Jianpi Gushen Huayu decoction ameliorated diabetic nephropathy through modulating metabolites in kidney,and inhibiting TLR4/NF-κB/NLRP3 and JNK/P38 pathways

BACKGROUND Jianpi Gushen Huayu Decoction(JPGS)has been used to clinically treat diabetic nephropathy(DN)for many years.However,the protective mechanism of JPGS in treating DN remains unclear.AIM To evaluate the therapeutic effects and the possible mechanism of JPGS on DN.METHODS We first evaluated the therapeutic potential of JPGS on a DN mouse model.We then investigated the effect of JPGS on the renal metabolite levels of DN mice using non-targeted metabolomics.Furthermore,we examined the effects of JPGS on c-Jun N-terminal kinase(JNK)/P38-mediated apoptosis and the inflammatory responses mediated by toll-like receptor 4(TLR4)/nuclear factor-kappa B(NF-κB)/NOD-like receptor family pyrin domain containing 3(NLRP3).RESULTS The ameliorative effects of JPGS on DN mice included the alleviation of renal injury and the control of inflammation and oxidative stress.Untargeted metabolomic analysis revealed that JPGS altered the metabolites of the kidneys in DN mice.A total of 51 differential metabolites were screened.Pathway analysis results indicated that nine pathways significantly changed between the control and model groups,while six pathways significantly altered between the model and JPGS groups.Pathways related to cysteine and methionine metabolism;alanine,tryptophan metabolism;aspartate and glutamate metabolism;and riboflavin metabolism were identified as the key pathways through which JPGS affects DN.Further experimental validation showed that JPGS treatment reduced the expression of TLR4/NF-κB/NLRP3 pathways and JNK/P38 pathway-mediated apoptosis related factors.CONCLUSION JPGS could markedly treat mice with streptozotocin(STZ)-induced DN,which is possibly related to the regulation of several metabolic pathways found in kidneys.Furthermore,JPGS could improve kidney inflammatory responses and ameliorate kidney injuries in DN mice via the TLR4/NF-κB/NLRP3 pathway and inhibit JNK/P38 pathwaymediated apoptosis in DN mice.

Clinical study on the treatment of bronchiectasis in remission period by embedding thread combined with Jianpi Qushi Huayu plaster

Objective:To explore the clinical effect of embedding thread combined with Jianpi Qushi Huayu ointment in the treatment of bronchiectasis in remission period,and to observe the effect on the level of inflammatory cytokines.Methods:150 patients with bronchiectasis in remission period were divided into three groups(50 cases in each group),western medicine group(treated with salmeterol fluticasone and low dose erythromycin),combined group(treated with Jianpi Qushi Huayu plaster),observation group(treated with western medicine+Jianpi Qushi Huayu plaster+embedding thread),and the clinical treatment of the three groups were compared.Result:before and after treatment,the improvement of TCM syndrome score,the improvement of pulmonary ventilation index,the improvement of inflammatory cytokines,and the change of adverse reactions.Results:the treatment efficiency of the observation group and the combination group was significantly higher than that of the western medicine group P The peak level of expiratory flow velocity,the maximum expiratory flow,the forced expiratory volume in one second and the ratio of forced expiratory volume in one second to vital capacity in the observation group and the combined group were significantly better than those in the western medicine group and the pre-treatment level(P<0.05),and the improvement in the observation group was better than that in the combined group After treatment,the expression of IL-13,IL-10 and IL-4 in the combined group was significantly better than that in the western medicine group and before treatment(P<0.05),and the improvement in the observation group was better than that in the combined group;there was no significant difference in the incidence of adverse reactions among the three groups(P>0.05).Conclusion:catgut embedding combined with Jianpi Qushi Huayu ointment can significantly alleviate the related clinical symptoms and signs,effectively control the further aggravation of the disease,improve the lung function of patients,regulate the level of inflammatory cytokines to reduce the degree of inflammatory reaction,and do not significantly aggravate the adverse reactions of drugs.

健脾化瘀方通过调节RASSF1A激活p38 MAPK信号通路治疗肝细胞癌的机制研究

目的探讨健脾化瘀方治疗肝细胞癌的作用机制。方法将SD大鼠随机分为对照组,健脾化瘀方含药血清低、中、高剂量组,每组10只;健脾化瘀方低、中、高剂量组大鼠分别灌胃健脾化瘀方4.32、8.64、17.28 g/kg,对照组灌胃等容积生理盐水。观察健脾化瘀方含药血清对肝癌细胞株HepG2和Huh7中Ras相关结构域家族1亚型A(Ras association domain family 1 isoform A,RASSF1A)、p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、细胞凋亡率、细胞增殖相关蛋白(p21、cyclin D1)、细胞凋亡相关蛋白[半胱天冬酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)-3、caspase-8、caspase-9]的影响。采用RASSF1A小干扰RNA(RASSF1A siRNA)干扰RASSF1A的表达,将细胞分为对照组、阴性血清组、含药血清组、含药血清+对照siRNA组、含药血清+RASSF1A siRNA组,通过CCK-8、EdU、TUNEL、Western blot实验验证健脾化瘀方是否通过RASSF1A发挥抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用;采用p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580抑制p38 MAPK信号通路,将细胞分为对照组、阴性血清组、含药血清组、含药血清+SB203580组,通过CCK8、EdU、TUNEL、Western blot实验验证健脾化瘀方是否通过p38 MAPK信号通路发挥抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。结果健脾化瘀方含药血清干预48 h后,RASSF1A mRNA和蛋白表达水平随着含药血清浓度的增加而升高,细胞凋亡率及p-p38、p21、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率及cyclin D1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与含药血清组比较,含药血清+RASSF1A siRNA组细胞中RASSF1A、p-p38、p21、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达水平和细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞存活率及cyclin D1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与含药血清组比较,含药血清+SB203580组细胞中p-p38、p21、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达水平和细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞存活率及cyclin D1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论健脾化瘀方可通过调节RASSF1A的表达,激活p38 MAPK信号通路抑制肝细胞癌细胞的过度增殖,并促进凋亡。

补肾化瘀健脾针刺联合糖肾安治疗糖尿病肾病的临床研究

目的探讨补肾化瘀健脾针刺联合自拟中药糖肾安治疗糖尿病肾病(DN)的效果。方法将2023年11月至2024年5月收治的70例早期DN患者以随机数字表法分为对照组和观察组,每组35例。2组均予以西医常规治疗,在此基础上对照组予以自拟中药糖肾安治疗,观察组予以补肾化瘀健脾针刺联合自拟中药糖肾安治疗。比较2组临床疗效、中医证候积分、血糖相关指标[空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)]、肾功能[尿蛋白排泄率(UAER)、尿蛋白肌酐比值(UACR)、血肌酐]、炎性指标[白细胞介素-1(IL-1)、单核趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)]及不良反应发生情况。结果观察组总有效率[100.00%(35/35)]高于对照组[77.14%(27/35)],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组中医证候积分、空腹血糖、HbA1c、UAER、UACR、血肌酐、IL-1、TNF-α、MCP-1、CRP低于对照组(P<0.05,P<0.01)。2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾化瘀健脾针刺联合自拟中药糖肾安治疗DN效果显著,能进一步控制患者血糖水平,改善肾功能,抑制炎症反应,改善患者临床症状,且安全性良好。

健脾固肾化瘀方治疗脾肾两虚夹瘀型糖尿病肾脏病的疗效及对相关生物标志物的影响

[目的]探讨健脾固肾化瘀方联合氯沙坦钾片治疗脾肾两虚夹瘀型糖尿病肾脏病(DKD)的临床疗效以及其对患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。[方法]选择沧州中西医结合医院2019年1月—2021年5月纳入80例脾肾两虚夹瘀型DKD患者作为研究对象,采用随机数字表法分成观察组与对照组各40例。观察组给予健脾固肾化瘀方联合氯沙坦钾片治疗,对照组单用氯沙坦钾片治疗,连续治疗12周后观察两组临床疗效。治疗前后检测受试者血糖[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)和糖化血红蛋白(HbA1c)]、血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]及肾功能指标[尿微量白蛋白/尿肌酐比值(UACR)、肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)]。选用酶联免疫吸附法测定血清MMP-9、MCP-1和VEGF水平。并统计两组不良反应情况。[结果]观察组总有效率为92.50%(37/40),较对照组72.50%(29/40)有所提高(P<0.05)。两组治疗后FPG、2 h PG和HbA1c均较治疗前降低(P<0.05),且均以观察组的改善更显著(P<0.01)。两组治疗后血清TC、TG和LDL-C浓度均较治疗前下降(P<0.05),且均以观察组的改善更显著(P<0.01)。两组治疗后UAER和血清SCr、BUN水平均较治疗前降低(P<0.05),且均以观察组的改善更显著(P<0.01)。两组治疗后血清MMP-9水平均较治疗前升高(P<0.05),血清MCP-1、VEGF浓度均较治疗前下降(P<0.05);且治疗后,观察组对血清MMP-9水平的升高作用及对血清MCP-1、VEGF水平的降低作用较对照组更显著(P<0.01)。所有患者均无明显不良反应发生。[结论]应用健脾固肾化瘀方联合氯沙坦钾片治疗脾肾两虚夹瘀型DKD能安全有效地上调患者MMP-9表达水平,下调MCP-1、VEGF表达水平,改善肾功能,整体疗效确切。

基于NOX5-ERK1/2信号通路探讨健脾祛痰化瘀方对动脉粥样硬化小型猪炎症反应的影响

目的 观察健脾祛痰化瘀方对动脉粥样硬化(AS)小型猪氧化应激和炎症反应的影响,基于NOX5-ERK1/2信号通路探讨其作用机制。方法 将12只巴马小型猪随机分为对照组、模型组和健脾祛痰化瘀方低、高剂量组,每组3只。采用高脂饮食饲养24周构建动脉粥样硬化模型,给药组同时在饲料中添加健脾祛痰化瘀方。分别于给药0、16、24周检测小型猪一般体征(体长、腹围、体质量、食物摄入量和粪便含水量),HE染色观察主动脉形态,油红O染色观察主动脉和心肌组织脂质沉积,透射电镜观察胸主动脉组织超微结构,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,ELISA检测血清活性氧(ROS)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量,Western blot检测主动脉组织NADPH氧化酶5(NOX5)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2、VCAM-1、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小型猪16、24周腹围、体质量、食物摄入量增加(P<0.01),主动脉内膜明显增厚,内皮细胞破坏,脂质沉积,平滑肌细胞水肿,线粒体肿胀明显,血清TC、LDL-C含量及ROS、IL-6、IL-10、TNF-α、hs-CRP、VCAM-1、ICAM-1含量升高,HDL-C含量降低(P<0.01);主动脉组织NOX5、p-ERK1/2、VCAM-1、PCNA蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,健脾祛痰化瘀方低、高剂量组16、24周腹围、体质量、食物摄入量减少(P<0.05,P<0.01),斑块面积和脂质沉积减少,内皮细胞破坏减轻,血清TC、LDL-C含量及ROS、IL-6、IL-10、TNF-α、hs-CRP、VCAM-1、ICAM-1含量降低,HDL-C含量升高(P<0.01,P<0.05);主动脉组织NOX5、p-ERK1/2、VCAM-1、PCNA蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论 健脾祛痰化瘀方可减轻小型猪AS,其机制可能与抑制NOX5-ERK1/2信号通路激活、减轻氧化应激诱导的炎症反应有关。

基于“脾虚邪滞”理论探讨胃解痉多肽表达化生中医病机与微观辨证

胃癌前病变(Gastric precancerous lesions,GPL)具有发展为胃癌的风险,而胃解痉多肽表达化生(Spasmolytic polypeptide expressing metaplasia,SPEM)是GPL的初始步骤,具有恶性进展为胃癌前病变的风险。目前关于该化生阶段发病机制的探讨尚不完整,中医药依托扎实的中医理论基础及丰富的中药资源,在防治GPL上具有独特优势。因此,笔者基于“脾虚邪滞”理论,从疾病的病理生理状态、标志物、信号通路三方面进行微观辨证分析,提出以健脾化瘀解毒法为主要疗法,结合文献分析其可行性,以期为SPEM的中医治疗提供新的思路与方法。

基于网络药理学、分子对接及实验验证探讨滋肾健脾化瘀片对糖尿病视网膜病变的干预机制

目的运用网络药理学方法和分子对接技术探讨滋肾健脾化瘀片(山萸肉、三七、黄芪、葛根、鸡血藤、生地黄)治疗糖尿病视网膜病变(DR)的作用机制,并通过体外实验进行验证。方法(1)利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及BATMAN-TCM数据库筛选滋肾健脾化瘀片的有效成分及其对应的靶点蛋白。利用GeneCards、OMIM及TTD数据库检索DR疾病相关靶点。利用VENNY 2.1.0平台对药物活性成分靶点与DR疾病相关靶点取交集(共同靶点),即为滋肾健脾化瘀片治疗DR的潜在作用靶点。构建“中药-活性成分-共同靶点”网络,筛选出滋肾健脾化瘀片治疗DR的关键活性成分。将共同靶点导入STRING数据库,获取PPI网络关系,并筛选出核心靶点。运用Metascape平台对共同靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。将关键活性成分及核心靶点通过Autodock 4软件进行分子对接验证。(2)制备滋肾健脾化瘀片含药血清及空白血清。将人视网膜微血管内皮细胞(HRmECs)随机分成5组:对照组(低糖DMEM培养基+10%空白血清)、高糖组(高糖DMEM培养基+10%空白血清)及滋肾健脾化瘀片含药血清低、中、高剂量组(高糖DMEM培养基+10%低、中、高剂量含药血清),培养48 h后进行检测。采用CCK-8法检测HRmECs细胞增殖活性;RT-qPCR法检测HRmECs细胞中IL-1β、AKT1、VEGFA、TP53 mRNA表达水平。结果(1)共筛选出滋肾健脾化瘀片治疗DR的潜在作用靶点(共同靶点)74个;9个关键活性成分包括槲皮素、芒柄花黄素、毛地黄黄酮、β谷甾醇、山柰酚、毛蕊异黄酮、γ-氨基丁酸、豆甾醇、异鼠李亭;12个核心靶点:IL-1β、PPARG、NOS3、CXCL8、IL-6、AKT1、TNF、INS、EGF、VEGFA、TP53、PTGS2。GO功能及KEGG富集分析显示核心靶点主要参与了炎症反应、蛋白质磷酸化的正调控、细胞迁移等生物过程,以及NF-κB信号通路、AGE-RAGE信号通路、HIF-1通路、TNF通路、PI3K-AKT通路等。关键活性成分与核心靶点均具有较好的结合亲和力。(2)与对照组比较,高糖组HRmECs细胞活性显著降低(P<0.01);细胞中VEGFA、TP53、IL-1βmRNA表达水平显著升高(P<0.01),AKT1 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。与高糖组比较,滋肾健脾化瘀片含药血清低、中、高剂量组的HRmECs细胞活性均显著升高(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性;含药血清高剂量组细胞的VEGFA、TP53、IL-1βmRNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),而AKT1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论滋肾健脾化瘀片可能通过槲皮素、山柰酚、毛地黄黄酮等多种活性成分,作用于IL-1β、IL-6、VEGFA等核心靶点,以及NF-κB信号通路、AGE-RAGE信号通路、PI3K-AKT通路等关键通路,从而发挥对DR的治疗作用。

健脾化瘀解毒法对结肠癌裸鼠模型癌及癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1表达的影响研究

目的研究健脾化瘀解毒法对结肠癌原位种植瘤癌及癌旁组织中蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化真核细胞起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)表达的影响。方法建立裸鼠结肠癌模型,随机分为空白组、模型组、健脾益气组、化瘀解毒组、健脾化瘀解毒组、雷帕霉素组及5-氟尿嘧啶组,每组5只。干预各组4周后,检测各组癌组织与癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平。结果与空白组比较,模型组癌组织与癌旁组织中AKT1、mTOR、p-4EBP1的表达均上调,差异有显著性(P<0.05),且AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平均为癌组织>癌旁组织>正常肠黏膜组织。与模型组比较,健脾化瘀解毒法能在一定程度上抑制结肠癌癌组织及癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);健脾益气法、化瘀解毒法均能下调癌组织与癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1蛋白,但其降低水平不如健脾化瘀解毒法。结论健脾化瘀解毒法能够降低AKT、mTOR、p-4EBP1蛋白的表达,健脾益气法与化瘀解毒法协同增效,以获得最佳疗效。

基于中性粒细胞胞外诱捕网途径探讨胃黏膜肠上皮化生的发生机制及中药预测研究

目的探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对胃黏膜肠上皮化生(Intestinal metaplasia,IM)的作用机制及治疗靶点,为中医药防治IM提供新思路和新方向。方法从公共数据库下载IM及NETs相关数据集,通过免疫浸润分析、差异分析及基因相关性分析获得IM与NETs共表达的关键基因集;采用功能富集分析、蛋白互作网络、分子对接技术及实验验证等方法进一步阐述IM及NETs的相关性;最后将获得的关键基因与Coremine Medical平台相互映射,预测中医治疗IM的有效中药和治法。结果共筛选出6个IM与NETs形成相关的共表达的差异基因,分别为THBD、HDAC9、FGA、AQP9、DECR1和PIK3CD,这些基因与NETs的3个标记性蛋白(NE、PADI4、MPO)存在不同程度的相关性,其功能主要富集在呼吸爆发与防御反应、纤维蛋白溶解等生物学过程上;中药预测共映射出中医治疗IM的中药112味,按照功效可归为34类,其中清热解毒类中药出现频次最高,其次为活血化瘀药、温里药、补气药等。结论在IM的病理发生及发展过程中存在NETs,靶标基因NE和THBD可能存在相互关联作用,共同通过NETs通路参与IM进展;健脾化瘀解毒法是中医治疗IM的核心治法,其可能通过抑制NETs的形成,从而减缓IM的发展进程。

基于巨噬细胞M2极化探讨胃黏膜肠上皮化生的发生机制及中药预测研究

目的探讨巨噬细胞M2极化对胃黏膜肠上皮化生(IM)的影响及治疗靶点,为中医药防治IM提供新思路和新方向。方法从公共数据库下载IM及巨噬细胞M2极化相关数据集;采用免疫浸润分析、基因相关性分析、功能富集分析、蛋白互作网络及免疫荧光等方法进一步阐述IM及巨噬细胞M2极化的相关性;最后将获得的枢纽基因与Coremine Medical平台相互映射,预测中医治疗IM的有效中药和治法。结果免疫浸润及免疫荧光分析显示巨噬细胞M2极化标记物CD68^(+)CD163^(+)(P=0.0394)、CD68^(+)CD206^(+)(P=0.002)在IM组中的表达均显著高于正常组,且M2型巨噬细胞在IM组的的浸润水平显著高于正常组(P<0.05)。IM相关标记基因(CDX1、MUC2、TFF3)与巨噬细胞M2极化标志物(CD209、ARG1、MSR1、STAT3、IL32、SELENOP)的表达水平显著正相关(P<0.05);功能富集分析提示IM与巨噬细胞M2极化共表达的差异基因主要与羧酸跨膜转运蛋白活性、有机酸跨膜转运蛋白活性等分子生物学功能密切相关;最后筛选出IM与巨噬细胞M2极化共表达的枢纽差异基因7个,分别为TRAF1、TNFRSF12A、BIRC3、TNFRSF11A、CTSV、SLC29A1和CDA;中药预测共映射出中医治疗IM的中药36味,按照功效分类可归为21类,其中清热解毒药出现频次最高,其次为补气药和活血止痛药等。结论巨噬细胞M2极化可能通过外泌体途径参与IM病理的发生及发展过程,IM与巨噬细胞M2极化共表达的7个枢纽基因(TRAF1、TNFRSF12A、BIRC3、TNFRSF11A、CTSV、SLC29A1和CDA)和IM特异性分子CDX1、MUC2、TFF3可能存在相互关联作用,共同参与IM进展;“健脾化瘀解毒法”是中医治疗IM的核心治法,从巨噬细胞M2极化出发有望成为临床防治IM的新方向和突破口。

基于SIRT1/TGF-β1/Smad通路研究健脾固肾化瘀方治疗糖尿病肾病机制

[目的]研究健脾固肾化瘀方(JPGS)治疗糖尿病肾病(DKD)效果,并从去乙酰化酶1(SIRT1)/转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路介导的上皮间质转化(EMT)研究JPGS治疗DKD的作用机制。[方法]60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,高脂饮食喂养联合链脲佐菌素腹腔注射造模,并随机平均分为正常组、模型组、SIRT1激动剂组(50 mg/kg,灌胃)、低剂量JPGS组(2.4 g/kg,灌胃)、中剂量JPGS组(4.8 g/kg,灌胃)、高剂量JPGS组(9.6 g/kg,灌胃)。治疗8周后,收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。使用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-UPQ)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平以评估肾功能。对肾脏同一部位进行苏木精-伊红(HE)、Masson染色,观察其病理学变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)以及蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测EMT相关因子[E-钙黏蛋白(E-cad)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、波形蛋白(VIM)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达情况,以评估JPGS对EMT的影响。运用Western Blot法检测SIRT1和TGF-β1蛋白表达水平,以及Smad2、Smad3磷酸化水平,评估JPGS对SIRT1/TGF-β1/Smad通路的调控作用。[结果]与模型组比较,经JPGS治疗后,DKD小鼠Cr、BUN、24 h-UPQ降低,肾组织病理损伤好转,E-cad、ZO-1表达升高,VIM、α-SMA表达降低,SIRT1表达上调,TGF-β1、磷酸化Smad2/Smad2、磷酸化Smad3/Smad3表达下调。[结论]JPGS可以抑制SIRT1/TGF-β1/Smad通路介导的EMT,以缓解DKD肾损伤。

健脾化瘀方调控TGF-β1/Smad7通路逆转肝细胞癌上皮间质转化及血管生成

目的探讨健脾化瘀方(人参、茯苓、白术、丹参等)通过TGF-β1/Smad7通路对肝细胞癌上皮间质转化(EMT)及血管生成的调控作用。方法(1)采用BALB/C-nu裸鼠建立Hep3B荷瘤小鼠模型,随机分为对照组及健脾化瘀方低、中、高剂量组(3.844、7.689、15.378 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组5只。灌胃给药,每日1次,连续给药21 d。(2)将Hep3B细胞分为空白组、造模组(10 ng·mL^(-1)TGF-β1)、低浓度组(10 ng·mL^(-1)TGF-β1+4 mg·mL^(-1)健脾化瘀方)、高浓度组(10 ng·mL^(-1)TGF-β1+6 mg·mL^(-1)健脾化瘀方),TGF-β1诱导48 h后更换为相应浓度的健脾化瘀方完全培养液(0、4、6 mg·mL^(-1))继续培养24 h。(3)将HUVEC细胞分为正常组、模型组、中药组、模型加中药组。正常组细胞用不含TGF-β1的条件培养基培养;模型组细胞用含TGF-β1的条件培养基培养;中药组细胞用含有4 mg·mL^(-1)健脾化瘀方但不含TGF-β1的条件培养基培养;模型加中药组细胞用含4 mg·mL^(-1)健脾化瘀方且含TGF-β1的条件培养基培养。继续培养24 h后收集细胞进行后续实验。(4)计算Hep3B荷瘤裸鼠皮下移植瘤的瘤质量指数和抑瘤率;采用免疫荧光法检测荷瘤裸鼠皮下移植瘤中CD31的表达;免疫组化法检测荷瘤裸鼠皮下移植瘤的微血管密度;细胞划痕实验检测Hep3B细胞的迁移能力;Transwell实验检测Hep3B/HUVEC细胞的侵袭能力;检测HUVEC细胞小管形成能力;Western Blot法检测荷瘤裸鼠皮下移植瘤、Hep3B及HUVEC细胞中相关蛋白的表达水平。结果(1)与对照组比较,健脾化瘀方中、高剂量组荷瘤裸鼠皮下移植瘤质量及瘤质量指数显著降低(P<0.01);低、中、高剂量组荷瘤裸鼠皮下移植瘤中CD31的表达量及微血管密度显著降低(P<0.05,P<0.01),VE-cadherin、EphA2、N-cadherin蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),E-cadherin、Smad7蛋白表达显著上调(P<0.01)。(2)与空白组比较,造模组的Hep3B细胞的相对迁移率明显升高(P<0.05),侵袭细胞数显著增加(P<0.01);Vimentin、N-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.01),E-cadherin、Smad7蛋白表达显著下调(P<0.01)。与造模组比较,健脾化瘀方低、高浓度组Hep3B细胞的相对迁移率显著降低(P<0.01),侵袭细胞数显著减少(P<0.01);Vimentin、N-cadherin蛋白表达显著下调(P<0.01),E-cadherin、Smad7蛋白表达显著上调(P<0.01)。(3)与正常组比较,模型组HUVEC细胞形成的小管分支点数显著增多(P<0.01),小管分支长度及侵袭细胞数显著增加(P<0.01);VE-cadherin、EphA2蛋白表达显著上调(P<0.01),Smad7蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,模型加中药组HUVEC细胞形成的小管分支点数显著减少(P<0.01),小管分支长度显著缩短(P<0.01),侵袭细胞数显著减少(P<0.01);VE-cadherin、EphA2蛋白表达显著下调(P<0.01),Smad7蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论健脾化瘀方可明显抑制肝细胞癌的生长、侵袭与迁移,可能与通过调控TGF-β1/Smad7通路介导的EMT及血管生成有关。

健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗治疗克罗恩病患者疗效及对肠道菌群的影响

目的探讨健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗对克罗恩病患者疗效及肠道菌群的影响。方法选取94例克罗恩病患者,使用随机数字表法分成观察组与对照组各47例。对照组给予英夫利昔单抗。在此基础上,观察组口服健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗治疗。比较治疗前后两组患者主要中医证候评分、粪便中肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、肠杆菌)数量、血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平。结果所有患者均顺利完成该次研究,无脱落病例。观察组总有效率95.74%(45/47),高于对照组[82.98%(39/47)],差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组腹痛拒按、腹泻急迫、腹胀、神疲乏力等证候积分降低,而且观察组积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组血清TNF-α、CRP水平降低,而且观察组水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组双歧杆菌、乳酸杆菌数量升高,肠球菌、肠杆菌数量降低,而且观察组双歧杆菌、乳酸杆菌数量高于对照组,肠球菌、肠杆菌数量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗应用于克罗恩病整体疗效确切,促进腹痛等症状的缓解,减轻肠黏膜炎症状态,其作用可能与其显著纠正肠道菌群失衡、改善肠黏膜屏障功能有关。

健脾化瘀通腑方治疗恶性淋巴瘤化疗后肠梗阻脾虚肠燥证疗效研究

目的:观察健脾化瘀通腑方治疗恶性淋巴瘤化疗后肠梗阻脾虚肠燥证临床效果。方法:105例恶性淋巴瘤化疗后肠梗阻脾虚肠燥证患者随机分为西医组53例、联合组52例。比较两组临床症状改善情况及脾虚肠燥证的中医证候积分变化、胃肠引流量,治疗前、治疗7 d后两组血清相关因子[二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LC)]和免疫功能[T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、补体(C3、C4)]水平。结果:联合组腹痛、腹胀缓解时间、首次排气及排便时间均短于西医组(P<0.05)。第1~7天,两组胃肠引流量呈下降趋势,且第3~6天联合组低于西医组(P<0.05)。治疗7 d后,两组纳差、倦怠乏力、面色萎黄评分及总积分、血清DAO、D-LC、CD8^(+)较治疗前降低,且联合组治疗后上述指标低于西医组(均P<0.05)。两组T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、补体C3、C4较治疗前升高,且联合组治疗后高于西医组(均P<0.05)。结论:健脾化瘀通腑方能有效改善恶性淋巴瘤化疗后肠梗阻脾虚肠燥证的临床症状,提升免疫功能,修复损伤的肠黏膜屏障。

疏肝健脾化瘀汤联合恩替卡韦治疗肺结核合并慢性乙型病毒性肝炎患者的效果

目的:观察疏肝健脾化瘀汤联合恩替卡韦治疗肺结核合并慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者的效果。方法:选取2021年9月至2023年9月该院收治的81例肺结核合并CHB患者进行前瞻性研究,根据随机数字表法将其分为对照组41例与研究组40例。对照组采用恩替卡韦口服治疗,研究组在对照组基础上联合疏肝健脾化瘀汤治疗,比较两组治疗效果,治疗前后肝功能指标[天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、肝纤维化指标[Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)]、凝血功能指标[凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)]水平,以及不良反应发生率。结果:研究组病灶吸收率、痰涂片转阴率、乙型肝炎病毒转阴率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组ALT、TBIL、AST水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组PCⅢ、Ⅳ-C、HA、LN水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组TT、APTT、PT水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,两组FIB水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:疏肝健脾化瘀汤联合恩替卡韦治疗肺结核合并CHB患者可提高病灶吸收率、痰涂片转阴率和乙型肝炎病毒转阴率,改善凝血功能指标水平,以及降低肝功能指标和肝纤维化指标水平的效果优于单纯恩替卡韦口服治疗。

健脾化瘀汤联合化疗对胃癌患者免疫功能及肿瘤标志物水平的影响

目的探讨健脾化瘀汤联合化疗对胃癌患者免疫功能及肿瘤标志物水平的影响。方法选取2021年1月—2022年12月收治的62例胃癌患者,以随机数字表法分为对照组(31例,接受替吉奥联合奥沙利铂治疗)和观察组(31例,在对照组基础上联合健脾化瘀汤治疗)。比较2组治疗效果。结果观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);2组治疗后血清肿瘤标志物水平均降低,且观察组更低(P<0.05);2组治疗后免疫功能指标均上升,且观察组更高(P<0.05)。结论健脾化瘀汤联合化疗可抑制胃癌患者肿瘤细胞复制,增强免疫功能,临床疗效显著。

益肾健脾化瘀汤通过调节Keap1/Nrf2/HO-1通路减轻STZ致大鼠肾损伤

目的:基于Keap1/Nrf2/HO-1通路观察益肾健脾化瘀汤(YJHD)减轻链脲佐菌素(STZ)所致大鼠肾损伤的情况。方法:在60只SD雄性大鼠中随机选取10只作为对照组,普通维持饲料喂养,其余50只大鼠给予高脂饲料喂养,4 w后,单次小剂量腹腔注射STZ,将造模成功的40只大鼠按照每组10只随机分为模型组、YJHD低、高剂量组和阳性药物组[卡格列净(CANA)组],阳性药物选择卡格列净(CANA),灌胃8 w,同时间内模型组灌胃等容积的蒸馏水。给药后测定口服糖耐量(OGTT)以及曲线下面积(AUC),收集尿液测定24 h尿蛋白,取材时取血,用血清样本测定血肌酐(Cre)、血尿素氮(BUN)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)的水平,HE染色观察肾组织病理改变情况,Western blot迹检测肾组织中Keap1、Nrf2、HO-1水平。结果:与对照组相比,模型组FBG、AUC明显升高(P<0.05),24 h尿蛋白、Cre、BUN水平明显升高(P<0.05),MDA明显升高,SOD、GSH-Px以及CAT明显下降(P<0.05),肾组织中可见大量的炎性细胞增生浸润,Keap1的表达明显升高,Nrf2和HO-1的表达明显降低(P<0.05)。与阳性药物组相比,YJHD组FBG、AUC水平明显下降(P<0.05),24 h尿蛋白、Cre、BUN水平都有明显改善(P<0.05),MDA水平降低,SOD、GSH-Px、CAT水平提高(P<0.05),而在肾组织中,细胞的增生浸润情况有所缓解,Keap1的蛋白表达量降低,Nrf2和HO-1蛋白表达量明显升高(P<0.05)。结论:益肾健脾化瘀汤可能是通过Keap1/Nrf2/HO-1通路来缓解减轻STZ所致的大鼠的肾损伤。

健脾益肾化瘀汤对脾肾两虚夹瘀型肾病综合征患儿肾功能及炎症指标的影响

目的:探讨健脾益肾化瘀汤联合醋酸泼尼松片对脾肾两虚夹瘀型肾病综合征患儿肾功能、炎症指标和中医症状的影响。方法:选取信阳市中心医院收治的符合纳入标准的120例脾肾两虚夹瘀型肾病综合征患儿,依据随机数字表随机分为观察组和对照组,每组各60例。对照组在常规治疗基础上给予醋酸泼尼松片治疗,观察组在对照组治疗基础上给予健脾益肾化瘀汤进行治疗,两组均连续治疗12周。比较两组患儿治疗前后肢体倦怠、面色无华、夜尿频多等中医症状评分,肾功能(SCr、UACR、BUN、CCR),炎症指标(IL-6、hs-CRP)的变化情况,同时比较临床疗效和不良反应发生率。结果:观察组总有效率93.33%(56/60),显著高于对照组总有效率75%(45/60),两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与治疗后比较,两组肢体倦怠、面色无华、夜尿频多等中医症状评分均明显降低(P<0.05);与对照组治疗后比较,观察组肢体倦怠、面色无华、夜尿频多等中医症状评分均明显降低(P<0.01)。与治疗后比较,两组UACR、BUN、SCr水平均明显降低(P<0.05),CCR水平明显升高(P<0.05);与对照组治疗后比较,观察组UACR、BUN、SCr水平均明显降低(P<0.01),CCR水平明显升高(P<0.01)。与治疗后比较,两组患儿IL-6、hs-CRP水平明显降低(P<0.05);与对照组治疗后比较,观察组IL-6、hs-CRP水平均明显降低(P<0.01)。观察组不良反应发生率6.67%(4/60),对照组不良反应发生率11.67%(7/60),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾益肾化瘀汤联合醋酸泼尼松片治疗儿童脾肾两虚夹瘀型肾病综合征疗效显著,能够改善肾功能和炎症反应,减少不良反应的发生。

健脾祛痰化湿化瘀方联合强化生活方式干预治疗腹型肥胖患者的临床效果及对糖脂代谢的影响

目的观察健脾祛痰化湿化瘀方联合强化生活方式干预治疗腹型肥胖患者的临床效果及对糖脂代谢的影响。方法选取2021年1月至2023年6月新余市中医院体检中心收治的200例腹型肥胖患者作为研究对象,按就诊顺序分为对照组和观察组各100例。对照组给予强化生活方式干预治疗;观察组在对照组基础上给予健脾祛痰化湿化瘀方联合治疗。对两组患者同时进行为期3个月的观察,评估两组有效率,并比较腹围(WC)、体重指数(BMI),总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及糖化血红蛋白(HbA1c)和空腹血糖的变化情况。结果治疗后,观察组总有效率(80.00%)高于对照组(64.00%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组WC、BMI水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组TC、TG、LDL-C、HbA1c、空腹血糖水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾祛痰化湿化瘀方联合强化生活方式干预治疗腹型肥胖患者在临床上治疗效果明显,能降低患者BMI、WC水平,纠正糖脂代谢异常。