 ,而与HNE2 LMP1ΔCTAR2、HNE2 LMP1ΔCTAR1,2、阴性对照HNE2及空白载体转染细胞的JNK蛋白表达和AP1活性具有显著差异 ;进一步比较转染TRAF、TRADD显性负性突变体鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中磷酸化的JNK量和AP1活性 ,结果显示 :TRAF DN和TRADD DN的导入使活化的JNK蛋白和AP 1活性显著降低 ,二者间无显著差异 ,提示TRAF和TRADD可能参与了LMP1对JNK和AP 1的活化 .以上结果提示在鼻咽癌细胞系中LMP1功能结构域CTAR2通过结合TRAF/TRADD激活JNK从而活化重要的转录因子AP1.

STX2通过调控JNK 信号途径抑制肺癌细胞的增殖和迁移

目的:本研究主要探讨STX2对非小细胞肺癌(NSCLC)的增殖和迁移的抑制作用及其潜在分子机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肺正常细胞系(16-HBE)和肺癌细胞系(A549和H1299)中STX2的差异性表达;将STX2在肺癌细胞系中敲低后,通过CCK-8检测细胞活力,平板克隆实验检测细胞增殖能力,通过细胞Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测CDK2、E-cadherin、MMP-2、MMP-9的表达及JNK的磷酸化水平。结果:肺正常细胞系与肺癌细胞系相比STX2是低表达的,体外实验表明STX2表达下调可促进细胞增殖、细胞迁移和侵袭;进一步的实验表明,STX2表达降低可以显著增加CDK2、MMP-2、MMP-9的表达以及抑制E-cadherin的表达水平。通过研究STX2可能参与的信号分子通路,发现与对照组相比,STX2敲低组促进了JNK的磷酸化水平。结论:STX2可能可以通过JNK途径影响NSCLC的进展,STX2可能是NSCLC中的一个潜在的预后生物标志物和潜在治疗靶点。