椒目油对SD大鼠灌胃给药的急性毒性研究

目的探讨大鼠灌胃椒目油可能出现的急性毒性反应,为后续应用研究提供安全性参考。方法将SD大鼠随机分为溶剂对照组(n=9)、最低剂量组(n=9)、低剂量组(n=9)、中剂量组(n=9)、高剂量组(n=10)、最高剂量组(n=10),溶剂对照组灌胃玉米油,各剂量组椒目油灌胃剂量依次为0.8134、1.6268、3.2535、6.5070、13.0140 g/kg,一次性灌胃给药,观察并记录给药后14 d内的毒性反应、体质量和摄食量变化情况。观察期结束后,对仍存活动物进行血液生理指标、血清生化指标、脏器系数及脏器组织病理学检查。结果椒目油灌胃14 d后无大鼠死亡,各组大鼠体质量无明显变化(P>0.05)。与溶剂对照组比较,高剂量组14 d进食量增加(P<0.05);最低剂量组、中剂量组、最高剂量组中性粒细胞百分比(neutrophil percentage,NEUT%)水平下降、淋巴细胞百分比(lymphocytes percentage,LYMPH%)水平上升(P<0.05);最低剂量组、低剂量组、中剂量组肌酐(creatinine,CREA)水平下降(P<0.01),左肾系数、右肾系数上升(P<0.05);中剂量组、最高剂量组淋巴细胞绝对值(lymphocyte,LYMP)水平上升(P<0.05);最低剂量组心脏系数下降(P<0.05);高剂量组CREA水平下降、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)水平上升(P<0.05);高剂量组、最高剂量组左肾系数上升(P<0.05);最高剂量组中性粒细胞绝对值(neutrophil,NEUT)水平下降(P<0.05)。与最低剂量组相比,低剂量组NEUT%水平上升、LYMPH%水平下降(P<0.05),心脏系数上升(P<0.05);中剂量组、高剂量组FPG水平上升(P<0.05);高剂量组右肾系数下降(P<0.05);最高剂量组心脏系数上升(P<0.05)。与低剂量组相比,中剂量组NEUT%水平下降、LYMPH%水平上升(P<0.05)、FPG水平上升(P<0.05);高剂量组FPG水平上升、左肾系数下降(P<0.05);最高剂量组NEUT%、NEUT水平下降(P<0.05),LYMPH%水平上升(P<0.05)。与高剂量组相比,最高剂量组NEUT%及NEUT水平下降、LYMPH%水平上升(P<0.05)。HE染色结果显示,溶剂对照组和各剂量组肝脏、脾脏、肾脏、胃未见明显病变。结论单次给予15 mL/kg椒目油灌胃未引起大鼠急性毒性反应,安全性较高,提示椒目油具有开发为生物制剂的潜在价值。

椒目油A2通过抑制EOS浸润和骨髓粒系动员减轻哮喘小鼠气管炎症反应

目的:观察椒目油A2对哮喘支气管嗜酸性粒细胞(EOS)浸润与CD34+细胞及骨髓粒系动员的影响。方法:腹腔注射20%氢氧化铝[Al(OH)3]+10%卵蛋白(OVA)混合液致敏与雾化吸入1%OVA诱发BALB/c小鼠哮喘模型。在激发10 d并同时给药治疗后,小鼠被处死,瑞氏染色检测肺灌洗液(BALF)炎性细胞及骨髓造血细胞系变化,原位杂交(ISH)检测肺组织和骨髓白细胞介素-5(IL-5)mRNA和嗜酸性粒细胞趋化因子(EON)mRNA表达,免疫组化检测肺组织和骨髓中IL-5、EON的蛋白表达,HE和荧光染色观察肺组织炎症细胞浸润和CD34+细胞。结果:椒目油A2和泼尼松显著地减轻肺组织支气管炎性反应的病变程度如组织肿胀、重构、增生、上皮细胞脱落等,抑制变应源致敏刺激机体所致EOS增多和浸润,明显地减少哮喘小鼠气管周围及骨髓中EOS密度,抑制骨髓中幼粒细胞向嗜酸性粒细胞分化,同时支气管区及骨髓中CD34+IL-5、CD34+IL-5R、CD34+CCR-3细胞数显著减少,这与肺组织内IL-5、IL-4、GM-CSF等细胞因子水平降低有关。结论:椒目油A2减轻实验性哮喘小鼠气道炎症反应,其机制可能与其抑制支气管EOS增多和骨髓粒系动员相关。

椒目油对哮喘豚鼠白细胞介素4,5及气道反应性的影响

目的:探讨椒目油对哮喘豚鼠模型白细胞介素4,5(IL-4,5)水平及气道高反应性(AHR)的影响,为椒目油治疗哮喘提供理论依据.方法:实验分为4组:正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组和椒目油治疗组,每组各10只豚鼠.用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型,三通管做气管插管进行机械通气,测定气道内压力(IP)以反映气道反应性,ELISA法检测豚鼠血清中IL-4,5含量.结果:哮喘模型组豚鼠血清IL-4,5含量[分别为(38.2±3.4)和(344.4±21.8)ng/L]显著高于正常对照组[分别为(19.8±1.2)和(77.8±26.0)ng/L](P<0.01);椒目油组IL-4,5含量[分别为(22.8±3.5)和(89.2±38.7)ng/L]和地塞米松组IL-4,5含量[分别为(22.0±1.8)和(234.6±35.1)ng/L]均明显低于哮喘模型组(P<0.01);椒目油组豚鼠IL-4含量与地塞米松组比较无统计学意义(P>0.05),但IL-5含量显著低于地塞米松组(P<0.01).哮喘豚鼠模型组气道反应性(0.013±0.014g/L)与正常对照组(0.168±0.186g/L)比较显著升高(P<0.01);椒目油治疗组与地塞米松治疗组气道反应性[分别为(0.160±0.180)和(0.144±0.154)g/L]与哮喘模型组比较均显著降低(P<0.01),与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05);椒目油组气道反应性与地塞米松组相比无显著性差异(P>0.05).结论:椒目油能有效降低哮喘豚鼠AHR,其机制可能是抑制哮喘豚鼠体内IL-4,5的生成.

椒目油对哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ水平及肺组织NF-κB的影响

目的 探讨椒目油对支气管哮喘（哮喘）豚鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ水平及肺组织中NF-κB的影响,为椒目油治疗哮喘提供理论依据。方法 实验分4组：正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组和椒目油治疗组,每组各10只豚鼠。用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型。ELISA法检测豚鼠BALF中IL-4,IFN-γ含量。免疫组化法观察NF-κB在豚鼠支气管上皮的表达。结果 哮喘组BALF中的IL-4、IFN-γ含量及PC20水平都与正常对照组有显著的差别（P均〈0.05）,分别为（41.36±6.71）ng/L和（10.58±1.28）ng/L,（21.15±2.75）ng/L和（73.52±5.23）ng/L,（0.013±0.014）g/L和（0.168±0.186）g/L,而椒目油组及地塞米松治疗组豚鼠BALF中IL-4含量分别为（15.35±4.28）ng/L、（19.20±3.78）ng/L,明显低于哮喘模型组（P〈0.05）,其IFN-γ含量分别为（50.65±4.19）ng/L、（53.34±5.64）ng/L和PC20[（0.160±0.180）g/L、（0.144±0.154）g/L]水平较后者显著升高（P〈0.05）。椒目油治疗组和地塞米松治疗组各指标之间无显著性差异（P〉0.05）。正常对照组、哮喘模型组、椒目油治疗组和地塞米松治疗组豚鼠气道中NF-κB阳性细胞百分比分别为（9.51±2.82）%、（52.71±7.80）%、（32.26±3.70）%、（29.89±2.01）%,两治疗组均和哮喘模型组有显著差异。结论 椒目油能有效降低豚鼠BALF中IL-4水平,升高IFN-γ含量,同时降低气道高反应性和NF-κB在哮喘豚鼠支气管上皮中的表达。

椒目油对哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ水平及肺组织NF-κB的影响

目的探讨椒目油对支气管哮喘(哮喘)豚鼠模型肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IFN-γ水平及肺组织中NF-κB的影响,为椒目油治疗哮喘提供理论依据。方法实验分4组:正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组和椒目油治疗组,每组各10只豚鼠。用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型。ELISA法检测豚鼠BALF中IL-4,IFN-γ含量。免疫组化法观察NF-κB在豚鼠支气管上皮的表达。结果哮喘组BALF中的IL-4、IFN-γ含量及PC_(20)水平都与正常对照组有显著的差别(P均<0.05),分别为(41.36±6.71)ng/L和(10.58±1.28)ng/L,(21.15±2.75)ng/L和(73.52±5.23)ng/L,(0.013±0.014)g/L和(0.168±0.186)g/L,而椒目油组及地塞米松治疗组豚鼠BALF中IL-4含量分别为(15.35±4.28)ng/L、(19.20±3.78)ng/L,明显低于哮喘模型组(P<0.05),其IFN-γ含量分别为(50.65±4.19)ng/L、(53.34±5.64)ng/L和PC_(20)[(0.160±0.180)g/L、(0.144±0.154)g/L]水平较后者显著升高(P<0.05)。椒目油治疗组和地塞米松治疗组各指标之间无显著性差异(P>0.05)。正常对照组、哮喘模型组、椒目油治疗组和地塞米松治疗组豚鼠气道中NF-κB阳性细胞百分比分别为(9.51±2.82)%、(52.71±7.80)%、(32.26±3.70)%、(29.89±2.01)%,两治疗组均和哮喘模型组有显著差异。结论椒目油能有效降低豚鼠BALF中IL-4水平,升高IFN-γ含量,同时降低气道高反应性和NF-κB在哮喘豚鼠支气管上皮中的表达。