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麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆及重组蛋白纯化 被引量：1
1
作者 唐佳 喻川 +2 位作者 韩海洋 严君 魏炜 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1085-1091,共7页
利用RACE技术克隆出麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,构建原核表达载体pET-28a-JcDHAR,并对重组菌表达的条件进行了优化,进而进行Ni亲和层析纯化蛋白.结果表明:表达产物与预期大小相符,His-JcDHAR蛋白质的分子质量为30kD;在37℃的条件下0.... 利用RACE技术克隆出麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,构建原核表达载体pET-28a-JcDHAR,并对重组菌表达的条件进行了优化,进而进行Ni亲和层析纯化蛋白.结果表明:表达产物与预期大小相符,His-JcDHAR蛋白质的分子质量为30kD;在37℃的条件下0.1mM的IPTG诱导表达5h时,获得了可溶性重组蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcDHAR原核表达成功. 展开更多
关键词 脱氢抗坏血酸还原酶 原核表达 蛋白纯化 麻疯树
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