JY佐剂对人乳头瘤病毒18型L1蛋白病毒样颗粒黏膜免疫效果的影响

目的探讨JY佐剂对人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)18型L1蛋白病毒样颗粒(Virus-like parti-cle,VLP)黏膜免疫效果的影响,并观察鼻腔反复免疫后与HPV58、11和6型的免疫交叉反应。方法用含或不含JY佐剂的HPV18 L1 VLP分别经肌肉和鼻腔免疫BALB/c小鼠,并设PBS对照组,于第0、3、6周各免疫1次,免疫后第2、5、8周采血,ELISA法检测血清IgG抗体滴度;于第8周分离脾淋巴细胞并收集呼吸道灌洗液,采用IFNγELISPOT试剂盒检测细胞免疫效果,ELISA法检测黏膜免疫效果;鼻腔免疫各组取5只小鼠,继续免疫10次,每次间隔3周,收集第14、20、26、32和38周的血清,ELISA法检测HPV18 L1蛋白与HPV58、11和6型的免疫交叉反应。结果免疫3次后,不含或含有佐剂的HPV18 L1蛋白经肌肉免疫后的血清IgG抗体滴度(均为104.6)高于经鼻腔免疫后的血清IgG抗体滴度(分别为101.9和102.8)。含有佐剂的HPV18 L1蛋白经鼻腔免疫后呼吸道灌洗液中sIgA抗体浓度(30.06μg/ml)明显高于不含佐剂的HPV18 L1蛋白鼻腔免疫组(23.47μg/ml)(P<0.01),但肌肉免疫组未检测到sIgA抗体。含有佐剂的HPV18 L1蛋白经鼻腔免疫诱导的细胞斑点数明显高于不含佐剂的HPV18 L1蛋白鼻腔免疫组(P<0.01),不含佐剂与含佐剂的HPV18 L1蛋白肌肉免疫组诱导的细胞斑点数差异无统计学意义(P>0.05)。HPV18 L1免疫小鼠后的血清与HPV58、11和6型之间均有交叉反应,在第32周血清特异性IgG抗体滴度最高。结论 HPV18 L1 VLP经肌肉免疫后,其血清抗体水平高于鼻腔免疫组,但该蛋白鼻腔免疫后细胞免疫反应和黏膜sIgA抗体水平均高于肌肉免疫组;JY佐剂能增强HPV18 L1蛋白经鼻腔免疫后的小鼠细胞反应及黏膜sIgA抗体应答,但肌肉免疫组佐剂作用不明显;HPV18 L1蛋白反复鼻腔免疫后,可拓宽抗原保护谱。

HPV16与18型L1病毒样颗粒联合JY佐剂鼻腔免疫食蟹猴诱导黏膜免疫应答

目的探讨人乳头瘤病毒16和18型L1病毒样颗粒与JY佐剂联合（HPV16＋18L1VLP＋JY佐剂）鼻腔免疫食蟹猴的黏膜免疫效果。方法分别用低剂量和高剂量HPV164-18L1VLP＋JY佐剂疫苗鼻腔喷雾免疫食蟹猴3次（第0、4、8周），并设PBS对照组，于第2、4、6、8、16周采集阴道分泌物、鼻腔分泌物和口腔分泌物，ELISA法检测sIgA抗体浓度。结果低剂量和高剂量HPV16＋18L1vLP＋JY佐剂疫苗均诱导鼻腔、口腔和阴道分泌物产生sIgA抗体，均高于对照组（P〈0．01）；低剂量组和高剂量组sIgA抗体水平差异无统计学意义（P〉0．05），阴道分泌物sIgA抗体水平高于鼻腔与口腔分泌物sIgA抗体水平（P〈0．01），鼻腔分泌物sIgA抗体水平与口腔分泌物sIgA抗体水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论含有JY佐剂的HPV16和18型L1VLP鼻腔喷雾免疫食蟹猴，能够有效诱导阴道黏膜产生sIgA抗体，且高于口腔和鼻腔黏膜sIgA抗体浓度。