HPLC法测定甲肿消及大鼠血清中土贝母苷甲的含量

目的建立甲肿消制剂及灌胃给予甲肿消后大鼠血清中土贝母苷甲的含量测定方法。方法采用RP-HPLC法,甲肿消制剂用甲醇萃取,血清样品采用C18SPE固相萃取柱(3mL,200mg,60μm)处理,甲醇洗脱;色谱柱:DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm)和Easyguard保护柱;流动相:甲醇-水(65∶35),检测波长:214nm,流速:1mL/min。结果甲肿消制剂及大鼠血清中土贝母苷甲的回收率分别为(103.49±3.49)%、(104.70±4.69)%,土贝母苷甲在1.18～88.5μg/mL浓度范围内线性良好。每1g制剂含土贝母苷甲995.3μg,灌胃给予甲肿消后大鼠血清中土贝母苷甲浓度为3.19μg/mL。结论本方法快速、简便、准确,可用于测定制剂及其血清中土贝母苷甲的含量。

化痰散结中药对甲状腺细胞增殖与凋亡影响的实验研究

目的:研究化痰散结中药甲肿消对甲状腺FRTL细胞增殖与凋亡的影响。方法:用水煮浸渍提取方法制备甲肿消提取液,甲状腺FRTL细胞株采用含6H的F12培养基培养。中药提取液作用培养细胞,以MTT法测定不同浓度甲肿消对FRTL细胞的增殖影响;采用Annexin V/PI双染法,应用流式细胞仪检测细胞凋亡;PI单染,流式DNA定量法检测细胞周期。结果:甲肿消作用24 h,细胞半数抑制浓度IC50=0.8 mg/ml(含生药浓度),最大抑制率浓度为4.0 mg/ml。甲肿消作用后G0/G1期细胞增多,S和G2/M期细胞减少,增值指数(PI)显著降低,细胞凋亡增加;同时发现甲肿消对细胞增殖与凋亡的影响与作用剂量、作用时间成正相关。结论:甲肿消通过阻滞细胞从G0/G1期向S期转换,从而抑制细胞增殖,同时可诱导FRTL细胞的凋亡,并与作用剂量和作用时间正相关。

甲肿消对甲状腺细胞凋亡及过氧化物酶活性的影响

目的研究甲肿消对甲状腺细胞凋亡及甲状腺过氧化物酶(TPO)活性的影响。方法用甲状腺FRTL细胞,按甲肿消剂量不同分为:0(对照组)、0.2、0.4、0.8、1.6 mg.mL-1组。甲状腺细胞培养24 h后,Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测细胞凋亡指数;改良愈创木酚法检测TPO活性。结果给药24 h后,荧光显微镜下可见凋亡小体及细胞核碎片。0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg.mL-1组细胞凋亡率(%)分别为:5.367±0.816、7.517±0.646、14.183±0.752、17.033±1.461、23.767±0.734,与药物呈剂量依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组TPO活性(单位:GU.mg-1蛋白×103)分别为:9.395±1.79、7.289±1.205、6.175±1.818、4.347±0.948、2.93±1.977,随着给药剂量的升高而降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲肿消可能通过诱导甲状腺细胞凋亡及抑制TPO酶活性来影响甲状腺功能。

中药甲肿消对格雷夫氏病患者白细胞介素含量的影响

目的 :观察中药甲肿消对格雷夫氏病 (Graves′disease ,GD)患者临床症状、白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 6 (IL 6 )水平的影响。方法 :治疗对象随机分为 3组 ,其中对照 1组 10例 ,单纯服用他巴唑(5～ 10mg ,每天 3次 ) ;对照 2组 2 2例 ,口服他巴唑 (用法同上 )及左旋甲状腺素片 10 0 μg ,每天 1次 ;治疗组2 8例 ,口服甲肿消 (5片 ,每天 3次 )及他巴唑。结果 :治疗组治疗GD病的总有效率为 75 % ,显著高于对照 1组和及对照 2组 (P <0 0 5 ) ;血清中IL 2含量升高而IL 6含量下降 ,与治疗前比较有明显差异 (P <0 0 5 )。其中治疗组患者血清中IL 2、IL 6与健康对照组水平无明显差异。而对照 1、对照 2组IL 2、IL 6水平与健康对照组比较差异仍有显著性 (P <0 0 5 )。且对照 2组、治疗组患者甲状腺B超体积治疗后与治疗前比较差异有显著性 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,而对照 1组治疗后与治疗前比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :中药甲肿消对GD甲状腺肿有明显疗效。