Gehua Jiejiu Dizhi decoction(葛花解酒涤脂汤)ameliorates alcoholic fatty liver in mice by regulating lipid and bile acid metabolism and with exertion of antioxidant stress based on 4DLabel-free quantitative proteomic study

OBJECTIVE:To analyze the effect and molecular mechanism of Gehua Jiejiu Dizhi decoction(葛花解酒涤脂汤,GJDD)on alcoholic fatty live disease(AFLD)by using proteomic methods.METHODS:The male C57BL/6J mouse were randomly divided into four groups:control group,model group,GJDD group and resveratrol group.After the AFLD model was successfully prepared by intragastric administration of alcohol once on the basis of the Lieber-DeCarli classical method,the GJDD group and resveratrol group were intragastrically administered with GJDD(4900 mg/kg)and resveratrol(400 mg/kg)respectively,once a day for 9 d.The fat deposition of liver tissue was observed and evaluated by oil red O(ORO)staining.4DLabel-free quantitative proteome method was used to determine and quantify the protein expression in liver tissue of each experimental group.The differentially expressed proteins were screened according to protein expression differential multiples,and then analyzed by Gene ontology classification and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway enrichment.Finally,expression validation of the differentially co-expressed proteins from control group,model group and GJDD group were verified by targeted proteomics quantification techniques.RESULTS:In semiquantitative analyses of ORO,all kinds of steatosis(ToS,MaS,and MiS)were evaluated higher in AFLD mice compared to those in GJDD or resveratroltreated mice.4DLabel-free proteomics analysis results showed that a total of 4513 proteins were identified,of which 3763 proteins were quantified and 946 differentially expressed proteins were screened.Compared with the control group,145 proteins were up-regulated and 148 proteins were down-regulated in the liver tissue of model group.In addition,compared with the model group,92 proteins were up-regulated and 135 proteins were downregulated in the liver tissue of the GJDD group.15 differentially co-expressed proteins were found between every two groups(model group vs control group,GJDD group vs model group and GJDD group vs control group),which were involved in many biological processes.Among them,11 differentially co-expressed key proteins(Aox3,H1-5,Fabp5,Ces3a,Nudt7,Serpinb1a,Fkbp11,Rpl22l1,Keg1,Acss2 and Slco1a1)were further identified by targeted proteomic quantitative technology and their expression patterns were consistent with the results of 4D label-free proteomic analysis.CONCLUSIONS:Our study provided proteomics-based evidence that GJDD alleviated AFLD by modulating liver protein expression,likely through the modulation of lipid metabolism,bile acid metabolism and with exertion of antioxidant stress.

解酒护肝胶囊对大鼠酒精性肝损伤保护作用研究

目的评价解酒护肝胶囊对酒精性肝损伤的防治作用以及增强酒精代谢功效研究。方法各实验组灌胃给予不同浓度受试样品后,建立酒精性肝损伤及急性酒精中毒模型。测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰氨基转移酶(GGT)、乙醇和乙醛含量;检测肝脏中三酰甘油(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;HE染色观察肝脏和胃组织的病理变化。结果与模型组比较,解酒护肝胶囊中剂量组能显著降低血清中ALT含量(P<0.05),中、高剂量组能显著降低AST和GGT含量(P<0.01),低、中、高剂量组均能显著降低肝脏组织中TG含量(P<0.01),高剂量组显著提高SOD水平(P<0.01)。肝脏组织病理切片显示,模型组大鼠肝细胞大小不均,肝索排列紊乱,有较多小泡性脂肪空泡,同时伴有炎症浸润、细胞坏死,各剂量给药组均可不同程度改善大鼠肝脏组织病变情况;与模型组比较,解酒护肝胶囊高剂量组在醉酒后8 h内乙醇和乙醛含量均显著下降(P<0.01)。解酒护肝胶囊低、高剂量组肝脏和胃组织的病变情况均有所缓解。结论解酒护肝胶囊可抑制氧化应激反应,降低脂质过氧化,加速酒精代谢,对肝组织和胃黏膜具有一定的保护作用。

双葛解酒方联合盐酸纳洛酮注射液治疗急性酒精中毒非昏迷期患者临床研究

目的:观察双葛解酒方联合盐酸纳洛酮注射液治疗急性酒精中毒(AAI)非昏迷期患者的临床疗效。方法:选取90例AAI非昏迷期患者为研究对象,按照简单随机法分为对照组和试验组各45例。对照组采用盐酸纳洛酮注射液治疗,试验组在对照组的基础上加用双葛解酒方口服。比较2组临床疗效及不良反应发生率,以及治疗前后呼气酒精浓度、中医证候评分、肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)]水平。结果:治疗后,试验组总有效率为91.11%,对照组为73.33%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组头目胀痛、恶心呕吐、狂躁易怒、胁腹胀满、面红目赤、黄疸、口苦口渴评分及总分均较治疗前降低(P<0.05),且试验组上述各项评分均低于对照组(P<0.05)。治疗4 h后,2组呼气酒精浓度均较治疗前及治疗1 h降低(P<0.05),并呈下降趋势(P<0.05),且试验组相同时间点呼气酒精浓度均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组ALT、AST、GGT水平均较治疗前降低(P<0.05),且试验组3项肝功能指标水平均低于对照组(P<0.05)。试验组不良反应发生率为17.77%,对照组为44.44%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:双葛解酒方能够改善AAI非昏迷期患者的临床症状,提高治疗效果,有效促进乙醇的代谢与排出,保护肝功能,且不良反应相对较少。

橄榄解酒饮对急性酒精性肝损伤大鼠细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的观察橄榄解酒饮对大鼠急性酒精性肝损伤的干预效果,探讨其对肝细胞凋亡进程的调节作用。方法采用白酒灌胃造模法,每天连续两次灌胃白酒,每次间隔1h,连续5d后取肝组织切片,检测凋亡细胞指数和Bcl-2蛋白,并与护肝胶囊对照。结果橄榄解酒饮可显著降低凋亡指数、增加Bcl-2蛋白阳性表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论橄榄解酒饮通过抑制肝细胞凋亡而减轻肝组织损伤。

橄榄解酒饮对大小鼠急性酒精性肝损伤的影响

为观察橄榄解酒饮 (主药 :橄榄、枳子 )对急性酒精性肝损伤的防治效果 ,采用白酒灌胃法造成大小鼠急性肝损伤的模型 ,0 5h后以橄榄解酒饮灌胃 ,记录醉酒率。第 3天检测血清ALT ,第 5天检测血清及肝匀浆ALT、AST ,并与护肝胶囊比较。结果 :橄榄解酒饮可显著降低大小鼠急性酒精性肝损伤模型醉酒率 ,提高醒 /醉比 ,显著降低血清ALT、AST及肝脏组织ALT水平 ,改善肝组织病理状态 ,促进肝细胞损伤恢复。提示橄榄解酒饮具有良好的防醉、解酒、护肝作用。

李氏解酒方解酒作用的实验研究

目的:研究李氏解酒方的解酒毒作用及其部分机制。方法:测定服用李氏解酒方前后小鼠翻正反射消失和恢复时间,全血乙醇浓度及小鼠肝、胃细胞匀浆中乙醇脱氢酶的活力变化。结果:李氏解酒方可缩短翻正反射恢复时间,降低醉酒小鼠全血乙醇含量,提高肝、胃组织乙醇脱氢酶活性。结论:李氏解酒方对预防和治疗醉酒有较好的作用,其机制与增强肝脏对乙醇的生物转化功能,降解乙醇有关。

高效液相色谱法测定解酒肝康颗粒中五味子醇甲的含量

目的:建立高效液相色谱法测定解酒肝康颗粒中五味子醇甲含量测定方法。方法:样品用甲醇超声提取30 min。分析采用Diamonsil C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸(42∶58)为流动相。流速1 mL.min-1,检测波长250 nm。结果:五味子醇甲平均回收率为97.89%(RSD=0.95%)。结论:该实验操作简便,结果准确,可作为解酒肝康颗粒的质量控制标准。

橄榄解酒饮对急性酒精性肝损伤大鼠、小鼠丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶的影响

目的:观察橄榄解酒饮对大鼠、小鼠急性酒精性肝损伤的防治效果,初步探讨其对血清及肝匀浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的影响。方法:采用白酒灌胃法造模,每天记录醉酒、醒酒时间,第3天检测血清ALT,第5天检测血清及肝匀浆ALT、AST,并与护肝胶囊对照。结果:橄榄解酒饮可显著降低大鼠、小鼠急性酒精性肝损伤模型醉酒率,提高醒/醉比;显著降低血清ALT、AST及肝匀浆ALT水平,与对照组比较差异有显著(P<0.05或P<0.01)。结论:橄榄解酒饮具有良好的防醉解酒护肝作用。

RP-HPLC法测定制剂中五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素的含量

目的:用高效液相色谱法同时测定解酒保肝颗粒中五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素含量。方法:采用Apollo-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)柱,以甲醇-水梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长254 nm。结果:五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素分别在40分钟内达基线分离,线性关系良好(r≥0.999 7)。加样回收率分别为97.79%、98.53%和98.17%。结论:该方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,可作为解酒保肝颗粒的质量控制标准。

解酒肝康颗粒薄层色谱指纹图谱研究

目的:运用薄层色谱法(TLC)建立解酒肝康颗粒的薄层鉴别指纹图谱。方法:采用薄层色谱法对解酒肝康颗粒中的主要药材人参、白芍、葛根、丹参等进行指纹图谱鉴别研究。结果:薄层色谱法鉴别色谱斑点清晰,分离度好,专属性强。结论:本研究方法能快速准确地进行解酒肝康颗粒组成药物的定性检测、鉴别。

解酒护肝饮对酒精性肝病大鼠肝功能损伤的保护作用

目的:观察解酒护肝饮对酒精性肝病大鼠肝脏指数及肝功能的影响,为临床酒精性肝病的预防提供实验依据。方法:将大鼠随机分为6组,正常组、模型组、解酒护肝饮低剂量组、解酒护肝饮高剂量组、葛花解酲汤组和益肝灵组。采用白酒灌胃造模,造模与给药同时进行。6周后测定肝脏指数及血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。结果:模型组肝脏指数较正常组明显降低,血清AST、ALT明显升高;解酒护肝饮低剂量组、解酒护肝饮高剂量组、葛花解酲汤组和益肝灵组的肝脏指数均较模型组明显提高,血清AST、ALT明显降低;各预防治疗组之间的比较提示,以高剂量解酒护肝饮作用最为显著。结论:解酒护肝饮能有效预防大鼠酒精性肝病。

解酒护肝方对不同体质大鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的:观察解酒护肝方对不同体质大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法:将大鼠随机分为正常组、阳虚模型组、阳虚预防给药组(温低组、温高组、寒低组、寒高组)、阴虚模型组、阴虚预防给药组(寒低组、寒高组、温低组、温高组)等11组,除正常组外,阳虚组采用30 mg/kg肌注氢化可的松,阴虚组采用甲状腺素水溶液25 mg/kg分别建立阳虚模型、阴虚模型,造模完成后针对体质预防给药,分高、低剂量组(按生药量计为4.15,0.83 g/kg),1小时后灌胃0.009 mL/g 56度红星二锅头,持续灌注5周后测定大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平。结果:与正常组比较,模型组与预防给药组的AST、ALT及AST/ALT比值均增高,提示有不同程度的肝损伤(P<0.05);违背体质用药的高剂量组血清AST、ALT增高明显(P<0.05);符合体质用药的高剂量组血清AST、ALT明显降低(P<0.05)。结论:针对体质的解酒护肝方能有效预防大鼠酒精性肝损伤。

解酒饮对急性胃黏膜损伤小鼠的保护作用

目的探讨解酒饮对急性胃黏膜损伤小鼠的保护作用。方法昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、硫糖铝组(600 mg·kg-1)和解酒饮小、中、大剂量(6.25,12.5,25.0 g·kg-1)组,每组10只。除正常对照组外,其余各组给予95%乙醇10 m L·kg-1灌胃造模,测定各组小鼠胃黏膜损伤指数和抑制率,测定胃黏膜中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)的含量。同时做组织病理学检查。结果模型对照组小鼠胃黏膜出现明显出血、糜烂和点片状溃疡。与模型对照组比较,解酒饮组急性胃黏膜损伤指数明显降低,中、大剂量组胃黏膜ET-1、TNF-α和IL-6含量降低(P<0.05或P<0.01)。解酒饮大剂量组胃黏膜NO水平升高(P<0.05)。解酒饮对胃黏膜PGE2含量无明显影响(P>0.05)。病理组织检查发现解酒饮可减少胃黏膜的脱落和炎症细胞浸润。结论解酒饮具有保护急性胃黏膜损伤小鼠的作用。

消脂解酒方治疗酒精性脂肪肝58例疗效观察

目的:观察消脂解酒方治疗酒精性脂肪肝的临床疗效。方法:将116例酒精性脂肪肝患者随机分为2组各58例。治疗组采用消脂解酒方(处方:枳犋子、葛根花、葛根、柴胡、青皮、蟾衣、荷叶、虎杖、山楂、何首乌、丹参、白芍、决明子、白茅根、茶树根)治疗,对照组采用西医常规护肝、降酶、调节血脂等治疗。疗程均为3月。主要观察临床疗效及不良反应。结果: 治疗组临床治愈38例,有效12例,无效8例,总有效率86．2％。对照组临床治愈15例,有效23例,无效20例,总有效率 65．5％。2组总有效率比较,差异有非常显著性意义(P<0．01)。2组治疗期间均未发现明显的不良反应。结论:消脂解酒方治疗酒精性脂肪肝有较好疗效,可明显改善症状和体征。

解酒养心合剂治疗早期酒精性心脏病的临床及实验研究

酒精性心脏病是由于乙醇过多摄入引起的心脏损害。酒体湿而性热，长期大量饮用易致人体湿热内蕴，痰瘀互结，日久伤及气血。据此拟定了具有解酒毒、清热利湿、化痰祛瘀之功效的解酒养心合剂。对饮酒组中１００例进行流行病学调查，与不饮酒组比较，二者在症状、心电图、血清谷草转氨酶（ＡＳＴ）上存在着显著性差异（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。说明酒的过多摄入是酒精性心脏病发病的重要因素。对饮酒组３０例症状或（及）心电图、ＡＳＴ明显异常者服解酒养心合剂。结果表明，治疗前后症状改善总有效率为９３．３％，并具有显著改善舌象、脉象、心电图室性早搏、ＳＴ段、Ｔ波异常及ＡＳＴ水平的作用。动物实验表明解酒养心合剂对乙醇所致乳鼠搏动心肌细胞的搏动率增快、搏动间歇的出现及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的释放均有显著保护作用。

解酒肝康颗粒对酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢影响的研究

目的:观察解酒肝康颗粒对酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢的影响。方法:用酒精性脂肪肝模型,观察不同剂量的解酒肝康颗粒对血脂代谢、肝内脂代谢、能量及氧化损伤程度的影响。结果:解酒肝康颗粒可使酒精性脂肪肝大鼠血甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL-C),丙二醛(MDA)水平显著降低,肝内组织内糖原(Gn),MDA含量显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高。结论:其药物高、中、低剂量之间在药效作用强度上存在一定的剂量依赖关系。

正交设计优选解酒肝康颗粒的提取工艺

目的对解酒肝康颗粒的提取工艺进行正交设计研究。方法以人参、丹参等醇提得膏率,山楂等水提得膏率,丹参酮ⅡA为指标,采用正交设计法对解酒肝康颗粒的提取工艺进行优选。结果人参、丹参等加10倍量70%乙醇,回流提取2次,每次2 h。山楂、人参、丹参残渣等加10倍量水,煎煮2次,每次2 h。结论优选的提取工艺设计合理,有效成分提取效率较高。

论六朝志怪小说“骗奸”主题故事及其渊源

六朝志怪小说中"骗奸"主题故事有其独特的情节特征,值得关注和研究。此主题故事在情节构建方面的渊源可以追溯到睡虎地秦简《日书·诘咎篇》中的"神狗"等巫术,也受到了宋玉《高唐赋》等人神遇合主题故事的影响。《诘咎篇》世俗化的内容及民间传播方式是"神狗"等巫术转化为"骗奸"主题小说的重要驱动力。

枳木具子解酒方护肝活性成分提取工艺优化及药效学研究

目的:建立枳椇子解酒方护肝活性成分最佳提取工艺,考察最佳提取工艺下该方低、中、高剂量的护肝药效。方法:以乙醇浓度、料液比、粉碎度、提取时间为考察因素,以二氢杨梅素、齐墩果酸、浸膏得率为指标,采用正交试验设计,确定枳椇子解酒方护肝活性成分最佳提取工艺。建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,考察最佳提取工艺下该方低、中、高剂量对血清ALT、AST、总胆固醇(CHO)活性及肝脏系数的影响。结果:枳椇子解酒方最佳提取工艺为10目药材,50%乙醇,浸泡1 h,提取次数为2次,料液比为1∶10、1∶8,提取时间2.5、2.0 h。与模型组比较,阳性对照组、解酒方低、中剂量组肝脏系数、血清AST含量均显著降低(P<0.05,P<0.01);各用药组血清CHO、ALT含量显著降低(P<0.01)。结论:确定了枳椇子解酒方的最佳药物配比,提取工艺合理、可行,枳椇子解酒方有良好的护肝疗效,为进一步的研究提供基础。

自拟解酒护肝汤对酒精性肝炎模型大鼠的保护作用

目的探讨自拟解酒护肝汤对酒精性肝炎模型大鼠的肝脏保护作用。方法将SD大鼠随机分为6组,每组10只。将大鼠按体重用56%酒精给予灌胃,7 mL/kg,1天1次,持续4周。从造模后第5周起,阳性对照组灌胃给予西乐葆0.05 mg/kg,解酒护肝汤治疗组分别给予灌胃低、中、高剂量(5.0 mg/kg,15.0 mg/kg,30.0 mg/kg),持续30天。末次给药后,经腹主动脉取血,以及取肝脏组织,称重固定。随后试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),ELISA和免疫组化法分别检测血清和肝脏肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α),HE染色观察肝脏组织形态。结果与模型对照组比较,解酒护肝汤各剂量组的ALT、AST显著减少(P<0.05),解酒护肝汤中、高剂量组的MDA、TNF-α显著减少(P<0.05)。解酒护肝汤高剂量组的肝脏脏器系数显著下降(P<0.05)。解酒护肝汤各剂量组肝脏TNF-α表达均有一定程度减少。结论自拟解酒护肝汤对酒精性肝炎模型大鼠肝脏有一定的保护作用。