四制香附对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响及作用机制研究

目的:探讨建昌帮四制香附及其石油醚部位对未孕大鼠离体子宫平滑肌收缩作用的影响及其机制。方法:采用雌性未孕大鼠,灌胃己烯雌酚致敏,制备离体子宫标本,通过powerlab生物信号采集系统考察生香附、四制香附及其石油醚部位各提取液及α-香附酮对由缩宫素引起的大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用,并通过加入受体拮抗剂初步探讨其作用机制。结果:各样品对未孕大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用强弱依次为:四制香附石油醚部位﹥四制香附﹥α-香附酮﹥生香附,且α-香附酮、四制香附及其石油醚部位呈现剂量依赖性地抑制子宫平滑肌的收缩作用。结论:四制香附及其石油醚部位抑制子宫平滑肌收缩的作用优于α-香附酮和生香附。

以药理效应为指标考察建昌帮四制香附炮制工艺

目的:考察建昌帮四制香附炮制工艺。方法:采用均匀设计法炮制香附,运用回流提取法对香附成分进行提取,建立缩宫素所致小鼠在体痛经模型,考察不同炮制品的镇痛效果。结果:各给药组与模型组比较,其中U-2、U-3、U-4、U-6、U-7、U-11、U-12均有极显著性差异,U-8有显著性差异。结论:以药理效应为指标考察建昌帮四制香附的最佳炮制工艺为:生姜70g/kg、食盐4g/kg、黄酒0.3 kg/kg、米醋0.4 kg/kg,在180-190℃下炒制10分钟。

HPLC法比较4种醋香附中黄酮类成分含量研究

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法比较4种醋制方法制备的醋香附饮片中黄酮类成分的差异,为控制香附炮制品的质量提供依据。方法:以芦丁、木犀草苷和木犀草素为指标性成分,采用Intersil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇为流动相A,0.1%磷酸水为流动相B,梯度洗脱(0~35 min,38%~38%A;35~45 min,38%~50%A;45~70 min,50%~50%A;70~110 min,50%~90%A),流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长为350 nm。结果:对芦丁、木犀草素和木犀草苷在选定的浓度范围内线性关系良好,其相关系数均>0.9997,加样回收率为98.10%、97.73%、98.20%,RSD%为1.56%、1.58%、1.22%,重复性、稳定性、精密度良好。3种黄酮成分总量由高到低依次为醋炙品>醋煮品>醋煮蒸品>醋蒸品>生品。结论:建立的HPLC法测定不同香附醋制品中芦丁、木犀草素和木犀草苷含量的方法简单、可行、重现性好,3种黄酮成分总量在醋炙品中最高。

基于成分敲出策略辨识四制香附抗痛经的主要效应成分

目的:基于成分敲出策略对四制香附抗痛经的主要药效成分进行初步辨识,为该药材的后续研究提供参考。方法:采用硅胶柱色谱技术结合制备高效液相色谱法(HPLC)对四制香附石油醚部位中具有抗痛经作用的活性成分α-香附酮(A),香附烯酮(B)和sugeonol(C)分别按照敲出A,B,C,AB,AC,BC,ABC的方法不断敲出,从而得到各目标敲出成分A+,B+,C+,AB+,AC+,BC+,ABC+及其相应的阴性样品A-,B-,C-,AB-,AC-,BC-,ABC-,利用HPLC对各目标敲出成分及其阴性样品进行检测,通过小鼠离体子宫平滑肌收缩试验,探究各敲出目标成分及其对应阴性样品、石油醚部位对小鼠离体子宫平滑肌的影响。结果:α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分分别组合敲出的目标成分的抗痛经作用比单独敲出的目标成分强;与石油醚部位比较,阴性样品A-,B-,C-抗痛经作用明显下降;目标成分AB+的抗痛经作用强于敲出目标成分后的阴性样品AB-;阴性样品ABC-仍具有抗痛经作用;各敲出目标成分与其阴性样品的平均抑制率之和均比石油醚部位的平均抑制率大。结论:在中药整体水平上,证明α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分都是香附抗痛经作用的活性成分,并且三者之间可能存在着协同作用,其中α-香附酮与香附烯酮是香附抗痛经作用的主要药效物质,除了目标成分α-香附酮、香附烯酮和sugeonol外,香附中还存在着其他的抗痛经活性成分,各敲出目标成分与其阴性样品(其他成分的混合物)之间均可能存在着拮抗作用。

经典名方中香附的本草考证

从经典名方开发的角度出发,笔者通过查阅香附相关的历代本草、医籍及近现代文献资料,对历代香附药材的名称、基原、产地、品质、采收加工及炮制等方面进行系统的本草考证。结果表明虽有粗根茎莎草、藨草属植物等伪品曾作为香附使用的情况,但香附药材历代主流基原仍为莎草科植物莎草Cyperus rotundus,建议经典名方中使用莎草科植物莎草C.rotundus。其产区自唐朝以来,广东、广西及浙江地区始终为香附的优质产区。其中广东省西部地区产者习称广香附,浙江产者习称南香附。近代以来总结其品质以个大、质坚实、红棕色香气浓者为佳。延续至今常用的炮制方法为醋炙,建议经典名方中未明确注明炮制要求的香附药材以生品入药,注明炮制要求的处方根据方义选择相应炮制品入药。

共水蒸馏法提取香附-艾叶挥发油的工艺优化及与隔水蒸馏法提取的GC-MS比较

目的研究香附-艾叶中挥发油的提取工艺,并比较共水蒸馏法与隔水蒸馏法提取药对中挥发油的差异。方法采用共水蒸馏法提取挥发油,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken确定香附-艾叶中挥发油的最佳提取工艺,并采用GC-MS对两种方法提取的药对及单味药材中的挥发油成分进行鉴定。结果香附-艾叶的最佳提取工艺为：提取6 h、浸泡2 h、料液比8倍;GC-MS分析表明：共水蒸馏法与隔水蒸馏法提取的挥发油中的主要成分是一致,但共水蒸馏法提取的挥发油比隔水蒸馏法的含量更高。结论所用挥发油提取工艺合理可行,可用于香附-艾叶中挥发油的提取;隔水蒸馏法提取的挥发油中的种类和含量减少;表明药对提取挥发油不是单味药的简单加合。

基于多指标响应曲面法优选醋炙香附炮制工艺及炮制终点量化研究

目的将饮片质量评价的主观经验与其化学成分含量的客观指标相结合,多指标、综合评价醋炙香附的最佳炮制工艺,并对炮制终点的判断进行量化。方法基于Box-Behnken设计醋炙香附炮制工艺,通过德尔菲评价对醋香附不同炮制品的外观性状进行打分,以德尔菲评价的总得分为主观评价指标,以粗纤维、α-香附酮、圆柚酮、总黄酮、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、总挥发油的含量为客观评价指标,采用CRITIC权重赋值法将主客观指标相结合,响应面法优选醋炙香附最佳炮制工艺。通过测定饮片的物性参数与色度,建立物性参数、色度与化学成分含量之间的相关性,找到与其内在化学成分含量相关性最多的指标,并用其量化炮制终点。结果醋炙香附的最佳炮制工艺:加米醋25%,使用带刻度的喷壶均匀喷洒在药材表面,每次喷洒5 mL,喷洒12次,闷润8 h至药材内无白心,140℃炮制7 min。pH值、氧化值均与色度L^(*)、b^(*)、ΔE^(*)(L^(*)为亮度,b^(*)为黄蓝色度值,ΔE^(*)为总色值)值具有显著负相关,吸水率与L^(*)、b^(*)、ΔE^(*)值具有显著正相关;粗纤维含量与pH值、氧化值呈显著负相关,与相对密度呈显著正相关;α-香附酮含量与pH值、氧化值呈极显著正相关,与L^(*)、b^(*)、ΔE^(*)值呈显著负相关;圆柚酮含量与pH值、氧化值呈极显著负相关,与L^(^(*))值呈显著正相关;总挥发油含量与pH值、氧化值呈显著正相关,与L^(*)、b^(*)、ΔE^(*)值呈显著负相关。结论优选的醋香附炮制工艺合理可行;推测香附在醋炙时将其pH值、氧化值分别控制在4.462~4.678、21.076 8~22.429 2,醋香附饮片整体状态即可达到最佳。

不同炮制方法对醋香附中主要成分含量的影响

目的测定香附生品和醋香附中总挥发油的提取量以及α-香附酮、香附烯酮的含量,比较不同醋制方法对香附中挥发油类成分的影响。方法采用2015年版《中国药典》中的方法测量香附的含水量和挥发油的含量,采用HPLC法测定α-香附酮、香附烯酮的含量。结果与香附生品比较,不同醋香附中α-香附酮的含量均显著性降低,且醋煮蒸品<醋蒸品<醋煮品<醋炙品<生品。与生品比较,醋炙品中香附烯酮的含量无显著性差异,而在其余3种醋制香附中的含量显著降低;香附烯酮的含量依次为:醋蒸品<醋煮品<醋煮蒸品<醋炙品≈生品。经醋制后,香附中挥发油的含量都有所降低。结论醋炙法为香附的较优醋制方法。