乌芪通络胶囊对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节JNK1/2和p38MAPK蛋白表达的影响

目的:研究乌芪通络胶囊对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节中JNK1/2和p38MAPK蛋白表达的影响,从氧化应激的角度探讨乌芪通络胶囊治疗糖尿病周围神经病变的机制。方法:实验用雄性SD大鼠80只,随机选择14只为正常对照组,其余66只用来造模。后者经腹腔注射链脲佐菌素(STZ),成功造模51只。将造模成功的大鼠随机分为模型组、弥可保组及乌芪通络胶囊组,每组17只。弥可保组和乌芪通络胶囊组连续给药8周,对照组和模型组正常饮食8周,将8周后的四组大鼠处死,取背根神经的L4/L5神经节,提取总蛋白,采用Western杂交的方法检测背根神经节中JNK1/2和p38MAPK蛋白的表达水平。结果:模型组JNK1/2和p38MAPK蛋白的表达比正常组显著增高(P<0.05)。乌芪通络胶囊组和弥可保组JNK1/2和p38MAPK蛋白表达较模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乌芪通络胶囊可降低大鼠背根神经节中的JNK1/2和p38MAPK蛋白的表达,这可能是乌芪通络胶囊从氧化应激方面治疗和缓解糖尿病周围神经病变各种症状的机制之一。

氯沙坦对心肌成纤维细胞基质金属蛋白酶-2、JNK1/2表达及增殖活性的影响(英文)

目的:研究氯沙坦通过影响高血压大鼠心肌成纤维细胞间质成分抑制心室重构的药理机制。方法:培养心肌成纤维细胞,免疫细胞化学法鉴定细胞,MTT法测氯沙坦和AngⅡ对细胞增殖活性影响的量效关系,Western Blotting测AngⅡ刺激成纤维细胞心肌JNK1/2、磷酸化JNK1/2表达的时效关系。根据实验所得AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖活性作用的EC50值、氯沙坦抑制心肌成纤维细胞活性作用的IC50值和AngⅡ刺激JNK1/2表达的最佳时间,心肌成纤维细胞分为无血清DMEM组、AngⅡ100 nmol/L组、AngⅡ100 nmol/L+losartan 100 nmol/L组、losartan 100 nmol/L组,药物干预后分别收集各组蛋白质、培养上清液,Western blotting检测各组MMP-2、JNK1/2、磷酸化JNK1/2蛋白表达,ELISA检测分泌至培养上清液中MMP-2的量。结果:AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖活性作用的EC50为53 nmol/L,氯沙坦抑制心肌成纤维细胞增殖活性作用的EC50为56.3 nmol/L。JNK1/2蛋白表达在AngⅡ刺激2 min达高峰,随后表达逐渐降低。AngⅡ增加JNK1/2表达,氯沙坦降低AngⅡ刺激导致的JNK1/2表达。AngⅡ组MMP-2蛋白表达较无血清DMEM组明显增高,氯沙坦降低AngⅡ刺激增高的MMP-2表达。AngⅡ组MMP-2分泌较无血清DMEM组增高,氯沙坦减少AngⅡ刺激所致MMP-2分泌增高。结论:氯沙坦防治高血压引起的心室重构,可能与其对抗AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖活性、MMP-2合成、分泌有关,信号通路涉及JNK1/2。

氯沙坦对高血压大鼠心肌MMP-2、Ⅲ型胶原和JNK1/2表达的影响

目的 研究Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶 2 (matrixmetalloproteinases 2 ,MMP 2 )和JNK1/ 2在高血压大鼠心肌组织中的表达及氯沙坦干预后 3者的变化 ,探讨氯沙坦逆转心室重构的药理机制。方法 采用SD大鼠建立两肾一夹型 (Goldblatt)高血压模型 ,将大鼠随机分为对照组、高血压组和氯沙坦治疗组。采用鼠尾动脉测压法记录每周血压变化 ,实验末切取心脏 ,并计算心脏与体重比值。免疫组织化学方法测定心脏组织中的Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶 2和JNK1/ 2表达。结果 左肾动脉结扎术后大鼠收缩压升高 ,心脏体重比值增加 ,心肌间质Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶 2、心肌细胞JNK1/ 2表达增多。氯沙坦治疗能显著降低大鼠收缩压 ,降低心脏体重比值 ,并且使心肌间质Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶 2、心肌细胞JNK1/ 2表达减少。结论 两肾一夹型高血压大鼠重构心肌中MMP 2、Ⅲ型胶原、JNK1/ 2表达升高。氯沙坦能有效逆转心肌肥厚或心室重构 ,这一效应与其降低心肌中高表达的MMP 2 ,Ⅲ型胶原、JNK1/

Egb761对大鼠局灶脑缺血/再灌注诱导JNK1/2活化的影响

目的观察大鼠局灶性脑缺血/再灌注后丝裂原活化蛋白激酶家族中JNK1/2(c-Jun氨基末端激酶1/2)的活化情况以及银杏叶提取物Egb761对其影响。方法雄性成年SD大鼠随机分成3组(n=5):假手术组、生理盐水对照组和Egb761组。分别于缺血前6天每天用生理盐水4 m l和Egb761 150 mg/kg(Egb761用4 m l生理盐水溶解)灌胃。采用线栓法致大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,在脑缺血再灌注后处死大鼠,对缺血侧海马进行免疫印迹法检测JNK1/2磷酸化水平。结果局灶脑缺血/再灌注可以诱导JNK1/2激活,30 m in达第1个高峰,3天达第2个高峰;Egb761可显著抑制脑缺血再灌注后JNK1/2的激活(P<0.05),JNK1/2的蛋白表达量在以上不同处理条件下没有明显变化。结论局灶性脑缺血再灌注可诱导缺血侧海马JNK1/2活化,Egb761干预可使缺血侧海马JNK1/2活化受到抑制,减轻缺血侧海马的损伤。

肠道病毒71型激活人横纹肌肉瘤细胞中JNK1/2信号转导通路

目的探讨c-Jun N端激酶(JNK)信号转导通路在肠道病毒71型(EV71)感染中的作用。方法台盼蓝染色法检测不同浓度抑制剂SP600125对人横纹肌肉瘤细胞(RD)活性的影响;实时荧光定量PCR及western blot检测EV71感染RD细胞后VP1 mRNA及蛋白质的表达水平;western blot检测JNK1/2、c-Fos、c-Jun蛋白及其磷酸化水平,并分析JNK1/2抑制剂SP600125对EV71复制及JNK1/2信号通路的影响。结果台盼蓝染色结果表明,与空白对照组比较,5和10μmol/L实验组存活率差异无统计学意义(P均>0.05),而20μmol/L抑制剂组细胞存活率明显降低(P<0.05);实时荧光定量PCR及western blot结果表明,与对照组相比,实验组在EV71感染RD细胞8 h后,其VP1 mRNA及蛋白质的表达水平均明显下降(P均<0.01)。此外,western blot检测结果证实EV71感染RD细胞后,其JNK1/2、c-Fos和c-Jun的蛋白质磷酸化水平均明显升高(P均<0.05)。而经抑制剂SP600125处理可明显下调其JNK1/2、c-Fos、c-Jun磷酸化水平(P均<0.05)。结论 JNK1/2信号通路可被EV71感染有效激活,并与EV71复制有关。

磷酸化-JNK1/2在高温处理后的鼠胚心脏的表达变化

目的探讨p-JNK1/2高温处理后金黄地鼠胚胎心脏之表达变化。方法将金黄地鼠孕鼠在受孕8d时置42℃水浴20min,在高温处理后12h,24h,36h,48h剖腹取胎,制备为石蜡切片。利用免疫荧光染色技术,观察心脏正常发育与异常分化过程中磷酸化JNK(p-JNK)的表达。结果 高温处理后12h,24h,36h,48h,实验组鼠胚心脏p-JNK1/2的表达较对照组均减弱,其中36h和48h两个时间点差异显著。结论 高温可致金黄地鼠胚胎心脏磷酸化JNK1/2(p-JNK1/2)表达减低,p-JNK1/2对心脏正常发育具有重要作用。

基于JNK1/Bcl-2通路探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞的影响

目的:研究益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞凋亡的影响及初步机制。方法:将44只SD大鼠随机选取10只为正常组,造模其余34只,造模成功后将造模组大鼠随机分为中药组、盐酸贝那普利组及模型组,各组均10只,每组按相应剂量给药,在给药4周后测定大鼠24h尿蛋白(UTP)及血清标本中的总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC);留取肾脏组织,用电镜、免疫荧光观察肾脏病理变化,免疫组化及用Western blot检测p-Bcl-2、JNK1、p-JNK1、Caspase-3在肾脏组织的表达。结果:与模型组比较,益肾通络方组和盐酸贝那普利组大鼠UTP、TC明显下降(P<0.05),TP、ALB明显上升(P<0.05);中药组与盐酸贝那普利组大鼠基底膜增厚程度及足突融合程度轻微改善,上皮下少量电子致密物沉积;IgG荧光沉积较模型组明显减弱;Bax、Caspase-3蛋白表达明显下调(P<0.05),其中益肾通络方组程度最显著;p-Bcl-2蛋白表达下调,p-JNK1/JNK1表达也明显下调(P<0.05)。结论:益肾通络方可能基于调节JNK1/Bcl-2信号通路,调节Bax、Caspase-3蛋白的表达水平来抑制MN大鼠肾脏足细胞凋亡,延缓膜性肾病进展。

丙泊酚通过抑制JNK/ERK1/2通路抑制鼻咽癌C666-1细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨丙泊酚对鼻咽癌C666-1细胞的作用及机制。方法C666-1细胞分为4组:对照组、丙泊酚22、33、44μmol/L组。CCK-8实验、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞活力、凋亡、侵袭和迁移能力;Western印迹检测凋亡和侵袭相关蛋白表达。JNK抑制剂SP600125或ERK1/2抑制剂U0126与丙泊酚(44μmol/L)单独或联合处理细胞后,Western印迹检测JNK和ERK1/2蛋白磷酸化,CCK-8检测细胞活性。构建裸鼠移植瘤,免疫组化检测瘤组织中p-JNK、p-ERK1/2和Ki67的表达,TUNEL检测瘤组织细胞凋亡。结果与0μmol/L组比较,丙泊酚33μmol/L及以上浓度明显抑制C666-1细胞活力(P<0.05)。与对照组比较,丙泊酚33和44μmol/L组C666-1细胞中凋亡相关蛋白表达升高(P<0.05),细胞凋亡数增加(P<0.05);细胞侵袭和迁移数减少(P<0.05),侵袭相关蛋白及JNK和ERK1/2磷酸化水平显著降低(P<0.05),SP600125或U0126与丙泊酚单独或联合组均降低细胞存活率(P<0.05)。丙泊酚显著抑制移植瘤生长并促进凋亡(P<0.05)。结论丙泊酚通过抑制JNK/ERK1/2通路诱导鼻咽癌C666-1细胞凋亡,抑制增殖、侵袭和移植瘤生长。

Effects of isoflurane and sevoflurane postconditioning and changes in JNK1/2 pathway activity on rat brain slices subjected to oxygen and glucose deprivation in vitro

Recent research shows that the JNK1/2 signaling pathway plays a neuroprotective role against ischemia-reperfusion injury by cross-talk with other pathways.The present study investigated the effects of isoflurane and sevoflurane postconditioning on JNK1/2 pathway activity and neuronal cell viability after oxygen and glucose deprivation injury in hippocampal slices in vitro.Techniques used included population spike analysis,propidium iodide fluorescent staining,western blot assay,and the use of JNK1/2-specific pharmacological tools such as anisomycin （agonist） and SP600125 （inhibitor）.We found that both isoflurane and sevoflurane inhibited JNK pathway activity and had neuroprotective effects against oxygen and glucose deprivation injury in slices of rat hippocampus in vitro.Postconditioning with volatile anesthetics exerted neuroprotective effects on nerve cells and preserved the function of the CA1 region by inhibiting JNK1/2 phosphorylation.This suppression of JNK1/2 activity could underlie the observed synergistic neuroprotective effect produced by volatile anesthetic postconditioning.

大鼠缺血性脑损伤后HSP72保护神经元的作用及机制探讨

将75只SD大鼠按缺血再灌注时间(5 d、30 min、6 h)随机分为甲、乙、丙3组,各25只,每组大鼠又分为假手术组、缺血再灌注对照组、热休克蛋白(HSP)72处理组、HSP72反义寡核苷酸组及溶剂组,各5只。采用焦油紫染色、免疫印迹法检测大鼠缺血再灌注后海马神经元损伤和脑组织JNK1/2、Bad(ser 128)和c-Jun。结果显示,热休克处理组与缺血再灌注对照组、HSP72反义寡核苷酸组和溶剂组相比海马神经元损伤减轻,脑组织中JNK1/2、c-Jun和Bad(ser 128)磷酸化水平降低(P<0.05)。认为HSP72能减少海马神经元损伤,其机制可能是降低脑组织JNK1/2、c-Jun、Bad(ser 128)的磷酸化程度。

温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠JNK1/Bcl-2/Beclin 1信号通路相关蛋白及基因表达的影响

目的:观察温阳复元方对脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠的影响,探讨其可能的作用机制。方法:65只大鼠随机分为假手术组,模型组,温阳复元方低、中、高剂量组,每组13只。制备大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)2 h模型,假手术组和模型组以0.9%氯化钠溶液灌胃,温阳复元方低、中、高剂量组分别给予温阳复元方1.5、3、6 mL灌胃,连续7 d。观察成模后各组大鼠TTC染色,比较神经功能缺损评分,HE、尼氏染色观察大鼠脑组织病理形态变化,免疫组化、qRT-PCR和Western Blot检测大鼠脑组织中JNK1、Beclin 1、Bcl-2、LC3B蛋白和mRNA的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能缺损评分显著上升(P<0.01),脑组织有明显的白色梗死灶,缺血侧脑组织细胞排列杂乱松散,神经元轮廓模糊,其胞质自溶及核碎裂,尼氏小体减少,脑组织JNK1、Beclin 1、Bcl-2、LC3B蛋白和mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,温阳复元方中、高剂量组神经功能缺损评分显著下降(P<0.05),各给药组脑皮质损伤减轻,水肿减少,存活神经元数量增加;温阳复元方高剂量组JNK1、Beclin 1、Bcl-2、LC3B蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01),蛋白LC3BⅡ/LC3BⅠ比值显著降低(P<0.01)。结论:温阳复元方可能通过抑制JNK1/Bcl-2/Beclin 1信号通路的激活,降低脑缺血再灌注损伤后神经细胞的凋亡和过度自噬,从而起到脑保护作用。

香烟烟雾增加哮喘大鼠肺组织内皮素2的水平及机制

目的探讨香烟烟雾对哮喘大鼠肺组织内皮素2(ET-2)表达的影响。方法大鼠腹腔注射鸡卵清蛋白/Al(OH)3混合液1 m L致敏建立哮喘模型(哮喘模型组,n=6),在哮喘模型组基础上烟熏(10支/d)连续4周为香烟烟雾哮喘组(烟雾哮喘组,n=6),分别以地塞米松2 mg/(kg·d)腹腔注射1周、ET受体抑制剂波生坦100 mg/(kg·d)灌胃及联合处理分为地塞米松处理组、波生坦处理组、地塞米松及波生坦处理组,每组6只,设正常对照(正常对照组,腹腔注射生理盐水1 m L,n=6)及香烟烟雾对照[在正常对照组基础上,连续烟熏(10支/d)4周,n=6]。收集左肺上叶支气管肺泡灌洗液(BALF)检测细胞计数及分类,右肺上叶HE染色观察肺组织病理学改变;其余肺组织行Western blot法及免疫组织化学染色法分别检测肺组织c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、ET-2蛋白水平,硫代巴比妥酸法测丙二醛(MDA)水平,微量酶标法测谷胱甘肽(GSH)水平。结果与对照组比较,香烟烟雾对照组、哮喘模型组、香烟烟雾哮喘组BALF中白细胞数、中性粒细胞数及嗜酸性粒细胞数升高,肺组织中ET-2蛋白、JNK1/2蛋白、MDA及GSH水平升高;而与香烟烟雾哮喘组比较,地塞米松处理组、波生坦处理组、地塞米松及波生坦处理组BALF中白细胞数、中性粒细胞数及嗜酸性粒细胞数均降低。肺组织中ET-2蛋白、JNK1/2蛋白、MDA及GSH表达降低。地塞米松处理组、波生坦处理组、地塞米松及波生坦处理组气道炎症均有改善,地塞米松及波生坦处理组改善最明显。ET-2在地塞米松处理组、波生坦处理组、地塞米松及波生坦处理组肺组织染色强度减少,地塞米松及波生坦处理组染色强度减少更明显。结论香烟烟雾暴露可加重哮喘大鼠气道炎症,ET受体抑制剂波生坦可改善气道炎症,香烟烟雾暴露哮喘发生的炎症机制可能与ET-2及JNK1/2通路有关。

氧化槐果碱对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制

目的探究氧化槐果碱(oxysophocarpine,OSC)对大鼠MIRI的保护作用及其作用机制。方法超声心动图仪检测心脏功能指标;HE染色观察心肌组织病变;ELISA法检测心损标记物及血清炎症因子水平;试剂盒检测氧化应激标记物;蛋白质印迹检测相关蛋白表达水平。结果与sham组相比,I/R组大鼠出现明显心肌损伤,心脏功能明显降低,CK-Mb、Mb和cTnI水平显著上调;血清SOD水平明显降低,MDA和LDH水平升高;TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10水平均明显升高,p-ERK1/2和p-JNK表达显著上调。与I/R组相比,OSC处理后明显改善心肌损伤和心肌功能;抑制心肌氧化应激和促炎性因子释放;下调p-ERK1/2和p-JNK表达。结论OSC可改善大鼠I/R导致的心脏功能障碍,并抑制氧化应激和炎症反应,其作用机制与ERK/JNK通路下调有关。

脑缺血再灌注后依达拉奉联合黄芪对大鼠神经元的保护作用及机制

目的探讨脑缺血再灌注后依达拉奉联合黄芪对大鼠神经元的保护作用及机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、缺血对照组、黄芪组、依达拉奉组、依达拉奉与黄芪联合组及溶剂组。采用焦油紫染色、免疫印迹检测大鼠缺血再灌注后海马神经元损伤和脑组织JNK1/2、bad(ser 128)和c-Jun的磷酸化情况。结果各给药组与缺血再灌注组和溶剂组相比,海马神经元损伤减轻,脑组织JNK1/2、c-Jun和bad(ser 128)磷酸化降低,其中联合组效果更明显(P均<0.05)。结论依达拉奉、黄芪两药联用比单用更能减少海马神经元损伤及脑组织JNK1/2、c-Jun、bad(ser 128)的磷酸化程度。

金匮肾气汤对糖尿病肾病小鼠足细胞凋亡信号的影响

目的探讨金匮肾气汤对db/db糖尿病小鼠肾脏足细胞凋亡的影响及机制。方法将6周龄db/db糖尿病小鼠随机分为生理盐水组、金匮肾气汤组、二甲双胍组,均灌胃给药;♂db/m小鼠作为正常对照组。于18周龄处死动物,取血检测血糖,留24h尿检测尿白蛋白;留取肾脏组织,分别进行PAS染色观察肾小球内系膜增生情况,透射电镜观察肾小球内足细胞足突情况,免疫荧光检测podocin在肾组织的表达,Western blot检测caspase-3、p-Bcl-2、p-JNK1/JNK1在肾组织的表达。结果与db/db糖尿病小鼠比较,金匮肾气汤治疗后,24h尿白蛋白水平降低,肾小球内系膜增宽程度减轻,肾小球内足细胞足突倒伏、融合明显减轻,肾小球内podocin线样荧光明显增强,肾皮质内caspase-3表达明显降低(P<0.05),JNK1和Bcl-2磷酸化明显下调(P<0.05)。结论金匮肾气汤通过JNK1/Bcl-2信号途径,改善足细胞凋亡,保护足细胞,延缓糖尿病肾病的进展。

黄芪甲苷对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及白细胞介素6分泌的影响

目的:本实验通过研究黄芪甲苷对肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synoviocytes,HFLS-RA)增殖作用的影响,探讨其调控HFLS-RA内白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)、c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)蛋白表达的作用机制。方法:体外培养HFLS-RA,采用TNF-α及不同浓度的黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-Ⅳ)干预细胞。本次实验共分为空白组(10%胎牛血清培养基培养细胞)、TNF-α组(10 ng/mL TNF-α)、AS-ⅣH组(10 ng/mLTNF-α+100μg/mLAS-Ⅳ)、AS-ⅣM组(10 ng/mLTNF-α+50μg/mLAS-Ⅳ)、AS-ⅣL组(10 ng/mLTNF-α+25μg/mL AS-Ⅳ)5组,MTT法检测不同浓度的黄芪甲苷对TNF-α诱导的HFLS-RA增殖活力的影响,ELISA法检测细胞上清液中IL-6的表达水平,Western Blot法检测细胞中JNK1、JNK1/2蛋白表达水平。结果:黄芪甲苷能够抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖,降低HFLS-RA中IL-6、JNK1、JNK1/2蛋白表达。结论:黄芪甲苷通过调控JNK信号通路相关细胞因子表达抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖。

G蛋白信号调节因子6对心肌细胞肥大的作用及机制研究

目的探讨G蛋白信号调节因子6(RGS6)对心肌细胞肥大的调控作用及机制。方法用AdRGS6和AdshRGS6慢病毒分别感染心肌细胞使RGS6表达上下调,AngⅡ构建肥大模型。测定各组细胞面积和ANP、BNP的表达,检测活性氧(ROS)和丝裂原活化蛋白激酶(ERK1/2、p38、JNK1/2)的表达。明确改变的信号通路后,用ROS抑制剂(DPI)开展逆转实验。结果 (1)与AdG FP/AngⅡ组相比,AdRGS6/AngⅡ组细胞面积、ANP和BNP明显增加,信号通路中ROS和磷酸化(p)-JNK1/2表达增加。(2)与AdshRNA/AngⅡ相比,AdshRGS6/AngⅡ组细胞面积、ANP和BNP明显降低,信号通路中ROS和p-JNK1/2表达下降。(3)逆转实验:与AdRGS6/AngⅡ组相比,DPI干预的AdRGS6/AngⅡ组心肌细胞面积明显降低,p-JNK1/2蛋白表达降低。结论 RGS6通过激活ROS/JNK1/2通路促进心肌细胞肥大。

应激活化蛋白激酶在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染和调节病毒诱导的细胞因子生产中的作用研究

试验旨在研究p38 MAPK和JNK通路在繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪肺泡巨噬细胞(PAM)中的作用。感染PRRSV后36 h,p38和JUK1/2逐渐被激活;感染后48 h,其磷酸化水平显著降低至基线。然而紫外线灭活的PRRSV不能引起这些应激活化蛋白激酶(SAPKs)的磷酸化,表明病毒侵入后的步骤才能激活这些激酶。单独用p38或JNK抑制剂处理,都能显著降低PRRSV的感染,导致病毒基因组和亚基因组RNA合成、病毒蛋白表达、子代病毒生产的显著降低。并且抑制SAPKs时,感染PRRSV的PAM细胞中细胞因子的产生会发生改变。本研究结果表明,p38和JNK信号通路在病毒复制中发挥关键作用,并可能在病毒感染时调节免疫应答。

基于MAPK/ERK/JNK信号通路探究染料木黄酮对荨麻疹大鼠的保护作用

目的 从丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)/c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)通路探究染料木黄酮对荨麻疹大鼠的保护机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、染料木黄酮低、高剂量(150、300mg/kg)组,MAPK激活剂(茴香霉素)组、染料木黄酮+茴香霉素组,每组12只。通过卵蛋白血清致敏诱导建立大鼠慢性荨麻疹模型。观察大鼠搔抓症状;ELISA法检测血清免疫球蛋白E抗体(IgE)及炎症介质如组胺、白三烯、前列腺素(PGD2)、5-羟色胺(5-HT)水平;伊文思蓝染色观察血管通透性改变;苏木精–伊红(HE)染色观察蓝斑皮肤组织病理变化;取腹腔肥大细胞计算脱颗粒比率;免疫组化法观察蓝斑组织皮肤中磷酸化MAPK(p-MAPK)阳性表达水平;Western blotting法检测蓝斑组织皮肤中MAPK–ERK1/2–JNK1/2通路蛋白表达及上游酪氨酸激酶(Lyn)、脾酪氨酸激酶(Syk)磷酸化蛋白、下游激活蛋白-1(AP-1)、炎症通路核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠搔抓次数增多、耳部血管通透性升高、血清IgE及炎症介质分泌增多、肥大细胞脱颗粒比率升高、大鼠背部皮肤水肿及炎性浸润等病理损伤均加重,背部蓝斑组织MAPK/ERK/JNK通路活化,其下游炎症及脱颗粒相关通路蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组相比,染料木黄酮低、高剂量组大鼠搔抓次数减少,耳部血管通透性和肥大细胞脱颗粒比率降低,血清IgE及炎症反应降低,背部皮肤水肿及炎性浸润等病理损伤减轻,MAPK/ERK/JNK通路及其介导的炎症、脱颗粒等信号途径活化受到抑制(P<0.05),且染料木黄酮300 mg/kg组上述抑制作用更明显(P<0.05)。茴香霉素可逆转染料木黄酮的上述作用(P<0.05)。结论 染料木黄酮可抑制MAPK–ERK1/2–JNK1/2通路活化,阻断肥大细胞脱颗粒,改善荨麻疹病理症状。