超高效液相色谱-串联质谱同时测定加味左金丸中的9种有效成分

建立了同时测定加味左金丸中9种药效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。采用Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱,以含0.2%甲酸的水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,在电喷雾电离(ESI)正离子模式下,采用多重反应监测模式进行检测。结果表明,芍药苷、延胡索乙素、药根碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、柴胡皂苷C、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D的线性范围分别为0.025～5.0 mg/L、0.001 0～2.0 mg/L、0.002 3～7.2 mg/L、0.002 7～28.9 mg/L、0.002 3～9.1 mg/L、0.005 0～1.0 mg/L、0.050～10 mg/L、0.005～1.0mg/L、0.007 5～1.5 mg/L;检出限分别为5.0、0.20、0.45、0.54、0.45、1.0、10、1.0、1.5μg/L。9种成分的加样回收率为99.3%～105%,相对标准偏差均不大于2.6%。该法快捷、准确、重复性好,已成功用于实际样品的分析。

加味左金丸抑酸止痛作用的临床观察及实验研究

加味左金丸由左金丸加木香、柴胡、大黄等组成，用传统工艺制成水泛九。临床治疗３４例消化性溃疡及慢性胃炎患者，以改善胃痛等主要症候为标准评价疗效，结果总有效率８５．３％，显效率５２．９％．药效学实验结果表明该方具有明显止痛、促进胃排空、抑酸和抗溃疡作用，与临床疗效相符。

加味左金丸联合铝碳酸镁治疗反流性食管炎临床观察

目的 :观察加味左金丸 (黄连 ,吴茱萸 ,乌药 ,枳实等 )联合铝碳酸镁治疗反流性食管炎的疗效。方法 :将 6 8例内镜证实的反流性食管炎患者分为治疗组 38例 ,予铝碳酸镁 1.0 g ,每日 4次 ,配合加味左金丸每日 1剂 ,分 2次服用 ,4周为1个疗程 ;对照组 30例 ,予奥美拉唑 2 0mg ,每日 2次 ,治疗 2周后 ,再改用 2 0mg ,每日 1次 ,治疗 2周。观察两组病人治疗前后临床主要症状积分及内镜下治愈率。结果 :治疗组有效率 96 .3 % ,对照组有效率 95 % ,两组比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :加味左金丸联合铝碳酸镁与奥美拉唑一样为治疗反流性食管炎的有效药物。

加味左金丸中盐酸小檗碱的提取与含量测定

目的建立加味左金丸中盐酸小檗碱的提取和测定方法。方法以50%甲醇-盐酸（100∶1）为溶剂,超声提取30min作为盐酸小檗碱的提取方法。色谱柱CAPCELL PAK C18;流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（含0.2%的三乙胺,用磷酸调pH值为3.0）（25∶75）;检测波长263nm。结果盐酸小檗碱在进样量0.06672~1.3344mg范围内线性良好r=1,平均回收率为99.27%,RSD=0.71%,（n=6）。结论该方法操作简便,准确可靠,可用于提取和测定加味左金丸中盐酸小檗碱的含量。

LC-MS/MS法研究加味左金丸在大鼠体内的药动学

目的建立专属、准确的LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中小檗碱、巴马汀、延胡索乙素、黄芩苷、黄连碱的质量浓度,并应用于加味左金丸在大鼠体内的药动学研究。方法以白屈菜红碱为内标,采用乙腈(含体积分数0.02%甲酸)沉淀蛋白的方式进行血浆样品预处理,色谱柱为Thermo Syncronis C_(18)(100 mm×2.1 mm, 5μm)柱,保护柱为Security Guard C_(18)(4 mm×3.0 mm, 3μm)柱,流动相为2 mmol·L^(-1)甲酸铵水溶液(含体积分数0.02%甲酸)-乙腈(体积比70∶30),流速为0.2 mL·min^(-1),进样量为5μL。离子源选择电喷雾电离源,采用正离子化方式,扫描方式为选择反应离子监测。结果血浆中小檗碱、巴马汀、延胡索乙素、黄芩苷、黄连碱的线性范围分别为0.50-100μg·L^(-1),0.50-100μg·L^(-1),0.10-20μg·L^(-1),5.0-1 000μg·L^(-1)和0.25-50μg·L^(-1)(r≥0.990 7),日内、日间精密度(RSD)均小于15%,准确度RE在-7.5%-5.3%之间。大鼠灌胃给予加味左金丸药液后,小檗碱、巴马汀、延胡索乙素和黄连碱的吸收速度均较快,tmax约为0.3-2.4 h,但它们的达峰浓度都较低,ρmax约为1.9-14.5μg·L^(-1);黄芩苷的t_(max)和ρ_(max)分别为(6.3±1.5) h和(343.0±102.0)μg·L^(-1);延胡索乙素从体内消除的速度最快,t_(1/2)为(1.3±0.4) h,而黄连碱的消除速度最慢,t_(1/2)为(9.3±6.5) h。结论该方法适用于加味左金丸在大鼠体内的药物动力学研究。

基于胃干细胞标记物-Lgr5研究加味左金丸对大鼠胃癌前病变的影响

目的基于胃干细胞标记物-富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(G protein-coupled receptor 5 rich in leucine repeat sequence,Lgr5)研究加味左金丸对大鼠胃癌前病变的影响。方法将63只SD雄性大鼠按随机数字表设计分组,分别为模型组35只、加味左金丸组10只、叶酸组10只、空白对照组8只。空白对照组正常进食,其余3组采用综合造模方法,除空白对照组外,其余3组大鼠的饮用水以浓度为100μg/ml甲硝基亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)溶液代替(饮水瓶用油漆涂黑避光),配合饥饱失常,即进食标准饲料2 d、禁食1 d,相互交替,且在禁食当日上午用40%酒精10 ml/kg灌胃,进食当天下午用0.85%脱氧胆酸钠溶液10 ml/kg灌胃。实验28周,采用免疫组化检测模型组、加味左金丸组、叶酸组、空白对照组大鼠胃黏膜中Lgr5蛋白的表达情况。结果实验的8、12、16、20、24周时,于模型组中随机选取5只大鼠处死观察大鼠胃黏膜的变化情况,确认研究进程。此外,加味左金丸组在实验的6周、叶酸组在实验的23周时各有1只大鼠死亡,整个实验过程空白对照组无大鼠死亡。28周末,模型组、加味左金丸组、叶酸组、空白对照组各组大鼠剩余数为10、9、9、8只。Lgr5蛋白水平表达从高到低依次是:模型组、叶酸组、加味左金丸组(空白对照组)。模型组Lgr5的表达水平高于加味左金丸组、叶酸组、空白对照组(P均<0.05);加味左金丸组Lgr5的表达水平低于叶酸组(P<0.05);空白对照组Lgr5的表达水平与加味左金丸、叶酸组组比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味左金丸可预防萎缩性胃炎的发生。