野百合碱诱导大鼠肺动脉高压时对肺血管壁Jagged2/Notch3信号分子表达的影响

目的:观察野百合碱诱导大鼠肺动脉高压时肺血管壁Jagged2/Notch3信号分子表达的变化,探讨Jagged2/Notch3信号在肺动脉高压发生中的作用和意义。方法:45只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、溶剂对照组(S组)和野百合碱模型组(M组),每组15只,通过一次性腹腔注射野百合碱50 mg/kg建立肺动脉高压模型,溶剂对照组注射相同剂量的溶媒。4周时通过HE染色观察肺血管重构,通过右心导管测定平均肺动脉压(m PAP)和右心室收缩压(RVSP)。采用免疫组化和实时荧光定量PCR等方法检测肺血管壁Jagged2/Notch3/Hes5蛋白和mRNA表达的变化。结果:与正常对照和溶剂对照组相比,4周时野百合碱模型组的血管壁显著增厚,中膜厚度百分比增加(P<0.01);此外野百合碱模型组的m PAP和RVSP显著高于正常对照和溶剂对照组(P<0.01);免疫组化和实时荧光定量PCR结果提示Jagged2主要表达于肺小动脉内膜,Notch3、Hes5主要表达于肺小动脉中层平滑肌,与溶剂对照组以及正常对照组相比,野百合碱模型组肺小动脉的Jagged2、Notch3和Hes5表达显著增高。结论:Jagged2/Notch3信号分子的激活可能在野百合碱诱导肺动脉高压发生中起重要作用。

Jagged2在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨Jagged2在结肠癌中的表达及其临床意义.方法应用免疫组化、实时定量PCR及蛋白质印迹等方法检测Jagged2在42例结肠癌及癌旁组织中的表达,并结合免疫组化结果及结肠癌患者的临床病理资料进行统计学分析.结果结肠癌及癌旁组织中均检测到Jagged2 mR NA和蛋白质的表达.Jagged2在结肠癌中的表达水平明显高于其对应的癌旁组织(P<0.05);免疫组化染色结果显示,Jagged2在结肠癌组织中的阳性比例显著高于癌旁组织(85.7%vs 33.3%,χ~2=23.92,P<0.01),且Jagged2的表达与肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移及浸润深度密切相关(P<0.05).结论Jagged2在结肠癌肿瘤组织中表达上调,可能与结肠癌的发生发展和浸润转移等恶性生物学行为相关.

NOTCH配体Jagged2和Delta4对32D细胞的分化抑制研究

目的 探讨Notch信号传导系统中相关配体Jagged2和Delta4对髓系前体细胞 32D的分化抑制作用 .方法 构建Delta4高表达载体pTracer.CMV .Delta4 .FLAG ,制备Delta4 -CHO细胞 ;将Notch1- 32D细胞加入含G -CSF培养液的CHO、Jagged2 -CHO及Delta4 -CHO细胞中 ,观察Notch1- 32D细胞分化及分化抑制情况 .结果 构建成功Delta4高表达载体pTracer.CMV .Delta4 .FLAG并稳定转染CHO细胞 .在G -CSF存在下 ,Notch1- 32D细胞可分化为成熟的粒细胞 ;Jagged2能抑制G -CSF引起的Notch1- 32D细胞分化 ,但Delta4不能抑制G -CSF引起的Notch1- 32D细胞分化 .结论 分化抑制实验发现NOTCH配体中 ,Delta4不能抑制G -CSF引起的Notch1- 32D细胞分化 ,但Jagged2能抑制G -CSF引起的Notch1- 32D细胞分化 。

TCDD诱发昆明小鼠腭突畸形过程中对Jagged2蛋白表达的影响

目的:检测四氯二苯并二恶英(TCDD)诱发昆明小鼠腭裂畸形过程中对Jagged2蛋白表达的影响。方法:将30只昆明孕鼠随机分为实验组和对照组,实验组GD12天孕鼠一次性灌服40μg/kg TCDD,对照组灌服等剂量花生油,分别于GD13、GD14、GD15剖腹取胎鼠头部标本,作冠状位组织切片。采用免疫组化方法检测胚胎腭中Jagged2蛋白表达。结果:Jagged2主要表达于胚胎腭突上皮组织;GD14、GD15时,对照组中Jagged2蛋白表达显著下降(P<0.05),但实验组未出现明显表达变化。结论:Jagged2在胚胎腭突上皮的异常表达可能参与了TCDD诱发小鼠腭裂畸形发生。

Jagged2和Gli1在人结肠癌组织中的表达及其相关性

目的:检测Jagged2和Gli1蛋白在结肠癌组织中的表达情况并分析两者表达相关性。方法:采用免疫组织化学染色检测60例原发性结肠癌及对应癌旁组织中Jagged2和Gli1蛋白的表达情况,分析Jagged2蛋白表达与结肠癌不同临床病理特征的相关性以及其与Gli1蛋白表达相关性。结果:Jagged2和Gli1蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率分别为71.7%(43/60)和78.3%(47/60),而对应癌旁组织中Jagged2和Gli1蛋白阳性表达率分别为33.3%(20/60)和36.7%(22/60),差异具有统计学意义(χ2=17.678,P=0.000;χ2=21.313,P=0.000)。结肠癌组织中Jagged2蛋白表达与浸润深度(χ2=4.930,P=0.026)、淋巴结转移(χ2=7.520,P=0.006)和肿瘤分期(χ2=4.705,P=0.030)有关。另外,结肠癌组织中Jagged2与Gli1蛋白表达呈显著负相关(r=-0.518,P=0.019)。结论:结肠癌组织中Jagged2蛋白高表达并与恶性临床病理特征密切相关,且Jagged2与Gli1蛋白表达负相关,提示Jagged2在胃癌侵袭转移中可能发挥重要作用。

针刺经筋点对膝关节骨性关节炎Notch信号通路调控机制及Notch1、Notch2、Jagged1、Jagged2蛋白表达的实验研究

目的 通过针刺经筋点对家兔膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)的干预治疗,观察家兔治疗前后血清中缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、膝关节软骨细胞中Notch1、Notch2、以及Jagge1、Jagged2蛋白的表达情况,以探讨在经筋理论指导下的针刺方法对膝关节炎家兔的Notch信号通路的调控机制。方法 选取30只清洁级日本大耳白兔,雌雄各半,随机数字表法抽取8只正常饲养做为空白组,余下兔均按左后肢伸直位石膏固定制动法(Vidman法)制造兔膝关节炎模型。制动满6周时,拆除固定,随机选取空白组和造模家兔各2只,应用量角器检测膝关节关节活动度,并处死取关节软骨作病理观察。将造模后的家兔随机分为模型组、经筋组、西药组,6只/组,并分别于干预4周后处死取样。用量角器和改良Lequesne MG评分标准分别测量和观察治疗前后兔膝关节的关节活动度(ROM)和行为学指标,取关节软骨标本并观测其形态学改变,ELISA法检测血清中HIF-2α含量,并采用Western Blot法检测Notch1、Notch2、以及Jagged1、Jagged2蛋白表达量。结果 治疗后,经筋组和西药组的标本中HIF-2α、Notch1、Notch2、以及Jagged1、Jagged2蛋白的阳性表达率均低于模型组,但略高于空白组(P<0.01)。结论 经筋理论指导下,针刺对膝骨关节炎家兔有良好的疗效,其作用机制可能是降低HIF-2α、受体Notch1、Notch2、以及配体Jagged1、Jagged2蛋白的表达从而对Notch信号通路产生抑制作用,以减轻家兔膝骨关节炎的发展,为临床提供理论支持。

佐剂关节炎大鼠肺功能变化与Notch1、Notch2/Jagged1、Jagged2通路的相关性

目的观察佐剂关节炎(AA)大鼠肺功能降低与肺组织Notch1、Notch2、Jagged1、Jagged2的关系。方法将40只大鼠随机均分为正常组和模型组,模型组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(CFA)0.1 ml致炎,复制成AA模型。致炎30 d后,观察两组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、肺功能、肺组织形态学变化,RT-PCR法检测肺组织Notch1、Notch2及Jagged1、Jagged2的表达。结果模型组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数升高,肺功能参数用力肺活量(FVC)、50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、用力最大呼气流量(PEF)降低,肺组织Notch1、Jag-ged1、Jagged2的表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。相关分析显示,模型组大鼠肺功能参数FVC与Jagged1呈正相关,1s内平均呼气流量(FEV1/FVC)与Notch1呈正相关,FEF50与Jagged2呈正相关,FEF75与Notch1、Notch2呈正相关,与Jag-ged1呈负相关(P<0.05,P<0.01)。结论 AA大鼠在发生关节炎症的同时出现肺功能降低,而肺功能降低与Notch受体/配体呈高度相关,提示致炎后形成的免疫复合物沉积于肺组织,激活肺组织Notch信号通路,通过级联放大效应进一步导致肺功能降低。

微核糖核酸-124靶向Jagged2对低氧性肺动脉高压新生大鼠血管重塑的影响

目的探究微核糖核酸-124(简称miR-124)对低氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠血管重塑的影响,及其与Jagged2的靶向关系。方法将48只Wistar新生大鼠随机分为常氧组、低氧组、miR-124组和miR-124阴性对照(NC)组,每组12只。miR-124组和miR-124 NC组大鼠分别给予相应的miR-124激动剂或miR-124 NC行尾静脉注射。除常氧组正常饲养外,将其余3组大鼠置于氧气体积分数为0.1的常压低氧舱中28 d,制备HPH大鼠模型。使用压力信号采集系统记录平均肺动脉压(mPAP);计算右心室肥大指数[RV/(LV+S)];采用H-E染色检测肺组织病理学变化,并计算肺血管内壁厚度与外径的比值(MT%)、内膜横截面积与总动脉横截面积的比值(MA%);检测血清NO、内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的水平;实时荧光定量PCR检测大鼠肺组织miR-124、Jagged2 mRNA水平;免疫印迹实验检测大鼠肺组织Jagged2、split多毛增强子1(Hes-1)蛋白质水平;双荧光素酶实验验证miR-124与Jagged2的靶向关系。结果与常氧组相比,低氧组和miR-124 NC组大鼠的mPAP和右心室肥大指数、MT%和MA%、ET和AngⅡ水平均显著升高(P值均<0.05),NO水平显著降低(P<0.05)。与低氧组和miR-124 NC组相比,miR-124组大鼠的mPAP和右心室肥大指数、MT%和MA%、ET和AngⅡ水平均显著降低(P值均<0.05),NO水平显著升高(P<0.05)。肺组织H-E染色结果显示,低氧组和miR-124 NC组大鼠肺动脉壁明显增厚,管腔变窄,细胞排列紊乱,呈现肺动脉重塑特征。与miR-124 NC组相比,miR-124组大鼠的肺动脉壁增厚程度明显减轻,管腔狭窄不明显。与常氧组相比,低氧组和miR-124 NC组大鼠肺组织的miR-124水平显著降低(P值均<0.05),Jagged2 mRNA、Jagged2和Hes-1蛋白质水平均显著升高(P值均<0.05)。与低氧组和miR-124 NC组相比,miR-124组大鼠的miR-124水平显著升高(P值均<0.05),Jagged2 mRNA、Jagged2和Hes-1蛋白质水平均显著降低(P值均<0.05)。双荧光素酶实验结果证实,miR-124与Jagged2存在靶向结合位点。结论miR-124可能通过靶向下调Jagged2表达改善HPH诱导的肺血管重塑。

Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤协同肌源性干细胞移植鼠骨髓中的表达和作用

目的探讨Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植小鼠骨髓中的表达和作用。方法将雌性昆明小鼠随机分为6组:照射模型组、骨髓移植组、MDSCs移植组和当归补血汤不同剂量(1、3和5倍)预处理+MDSCs移植组。各组分别给予生理盐水和不同剂量DBD灌胃1周后,经8Gy^(137)Cs-γ射线照射,尾静脉分别移植骨髓细胞和MDSCs。用Real-time PCR分别检测3周和8周末时小鼠骨髓中Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3 mRNA表达量。结果 3周末,骨髓移植组和MDSCs移植组Notch2mRNA上调,给药组下调,组间比较无统计学差异(P>0.05)。Notch3 mRNA均下调(P<0.05),且给药2组下调幅度最大;8周末,除MDSCs移植组外,其余各组Notch2 mRNA均下调(P<0.05),且以给药2组下调幅度最大。各干预组Notch3 mRNA均下调(P<0.05),其中骨髓移植组下调幅度最小;Jagged2和Hes3 mRNA均未见表达。结论 Jagged2配体和Hes3靶基因既不参与造血干细胞向造血前体细胞分化过程,也不参与MDSCs向造血干细胞分化、增殖过程。而Notch2受体和Notch3受体在这些过程中扮演不同的角色。在造血重建后期,5倍当归补血汤可通过上调Notch2和Notch3表达来促进淋巴细胞的发育。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对Notch1受体及jagged1与jagged2配体表达的影响

目的探讨丙戊酸钠(VPA)对多发性骨髓瘤(MM)细胞株RPMI8226细胞Notch受体及配体表达的影响。方法培养RPMI8226细胞后,分为4组,对照组(空白)和小中大3个浓度(VPA 2,4,8 mmol·L-1)实验组。用不同浓度VPA处理RPMI8226细胞24,48,72 h,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖抑制作用。用反转录聚合酶链式反应、蛋白免疫印迹方法检测细胞Notch1、jagged1及jagged2 mRNA和Notch1、jagged1及jagged2蛋白在VPA作用后48 h的表达。结果 VPA对RPMI8226细胞的增殖抑制作用具有明显的浓度-时间依赖效应。不同浓度VPA作用RPMI8226细胞48 h,与对照组相比,Notch1、jagged1、jagged2 mRNA和Notch1、jagged1、jagged2蛋白表达均明显降低(P<0.05),且随着VPA浓度的不断增高,各基因和蛋白的表达量逐渐降低,3个浓度VPA组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 VPA能够下调RPMI8226细胞Notch1受体、jagged1及jagged2配体的表达水平,这可能是VPA治疗多发性骨髓瘤的作用机制之一。

当归补血汤协同肌源性干细胞移植促造血重建的研究:Notch2、Jagged2和Hes5在鼠脾脏中的表达及作用

目的了解Notch2、Jagged2和Hes5在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植鼠脾脏中的表达及其临床意义。方法根据随机数字表将150只雌性昆明小鼠分成6组,于照射前1周分别给予6组不同剂量当归补血汤或生理盐水灌胃。在经8Gy 137Cs-γ射线照射后的小鼠尾静脉中移植骨髓细胞或肌源性干细胞。并于3周和8周末时采用实时定量PCR方法检测小鼠脾脏中Notch2、Jagged2和Hes5mRNA表达。结果移植3周末,与照射组相比,各给药组Notch2、Jagged2mRNA及给药3组Hes5mRNA表达上调,给药1组和给药2组的Hes5mRNA表达下调,且组间具有统计学差异(Notch2,F=4.777,P=0.012;Jagged2,F=11.650,P=0.000;Hes5,F=23.229,P=0.000)。移植8周末,与照射组相比,各给药组Notch2、Jagged2mRNA表达上调,Hes5mRNA表达下调,且仅Jagged2mRNA组间存在统计学差异(Notch2,F=2.979,P=0.056;Jagged2,F=18.796,P=0.000;Hes5,F=2.202,P=0.122)。结论在骨髓移植早期和晚期,以及MDSCs移植早期,Notch2和Jagged2均未参与B淋巴细胞的分化发育。Hes5在骨髓移植早期参与了脾脏中B淋巴细胞的发育调控。3倍剂量当归补血汤可在MDSCs移植早期通过调控Notch2及Jagged2来促进B淋巴细胞发育。

剥脱综合征患者血浆Jagged1和Jagged2表达

目的探讨维吾尔族剥脱综合征(exfoliation syndrome, XFS)患者血浆Jagged1与Jagged2中的表达及其临床意义。方法新疆维吾尔自治区维吾尔族XFS患者18例为观察组,同期维吾尔族体检健康者18例为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测2组血浆Jagged1 mRNA、Jagged2 mRNA相对表达量,并进行比较。结果观察组Jagged1 mRNA、Jagged2 mRNA相对表达量[19 940×10^(-7)(6 730×10^(-7), 53 870×10^(-7))、0.74×10^(-7)(0.05×10^(-7), 5.91×10^(-7))]均低于对照组[983 000×10^(-7)(533 290×10^(-7),3 007 950×10^(-7))、2 448 550×10^(-7)(121 009×10^(-7),5 100 100×10^(-7))](P<0.05)。结论新疆维吾尔自治区维吾尔族XFS患者血浆Jagged1、Jagged2表达降低,可能参与XFS发病机制的调节。

通利枢机针刺法对右侧大脑中动脉永久性缺血大鼠Jagged2和Notch2蛋白表达的影响

目的:观察通利枢机针刺法对右侧大脑中动脉永久性缺血大鼠行为学、脑梗死体积百分比、缺血侧脑半球海马组织Jagged2和Notch2蛋白表达的影响,探讨通利枢机针刺法改善缺血性脑血管病的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、阳性药物组、普通针刺组、通利枢机组,每组10只。采用线栓法建立右侧大脑中动脉永久性缺血大鼠模型。阳性药物组给予胞二磷胆碱(0.4 mg/kg)灌胃;普通针刺组针刺"百会""大椎"穴,每天15 min;通利枢机组针刺左侧"正营""天井""环跳"穴,每天15 min。各组均连续干预28 d。术后第1、7、14、21、28天进行神经功能缺损评分,全部治疗结束后检测大鼠脑梗死体积百分比,蛋白质免疫印迹法检测大鼠右侧脑半球海马组织Jagged2和Notch2蛋白的表达。结果:与假手术组比较,同时点模型对照组神经功能缺损评分显著升高(P<0.001);与模型对照组、阳性药物组、普通针刺组比较,通利枢机组术后第21天神经功能缺损评分均显著降低(P<0.01)。与假手术组比较,模型对照组脑梗死体积百分比明显升高(P<0.05);与阳性药物组比较,通利枢机组脑梗死体积百分比明显降低(P<0.05)。与模型对照组比较,普通针刺组Jagged2蛋白表达明显上调(P<0.01);与模型对照组、阳性药物组、普通针刺组比较,通利枢机组Jagged2和Notch2蛋白表达明显上调(P<0.01)。结论:针刺可以改善右侧大脑中动脉永久性缺血大鼠神经功能缺损的行为学表现,通利枢机针刺法对大鼠缺血侧海马组织Jagged2和Notch2蛋白有明显上调作用,这可能与激活Notch信号通路达到神经保护作用有关。

重组人Jagged2胞外区蛋白的真核表达与免疫原性鉴定

本研究目的在于使用哺乳动物真核表达系统获得具有高免疫原性重组人Jagged2胞外区C2-EGF2区段(aa27~309),为后续抗Jagged2抗体相关研究奠定基础。首先,合成JAG2胞外区基因并插入pcDNA3.1(+)质粒构建哺乳细胞真核表达载体。使用阳离子脂质体转染试剂瞬时转染HEK293F细胞,收集培养上清,使用镍离子亲和层析柱梯度洗脱纯化,纯化后蛋白样品经过12%胶浓度SDS-PAGE电泳,免疫Balb/c小鼠并利用间接ELISA法测试小鼠抗血清效价。结果显示,150 mmol/L咪唑浓度下洗脱出的Jagged2蛋白在相对分子质量35000左右出现单一电泳条带,ImageJ分析纯度达90%以上。3次免疫后小鼠产生的抗血清效价最高可达10^(6)以上。此结果表明真核表达得到的Jagged2胞外区蛋白具有较高的纯度和免疫原性,可以作为免疫原蛋白支持后续的抗体筛选。

JAG2、INHBA、PD-L1蛋白在老年大肠癌组织中表达及与预后的关系

目的 探讨老年大肠癌患者肿瘤组织中Jagged 2蛋白(JAG2)、抑制素βA(INHBA)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)表达与预后的关系。方法 选择2017年5月至2019年5月在湖南省肿瘤医院接受手术治疗的112例老年大肠癌患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中JAG2、INHBA、PD-L1表达。随访患者的生存时间,Cox回归模型分析JAG2、INHBA、PD-L1表达与老年大肠癌患者预后的关系。结果 患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化患者JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率高于中高分化患者,TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。Cox回归模型显示,肿瘤低分化、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、JAG2、INHBA、PD-L1表达阳性为影响老年大肠癌患者无进展生存时间的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。大肠癌患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阴性患者总生存率高于JAG2、INHBA、PD-L1阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。大肠癌患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阴性患者无进展生存率高于JAG2阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 老年大肠癌患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率较高,且对预后评估具有重要意义。

Notch配体在诱导淋巴细胞分化中的不同作用

脊椎动物Notch配体为一组单次跨膜蛋白,包括Delta1,Delta3,Delta4,Jagged1和Jagged2,它们与Notch受体结合激活Notch信号通路,决定细胞分化的命运。这些Notch配体具有不同的生物学特性,在诱导造血干/祖细胞和胸腺细胞向T、B和NK细胞分化中起着不同作用,可能为免疫性疾病的治疗提供新的药物靶点。

Notch信号通路在胰腺癌中的表达及其作用研究

目的研究Notch信号通路成员在胰腺癌组织中的异常表达及其在胰腺癌发生发展中的重要作用。方法应用Affymetrix基因表达谱芯片筛选10例胰腺癌组织及其癌旁组织中Notch信号通路存在差异表达的成员,并应用实时定量PCR和Western blot印迹法加以验证;利用携锯齿2(Jagged 2,JAG2)基因siRNA片段的慢病毒表达载体转染胰腺癌原代细胞构建JAG2基因阻遏表达胰腺癌细胞株,并采用MTT法、流式细胞术、侵袭小室实验法观察与分析该细胞株增殖、细胞周期及侵袭转移能力的变化。结果 Affymetrix基因表达谱芯片共检测到差异表达基因512个,其中表达上调的基因419个,表达下调的基因93个; Notch信号通路中存在差异表达的为JAG2(上调表达8. 20倍)、NOTCH1(上调表达3. 74倍)、HES1(上调表达3. 27倍)、NOTCH2(上调表达3. 16倍); PCR和Western blot法验证结果与基因芯片结果相符;与对照组相比,JAG2基因阻遏表达胰腺癌细胞株的生长明显受到抑制;经流式细胞仪分析两组细胞周期示JAG2基因阻遏表达胰腺癌细胞株的凋亡与S期阻滞明显增强;侵袭小室侵实验结果示JAG2基因阻遏表达胰腺癌细胞株袭转移能力明显减弱(P <0. 05)。结论 Notch信号通路部分成员在胰腺癌组织中存在显著差异表达,且阻遏该成员表达可影响胰腺癌细胞生长、细胞周期及侵袭转移。

Notch-Jagged/Delta信号通路在佐剂关节炎大鼠肺功能降低中的作用

目的:观察佐剂关节炎(AA)大鼠肺功能、肺组织Notch信号通路的变化,探讨AA大鼠肺功能降低的机制。方法:将30只大鼠随机分为正常组和模型组,每组15只,向模型组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 mL致炎,复制成AA模型。致炎30 d后,观察两组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、肺功能、肺病理形态学及肺组织Notch受体/配体表达的变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、肺功能参数0.3 s内平均呼气流量(FEV0.3/FVC)、肺泡炎程度、肺组织Notch3和Notch4及Jagged2的表达升高(P<0.05或P<0.01);50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、用力最大呼气流量(PEF)降低,肺组织Notch1,Jagged1,Delta1的表达降低(P<0.01)。相关分析显示:大鼠肺功能参数FEV0.3/FVC与Notch4呈正相关,FEV0.3/FVC,FEF25,FEF50分别与足跖肿胀度,Notch3,Delta1的表达呈负相关(P<0.05或P<0.01)。结论:AA大鼠在发生足跖肿胀、关节炎症同时出现肺功能降低,且肺功能参数与Notch受体/配体呈相关性,提示致炎后免疫复合物沉积于组织局部,激活Notch信号通路,通过级联放大效应协同参与肺组织损伤,导致肺功能降低。

四种Notch配体信号功能活性比较

目的 观察四种 Notch配体的功能活性 ,探讨其在 Notch信号传导机制中的作用。方法 以Notch1- CHO和 Notch2 - CHO作为宿主细胞 ,瞬时转染报告质粒 TP1,分别加入转染有不同 Notch配体 Delta1、Jagged1、Jagged2、Delta4的 CHO细胞及未转染 CHO细胞 ,使 Notch分子与其配体充分结合 ,加入发光底物PGL10 0 ,用 L umat测定发光情况 ,由此观察并比较各配体对上述两种宿主细胞的信号功能活性水平。结果 各配体与 Notch1结合后均能引起荧光素酶活性增高 ,尤其以 Jagged2 - CHO、Delta4 - CHO1- 4、Delta4 - CHO1- 5为著 ,而 Delta1- CHO、Jagged1- CHO引起的活性增加程度较低 ,尚不能确定其信号功能活性 ;各配体与 Notch2结合后都有较高的信号功能活性 ,其反应强于与 Notch1的作用。结论 4种配体与 Notch2作用后均能使荧光素酶活性增加多倍 ,故有较强的信号功能活性。

敦煌平胃丸对胃癌前病变大鼠Notch信号通路中Notch2和Jagged1表达的影响

目的:观察敦煌平胃丸对胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜组织Notch信号通路中Notch2和Jagged1表达的影响。方法:采用复合法建立PLGC大鼠模型,将32只大鼠随机分为4组,每组8只。敦煌平胃丸组用敦煌平胃丸浸膏按每日生药96 g/kg掺入饲料中喂养给药,共计12周。观察大鼠胃黏膜病理组织学变化;采用Western Blot检测Notch2和Jagged1蛋白表达;采用RT-PCR检测Notch2和Jagged1mRNA的表达。结果:PLGC大鼠胃黏膜组织Notch2与Jagged1mRNA及蛋白表达较正常大鼠胃黏膜组织均明显上调(P<0.05)。敦煌平胃丸能明显改善PLGC大鼠胃黏膜腺体萎缩、肠化增生,下调PLGC大鼠胃黏膜组织中Notch2与Jagged1表达水平(P<0.05)。结论:Notch2、Jagged1激活了Notch信号通路,在PLGC发生发展中有重要意义。敦煌平胃丸治疗PLGC可能与下调Notch信号通路中Notch2与Jagged1表达有关。