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新型鹅黄病毒JS804毒株的分离与鉴定 被引量:87
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作者 黄欣梅 李银 +13 位作者 赵冬敏 刘宇卓 张敬峰 何孔旺 侯继波 钮慧敏 李彬 温立斌 王永山 邵国青 张康宁 朱江宁 吴东明 高磊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期354-360,共7页
2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病。对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子。对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验。在... 2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病。对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子。对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验。在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理(DNase-sequence independent single primer amplification,DNase-SISPA)对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增。剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死。含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示:病毒粒子直径为50~60 nm。动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒。应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属(Flavi-virus)坦布苏病毒(Tembusu virus)基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%。据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%。将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010(简称JS804)。研究结果表明:此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒。 展开更多
关键词 非序列依赖性单引物扩增法 病毒 js804毒株
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鸡传染性法氏囊病毒JS株毒力测定 被引量:6
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作者 许小琴 刘红梅 +3 位作者 秦爱建 周小进 郜平光 Mohammed Kouadir 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1020-1022,共3页
35日龄SPF鸡半数致死量(LD50)和9日龄SPF鸡胚半数致死量(ELD50)试验结果显示,传染性法氏囊病毒(IBDV)JS株的LD50为10-3.60.1 mL/只,ELD50为10-5.20.1 mL/胚;1~6周龄SPF鸡及商品鸡的致病性试验结果显示,IBDV JS株对SPF鸡和商品鸡3周龄后... 35日龄SPF鸡半数致死量(LD50)和9日龄SPF鸡胚半数致死量(ELD50)试验结果显示,传染性法氏囊病毒(IBDV)JS株的LD50为10-3.60.1 mL/只,ELD50为10-5.20.1 mL/胚;1~6周龄SPF鸡及商品鸡的致病性试验结果显示,IBDV JS株对SPF鸡和商品鸡3周龄后的致病率为100%,最高致死率分别为93.75%和75%;应用RT-PCR方法从IBDV JS株中扩增的VP2基因,经序列测定分析结果显示,IBDV JS株的VP2基因与香港HK46、日本OKYM、英国UK661等国际超强毒株的氨基酸序列的同源性达99%以上。表明IBDV JS株为超强毒株。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒js 致病性 VP2基因 超强毒株
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口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株基因组全长感染性克隆的构建 被引量:4
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作者 李平花 白兴文 +6 位作者 卢曾军 孙普 郭建宏 曹伟军 刘湘涛 殷宏 刘在新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期706-711,共6页
利用长距离RT-PCR技术扩增病毒基因组3′端覆盖口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株近全长的3个片段(共约7.5 kb),并利用单一酶切位点将其分别克隆到pBluescriptSK+载体上。利用融合PCR扩增到基因组5′端含有15个C碱基的基因片段(约700 bp)... 利用长距离RT-PCR技术扩增病毒基因组3′端覆盖口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株近全长的3个片段(共约7.5 kb),并利用单一酶切位点将其分别克隆到pBluescriptSK+载体上。利用融合PCR扩增到基因组5′端含有15个C碱基的基因片段(约700 bp),并将其连接至pGEM-T载体。最后将这4个片段的阳性克隆装配至剔除T7启动子的低拷贝载体pcDNA3.1/Zeo(+)中构建该病毒株的全长cDNA克隆。以构建的FMDV Asia1/JS/China/2005株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶在体外转录得到病毒RNA,通过脂质体将其导入BHK细胞获得拯救病毒。对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析结果证实,通过体外转录获得了具有感染性的口蹄疫病毒。该株感染性克隆的构建为深入研究口蹄疫病毒的致病机制及研制新型疫苗等奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 Asia1/js/China/2005株 全长CDNA 转录物RNA 病毒拯救
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鹅黄病毒JS804株的生物学特性 被引量:2
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作者 钮慧敏 李银 +7 位作者 黄欣梅 赵东敏 刘宇卓 张敬峰 刘飞 李彤彤 周晓波 李祥瑞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期454-456,共3页
2010年4月以来,江苏、浙江、福建、安徽、山东、河南和河北等省的鸭、鹅发生了一种具有脑炎样神经症状的传染病。发病的种(蛋)鸭、种鹅产蛋量大幅下降甚至绝产,且其死亡率为2%~15%,而肉鸭、肉鹅死亡率为10%~55%,给鸭鹅养殖业造成了... 2010年4月以来,江苏、浙江、福建、安徽、山东、河南和河北等省的鸭、鹅发生了一种具有脑炎样神经症状的传染病。发病的种(蛋)鸭、种鹅产蛋量大幅下降甚至绝产,且其死亡率为2%~15%,而肉鸭、肉鹅死亡率为10%~55%,给鸭鹅养殖业造成了重大的经济损失。通过流行病学调查。 展开更多
关键词 病毒 js804 生物学特性
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猪流行性腹泻病毒JS2008株的传代培养及遗传变异分析 被引量:3
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作者 朱琳 孙冰 +5 位作者 孙杰 郭容利 范宝超 李彬 索朗斯珠 何孔旺 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1833-1840,共8页
【目的】明确猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)JS2008株的序列特征及其连续传代后的序列变化规律,为筛选出新的疫苗候选毒株提供参考依据。【方法】将分离自华东地区某发病猪场的PEDV JS2008株在Vero细胞系上传... 【目的】明确猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)JS2008株的序列特征及其连续传代后的序列变化规律,为筛选出新的疫苗候选毒株提供参考依据。【方法】将分离自华东地区某发病猪场的PEDV JS2008株在Vero细胞系上传代培养至100代,选取部分代次进行病毒滴度测定;每隔10代提取病毒RNA,采用RT-PCR对各代次病毒的S基因、ORF3基因和N基因进行扩增,并与PEDV经典和流行参考毒株进行序列比对及遗传变异分析。【结果】PEDV JS2008株经连续传代至100代,其病毒滴度由105.5TCID50/0.1 mL上升至107.5TCID50/0.1 mL。JS2008株在传代过程中共有11处碱基发生突变,其中9处发生在传代培养的第10~20代,变异主要位于S基因上(7/11);同时发现JS2008株及其传代株与attenuated DR13株的相似性最高。基于S基因和N基因序列构建的PEDV系统发育进化树均表明JS2008株各代次与attenuated DR13株同处于Group 3进化群;基于ORF3基因序列构建的PEDV系统发育进化树则显示,JS2008株各代次与attenuated DR13株均处于同一进化群(Group 2)。【结论】PEDV JS2008株通过Vero细胞系进行体外连续传代至100代,其碱基突变主要发生在病毒传代培养的第10~20代,病毒滴度明显提高,抗原量增加,为研制新型PEDV疫苗提供可能,同时推测病毒传代培养10~20代是病毒发生变异以适应细胞培养的活跃期。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) js2008株 传代培养 遗传变异
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JS/1/97/Go株GPMV M基因的克隆、序列分析
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作者 杨玉菊 刘娣 +1 位作者 何海娟 王君伟 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第2期63-65,共3页
关键词 js/1/97/Go株 M基因 克隆 序列分析 鹅副黏病毒
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Asia1型口蹄疫病毒基因组的测序分析 被引量:2
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作者 王琳萱 陈思敏 +1 位作者 张印红 孙东杰 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期290-296,共7页
对中国口蹄疫病毒Asia1/JS/2005毒株的全基因组进行了分段扩增并测序。结果表明,该毒株的基因组全长为8 174 nt,其中5’UTR为1 092 nt;ORF为6 990 nt;3’UTR为92 nt。利用DNAstar软件对该毒株和Asia1型其他24毒株基因组序列进行同源性... 对中国口蹄疫病毒Asia1/JS/2005毒株的全基因组进行了分段扩增并测序。结果表明,该毒株的基因组全长为8 174 nt,其中5’UTR为1 092 nt;ORF为6 990 nt;3’UTR为92 nt。利用DNAstar软件对该毒株和Asia1型其他24毒株基因组序列进行同源性分析表明,该毒株的非结构蛋白和5’UTR比较保守。研究还发现了可能与生物学功能相关的新的保守和变异区域。系统树分析表明Asia1/JS/2005,Asia1/1/YZ/2006,Asia1/WHN/2006,Asia1/HN/2006和Asia1/YS/2005属于同一分支,表明这些毒株间有着紧密的遗传关系,其中与其亲缘关系最为密切的是Asia1/YS/2005。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 Asia1 js 2005 基因组
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鸭短喙型小鹅瘟病毒SBDS-GPV JS01株的分离鉴定及其对雏鸭致病性的研究 被引量:9
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作者 傅宏庆 姚志兰 +2 位作者 王永娟 朱善元 荣先锋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1286-1293,共8页
2018年以来,江苏地区部分养殖场病鸭表现短喙、生长延滞。为确定该病的病原特征,本研究团队从某发病樱桃谷肉鸭场采集病料,经无菌处理后接种11日龄鸭胚连续传代培养,分离获得1株病毒,传至第3代次时可致感染鸭胚死亡,第5代次病毒滴度达5.... 2018年以来,江苏地区部分养殖场病鸭表现短喙、生长延滞。为确定该病的病原特征,本研究团队从某发病樱桃谷肉鸭场采集病料,经无菌处理后接种11日龄鸭胚连续传代培养,分离获得1株病毒,传至第3代次时可致感染鸭胚死亡,第5代次病毒滴度达5.3 log10ELD50/mL。通过PCR鉴定、电镜观察、基因遗传进化分析和动物回归试验,证明该毒株是短喙型小鹅瘟病毒(short beak and dwarfism syndrome-goose parvovirus,SBDS-GPV),遂将其命名为SBDS-GPV JS01株。为了进一步研究SBDS-GPV JS01株对不同品种鸭的易感性与致病力,将该毒株第5代病毒分别经皮下接种1日龄GPV阴性健康高邮鸭、金定鸭与苏邮1号鸭。结果显示,JS01株对各品种试验鸭均易感,感染鸭出现发育迟缓、腹泻、跛行瘫痪及上下喙萎缩变短等临床症状,发病率100%,死亡率10%~25%。上述结果表明,本研究成功分离鉴定出1株SBDS-GPV,该毒株具有较广的宿主感染谱。 展开更多
关键词 鸭短喙-侏儒综合征 细小病毒 SBDS-GPV js01 分离鉴定 致病性
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金山毒霸缉毒令
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《信息时空》 2003年第5期58-58,共1页
本病毒快报由金山毒霸反病毒资讯网提供,下述7种病毒为2003年5月发作且影响较大的病毒。金山毒霸都能对其查杀。你的爱机若不幸感染了这些病毒,请更新金山毒霸的病毒库并升级金山毒霸查杀病毒,如果想了解更多的病毒信息,请到WWW.d... 本病毒快报由金山毒霸反病毒资讯网提供,下述7种病毒为2003年5月发作且影响较大的病毒。金山毒霸都能对其查杀。你的爱机若不幸感染了这些病毒,请更新金山毒霸的病毒库并升级金山毒霸查杀病毒,如果想了解更多的病毒信息,请到WWW.duba.net查询。 展开更多
关键词 金山毒霸软件 计算机病毒 js.optiz病毒 W32.Magistr.24876@mm病毒 Wm.Twno.D病毒 W32/Urick@MM病毒 W32.Klez.A@mm病毒 VBS/San@M病毒 W32.White.Worm病毒 传播途径
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鸭甲型肝炎病毒JS2013株的鸭胚适应性与基因组分析 被引量:3
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作者 赵鹏 吴林林 +2 位作者 王经满 张立武 曹瑞兵 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第9期38-44,共7页
鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)是引起雏鸭病毒性肝炎的主要病原之一。本研究将2013-2015年分离的5株DHAV进行了鸭胚传代复苏,发现JS2013株的鸭胚适应性最好,可导致鸭胚在接毒后2-5d出现有规律的死亡。应用血凝试验和PC... 鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)是引起雏鸭病毒性肝炎的主要病原之一。本研究将2013-2015年分离的5株DHAV进行了鸭胚传代复苏,发现JS2013株的鸭胚适应性最好,可导致鸭胚在接毒后2-5d出现有规律的死亡。应用血凝试验和PCR方法进行了鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭瘟病毒(DPV)和鸭圆环病毒(Du CV)等的检测,结果均为阴性。将DHAV JS2013株继续在鸭胚传代并测定其病毒滴度,发现其在5至8代之间病毒滴度稳定提升,第8代病毒的ELD50为10-7.5/0.1m L,但8至20代没有出现有规律的病毒滴度提升。为了揭示DHAV JS2013株的基因组特征,应用RT-PCR方法分9段扩增了病毒基因片段,通过序列拼接获得了全基因组序列,Gen Bank登录号为KP721458。同源比对发现,与DHAV JS2013株基因同源性最高的毒株属于基因I型DHAV。将其编码多聚蛋白的序列与同源性最高的10株已登录序列的DHAV毒株进行比对,发现存在8处氨基酸位点变异。该研究探明了DHAV JS2013株在鸭胚的增殖特性及其基因特征,为研制新型鸭肝炎病毒灭活疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 鸭甲型肝炎病毒 js2013株 病毒滴度 基因特征
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山羊副流感病毒3型人工感染山羊的致病性 被引量:3
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作者 郝飞 李文良 +3 位作者 毛立 杨蕾蕾 张纹纹 江杰元 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2101-2105,共5页
为了明确新分离的山羊副流感病毒3型(CPIV3)JS2013株的致病性,本试验采用动物感染试验的方式研究该病毒在本属动物体内的复制、排毒以及组织病理损伤等情况。通过病毒血症、临床症状、病理组织学检测、HI抗体及中和抗体检测综合分析... 为了明确新分离的山羊副流感病毒3型(CPIV3)JS2013株的致病性,本试验采用动物感染试验的方式研究该病毒在本属动物体内的复制、排毒以及组织病理损伤等情况。通过病毒血症、临床症状、病理组织学检测、HI抗体及中和抗体检测综合分析病毒对山羊的致病性。结果表明,攻毒后的山羊出现以喷嚏、咳嗽、流鼻涕、眼分泌物增多以及呼吸困难为主的临床症状;攻毒后1d即可检出病毒血症,持续到攻毒后7d,且从攻毒后1~7d可以从鼻拭子中检测到排毒。剖检观察攻毒组山羊肺组织出现增生实变、肿大,组织病理学检测发现肺组织出现肺泡间隔增宽、肺泡结构消失、炎性细胞浸润等变化。HI和中和试验表明,山羊感染后7d开始出现血凝抑制抗体,14d出现中和抗体,并持续升高至28d。以上结果证实CPIV3JS2013株对山羊具有较强的致病性,为后续研究奠定基础。 展开更多
关键词 山羊副流感病毒3型(CPIV3) js2013株 人工感染 山羊
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抗2019-nCoV的单克隆抗体作用机制及其制剂研究进展 被引量:3
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作者 马亦林 《中华临床感染病杂志》 CAS CSCD 2021年第2期91-96,共6页
研究者发现,在临床抢救新型冠状病毒肺炎(COVID-19)危重患者中,中和活性的单克隆抗体具有靶点明确、纯度高以及可大规模制备等优势,有望成为治疗COVID-19的有力武器。本文就2019新型冠状病毒(2019-nCoV)侵入宿主细胞的途径、病毒新的主... 研究者发现,在临床抢救新型冠状病毒肺炎(COVID-19)危重患者中,中和活性的单克隆抗体具有靶点明确、纯度高以及可大规模制备等优势,有望成为治疗COVID-19的有力武器。本文就2019新型冠状病毒(2019-nCoV)侵入宿主细胞的途径、病毒新的主要变异体以及国内外抗2019-nCoV单克隆抗体研发进展进行介绍,以供临床工作者或研究者参考。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 抗体 中和 跨膜蛋白酶 2019新型冠状病毒 变异株 REGN-CoV2抗体鸡尾酒疗法 js016 美普珠单抗
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