加味芪黄饮通过减轻线粒体损伤延缓糖尿病肾病研究

目的分析加味芪黄饮治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的机制。方法利用高脂食物联合向腹腔注入链脲佐菌素的方法建立肾病大鼠模型,按照随机原则分为4组,分别为正常组,模型组,加味芪黄饮低、高剂量组,给药组大鼠每天予加味芪黄饮400、800 mg·kg-1进行灌胃。12周后检杀,提取大鼠血液、尿液样本检测24 h尿微量白蛋白(UALB)、空腹血胰岛素(FIns)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标水平,观察肾脏组织病理变化,通过电子显微镜研究细胞中线粒体的变化情况,Western Blot检测肾组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、发动蛋白相关蛋白-1(Drp1)等蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠24 h UALB、FIns水平及胰岛素抵抗指数均显著提高(P<0.01),说明肾小球基质开始积累,体积显著扩大及肾小管上皮组织明显受损(P<0.01);加味芪黄饮低、高剂量组大鼠以上参数相比于模型组有所降低(P<0.05),肾组织病理受损情况相比于模型组有所改观(P<0.05),且呈剂量依赖。与正常组比较,模型组大鼠肾组织中SIRT1表达升高,Drp1表达下降(P<0.05);加味芪黄饮低、高剂量组大鼠以上蛋白表达相比模型组都有所改善(P<0.05),并伴随给药剂量的提高,其改善态势更显著。结论加味芪黄饮可延缓糖尿病肾病进展,可能通过减轻线粒体损伤,改善胰岛素抵抗状态发挥作用。

基于SIRT1/p53/Drp1轴探讨加味芪黄饮减轻糖尿病肾病线粒体损伤及胰岛素抵抗的机制

目的研究加味芪黄饮减轻糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)线粒体损伤及胰岛素抵抗的沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/上游信号抑癌基因(p53)/分子发动相关蛋白1(Drp1)轴的影响及机制。方法40只SPF级C57BL/6小鼠,其中30只小鼠用于建立糖尿病肾病模型设为DKD组,10只不建立糖尿病肾病模型设作为对照组;建模成功后再将DKD组中小鼠随机分为模型组、低剂量组、高剂量组,每组各10只;低剂量组、高剂量组分别给予加味芪黄饮400、800 mg/(kg·d),对照组、模型组小鼠给予等体积生理盐水,均为灌胃给药12周后处死,留取小鼠血、尿标本测定尿白蛋白肌酐比值(UACR);尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、β2微球蛋白(β2-MG)、胱抑素C(Cys-C);血糖仪检测空腹血糖(FBG),放射免疫法检测空腹胰岛素(FIns)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标,采用DCFH-DA探针检测肾脏细胞中活性氧(ROS)水平、MitoSOXtmRed探针检测肾脏细胞线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)、荧光检测ATP,HE染色观察大鼠肾组织形态,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肾组织中SIRT1、p53、Drp1水平。结果与对照组小鼠比较,模型组小鼠UACR、BUN、Scr、β2-MG、Cys-C、FBG、FIns、HOMA-IR、ROS、p53、Drp1水平升高、SOD、ATP、SIRT1下降(P<0.05);与模型组比较,低剂量组、高剂量组小鼠UACR、BUN、SCr、β2-MG、Cys-C、FBG、FIns、HOMA-IR、ROS、p53、Drp1水平下降、SIRT1、SOD、ATP升高(P<0.05),且高剂量组小鼠UACR、BUN、SCr、β2-MG、Cys-C、FBG、FIns、HOMA-IR、ROS、p53、Drp1水平低于低剂量组,SOD、ATP、SIRT1高于低剂量组(P<0.05)。结论加味芪黄饮可延缓糖尿病肾病进展,其机制可能与介导SIRT1/p53/Drp1轴减轻肾脏线粒体损伤,改善胰岛素抵抗状态有关。