健脾理气药诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的研究

目的观察健脾理气药的诱导凋亡效应,为其临床应用进一步提供依据。方法采用血清药理学方法研究中药的体外效应,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测含中药兔血清对肝癌细胞的抑制效应,以Annexin V标记法、DNA含量测定、电子显微镜方法检测含中药血清诱导凋亡及细胞周期阻滞效应。免疫组化法观察含中药血清对P53,P21^(WAF1)/CIP1)蛋白的影响,RT-PCR法观察含中药血清对P21^(WAF1/CIP1) mRNA表达水平的影响。结果含中药血清有一定的抑制肝癌细胞作用,其作用3d的抑制率为6.6％,作用6d的抑制率为36.2％。含中药血清作用2d诱导9.8％±4.0％的肝癌细胞凋亡,使细胞周期阻滞于S期,并上调P53蛋白、P21^(WAF1/CIP1) mRNA及蛋白的表达。结论健脾理气药具一定的诱导凋亡及抑制肝癌细胞效应,上调p53,p21^(WAF1/CIP1)基因的表达为分子机制。

健脾理气方药诱导小鼠Hca-F肝癌细胞凋亡的形态学研究

目的观察健脾理气方药对小鼠Hca-F肝癌细胞凋亡的影响。方法建立小鼠脾虚肝郁的动物模型,再选用小鼠Hca-F腹水型肝癌细胞株,制作肿瘤动物模型,随机将其分为肿瘤对照组、中药组、西药组、中西药结合组进行光、电镜形态学观察。结果各实验组与肿瘤对照组比较,肝癌细胞体积较小,异型性不明显,病理性核分裂较少,间质血管较少。电镜下可见到细胞形态、胞质、胞核、染色质的变化,以及细胞凋亡的特异性标志—凋亡小体形成。结论健脾理气方药具有抗肝癌作用,其作用机理是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。

健脾理气方药对Hca-F荷瘤小鼠肿瘤细胞突变型P53 Bcl-2 C-myc蛋白表达的影响

目的:观察健脾理气方药对Hca-F荷瘤小鼠肿瘤细胞相关基因突变型P53、Bcl-2、C-myc蛋白表达的影响。方法:将40只小鼠随机分成荷瘤对照组、健脾理气方药组、环磷酰胺组和中西药结合组,造模形成实体瘤后分别以生理盐水、健脾理气方药、环磷酰胺、健脾理气方药+环磷酰胺灌胃9天,取瘤组织用免疫组化方法检测突变型P53、Bcl-2、C-myc蛋白表达。结果:各实验组肿瘤细胞突变型P53、Bcl-2、C-myc蛋白表达均有下降,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:健脾理气方药具有抑制肿瘤细胞突变型P53、Bcl-2、C-myc蛋白表达的作用。