A Study on the Traditional Chinese Medicine Jinyebaidu for Prevention and Treatment of Intrauterine Infection with Guinea Pigs Cytomegalovirus

The purpose is to study the prophylactic and therapeutic effect of the traditional Chinese Medicine （TCM）-Jinyebaidu （JYBD） to guinea pig cytomegalovirus （GPCMV） intrauterine infection. The virus-free female and male guinea pigs were screened with nest-polymerase chain reaction （N-PCR）. After inbred, pregnant guinea pigs were selected and divided into 3 groups randomly： 5 guniea pigs of the blank control group were not given either GPCMV or JYBD. 31 guniea pigs of the positive control group were inoculated 1 mL （107 TCID50 ） suspension of GPCMV intraperitoneal. 10 gunlea pigs of the experimental group were inoculated GPCMV firstly and then perfused stomach with JYBD for 14 days （Dosage in accordance with the modulus of the weight ratio of human to guniea pig）. The effects of JYBD on the intrauterine infection of GPCMV were observed. The results showed that JYBD could decrease the maternal infection rate from 100 % （31/31） to 50 % （5/10） （P〈0. 001）, the intrauterine infection rate from 100% （72/72） to 75 % （21/28） （P〈 0. 001）, and the rate of abnormal outcome of pregnancy from 64.4 % （29/45） to 25.0 % （7/28） （P〈0. 001）, the infective symptoms being relieved. It can be concluded that traditional Chinese medicine- JYBD can prevent and treat GPCMV intrauterine infection, and can be expected a prophylactic drug for HCMV intrauterine infection.

金叶败毒颗粒治疗风温肺热病(热在肺卫证)的随机双盲临床试验

目的 观察金叶败毒颗粒治疗风温肺热病 (热在肺卫证 )的疗效 ,并对其安全性作出客观评价。方法 采用多中心双盲双模拟随机对照试验 ,选择风温肺热病 (热在肺卫证 )患者 2 0 0例 ,随机分为金叶败毒颗粒组 (治疗组 ) 10 0例 ,双黄连颗粒组 (对照组 ) 10 0例。治疗组给予金叶败毒颗粒每日 3次 ,每次 10 g ,对照组给予双黄连颗粒每日 3次 ,每次5 g ,疗程均为 5天。 结果 临床综合疗效 :意向性分析 (intention -to -treat,ITT)显示 :治疗组总显效率 72 6 4 % ,总有效率 94 0 0 % ;对照组总显效率 6 8 6 3% ,总有效率 90 2 0 %。符合方案数据分析 (per -protocolpopulation ,PP)疗效 :治疗组总显效率 75 0 0 % ,总有效率 96 0 0 % ;对照组总显效率 6 8 0 0 % ,总有效率 90 0 0 %。两组临床综合疗效比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。中医证候疗效 :ITT分析显示 :治疗组总显效率 71 70 % ,总有效率 93 4 5 % ;对照组总显效率6 6 6 7% ,总有效率 89 2 2 %。PP疗效 :治疗组总显效率 74 0 0 % ,总有效率 96 0 0 % ;对照组总显效率 6 8 0 0 % ,总有效率 90 0 0 %。两组中医证候疗效比较差异亦无显著性 (P >0 0 5 )。ITT疗效与PP疗效具有一致性。临床观察中 ,未发现明显不良反应。结论 金叶败毒颗粒临?

金叶败毒颗粒对HCMV感染及母婴垂直传播的临床疗效研究

采用 EL ISA法筛查育龄妇女 2 32 0例及孕妇 34 88例血清中人巨细胞病毒 (HCMV) Ig M、Ig G,并以 Ig M阳性者作为研究对象 ;采用 RT- PCR技术检测孕中期脐血、羊水、孕晚期脐血中晚期 HCMV- m RNA,检测胎儿先天性感染。采用金叶败毒颗粒、更昔洛苇治疗 HCMV感染并与对照组 (Ig M自然转阴组 )比较 Ig M转阴率及垂直传播率。结果表明 :对育龄妇女金叶败毒颗粒治疗组、更昔洛苇治疗组其 HCMV- Ig M转阴率分别为 81.32 %、 10 0 % ,明显高于对照组 (4 8.0 8% ) ,差异具有极显著意义 (P<0 .0 0 1) ;两治疗组之间差异无显著意义。对孕妇金叶败毒颗粒治疗组其HCMV- Ig M转阴率为 80 .91% ,明显高于对照组 (39.81% ) ,差异具有极显著意义 (P<0 .0 0 1) ;金叶败毒治疗组母婴传播率为 19.6 4% ,明显低于对照组 (4 7.37% ) ,差异具有显著意义 (P<0 .0 5 )。提示 :金叶败毒颗粒是治疗 HCMV感染安全、有效的药物 ,能降低胎儿先天性 HCMV感染率 ,对孕妇

金叶败毒颗粒对孕鼠免疫和生殖功能影响的研究

目的 :探讨中药金叶败毒颗粒 (金银花、鱼腥草、大青叶等 )对孕鼠免疫功能的作用 ,以及其对孕鼠和子代发育安全性的影响。方法 :设试验组、空白组和阳性组 3组 ,给试验组孕鼠孕期持续灌服高剂量的金叶败毒颗粒 ,观察各组仔鼠骨骼、器官和染色体发育情况 ;分别测定孕鼠分娩前外周血免疫细胞数、腹腔巨噬细胞数、脾淋巴细胞激活实验和NK细胞活性。结果 :三组孕鼠一般情况和仔鼠发育无明显差异 ;试验组孕鼠外周血免疫细胞、腹腔巨噬细胞数明显增多 ,脾淋巴细胞A值和NK细胞活性明显高于两对照组 (P <0 .0 5)。结论 :金叶败毒颗粒对孕鼠及子代无毒副作用 ,能显著提高孕鼠免疫功能 。

中药金叶败毒制剂抑制巨细胞病毒感染ERK／MAPK信号通路的研究

目的:通过对感染丝裂素活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase包括ERK1和ERK2)的信号通路的抑制作用,研究中药金叶败毒制剂治疗巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染的分子机制。方法:使用免疫印记技术检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(ganciclovir,GCV)干预HCMV感染的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung,HEL)的ERK表达水平,并观察MEK(mitogen-activated protein kinase kinase)特异性抑制剂PD 98059,中药金叶败毒制剂对细胞的病变作用(cytopathic effect,CPE)的影响。结果:两种药物都可抑制HCMV在HEL中的增殖,以PD 98059与中药金叶败毒制剂合用效果明显。中药金叶败毒制剂使磷酸化ERK1／2表达降低,对ERK1的抑制作用在感染后10min出现,30min达到高峰,对ERK2的抑制作用在感染后10min出现,60min达到高峰,而GCV对ERK1／2无明显的抑制作用。结论:中药金叶败毒制剂可通过调节MAPK／ERK通路而抑制HCMV基因的表达和复制从而发挥其部分抗病毒作用。

金叶败毒治疗孕早期豚鼠巨细胞病毒感染的研究

目的 :探讨清热解毒中药金叶败毒抗孕早期豚鼠巨细胞病毒 (guineapigcytomegalovirus ,GPCMV)感染的效果及孕期用药的安全性。方法 :①随机选择妊娠早期雌豚鼠 75只分成 3组 ,每组 2 5只。空白对照组 :不接种病毒。阳性对照组 :每只腹腔接种GPCMV悬液 1mL(10 7TCID50 )。治疗组 :按阳性对照组接种病毒 ,同时灌胃给予中药金叶败毒 (tid ,连用 14d)。 2 0d后处死豚鼠 ,采集血液及各脏器组织 ,检测感染情况。②随机选取受孕后第 1～ 18天 (小鼠器官发生期 )的雌鼠 90只 ,随机分成 3组 ,每组 3 0只。空白对照组不给药。阳性对照组给予致畸阳性对照药维生素A ,10 0mg·kg 1 ·d 1 ,每日分 3次灌胃给药。治疗组根据小鼠灌胃最大容积给予金叶败毒 ,将 0 .5g药溶于 3 7℃温开水 0 .5mL ,tid ,连用 18d。追踪母鼠一般情况及胎仔生长发育状况。结果 :①阳性对照组和治疗组的血液GPCMVDNA阳性率分别为 10 0 .0 % (2 5 2 5 )和 44 .0 % (11 2 5 ) ,差异有极显著性 (χ2 =3 .94,P <0 .0 1) ,阳性对照组出现被毛耸立等感染征象 96.0 %(2 4 2 5 ) ,死亡 4.0 % (1 2 5 ) ,治疗组无任何感染征象。②小鼠器官发生期给药不增加胎仔生长发育异常的风险。结论 :中药金叶败毒具有抗孕早期GPCMV感染的效果 ,孕期用药比较安全。

中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒感染的作用机制

目的探讨中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用机制。方法用HCMVAD169感染人胚肺成纤维细胞,采用MTT法观察细胞的增殖活性,应用半定量RTPCR方法检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预后感染细胞cyclinD1mRNA及细胞周期素依赖激酶4(CDK4)mRNA的表达水平。结果金叶败毒制剂和更昔洛韦能明显提高HCMV感染细胞cyclinD1及CDK4的表达,诱导G0/G1期细胞进入S和G2/M期,从而促进宿主细胞增殖。结论金叶败毒制剂可能通过促进HCMV感染细胞cyclinD1及CDK4的表达,促进宿主细胞增殖而发挥抗病毒作用。

核转录因子κB在中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒感染中的作用

目的研究核转录因子NF-κB在金叶败毒制剂(简称中药)抗人巨细胞病毒(HCMV)感染中的作用。方法分别应用原位杂交和半定量RT-PCR方法检测中药和更昔洛韦(GCV)干预HCMV感染的细胞NF-κBp65mRNA及HCMV晚期mRNA的表达水平,观察两种药物对HCMV感染致人胚胎成纤维细胞(HEL)病变(CPE)的影响。结果两种药物对HCMV晚期mRNA的表达和HCMV致细胞病变CPE均有抑制作用,但中药能显著抑制NF-κBp65mRNA的水平,而GCV对此影响不明显。结论中药可能通过抑制核转录因子NF-κB而拮抗HCMV感染,NF-κB信号通路激活可能为HCMV致病机制之一。

中药金叶败毒制剂对鼠巨细胞病毒感染后的细胞病变及热休克蛋白70的表达影响

目的体外研究中药金叶败毒制剂对小鼠巨细胞病毒感染后的细胞病变及热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,为研究金叶败毒(JYBD)抗小鼠巨细胞病毒(MCMV)分子机制打下基础。方法体外培养小鼠胚肺细胞,加入病毒吸附2h,弃病毒液,加入最大无毒浓度TD0金叶败毒,分别作用12、24、72、120h,收获细胞,设对照组;倒置显微镜下观察细胞形态学变化,免疫组织化学方法检测HSP70表达情况。结果细胞病变情况:与病毒对照组比较,金叶败毒组:12～72h细胞胞浆空泡变性程度均减轻,未观察到病变变圆细胞,120h观察到出现病变变圆细胞,部分正常细胞胞浆空泡变性程度减轻。与金叶败毒组比较,GCV组细胞胞浆空泡变性程度与之相当,但120h未观察到病变变圆细胞。金叶败毒组:12hHSP70表达增强,72h继续上升,120h达最高点。与正常细胞对照组比较,各时相HSP70表达强度差异均有统计学意义(P<0.05);与病毒组比较,12、24h2个时相HSP70表达强度差异均有统计学意义(P<0.05)。更昔洛韦组:与金叶败毒作用类似,可增强病毒感染细胞内HSP70表达。结论金叶败毒制剂可抑制MCMV细胞病变作用,还能增强病毒感染细胞HSP70表达,可能是其抗MCMV分子机制。

基于网络药理学的“金叶败毒颗粒”防治COVID-19作用机制探索

目的探寻金叶败毒颗粒治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的药理作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、中药分子机制的生物信息学分析工具(Bioin⁃formatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine,BATMAN-TCM)检索筛选金叶败毒颗粒中金银花、蒲公英、鱼腥草、大青叶的化学成分和作用靶点。查询OMIM(Online Mendelian Inheritance in Man)、GeneCards数据库获得疾病相关靶点基因,进而运用Cytoscape软件构建药物活性分子-靶点基因作用网络,通过R语言包clusterProfiler进行基因本体(gene ontology,GO)功能注释和基于京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,预测金叶败毒颗粒对COVID-19的作用机制。结果共筛选获得药物活性分子31个。靶点基因110个,主要包含PTGS2、AR、ESR1、PPARG、PRSS1、NOS2、NR3C2等核心靶点。富集分析得到GO条目2138项(P<0.05),KEGG信号通路134条(P<0.05),主要富集的通路有AGE-RAGE信号通路、动脉粥样硬化、TNF-α信号通路、甲型流感等。结论金叶败毒颗粒的活性化合物能作用于TNF信号等核心炎症通路,从而对COVID-19起到抗氧化损伤、抗炎作用。

中药改善孕期巨细胞病毒感染对子代生长发育影响的动物实验研究

目的 :探讨中药金叶败毒改善孕早期豚鼠感染GPCMV所导致的子代生长发育异常的效果。方法 :运用N PCRC ,筛选无感染史的孕早期豚鼠随机分为 3组 (每组 2 5只 ) :空白对照组无特殊处理 ,阳性对照组腹腔接种病毒 ,观察组接种病毒并给予中药金叶败毒 ,孕中期处死豚鼠 ,观察金叶败毒改善子代生长发育的效果。结果 :阳性对照组和观察组的妊娠豚鼠感染率分别为 10 0 % (2 5 /2 5 )和 4 4 % (11/2 5 )、胎盘感染率分别为 10 0 % (2 3/2 3)和6 6 6 7% (12 /18)、胎仔感染率分别为 95 .5 6 % (4 3/45 )和 4 7.5 4 % (2 9/6 1)、死胎率分别为 31.11% (14 /45 )和 13 11%(8/6 1) ,差异均具有统计学意义 (χ2 =39.4 4P =0 .0 0 1,χ2 =8.98P =0 .0 0 3,χ2 =2 7.4 0P =0 0 0 1,χ2 =5 .10P =0 .0 2 4 )。结论 :金叶败毒可显著降低孕期GPCMV感染所导致的死胎 ,其作用机制可能与减少胎盘感染有关。

巨细胞病毒感染与粘附分子-1基因转录水平的实验研究

目的 研究人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,HCMV)感染人胚肺成纤维细胞 (humanembryoniclung ,HEL)后粘附分子 - 1(ICAM - 1)在基因转录水平的表达 ,探讨HCMV感染的发病机制。方法 采用RT -PCR技术研究细胞ICAM - 1- 1在基因转录水平的表达。结果 感染巨细胞病毒后ICAM - 1的表达上调 ,而UV灭活的CMV不能诱导I CAM - 1的上调 ,中药金叶败毒制剂与更昔洛韦 (Ganciclovir,GCV)不能阻止病毒诱导的ICAM - 1的上调 ,MEK特异性抑制子PD980 5 9可加强ICAM - 1的上调作用。结论 细胞ICAM - 1- 1在转录水平的上调可能是感染病毒的直接作用 ,MEK特异性抑制子PD980 5 9加强ICAM - 1上调作用。

中药金叶败毒制剂对巨细胞病毒调控IL-6 mRNA表达的影响

目的 研究有感染性的人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,HCMV)和紫外线 (ultravioletlight,UV)灭活丧失感染性的病毒 (CMV UV)感染人胚肺成纤维细胞 (humanembryoniclungfibroblasts ,HLF)后白细胞介素 6(inter leukin 6,IL 6)mRNA的变化 ,并初步探讨中药金叶败毒制剂治疗HCMV感染的分子机制。方法 采用细胞培养与逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,研究IL 6在转录水平的表达。结果 UV灭活丧失感染性的HCMV与有感染性的HCMV均可上调IL 6mRNA的表达 ,中药金叶败毒制剂与更昔洛韦 (ganciclovir,GCV)都可抑制HCMV诱导的IL 6表达的上调。结论 IL 6mRNA的上调不需要有感染能力的HCMV ,中药金叶败毒制剂可抑制HCMV诱导的IL

金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染人胚肺细胞的影响

目的研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒(HCMV)蛋白激酶pul97的抑制作用及对HCMV感染人胚肺细胞病变的影响,探讨其治疗HCMV感染的分子机制。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预HCMV感染细胞后pul97mRNA表达水平,并观察两种药物干预后对HCMV感染细胞病变的影响。结果两种药物均可明显抑制HCMVpul97mRNA的表达水平,HCMV感染12h后,即出现细胞病变,而两种药物均可明显延缓感染细胞的细胞病变。结论金叶败毒制剂通过抑制HCMV蛋白激酶pul97基因的表达而抑制HCMV的表达和复制,从而延缓感染细胞的细胞病变。

基于ADME和“Lipinski规则”的金叶败毒颗粒辅助治疗新型冠状病毒肺炎的活性成分研究

利用中药网络药理学与分子对接初步探究金叶败毒颗粒的活性成分及其靶点与新型冠状病毒肺炎(COVID-19)之间的关联。开放数据库检索的金叶败毒颗粒成分,通过ADME和Lipinski规则筛选得到47个活性成分及其对应的128个靶点,并与GeneCards数据库获取的251个COVID-19相关基因进行交集,得到20个潜在靶点,20个潜在靶点用DAVID数据库分析得到256条基因功能信息和67条信号通路(FDR≤0.01)。用Cytoscape3.7.1软件分析及可视化,得到PTGS2、PTGS1、NOS3、PPARG和NOS2等核心靶点。5个核心靶点与47个活性成分通过AutoDock软件进行对接,并预测了山奈酚、甘草酚和靛玉红等药效物质基础,期待本结果能为进一步确证金叶败毒颗粒抗COVID-19有效成分和作用机制提供帮助。

金叶败毒颗粒治疗急性咽炎扁桃体炎50例疗效观察

[目的]探讨金叶败毒颗粒治疗急性咽炎、扁桃体炎的疗效。[方法]将95例急性咽炎、扁桃体炎患者随机分成两组,治疗组50例,对照组45例,分别观察金叶败毒颗粒与新雪颗粒的疗效并进行比较。[结果]使用金叶败毒颗粒急性咽炎、扁桃体炎患者总有效率为96%,新雪颗粒总有效率为82%;金叶败毒颗粒组对中医证候疗效总有效率为对为98.0%,新雪颗粒组对中医证候总有效率为84.4%;两组疗效比较,有显著性差异(P<0.05);治疗组对咽痛的起效时间亦显著短于对照组(P<0.05)。[结论]金叶败毒颗粒治疗急性咽炎、扁桃体炎疗效显著,有较好的临床应用价值。

金叶败毒颗粒联合克拉霉素治疗急性上呼吸道感染疗效观察

目的:比较金叶败毒颗粒与利巴韦林颗粒联合克拉霉素缓释片治疗急性上呼吸道感染的临床疗效及安全性。方法:将急性上呼吸道感染82例患者随机分为治疗组42例与对照组40例,均给予口服克拉霉素缓释片基础上,治疗组加用金叶败毒颗粒,对照组加用利巴韦林颗粒,疗程3～7d。结果:治疗组总有效率95.2%,对照组总有效率77.5%,两组差异有显著性(P<0.05),治疗组在治疗后平均退热天数及鼻塞流涕、咽喉疼痛、咳嗽等症状平均消失天数均较对照组显著缩短(P<0.05),两组无不良反应发生。结论:金叶败毒颗粒联合克拉霉素缓释片治疗急性上呼吸道感染疗效显著,安全可靠。

金叶败毒颗粒联合克拉霉素缓释片治疗急性上呼吸道感染疗效观察

目的：比较金叶败毒颗粒与利巴韦林颗粒联合克拉霉素缓释片治疗急性上呼吸道感染的临床疗效及安全性.方法：将急性上呼吸道感染82例患者随机分为治疗组42例与对照组40例,均给予克拉霉素缓释片口服,在此基础上,治疗组加用金叶败毒颗粒,对照组加用利巴韦林颗粒,疗程3-7天.结果：治疗组总有效率95.2%,对照组总有效率77.5%,两组差异有显著性（P＜0.05）,治疗组在治疗后平均退热天数及鼻塞流涕、咽喉疼痛、咳嗽等症状平均消失天数均较对照组显著缩短（P＜0.05）,两组无不良反应发生.结论：金叶败毒颗粒联合克拉霉素缓释片治疗急性上呼吸道感染疗效显著,安全可靠.

金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨中药金叶败毒制剂(简称中药)对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(HEL)增殖及凋亡的影响。方法:用HCMVAD169感染人胚肺成纤维细胞,分别用金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预后,采用MTT法检测HCMV感染及药物干预后HEL细胞的增殖活性,并采用流式细胞术检测HEL、HCMV感染及药物干预后细胞凋亡指数。结果:在HCMV感染48h内,细胞增殖及凋亡指数与细胞对照组无明显差异。HCMV感染72h后,细胞增殖明显受抑制,凋亡指数明显增高;而两种药物干预后,72h后明显促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论:金叶败毒制剂可能通过促进HCMV感染细胞的增殖,抑制感染细胞的凋亡而发挥抗病毒作用。

金叶败毒颗粒抑制人巨细胞病毒vMIA蛋白表达及作用的实验研究

目的:通过研究金叶败毒颗粒对人巨细胞病毒vMIA蛋白表达及作用的调节,探讨金叶败毒颗粒体外对HCMV感染的预防、阻断和治疗效应及其机制。方法:采用细胞形态观察测定病毒的感染性。应用免疫荧光检测vMIA蛋白在病毒感染过程中表达的规律,在病毒感染不同阶段(病毒吸附前、吸附时和吸附后)应用金叶败毒颗粒,观察药物对HCMV vMIA蛋白表达水平的影响。转染pcDNA UL37xl质粒,经G418筛选,Western blot鉴定vMIA的表达。应用流式细胞术检测药物对TNFα+CHX攻击后细胞凋亡指数的影响。结果:HCMV感染后4 h vMIA开始表达,在病毒感染48h表达最显著。金叶败毒颗粒可显著抑制HCMV vMIA蛋白的表达,其作用较更昔洛韦弱。金叶败毒颗粒可以恢复被vMIA抑制的TNFα诱导的凋亡,但更昔洛韦无此功效。结论:金叶败毒颗粒可显著抑制HCMV vMIA蛋白的表达及其作用,这可能是金叶败毒颗粒抗HCMV效应的主要作用机制之一。