健胃消胀片通过调节PI3K-Akt-eNOS通路改善大鼠胃癌前病变

【目的】探讨健胃消胀片对大鼠胃癌前病变的治疗作用及机制。【方法】将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、叶酸组和健胃消胀片组,每组10只。除正常组,其他3组大鼠采用雷尼替丁水溶液灌胃联合N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)溶液饮用法制备胃癌前病变模型。成功造模后,相应给药治疗7周。记录造模及给药期间大鼠体质量变化,观察胃部大体观并进行病理评分,测定脾脏、肝脏系数,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胃组织病理形态变化,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、胰高血糖素(GC)含量,阿利新蓝-过碘酸雪夫氏(AB-PAS)染色法观察胃组织黏膜层厚度,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测胃组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,免疫荧光染色法检测胃组织血管内皮细胞生长因子A(VEGFA)蛋白的表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠实验期间体质量增长慢,胃部大体观病理评分显著升高(P<0.01),脾脏系数和肝脏系数显著降低(P<0.01),胃组织出现杯状细胞增生、肠化生现象,胃组织炎症评分显著升高(P<0.01),血清GAS含量显著升高(P<0.01),MTL、GC含量显著降低(P<0.05),胃组织黏膜层厚度显著减小(P<0.05),PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、eNOS蛋白表达水平降低(P<0.01),VEGFA蛋白表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,健胃消胀片组和叶酸组上述指标均得到明显改善(P<0.05或P<0.01),其中,在胃组织杯状细胞增生、肠化生现象,血清GAS含量,胃组织黏膜层厚度方面,健胃消胀片组改善效果更优。【结论】健胃消胀片可改善大鼠胃癌前病变,其机制可能与激活PI3K-Akt-eNOS通路进而促进胃损伤组织的血管生成和修复能力有关。

基于网络药理学探讨健胃消胀片治疗胃肠动力障碍性疾病的作用机制

目的通过“化合物⁃靶标⁃通路⁃疾病”的网络药理研究模式,研究健胃消胀片在重症医学科治疗胃肠动力障碍性疾病(DGIM)的作用机制。方法通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选健胃消胀片的主要有效成分。TCMSP和Drug⁃Bank平台收集健胃消胀片主要有效成分的作用靶点。利用Genecards和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库获取DGIM的相关靶点。通过Venny数据库获取药物成分和疾病靶点的交集靶点。采用Cytoscape 3.7.2软件构建健胃消胀片“化合物⁃交集靶点”网络图。利用STRING平台构建蛋白质⁃蛋白质相互作用(PPI)网络图。利用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果通过TCMSP数据库共选取健胃消胀片候选化学物136个。通过TCMSP数据库和DrugBank数据库共得到2395个健胃消胀片的成分靶点。通过Genecards和OMIM数据库共得到1033个DGIM疾病靶点。维恩图分析显示健胃消胀片的成分靶点与DGIM的疾病靶点之间的交集靶点192个。“化合物⁃交集靶点”网络图显示,共有143个药物成分节点,183个靶节点。主要药物成分有β⁃谷甾醇、芒柄花黄素、异鼠李素等。PPI网络图显示共有191个节点,主要有羟色胺(HT)、胰岛素样生长因子(IGF)、白细胞介素(IL)等。GO功能富集分析共得到2623条条目。KEGG通路富集分析共得到174条相关通路。结论健胃消胀片通过参与糖代谢、信号转导、炎症反应等过程,调控肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素⁃17(IL⁃17)、T辅助细胞17(Th17)细胞、缺氧诱导因子1(HIF1)、磷酸肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)等信号通路,发挥治疗胃肠动力障碍的作用。

健胃消胀片对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜病理及超微结构的影响

目的评价健胃消胀片对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜超微结构改变的影响。方法以110只SPF级SD雄性大鼠为研究模型,随机选取10只为正常组,剩余100只进行造模,并随机分为正常组、模型组、对照组(即胃复春组)和健胃消胀片底、中、高剂量6组。除正常组常规饲养管理外,其余各组每天以脱氧胆酸钠、水杨酸钠交替灌胃并以MNNG作为饮用水造慢性萎缩性胃炎(CAG)模型,连续12周。在实验大鼠造模第5周,胃复春组(剂量:1.0 g/kg)和健胃消胀片低、中、高剂量组(剂量:0.5 g/kg、1.0 g/kg和2.0 g/kg)开始灌胃给药,其余各组予2 m L生理盐水灌胃,给药7周,第12周末取材,并对胃黏膜进行HE染色观察和扫描电镜观察。结果造模7周后动物均出现毛松、光泽偏黄、进食量及活动量减少、大便溏薄等症状;第12周,模型组大鼠死亡率较高,体重减轻明显。电镜扫描结果显示,正常组胃黏膜上皮细胞排列整齐,细胞间隙无增宽;模型组胃黏膜上皮细胞见坏死,巨噬细胞粘附,上皮细胞间隙明显变宽,胃小凹开口变大;随着健胃消胀片剂量的上升,各组胃黏膜上皮细胞坏死程度逐渐减轻直至无坏死,细胞间隙和胃小凹开口逐渐恢复正常,最终未见炎性细胞粘附。病理结果提示模型组大鼠胃黏膜表现符合重度CAG改变,治疗后各治疗组死亡率均显著低于模型组(P<0.05),死亡率由低到高顺序为0.00%(正常组)、29.4%(高剂量组)、31.3%%(低剂量组)、35.3%(对照组)、41.2%(中剂量组)、72.2%(模型组)。结论胃复春与健胃消胀片对实验性CAG大鼠的胃黏膜均有一定的保护作用,其中健胃消胀片高剂量组(相当于临床用量26.7倍)的作用最明显。

健胃消胀片治疗非酒精性脂肪性肝病临床研究

目的:观察健胃消胀片治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的临床效果。方法:纳入60例NAFLD患者,随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组服用健胃消胀片治疗,对照组服用易善复胶囊治疗,2组患者均治疗12周,观察2组患者的临床主要症状积分、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)]、血脂指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)]及肝脏超声等的变化。结果:治疗后,治疗组总有效率为90.00%,对照组总有效率为83.33%。2组疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组ALT、AST水平均较治疗前下降(P<0.05),治疗组2项指标水平均低于对照组(P<0.05)。2组TC、TG水平与主症积分、肝脏超声积分均较治疗前下降(P<0.05),2组TC、TG、肝脏超声积分比较,差异均无统计学意义(P>0.05),治疗组主症积分低于对照组(P<0.05)。结论:健胃消胀片治疗NAFLD在临床疗效及改善血脂代谢方面与易善复胶囊相当,而在改善临床症状及肝功能等方面有明确优势。

健胃消胀片对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃粘膜COX-2、P53和TFF2表达的影响

目的研究健胃消胀片对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠胃粘膜环氧合酶-2(COX-2)、P53蛋白和三叶因子-2(TFF2)表达的影响。方法采用脱氧胆酸钠、水杨酸钠交替灌胃并以甲基硝基亚硝基胍(MNNG)溶液作为饮用水造CAG模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、对照组(胃复春)和健胃消胀片高、中、低剂量组。连续给药7周后采用HE染色观察胃组织病理学变化;并用免疫组化染色观察胃粘膜TFF2、COX-2和P53蛋白的表达。结果对照组和健胃消胀片组的动物死亡率均比模型组低,其中高剂量组的死亡率最低(23.5%),其次为低剂量组(25.0%)、中剂量组(35.3%)、对照组(35.3%)。免疫组化结果显示,模型组的COX-2、TFF2、P53光密度值均上升,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);经7周治疗后,各治疗组COX-2、TFF2、P53蛋白均下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论动物研究显示健胃消胀片能够下调CAG大鼠模型胃粘膜TFF2、COX-2和P53蛋白的表达,增强粘膜屏障的防御和修复能力。

健胃消胀片对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清SOD活性、MDA水平的影响

目的观察健胃消胀片对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。方法将SPF级雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(胃复春)和健胃消胀片低、中、高剂量组,采用脱氧胆酸钠、水杨酸钠交替灌胃并以单功能烷化剂甲基硝基亚硝基胍(MNNG)作为饮用水造CAG模型,连续给药7周后观察血清中SOD活性和MDA含量变化。结果经7周治疗后,健胃消胀片中剂量组与正常组对比,SOD活性升高(P<0.05)。健胃消胀片各组的MDA含量比正常组、模型组均有所下降,健胃消胀片各组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);中剂量组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论健胃消胀片在CAG模型大鼠治疗过程中,通过升高SOD活性,降低MDA含量参与CAG氧化与抗氧化环节,从而起到保护胃黏膜的作用,同时健胃消胀片各剂量组均能降低MDA含量,故在CAG疾病过程中,健胃消胀片具有阻止细胞向胃癌转变的作用。