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SK2和JPH2双基因重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
被引量:
4
1
作者
罗天霞
樊红琨
+3 位作者
芮丹丹
孙佳翕
马小芳
章茜
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2016年第5期580-583,共4页
目的:构建SK2和JPH2双基因重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2,并检测其在转染后HEK293细胞中的表达。方法:以p CMV6-entry/SK2为模板,PCR扩增出SK2片段,通过BgⅢ/HindⅢ酶切位点克隆入真核表达载体p IRES-EGFP,将JPH2序列插入构建的...
目的:构建SK2和JPH2双基因重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2,并检测其在转染后HEK293细胞中的表达。方法:以p CMV6-entry/SK2为模板,PCR扩增出SK2片段,通过BgⅢ/HindⅢ酶切位点克隆入真核表达载体p IRES-EGFP,将JPH2序列插入构建的SK2表达载体p IRES-EGFP-SK2,并通过酶切及测序鉴定。脂质体转染法将重组质粒p IRES-EGFP/SK2+JPH2转染HEK293细胞,采用Western blot法检测SK2通道蛋白和JPH2蛋白的表达。结果:构建的重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2经酶切和测序鉴定,证实插入的序列与Gen Bank中的SK2和JPH2基因序列完全相同。p IRES-EGFP/SK2+JPH2质粒转染HEK293细胞48 h后,SK2和JPH2蛋白均能成功表达。结论:成功构建了重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2。
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关键词
SK
2
通道
jph2蛋白
真核表达载体
HEK
2
93
下载PDF
职称材料
题名
SK2和JPH2双基因重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
被引量:
4
1
作者
罗天霞
樊红琨
芮丹丹
孙佳翕
马小芳
章茜
机构
郑州大学基础医学院生理学教研室
新乡医学院基础医学院
出处
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2016年第5期580-583,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目 81270248
81570311
文摘
目的:构建SK2和JPH2双基因重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2,并检测其在转染后HEK293细胞中的表达。方法:以p CMV6-entry/SK2为模板,PCR扩增出SK2片段,通过BgⅢ/HindⅢ酶切位点克隆入真核表达载体p IRES-EGFP,将JPH2序列插入构建的SK2表达载体p IRES-EGFP-SK2,并通过酶切及测序鉴定。脂质体转染法将重组质粒p IRES-EGFP/SK2+JPH2转染HEK293细胞,采用Western blot法检测SK2通道蛋白和JPH2蛋白的表达。结果:构建的重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2经酶切和测序鉴定,证实插入的序列与Gen Bank中的SK2和JPH2基因序列完全相同。p IRES-EGFP/SK2+JPH2质粒转染HEK293细胞48 h后,SK2和JPH2蛋白均能成功表达。结论:成功构建了重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2。
关键词
SK
2
通道
jph2蛋白
真核表达载体
HEK
2
93
Keywords
SK
2
channel
jph
2
protein
eukaryotic expression vector
HEK
2
93 cell line
分类号
R541.7 [医药卫生—心血管疾病]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SK2和JPH2双基因重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
罗天霞
樊红琨
芮丹丹
孙佳翕
马小芳
章茜
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2016
4
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