基于GC-MS联用法的筋骨止痛凝胶挥发性化学成分研究

目的通过GC-MS法分析筋骨止痛凝胶中挥发性成分。方法利用水蒸气蒸馏法提取筋骨止痛凝胶挥发性成分,运用GC-MS联用技术进行成分分析,谱库检索结合药材色谱峰归属进行定性分析。结果从筋骨止痛凝胶挥发性成分中共鉴定出43个成分,通过对照品指认异龙脑、龙脑、薄荷脑,含量相对较高,另对各色谱峰进行药材归属,其中32个色谱峰已归属至药材,占已鉴定总峰个数的74.4%。结论 GC-MS法能够快速有效地分析筋骨止痛凝胶中的挥发性成分,为该药药效成分的研究和质量控制提供参考。

筋骨止痛凝胶中功效物质的体外透皮扩散行为研究

该文探究筋骨止痛凝胶中功效物质的体外透皮扩散规律。采用干加热全自动透皮扩散取样系统,对筋骨止痛凝胶透皮扩散研究方法进行单因素考察,并建立筋骨止痛凝胶透皮接收液中阿魏酸,洋川芎内酯Ⅰ,肉桂酸,羟基-ε-山椒素,羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素6种功效成分的HPLC含量测定方法,对16 h内成分的透皮扩散规律进行研究。试验结果显示,优选筋骨止痛凝胶透皮扩散研究方法为大鼠皮作为透皮屏障,生理盐水作为接收介质,给药剂量0.3 g,采用乙酸乙酯萃取对接收液样品进行处理测定。透皮扩散结果显示,阿魏酸、肉桂酸和洋川芎内酯Ⅰ透皮规律表现为0~8 h释放显著增加,8~16 h释放减缓,释放过程扩散和溶蚀协同进行,阿魏酸、肉桂酸透皮扩散规律遵循Higuchi和Ritger-Peppas方程,洋川芎内酯Ⅰ遵循Higuchi方程。羟基-ε-山椒素、羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素透皮扩散曲线显示16 h内持续释放,释放表现为骨架溶蚀,扩散规律遵循零级方程,一级方程和Ritger-Peppas方程。研究结果表明,筋骨止痛凝胶中功效物质阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、肉桂酸、羟基-ε-山椒素、羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素16 h内释放规律具有一定的缓控释作用,可维持平稳的血药浓度,12 h成分累积透过量能到达24 h的80%,符合其每日2次的临床用药规律。

基于NLRP3/IL-1β通路探讨筋骨止痛凝胶治疗膝骨性关节炎的作用机制

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)/白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)通路探讨筋骨止痛凝胶改善膝骨性关节炎大鼠膝关节炎症、疼痛的作用和机制。方法70只雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组,筋骨止痛凝胶高、中、低剂量(1.24、0.62、0.31 g/kg)组,扶他林(0.105 g/kg)组和青鹏膏(0.105 g/kg)组,每组10只。对照组大鼠左膝关节腔注射50μL无菌生理盐水,其余各组注射40 mg/mL单碘乙酸钠建立膝骨性关节炎大鼠模型,造模后1 d开始给药,持续14 d。测定各组大鼠机械痛阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWT)、热刺激缩足反射潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)及足负重;采用苏木素-伊红(HE)染色观察膝关节滑膜组织病理情况;采用ELISA检测血清中IL-1β、前列腺素E_(2)(prostaglandin E_(2),PGE_(2))及关节液中IL-1β水平;采用qRT-PCR检测滑膜组织中IL-1β、PGE_(2)和NLRP3 mRNA表达。结果与模型组比较,各给药组大鼠PWT、PWTL和足负重均显著升高(P<0.05、0.01);筋骨止痛凝胶低剂量组、扶他林组和青鹏膏组滑膜组织病理学评分显著降低(P<0.01);筋骨止痛凝胶高剂量组血清和关节液中IL-1β水平均明显降低(P<0.05、0.01),筋骨止痛凝胶低、中剂量组和青鹏膏组血清中PGE_(2)水平明显降低(P<0.05、0.01);筋骨止痛凝胶低剂量组和扶他林组滑膜组织中IL-1βmRNA表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),筋骨止痛凝胶低、中剂量组及扶他林组和青鹏膏组PGE_(2)和NLRP3 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05、0.01)。结论筋骨止痛凝胶可能通过调控IL-1β、PGE_(2)、NLRP3炎症因子的表达,抑制滑膜炎进展,从而发挥抗膝骨性关节炎的作用。