Notch2、Jagged-2在缺氧合并高糖大鼠心肌细胞中的表达研究

目的:探讨Notch2、Jagged-2在缺氧合并高糖大鼠心肌细胞中的表达。方法:选取H9C2细胞(购自中国科学院上海细胞库),进行常规细胞传代培养、冻存,将其随机均分为H9C2(正常组)、缺氧组、高糖组、缺氧+高糖组。H9C2心肌细胞常规培养,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测大鼠心肌中Notch2和Jagged-2 mRNA的表达水平,采用Western blot方法检测各组大鼠心肌中Notch2和Jagged-2蛋白的表达水平。结果:缺氧组和高糖组的Notch2、Jagged-2 mRNA和蛋白表达水平均高于H9C2组、缺氧+高糖组,比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Notch通路在缺氧和高糖刺激下的H9C2心肌细胞中被激活,而缺氧+高糖同时作用于心肌细胞Notch通路的受体和配体表达明显降低。

绒毛和胎盘中Jagged-1/Jagged-2的表达与蜕膜中CD56+NK表达相关性探讨

目的探讨绒毛和胎盘中Jagged-1/Jagged-2的表达与蜕膜中CD56+NK表达相关性情况。方法分析该院2013年3月—2014年2月收治的妊娠期流产对象42例和正常剖宫产30例的临床资料,对Jagged-1、CD56+NK细胞和Jagged-2应用免疫组化方法检测,通过对其测定的情况。结果胎盘组Jagged-1高于绒毛组,Jagged-2低于绒毛组,自然流产组Jagged-1、Jagged-2及CD56+的表达均低于人工流产组,CD56+NK细胞和绒毛组织中的Jagged-1阳性细胞表达水平、Jagged-2阳性细胞表达水平均呈现明显正相关性,差异有统计学意义(r=0.91,0.95,P<0.05)。结论 Jagged-1、Jagged-2对NK细胞表型的变化可能两者一起参与,因而对妊娠结局造成影响,并且形成妊娠免疫耐受。

Notch-1和Jagged-2基因在先天性巨结肠中的表达及意义

目的研究先天性巨结肠症（HD）患儿各段肠管中Notch-1及Jagged-2的表达情况，初步探讨Notch-1及Jagged-2表达与HD发生的可能关系。方法选取2005-2010年间在中国医科大学附属盛京医院行手术治疗的HD患儿结肠标本共30例．将HD患儿正常段肠管设为对照组．移行段及痉挛段肠管设为实验组，应用免疫组织化学（免疫组化）染色、Westernblot及RT-PCR法观察Notch-1及Jagged-2在各肠段的表达情况。结果免疫组化染色示HD患儿正常段肠管的神经节细胞中有大量Notch-1及Jagged．2阳性细胞的表达．而在痉挛段肠管中没有这两种细胞的表达．移行段肠管中可见少量Notch-1及Jagged-2阳性细胞的表达。Westeinblot结果显示Notch-1和Jagged-2蛋白在痉挛段肠管相对表达量分别为0．19±0．02和0.13±0．04．明显少于移行段肠管和正常段肠管（0．58±0．05和0．52±0．04；0．72±0．04和0．69±0．04）（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，Notch-1及Jagged-2的mRNA水平与蛋白表达一致。结论HD患儿痉挛段肠管中Notch-1及Jagged-2的表达缺失可能与HD的发生有关。

Notch 2、Jagged-2在心肌梗死合并糖尿病大鼠心肌中表达研究

目的探讨Notch 2、Jagged-2在心肌梗死合并糖尿病大鼠心肌中表达。方法选取6～8周龄健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、糖尿病(DM)组、糖尿病假手术(DM-sham)组、心肌梗死(MI)组、心肌梗死合并糖尿病(DM-MI)组,每组6只,建立模型。应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各实验组大鼠血清中磷酸肌酸激酶同功酶(CK-MB)和肌钙蛋白的水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测大鼠心肌中Notch 2和Jagged-2 m RNA的表达水平,采用Western blot方法检测各实验组大鼠心肌中Notch 2和Jagged-2蛋白的表达水平。结果 MI组、DM-MI组CK-MB浓度、肌钙蛋白浓度与对照组、DM组和DM-sham组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。DM组、DM-sham组及MI组三组Notch 2 m RNA和蛋白表达水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05); DM-MI组与对照组、DM组、DM-sham组、MI组比较,Notch 2 m RNA和蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P <0. 05)。DM组、DM-sham组、MI组、DM-MI组Jagged-2 m RNA表达水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05); DM组、DM-sham组、MI组Jagged-2蛋白表达水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论在单纯糖尿病和单纯心肌梗死大鼠的心肌组织中,Notch受体和配体的表达均升高的趋势,而心肌梗死合并糖尿病大鼠的Notch信号通路各指标反而呈降低的趋势。

miR-145介导Notch2/Jagged-2信号通路改善心肌缺血-再灌注大鼠心肌损伤

目的探讨miR-145对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用及可能的机制。方法按随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组(Sham)、模型组(I/R)和miR-145 mimic组(miR-145);HE染色检测各组大鼠心肌组织病理变化;TUNEL染色检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;ELISA试剂盒检测大鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、白介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;qPCR检测各组大鼠心肌miR-145、Notch2及Jagged-2 mRNA的表达;Western blot检测大鼠心肌中Notch2及Jagged-2蛋白表达。结果 miR-145可减轻大鼠心肌病理损伤,降低心肌细胞凋亡,使大鼠体内CK-MB、cTnT及LDH水平显著降低,抑制炎症反应,降低IL-6、IL-1β及TNF-α水平,抑制Notch2及Jagged-2 mRNA及蛋白表达。结论 miR-145对I/R大鼠心肌组织损伤有一定的改善作用,可能是通过抑制Notch2/Jagged-2信号通路活性实现的。