基于“胞脉络于心”探讨绞股蓝通过METTL3介导RNA m6A修饰调控糖酵解途径共治动脉粥样硬化与卵巢癌的理论研究

心血管病和癌症,是导致人类患病和死亡的主要原因。研究发现,二者存在潜在联系。从中医角度而言,动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病位在血管,与奇恒之腑“脉”对应,卵巢癌以脏腑功能紊乱、冲任失调为本,邪毒内生为标,阻于胞宫所致,又《素问·评热病论篇》曰:“胞脉者,属心而络于胞中”。可见,两种疾病可以“脉”为桥梁构建联系。绞股蓝化痰止咳,健脾理气,益气活血,解毒利湿,具有调血脂、抗衰老、调节机体免疫以及抗肿瘤等多种药理作用,在心血管系统与肿瘤领域疾病中疗效显著。N 6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核细胞mRNA最常见的一种表观遗传修饰方式。m6A甲基化修饰通过调控修饰mRNA,广泛参与细胞内RNA的许多生物学行为,从而影响疾病进展与肿瘤的发生。基于“胞脉络于心”理论,以中医异病同治观点为依据,构建“药物-成分-靶点”网络,以METTL3介导RNA m6A修饰调控糖酵解途径为切入点,对绞股蓝共治AS与卵巢癌的中医内涵及现代药理作用予以探讨。

基于网络药理学分析绞股蓝治疗糖尿病性心肌病的作用机制

目的:利用网络药理学方法探讨绞股蓝治疗糖尿病性心肌病(Diabetic Cardiomyopathy,DCM)的作用机制。方法:在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、PharmMapper、Genecards数据库中获取“绞股蓝”活性成分及其靶点、疾病靶点,使用Cytoscape绘制药物活性成分-疾病交集靶点网络图,利用STRING平台构建交集靶点的蛋白质-蛋白质相互作用网络图,通过OmicShare Tools平台进行基因本体论(GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用分子对接软件Autodock对核心靶点和主要活性成分进行分子对接验证。结果:筛选得到24个绞股蓝活性成分,其中与DCM的交集靶点50个。人参皂苷F2、绞股蓝皂苷XII、绞股蓝皂苷XXXII、绞股蓝皂苷XXXV_qt、绞股蓝皂苷LXXIV等是绞股蓝治疗DCM的主要活性成分,蛋白质-蛋白质相互作用网络提示白蛋白(Albumin,ALB)、雌激素受体1(Estrogen Receptor1,ESR1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3,CASP3)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、热休克蛋白90α家族A类成员1(Heat Shock Protein 90 Alpha Family Class A Member 1,HSP90AA1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma,PPARG)等可能是绞股蓝治疗DCM的核心靶点。KEGG富集分析显示主要信号通路有白细胞介素(Interleukin,IL)-17信号通路、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物(Advanced Glycation End Product,AGE)-晚期糖基化终末产物受体(Advanced Glycation End Product Receptor,RAGE)信号通路、幽门螺杆菌感染中的上皮细胞信号传导等。分子对接验证提示核心靶点和主要成分之间具有优秀的结合活性。结论:绞股蓝通过多成分、多靶点、多通路以发挥降糖、抗炎、改善能量代谢、抗氧化应激、改善内分泌抵抗等生理学功能,从而治疗DCM。

基于网络药理学探讨绞股蓝治疗动脉粥样硬化的作用机制

目的基于网络药理学方法探讨绞股蓝治疗动脉粥样硬化的有效活性成分及靶点的作用机制。方法研究运用TCMSP数据库筛选绞股蓝的有效活性成分,结合筛选条件确定主要有效活性成分作用的靶点,建立主要有效活性成分-靶点网络。利用GeneCards数据库获取动脉粥样硬化疾病基因,将药物靶点和疾病靶点取交集,对交集靶点进行蛋白质互相作用(PPI)网络分析、基因功能富集分析(GO)和信号通路富集分析(KEGG),并且进行药物-主要有效活性成分-靶点-疾病网络分析。结果筛选主要有效活性成分24种,其中10个有效活性成分没有相对应靶点,并获得药物靶点116个。通过GeneCards数据库,获得1217个疾病靶点,药物与疾病交集基因共53个,PPI蛋白互作网络分析得出EGFR、VEGFA、IL6、ESR1、CASP3、MYC、CCND1、AR等可能是绞股蓝治疗动脉粥样硬化的核心靶点。GO功能富集分析得到226个是生物过程条目,49个是细胞组成条目,26个是分子功能条目。KEGG通路富集分析筛选后得到57条信号通路,其中富集排名靠前的通路主要有乙型肝炎、癌症相关的通路、癌症中的蛋白多糖、结直肠癌、膀胱癌、子宫内膜癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、病毒性心肌炎、HIF-1等信号通路。结论绞股蓝治疗动脉粥样硬化具有多途径、多靶点作用的特点,为进一步研究分子生物学实验提供了理论基础。

石墨炉原子吸收光谱法测定珍稀中草药中痕量锗

本文着重研究了样品的前处理,以及用硝酸镍作为基体改进剂,石墨炉原子吸收光谱法测定了珍稀植物金花茶、人参和胶股兰中的痕量锗。特征灵敏度2Pg/1%吸收,方法的相对标准偏差小于4.0%。回收率在97.8～99.1%之间。

绞股蓝氮磷钾肥效反应模式研究

采用N、P、K三因素二次D饱和最优设计,在陕西安康平利绞股蓝药源基地进行了绞股蓝氮、磷、钾 肥效田间试验,结合试验点的土壤肥力水平,求得了绞股蓝N、P、K的肥效反应主程,提出了绞股蓝不同用药 部位的N、P、K合理配比和肥料用量。绞股蓝地上部分目标年均产量在3 900-4 600 kg／hm2的施肥量为N 158．05～222．36 kg／hm2,P2O51．915～116．10 kg／hm2,K2O104．06～170．134 kg／hm2。绞股蓝地下根茎目 标产量在900～1200 kg／hm2的施肥量为N 102．88～1 89．02 kg／hm2,P2O5 60．98～100．49 kg／hm2,K2O 152． 31～194．34 kg／hm2。分析N、P、K对绞股蓝生长发育和产量的影响作用,结果表明:不同药用部位的需肥特点 虽不相同,但N、P、K均表现为正效应,都能促进绞股蓝产量的提高,但不能过量。对二因素交互作用分析发 现,NP反应为负,NK反应为正,PK反应为正。说明化学肥料必须在一定限度下以合理的比例施用,否则会造 成减产。

绞股兰在原发性肺癌放疗和化疗中对细胞免疫功能的保护作用

在接受联合放疗和化疗的原发性肺癌患者，前瞻性地观察绞股兰对细胞免疫功能和预后的作用。结果：对照组联合放疗和化疗后患者的免疫功能受到明显的再抑制；绞股兰组口服绞股兰总甙片（每次６０～８０ｍｇ，每天３次，６０ｄ），免疫功能状态保持不变；一年后随访，绞股兰组和对照组的肿瘤远处转移率，远处转移出现的中位时间以及６个月，１２个月的肿瘤局部控制率和生存率，虽然在统计学上无明显差异，但前者有优于后者的趋势。结果表明，绞股兰在原发性肺癌患者接受联合放疗和化疗中对细胞免疫功能具有保护作用。

复方绞股蓝对小鼠学习记忆及脑内单胺氧化酶活性的影响

目的:研究复方绞股蓝的组方、配比关系,并验证其效果,探讨复方绞股蓝的作用机理。方法:试验(1):用复方绞股蓝五种组方配比分别为:A组(绞股蓝∶某某:1∶1)、B组(绞股蓝∶某某:2∶1)、C组(绞股蓝∶某某:3∶1)、D组(绞股蓝∶某某∶石菖蒲:2∶1∶1)、E组(绞股蓝∶某某:2∶1)+冰片,分别给5组小鼠灌胃5d后,以氟哌啶醇造模,进行小鼠跳台试验,观察不同组方配比对小鼠学习记忆障碍的影响。试验(2):分别用石菖蒲挥发油高、低剂量与复方绞股蓝高、低剂量给老龄小鼠灌胃10d后,测定其对老龄小鼠脑蛋白含量及脑内单胺氧化酶(MAO-B)活性的影响。结果:试验(1):在小鼠跳台试验中观察到复方绞股蓝B组、D组与模型组比较P<0.05,有显著性差异。试验(2):复方绞股蓝高、低剂量对老龄小鼠脑蛋白含量及脑内单胺氧化酶(MAO-B)活性的影响与空白组比较P<0.01,有非常显著性差异。结论:(1)复方绞股蓝D组组方配比最好,B组次之。(2)复方绞股蓝水煎剂(绞股蓝∶某某:2∶1)可明显升高老龄小鼠脑蛋白含量并降低脑内单胺氧化酶(MAO-B)的活性。

绞股蓝、乌龙茶抗肿瘤实验研究

侧重探讨药物在体内环境中产生效应的过程 .以地产绞股蓝和当地习惯饮用的乌龙茶直接给动物饮用 ,观察它们的抗肿瘤作用 .结果 :饮用 15 0 mg/只 /日绞股蓝、30 mg/只 /日乌龙茶的荷瘤鼠生存期较饮水组明显延长 (P<0 .0 5 ) ,开始发生死亡的时间推迟 7～ 8d,并对瘤体早、中期增长速度有明显抑制作用 (P<0 .0 5～ 0 .0 0 1) ,且外观生存质量也好于饮水组 .但绞股蓝在 30 mg/只 /日浓度时却无上述作用 .另外 ,乌龙茶体外对于多种肿瘤细胞株增殖均有较强抑制作用 ,以 2 0 0 μg/ m L浓度作用最强 ,抑制率均 >86 .2 %

绞股蓝、生山楂水提物对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质代谢相关因子的调控作用研究

目的:探讨绞股蓝、生山楂水提物预防大鼠非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic Steatohepatitis,NASH)及其对肝组织SREBP-1c、PPARγ和PPARαmRNA表达水平的影响。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为4组,每组10只。除正常对照组外,高脂饲料喂养10周建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型。自造模即日起,正常对照组、模型组每天分别给予10mL/kg去离子水灌胃,中药组给予绞股蓝、生山楂水提物,西药组给予易善复混悬液灌胃。给药10周后,处死所有大鼠,观察各组大鼠肝指数,肝组织病理学改变及RT-PCR法检测肝组织SREBP-1c、PPARγ和PPARαmRNA表达水平。结果:与模型组比较,中药组体质量及肝指数明显降低(P<0.05),脂肪变、小叶内炎症病理评分明显下降(P<0.01),SREBP-1c mRNA的表达量显著降低(P<0.01),PPARαmRNA的表达量升高(P<0.05),PPARγmRNA表达量较模型组亦有所升高,但无显著统计学差异(P>0.05)。结论:绞股蓝、生山楂水提物可调控SREBP-1c、PPARγ和PPARα的基因表达,对非酒精性脂肪性肝炎有预防作用。

野生绞股蓝复方治疗高脂血症临床研究

目的 :了解野生绞股蓝复方治疗高脂血症的疗效。方法 :高脂血症患者 1 35例随机分为治疗组 68例和对照组 67例 ,分别以野生绞股蓝复方和野生绞胶蓝单方治疗。观察两组治疗前后组间血脂变化、临床症状改善及副作用的发生情况。结果 :治疗组有效率明显高于对照组 ( P<0 .0 1 )。两组 TC、TG、LDL- C均明显下降 ,但治疗组下降幅度高于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;治疗组 HDL - C上升幅度高于对照组 ( P<0 .0 5 )。结论 :野生绞股蓝复方调节血脂作用优于野生绞股蓝单方 ,而且副作用的发生率低于野生绞股蓝。

悬浮体制样氟化辅助ETV-ICP-AES直接测定中药绞股蓝中微量元素

报道了以聚四氟乙烯悬浮体 (PTFE)为化学改进剂 ,采用电热蒸发电感耦合等离子体原子发射光谱法(ETV- ICP- AES)直接分析中药绞股蓝中微量元素 Cu、Mn、Cr、Fe、Zn.考察了影响分析信号的主要因素 .本法用于实际样品分析 。

复方绞股蓝胶囊质量标准研究

目的建立复方绞股蓝胶囊的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对绞股蓝进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定野黄芩苷的含量。结果绞股蓝的薄层色谱图斑点清晰,阴性对照品溶液无干扰;野黄芩苷对照品溶液质量浓度在0.007～0.1800 g/L范围内与峰面积线性关系良好,r=0.99994(n=6),平均回收率为99.01%,RSD=1.81%(n=6)。结论所用方法分离度好,快速、简便,可作为复方绞股蓝的质量控制方法。

复方绞股蓝胶囊治疗中晚期胃癌的临床疗效观察

目的 为了探讨中西药复方制剂复方绞股蓝胶囊治疗中晚期胃癌的疗效及机理。方法 以复方绞股蓝胶囊治疗１２５ 例中晚期胃癌患者，其中单用复方胶股蓝胶囊６２ 例（ 治疗组Ⅰ） ，复方绞股蓝胶囊配合化疗６３ 例（ 治疗组Ⅱ） ，另有６０ 例单用化疗（ 对照组） ，观察三组的有效率、毒副反应等。结果 治疗组的有效率和卡氏评分高于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０５） ， 毒副反应发生率低于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论 复方绞股蓝胶囊是一具有较好发展前景的中西药复方制剂。

基于HPLC-UV-ELSD指纹图谱法同时测定绞股蓝中4种成分及不同产地药材质量评价

目的:建立绞股蓝药材高效液相色谱-紫外-蒸发光散射器(HPLC-UV-ELSD)串联指纹图谱方法,并同时测定槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX的含量,对其质量优劣进行全面综合评价。方法:采用HPLC-UV-ELSD串联法和相似度评价软件,对15批不同产地绞股蓝药材进行指纹图谱研究,并对绞股蓝中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种指标性成分中的含量进行测定与分析。结果:建立了绞股蓝药材HPLCUV-ELSD串联指纹图谱法,标定了11个共有峰,指认了其中4个色谱峰;不同产地绞股蓝药材中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种成分的含量高低不一,质量存在差异。结论:建立了绞股蓝药材HPLC-UVELSD指纹图谱法,并结合相似度评价和4种成分的定量分析结果,较全面地反映该药材的质量,该法可用于不同产地绞股蓝药材质量的有效评价。

兰子益春液治疗心脾两虚、肾精亏损型性机能障碍临床研究

[目的 ]进一步探讨兰子益春液的临床疗效 ,开发利用绞股蓝。 [方法 ]采用以绞股蓝为主制成的兰子益春液连续口服 30天 ,每日 3次 ,每次 2 0毫升 ,观察治疗 1 2 0例性功能障碍患者 ,其中男 90例 ,女 30例。 [结果 ]总有效率男 76.67% ,女 73.33% ,治疗后性机能显著改善 ,伴随证候明显减轻 ( P<0 .0 1 ) ,疗效与御苁蓉口服液对照组无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。 [结论 ]兰子益春液可显著改善心脾两虚、肾精亏损患者性机能及伴随证候 ,达到国内同类产品水平 。

绞股蓝总苷片的指纹图谱及含量测定

目的采用超高效液相色谱法建立中药制剂绞股蓝总苷片的指纹图谱,并同时测定其中人参皂苷Rb1和绞股蓝皂苷XLIX的含量。方法采用Kromat Universil XB C18色谱柱（150 mm×2.1mm,3μm）,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2mL·min-1,检测波长为203nm,柱温为30℃;建立绞股蓝总苷片指纹图谱,运用中国药典委员会＂中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件＂对10批制剂进行相似度评价,并对其中2个色谱峰进行指认及含量测定。结果 10批绞股蓝总苷片指纹图谱中标定了17个共有色谱峰,相似度值为0.983~0.995。人参皂苷Rb1和绞股蓝皂苷XLIX质量浓度分别在4.2~42.0mg·L-1和9.4~94.0mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.5%和99.4%。结论用该方法所建立的皂苷类指纹图谱方法,结合有关成分的含量测定能更好地控制其质量,对提高绞股蓝总苷片的整体质量控制提供参考依据。

绞股蓝总苷分散片指纹图谱及3个成分的定量分析

目的建立不同批次绞股蓝总苷分散片HPLc-ELsD指纹图谱，并对3种特征成分定量分析。方法采用HPLc-ELsD法，Phenomenex1unac18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲酸-异丙醇．水（1：8：91）和乙腈进行梯度洗脱，ELsD检测器；体积流量0．8mL/min；柱温25℃；进样量10此。结果10批绞股蓝总苷分散片指纹图谱中标示出20个特征峰；绞股蓝皂苷A、人参皂苷Rd、人参皂苷F：的线性范围分别为2．04～7．14μg（r=0．9994）、1．01～3．53μg（r=0．9995）、0．48～1．69μg（r=0．9997）；平均加样回收率分别为98．67％、98．40％、98．92％、RsD分别为1．10％、0．78％、1．30％。结论该方法简便，重复性好，精密度高，可用于绞股蓝总苷分散片生产过程的质量控制与制剂质量控制。

绞股蓝治疗糖尿病和高血压病临床观察

目的：为寻求糖尿病、高血压安全有效的治疗药物，观察绞股蓝治疗糖尿病和高血压病的疗效。方法：将６０例糖尿病患者随机分为绞股蓝组、优降糖组及绞股蓝与优降糖合用组（各２０例）；６０例高血压病患者分为绞股蓝组、心痛定组及绞股蓝与心痛定合用组（各组２０例），比较３组疗效。结果：治疗２周后绞股蓝能显著地降血糖、降血压，患者治疗前后比较血糖和血压均有非常显著性差异（Ｐ＜０．０５），与优降糖组或心痛定组比较，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；而联合用药组，疗效则更显著（Ｐ＜０．０１）。结论：绞股蓝是一种有效的降血糖。

基于网络药理学和分子对接技术预测复方绞股蓝胶囊治疗口腔扁平苔藓的分子机制

目的运用网络药理学及分子对接方法研究复方绞股蓝胶囊治疗口腔扁平苔藓的物质基础与潜在的分子机制。方法从TCMSP数据库中得出复方绞股蓝胶囊治疗口腔扁平苔藓的作用靶标,对共有基因构建PPI网络。构建“疾病-活性成分-靶点网络”图,并通过基于R语言的clusterprofiler进行GO和KEGG通路富集分析。将筛选出的复方绞股蓝胶囊活性成分与主要靶点进行分子对接。结果从复方绞股蓝胶囊中筛选出15个活性成分,包括绞股蓝皂苷类成分、灯盏乙素、槲皮素和鼠李素等,这些活性成分可与口腔扁平苔藓相关的54个潜在靶点发生相互作用,可能通过调节内分泌抵抗、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、低氧诱导因子1信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用等信号通路来发挥治疗作用。结论应用网络药理学和分子对接方法可揭示复方绞股蓝胶囊治疗口腔扁平苔藓的潜在作用机制,为进一步深入研究提供了理论参考。

基于预后分析的复方绞股蓝胶囊预防口腔白斑癌变的回顾性队列研究

目的基于病理分级分析口腔白斑患者的预后影响因素,探讨复方绞股蓝胶囊对口腔白斑的预防作用,并构建预后模型。方法收集整理口腔颌面头颈肿瘤科收治的192例具有自身对照样本口腔白斑患者的病历资料,根据是否服用复方绞股蓝胶囊分为中西医结合组(98例)、西医组(94例)。统计癌变率,采用Kaplan-Meier法计算平均癌变时间,并进行单因素分析;运用Cox回归模型分析影响疾病进展和癌变的独立预测因素,完成数据分析并建立预后模型。结果①中西医结合组、西医组癌变率分别为16.0%(15/94)和26.5%(26/98)。中西医结合组与西医组平均癌变时间分别为125.2个月、75.1个月,差异有统计学意义(P=0.005)。②中度异常增生(P=0.03)、重度异常增生(P<0.01)、饮酒(P=0.022)、服用复方绞股蓝胶囊(P=0.006)是口腔白斑进展或癌变的独立预测因素。③建立预后模型h(t)=h0(t)Exp(0.767×中度异常增生+2.88×重度异常增生+0.944×饮酒-0.934×服用复方绞股蓝胶囊)。结论中度异常增生、重度异常增生、饮酒是口腔白斑的危险因素,服用复方绞股蓝胶囊是保护因素。定期随访及口服复方绞股蓝胶囊是预防口腔白斑进展或癌变的重要手段。