HPLC测定九味羌活丸中黄芩苷、甘草酸和异甘草素含量

目的:建立九味羌活丸(羌活、防风、苍术、细辛、川芎、白芷等)中黄芩苷、甘草酸和异甘草素的含量测定方法。方法:色谱柱:Kromasil ODS1(200 mm×4.6 mm,5.0μm)。流动相:甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脱;流速:1 mL/min;检测波长:0～8 min为276 nm,8～15 min为370 nm,15 min以后为250 nm。结果:黄芩苷在0.155 0～3.100 0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1.000 0,平均回收率99.23%,RSD为0.52%。甘草酸在0.195 9～3.918 0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1.000 0,平均回收率98.81%,RSD为0.53%。异甘草素在0.012 4～0.248 0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1.000 0,平均回收率99.11%,RSD为0.72%。结论:所建立的方法简便可行、重现性好、可作为九味羌活丸的质量控制。

九味羌活袋泡剂与汤剂的比较实验研究

对九味羌活袋泡剂与其汤剂的水溶性浸出物、总挥发油、黄芩甙的定性、定量及两种剂型的镇痛作用作了比较研究。结果表明，袋泡剂优于汤剂，溶出速率表明。

九味羌活丸和香砂养胃丸制剂米粉掺伪检测方法的建立和质量标准的制定

目的:建立荧光探针PCR检测方法并拟定质量标准,旨在实现快速、准确地检出九味羌活丸(水丸)和香砂养胃丸(水丸)中的掺伪米粉。方法:通过优化样品提取方法,有效提取九味羌活丸和香砂养胃丸复方的基因组;通过文献检索和生物信息学分析,筛选得到适用于本试验的米粉特异性引物和TaqMan探针,并优化PCR检测方法。实验对方法的特异性、检出限、精密度和重复性进行考察,对市售样品进行筛查,并拟定了中成药荧光探针PCR检测方法的检测标准。结果:本实验优化了样品的前处理方法,通过文献检索和生物信息学分析检索到3组特异性引物和探针,并筛选得到了适合本研究的引物和探针。荧光探针PCR方法的检出限为每克样品可检出0.001 g米粉。九味羌活丸精密度的C_(t)值为30.34,相对标准偏差(RSD)为1.23%;重复性的C_(t)值为29.88,RSD为1.98%。香砂养胃丸精密度的C_(t)值为35.43,RSD为2.63%;重复性的C_(t)值为35.09,RSD为2.11%。对市售的7个厂家13批次样品进行分析,检出来自A厂家的5批次九味羌活丸和2批次香砂养胃丸掺入了米粉。利用克隆测序的方法,对PCR产物进行再确认,经NCBI数据库比对,结果均为水稻(Oryza sativa L.)。本研究拟定了九味羌活丸(水丸)和香砂养胃丸(水丸)荧光探针PCR检测方法标准。结论:建立了米粉的荧光探针PCR检测方法,并拟定质量标准,可快速准确地鉴别出米粉掺伪的九味羌活丸和香砂养胃丸样品,为中成药荧光探针PCR方法的标准制订提供参考。

九味羌活颗粒HPLC特征指纹图谱研究

目的:建立九味羌活颗粒的HPLC特征指纹图谱,为九味羌活颗粒的质量控制提供依据。方法:采用Sunfire C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,流速:1.0 ml·min^(-1),进行梯度洗脱;检测波长;270 nm,柱温:30℃。结果:建立了九味羌活颗粒HPLC指纹图谱的共有模式,标定15个共有峰,利用对照品指认4个峰,12批九味羌活颗粒样品HPLC图谱相似度均大于0.90。结论:所建立的HPLC指纹图谱分析方法简单、重现性良好,可为九味羌活颗粒的品种鉴别及质量评价提供依据。

九味羌活丸中白芷的测定

目的:建立九味羌活丸中白芷的检测方法。方法:采用薄层色谱法检测白芷特征斑点;高效液相色谱法同时测定白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量。结果:薄层鉴别斑点清晰,重现性好。高效液相色谱欧前胡素的线性范围是0.064～0.80μg(r=0.999 9),平均加样回收率为98.90%,RSD为1.52%(n=9);异欧前胡素的线性范围是0.081 6～1.02μg(r=0.999 7),平均加样回收率为98.65%,RSD为1.09%(n=9)。结论:该方法操作简便、结果准确、重现性好,可以弥补九味羌活丸质量标准的不足。

九味羌活汤治疗白癜风21例

观察九味羌活汤治疗泛发性白癜风的临床疗效, 21例患者采用内服九味羌活汤,外用加减羌活汤酊,以1个月为1个疗程,共治疗3个疗程。结果:显效12例,有效7例,无效2例,总有效率为90 .5%。

RP-HPLC法测定九味羌活丸中阿魏酸和欧前胡素的含量

目的:建立利用RP-HPLC测定九味羌活丸中阿魏酸和欧前胡素含量的方法。方法:采用C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,柱温为25℃,流动相为甲醇(A)-体积分数为2%的醋酸水溶液(B)梯度洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为321nm。结果:阿魏酸和欧前胡素分别在质量浓度为0.012~1.92μg、0.01~0.64μg内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9963~0.9959);平均加样回收率和RSD分别为98.28%、101.04%和2.87%、2.53%。结论:该方法可用于九味羌活丸的质量控制。

九味羌活颗粒挥发油β-环糊精包合工艺研究

目的：研究九味羌活颗粒中挥发油β-环糊精（13-CD）包合的最佳工艺。方法：采用饱和溶液法制备包合物，应用L9（3^4）正交试验设计优选最佳包合工艺条件，以包合物收得率和挥发油转化率为指标，以β-CD与挥发油的比例、包合温度、包合时间为考察因素。结果：最佳包合工艺条件为挥发油：β-CD为1ml：10g，40℃搅拌1h。结论：正交试验优选的包合工艺合理，包合率高，工艺稳定。

以九味羌活汤为例解析辨经论治法的用药规律

经络辨证是中医经典的辨证理论之一,是根据经络循行分布,确定病变具体位置和与之关联的脏腑,从而针对性采取相应的治疗方法的治疗理论。该文从辨经论治源流考、其理论的代表方剂九味羌活汤的组方规律以及辨经论治临床新用3方面,挖掘古方辨经论治理论的用药特点及组方规律,从而加强对古方及古法的认识,以期更好的采用及传播古法及古方指导现代临床应用。

RP-HPLC法同时测定九味羌活丸、片、颗粒中4种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活丸、片、颗粒(羌活、防风、苍术等)中羌活醇、阿魏酸、异欧前胡素、紫花前胡苷的含有量。方法 3种药物甲醇提取液的分析采用TechMate C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长317 nm。结果羌活醇、阿魏酸、异欧前胡素、紫花前胡苷分别在2.944 2~31.768 2μg/mL(r=0.999 8)、1.995 8~19.958 4μg/mL(r=0.999 8)、2.944 2~29.441 8μg/mL(r=0.999 7)、8.215 0~82.150 1μg/mL(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为94.9%、93.9%、91.2%、101.1%,RSD分别为0.9%、1.2%、1.4%、1.0%。结论该方法准确可靠,可用于九味羌活丸、片、颗粒的质量控制。

RP-HPLC法测定5种剂型的九味羌活制剂中紫花前胡苷、异欧前胡素

目的建立九味羌活（羌活、防风、苍术、黄芩、川芎、白芷、地黄、细辛和甘草）5种不同剂型（大蜜丸、小蜜丸、浓缩丸、水丸、颗粒剂）中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定方法。方法 HPLC分析采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;乙腈-0.5%冰乙酸水溶液为流动相,非线性梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长330 nm。结果采用的方法对5种剂型中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定均适用,其中紫花前胡苷在9.38～469.20 ng、异欧前胡素在12.56～167.48 ng范围内线性良好,相关系数均为0.999 9。结论本法分离效果好,专属性强,准确,可用于九味羌活系列制剂的质量控制。

九味羌活汤治疗鼻渊验案举隅

鼻渊首见于《内经》,以鼻流浊涕、量多不止为主要临床特征,可伴头痛、鼻塞、嗅觉减退等症状。现代社会随着环境的变化,生活习惯的改变,鼻渊的发病率日益增高,如治疗不及时,可能导致嗅觉减退、视力下降等并发症,给患者的日常生活带来诸多不便。在病因上,鼻渊由外感风寒湿邪,兼内有蕴热所致,以九味羌活汤加减治疗,疗效显著。

九味羌活制剂中挥发性成分的气相色谱-质谱分析

目的探讨九味羌活不同剂型各组方药材复方后挥发油的成分变化。方法用水蒸气蒸馏法提取九味羌活各制剂及其富含挥发油药材羌活、川芎、防风、苍术和细辛的挥发油,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)仪分析鉴定。结果九味羌活制剂挥发油的GC-MS、薄层色谱(TLC)化学信号主要来源于组方药材羌活、川芎、防风、苍术的贡献,但也发现单味药材中一些化学信号在复方的九味羌活制剂中未检测到。结论采用GC-MS联用法研究九味羌活制剂各组方药材复方后挥发性成分的变化,为揭示其效应物质基础和配伍机理奠定了基础。

浅析九味羌活汤治疗头痛理论渊源及验案举隅

九味羌活汤出自元代王好古的《此事难知》。方中药物配伍顾及到六经,对于不同经脉受邪引起的头痛均具有良好的作用。该文分析了九味羌活汤方药配伍的意义以及“分经论治”理论治疗头痛关键性作用,创新性阐释了九味羌活汤治疗头痛的理论渊源,并列举2则验案加以说明临床疗效。

HS-SPME-GC-MS和主成分分析法分析九味羌活不同剂型的挥发性成分

目的分析比较九味羌活丸剂、颗粒剂和口服液的挥发性成分。方法采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法(HS-SPME-GC-MS)对九味羌活3种剂型的挥发性成分进行分析和比较,用面积归一化法计算各成分的相对百分含量,并进行主成分分析(PCA)。结果从九味羌活丸中鉴定出90种挥发性成分,占总挥发性成分的97.19%;从颗粒剂中鉴定出27种成分,占总挥发性成分的92.92%;从口服液中鉴定出22种成分,占总挥发性成分的87.60%。3种剂型共鉴定出111种挥发性成分,其中共有成分有6种,但共有成分的含量有所差异,丸剂、颗粒剂和口服液含特有成分分别为68、8和13种。并且,3种剂型的PCA综合得分具有较大的差异,其中丸剂的综合得分最高,颗粒剂的综合得分其次,口服液的综合得分最低。结论九味羌活不同剂型的挥发性成分的组成和含量有所差异,并且从挥发性角度看,九味羌活丸剂的综合得分较颗粒剂和口服液高。

UPLC同时测定九味羌活颗粒中4种成分的含量

目的:针对九味羌活颗粒中4种成分的含量,建立超高效液相快速测定方法,有效评价九味羌活颗粒的质量。方法:采用UPLC-UV法,色谱柱为C18色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长310 nm。结果:紫花前胡苷在4.38~438 ng、阿米醇苷在0.91~91.29 ng、异欧前胡素在0.60~60.04 ng、羌活醇在1.30~130.20 ng的范围内线性关系良好(r=0.9999)。平均回收率分别为98.8%(紫花前胡苷)、97.0%(阿米醇苷)、95.6%(异欧前胡素)、102.8%(羌活醇)。结论:建立的含量测定方法专属性强、重复性好,操作简便,可以有效地评价不同样品之间的质量差异。

UPLC法测定九味羌活制剂中4种有效成分含量的研究

目的:采用UPLC法同时测定九味羌活6种剂型中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草酸和苍术素的含量,以提升现行质量标准,强化药品质量控制。方法:采用Waters Acquity UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱;以0.1%磷酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速为0.35 mL·min^(-1);柱温为40℃;可变波长测定。测定18家企业共128批样品,并对不同企业、不同剂型的样品测定结果进行统计分析。结果:升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草酸和苍术素分别在2.823~141.132、3.515~175.737、5.064~253.206和8.096~404.789μg·mL^(-1)范围内峰面积与浓度线性关系良好,r均为0.9999。回收率(n=6)分别为103.7%(RSD=1.3%)、98.3%(RSD=0.7%)、99.0%(RSD=2.1%)和102.5%(RSD=1.6%)。不同企业样品间测定结果差异显著,不同剂型样品间各待测组分差异较大,九味羌活系列制剂的化学信息完整性为水丸≥蜜丸>浓缩丸>片>颗粒。结论:本方法简便快捷、结果可靠,作为现行质量标准的有效补充可全面评价制剂质量,为客观比较不同企业产品的质量差异及评价不同剂型间的优劣提供量化依据。

UPLC-MS/MS测定九味羌活颗粒中7个马兜铃酸类成分

目的:采用超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定九味羌活颗粒中7个马兜铃酸类成分的含量。方法:采用Shim-pack Velox PFPP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以1 mmol·L^(–1)甲酸铵溶液(含0.05%甲酸,A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱。体积流量为0.4 mL·min^(–1),柱温为40℃,进样量为1μL,电喷雾离子源,多反应监测模式。结果:7个马兜铃酸类成分线性关系良好,r均≥0.997,加样回收率为86.5%~112.2%;检出限为0.05~0.31 ng·mL^(–1),定量限为0.18~1.04 ng·mL^(–1)。对3个企业8批样品进行测定,结果检出马兜铃酸Ⅳa、马兜铃内酰胺的质量分数分别为0~0.417、0.021~0.173μg·g^(–1)。结论:该方法重复性好、灵敏度高,可用于九味羌活颗粒中马兜铃酸类成分的测定。

基于特异性聚合酶链式反应方法鉴别九味羌活丸中水稻源性成分掺伪

目的通过DNA条形码技术和建立特异性聚合酶链式反应(PCR)方法,有效鉴别九味羌活丸中的水稻源性成分掺伪问题。方法通过建立特异性PCR技术对九味羌活丸中掺伪的水稻源性成分样品的GOS9序列进行扩增,并对PCR反应体系与程序、方法学和系统适用性进行考察,从而对掺伪水稻源性成分进行鉴别。结果该引物体系只针对水稻源性成分DNA进行扩增,与中成药中其他药味的DNA均无交叉扩增,最低能检测到1/1000掺伪的水稻源性成分DNA。将其应用于3厂家8批次样品中检测,以2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,掺伪水稻源性成分的批次在68 bp附近处有一清晰条带,而阴性样品无条带。结论通过特异性引物PCR扩增、电泳检测和克隆测序的方法,可以有效鉴别九味羌活丸中的水稻源性成分掺伪问题。该方法具有快速、特异、灵敏的优点,为水稻源性成分掺伪的分子生物学鉴定方法提供了参考。

RP-HPLC法同时测定九味羌活口服液中13种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活口服液（JQOL）中梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。方法采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；乙腈-5．0mmol／LKH2P04溶液（稀磷酸调节pH值至3．0）（15：85）为流动相，梯度洗脱，体积流量为1．0mL／min。结果梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷13种成分能够达到很好分离；其线性范围分别为2．08～31．22μg／mL（r=0．9995）、4．01～60．15μg／mL（，=0．9992）、10．09～151．31μg／mL（r=0．9992）、4．98-74．63μg／mL（r=0．9994）、2．05～30．74μg／mL（r=0．9996）、4．10～61．46μg／mL（r=0．9996）、2．93～43．98μg／mL（r=0．9993）、2．04～30．66μg／mL（r=0．9995）、12．54～181．55μg／mL（r=0.9997）、53.95-89.23μg／mL（r=0．9995）、12．05～180．68μg/mL（r=0．9995）、5．97～89．51μg／mL（r=0．9994）、7．99～119．82μg／mL（r=0．9996），平均加样回收率分别为98．8％、98．6％、101．2％、99．4％、100．1％、99．7％、98．9％、99．4％、100．5％、98．7％、101．2％、98.3％、99．1％，RSD分别为1．9％、1．8％、1．5％、0．8％、0．6％、0．9％、1．2％、2．0％、1．6％、0．8％、1．4％、1．5％、1．7％（n=6）。9批次JQOL供试品中梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-0-甲基维斯阿米醇苷质量浓度分别为0．229～0．259mg／L、1．231～1．260mg／L、0．849～0．877mg／L、0．357～0．371mg／L、0．149～0．169mg／L、0．941～0．967mg/L、0．529～0．547mg／L,0．269～0．294mg／L、1．039～1．067mg／L、0．043～0．064mg／L、3．631～3．649mg／L、0．157～0．183mg／L、0．068～0．084mg／L。结论该法分离度好，快速简便，重现性好，可用于JQOL的质量控制。