观察化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏炎症的干预作用,并探讨其机制。40只SD大鼠随机选取10只为正常组(C组),其余30只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,40 mg/kg)联合高糖高脂饲料喂养建立糖尿病模型。造模成功大鼠随机分为模型组(M组...观察化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏炎症的干预作用,并探讨其机制。40只SD大鼠随机选取10只为正常组(C组),其余30只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,40 mg/kg)联合高糖高脂饲料喂养建立糖尿病模型。造模成功大鼠随机分为模型组(M组)和化瘀通络中药组(Z组)。Z组予以中药干预。16周后,各组大鼠留尿检测24 h尿蛋白定量(24 h UTP);ELISA法检测血清中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;取肾组织,应用免疫荧光法检测巨噬细胞标志蛋白CD68、经典活化巨噬细胞标志蛋白诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)的表达,应用Western blot法检测TAK1/JNK信号通路相关蛋白转化生长因子激活激酶-1(TAK1)、p-TAK1、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p-JNK的表达。实验结果显示,与C组比较,M组大鼠24 h UTP、MCP-1、IL-1β和TNF-α水平均明显升高(P<0.001);肾间质可见大量CD68和iNOS蛋白的沉积;p-TAK1和p-JNK蛋白的表达量明显增多(P<0.001)。与M组比较,Z组大鼠24 h UTP、MCP-1、IL-1β和TNF-α水平均显著降低(P<0.001,P<0.001,P<0.01,P<0.001);CD68和iNOS蛋白的沉积显著减少;p-TAK1和p-JNK蛋白的表达量均显著减少(P<0.05)。结果表明化瘀通络中药可降低糖尿病肾病大鼠蛋白尿,改善肾脏炎症反应,其机制可能与其抑制TAK1/JNK信号通路减少肾组织内巨噬细胞浸润、活化和炎症因子释放相关。展开更多
目的:研究补肾培元胶囊治疗肺腺癌的抗肿瘤机制。方法:采用不同浓度补肾培元胶囊含药血清培养A549细胞,观察细胞形态;CCK-8法检测补肾培元胶囊对A549细胞增殖的影响;流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染色法)测定细胞凋亡率;RT-qPCR法分别...目的:研究补肾培元胶囊治疗肺腺癌的抗肿瘤机制。方法:采用不同浓度补肾培元胶囊含药血清培养A549细胞,观察细胞形态;CCK-8法检测补肾培元胶囊对A549细胞增殖的影响;流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染色法)测定细胞凋亡率;RT-qPCR法分别检测氨基末端激酶(Jun N terminal kinase,JNK)、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 (Mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)的mRNA表达差异。结果:补肾培元胶囊含药血清培养A549细胞后细胞体积缩小,部分不能贴壁生长,细胞质及细胞核固缩,其中以30%含药血清组及35%含药血清组的细胞形态改变最为明显。CCK-8检测结果显示补肾培元胶囊含药血清可抑制A549细胞增殖,且具有一定的时间—浓度依赖性;流式细胞术结果显示补肾培元胶囊含药血清可诱导A549细胞凋亡;RT-q PCR结果显示补肾培元胶囊干预A549细胞后可升高JNK、MKP-1 mRNA表达水平。结论:补肾培元胶囊可抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,其机制可能与调控MKP-1/JNK信号通路有关。展开更多
文摘目的 基于c-Jun氨基末端激酶(JNK)-p62/螯合体(SQSTM1)信号通路探讨糖肾煎对2型糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞的保护作用。方法 SD大鼠随机分成正常组、DN组、糖肾煎低、中、高[生药5、10、20 g/(kg·d)]剂量组(糖肾煎-L、M、H组)、二甲双胍组[100 mg/(kg·d)]。除正常组外,其余各组通过喂养高脂高糖饲料和腹腔注射链脲佐菌素(STZ)进行DN模型构建。药物干预结束后,检测大鼠血生化指标空腹血糖(FBG)、负荷后2 h血糖(P2 h BG)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)、六胺银(PASM)染色观察肾组织病理学变化;透射电镜(TEM)观察肾小球基底膜损伤和足细胞变化情况;Western印迹检测肾组织中微管相关蛋白1A/1B-轻链(LC)3、p-JNK、JNK、p62/SQSTM1、肾病蛋白(Nephrin)蛋白表达。结果 与正常组比较,DN组FBG、P2 h BG、SCr、BUN水平及p62/SQSTM1蛋白表达明显升高,LC3-Ⅱ、Nephrin蛋白表达和p-JNK/JNK明显降低(P<0.05);光镜下观察到肾小球缩小、管丛系膜明显扩张,并有基底膜增生增厚等现象;TEM下观察到肾小球基底膜增厚、足细胞排列紊乱、形态改变、足突融合等现象。与DN组比较,糖肾煎-L、M、H组和二甲双胍组FBG、P2 h BG、SCr、BUN水平及p62/SQSTM1蛋白表达明显降低,LC3-Ⅱ、Nephrin蛋白表达和p-JNK/JNK明显升高(P<0.05);并且肾小球基底膜增厚、足细胞足突融合等情况均获得一定程度减轻。结论 糖肾煎对2型DN大鼠足细胞具有一定保护作用,可能是通过调控JNK-p62/SQSTM1信号通路,提高足细胞自噬,从而起到肾脏保护功效。
文摘观察化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏炎症的干预作用,并探讨其机制。40只SD大鼠随机选取10只为正常组(C组),其余30只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,40 mg/kg)联合高糖高脂饲料喂养建立糖尿病模型。造模成功大鼠随机分为模型组(M组)和化瘀通络中药组(Z组)。Z组予以中药干预。16周后,各组大鼠留尿检测24 h尿蛋白定量(24 h UTP);ELISA法检测血清中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;取肾组织,应用免疫荧光法检测巨噬细胞标志蛋白CD68、经典活化巨噬细胞标志蛋白诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)的表达,应用Western blot法检测TAK1/JNK信号通路相关蛋白转化生长因子激活激酶-1(TAK1)、p-TAK1、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p-JNK的表达。实验结果显示,与C组比较,M组大鼠24 h UTP、MCP-1、IL-1β和TNF-α水平均明显升高(P<0.001);肾间质可见大量CD68和iNOS蛋白的沉积;p-TAK1和p-JNK蛋白的表达量明显增多(P<0.001)。与M组比较,Z组大鼠24 h UTP、MCP-1、IL-1β和TNF-α水平均显著降低(P<0.001,P<0.001,P<0.01,P<0.001);CD68和iNOS蛋白的沉积显著减少;p-TAK1和p-JNK蛋白的表达量均显著减少(P<0.05)。结果表明化瘀通络中药可降低糖尿病肾病大鼠蛋白尿,改善肾脏炎症反应,其机制可能与其抑制TAK1/JNK信号通路减少肾组织内巨噬细胞浸润、活化和炎症因子释放相关。
文摘目的:研究补肾培元胶囊治疗肺腺癌的抗肿瘤机制。方法:采用不同浓度补肾培元胶囊含药血清培养A549细胞,观察细胞形态;CCK-8法检测补肾培元胶囊对A549细胞增殖的影响;流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染色法)测定细胞凋亡率;RT-qPCR法分别检测氨基末端激酶(Jun N terminal kinase,JNK)、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 (Mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)的mRNA表达差异。结果:补肾培元胶囊含药血清培养A549细胞后细胞体积缩小,部分不能贴壁生长,细胞质及细胞核固缩,其中以30%含药血清组及35%含药血清组的细胞形态改变最为明显。CCK-8检测结果显示补肾培元胶囊含药血清可抑制A549细胞增殖,且具有一定的时间—浓度依赖性;流式细胞术结果显示补肾培元胶囊含药血清可诱导A549细胞凋亡;RT-q PCR结果显示补肾培元胶囊干预A549细胞后可升高JNK、MKP-1 mRNA表达水平。结论:补肾培元胶囊可抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,其机制可能与调控MKP-1/JNK信号通路有关。