核桃JrsHSP17.3基因克隆及温度胁迫响应模式分析

通过分析核桃（Juglans regia）转录组,鉴定获得核桃热激蛋白家族sHSP17.3基因的全长cDNA序列,命名为JrsHSP17.3。JrsHSP17.3基因开放读码框474bp,编码产物含157个氨基酸,分子量为17.64kD,理论等电点为5.35。为了研究该基因表达的组织特异性及温度响应模式,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法,对高温和低温胁迫下JrsHSP17.3基因在根、茎、叶中的转录水平进行分析。结果显示,JrsHSP17.3基因在不同组织中均有表达;经高温（36℃~52℃）和低温（16℃~6℃）处理后,JrsHSP17.3基因均可被显著诱导,其中12℃胁迫1h表达最高,为对照（非处理情况）的142.02倍。研究表明核桃JrsHSP17.3基因能够响应冷热温度胁迫,为进一步研究JrsHSP17.3基因的抗寒耐高温特性奠定基础。

布鲁氏菌pcDNA3.1-omp17.3基因疫苗的研制

采用PCR方法扩增了布鲁氏菌17.3 ku外膜蛋白编码基因,并将该基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-omp17.3。pcDNA3.1-omp17.3转染COS-7细胞后,通过Western-blotting检测到了17.3 ku蛋白的瞬时表达。将pcDNA3.1-omp17.3免疫小鼠,三免后经ELISA、流式细胞仪以及ELISPOT技术检测到pcDNA3.1-omp17.3在小鼠体内诱导产生了以Th1型为主的细胞免疫应答。结果表明,构建的基因疫苗可作为潜在的布鲁氏菌新型疫苗,有进一步研究的意义。

人类神经元蛋白 P17.3 全长 cDNA 的克隆及表达特征分析

从人胎脑ｃＤＮＡ文库分离到一个长５９５ｂｐ的ｃＤＮＡ，它含一个编码１５３个氨基酸的完整开放阅读框，５ＵＴＲ长１８ｂｐ，３ＵＴＲ长１１８ｂｐ；在３ＵＴＲ中，含有非典型的加尾信号序列“ＡＡＴＴＡＡＡ”和长１５ｂｐ的ｐｏｌｙＡ序列。由阅读框推导的编码蛋白质的分子量为１７．３ＫＤ，等电点为４．８９。由于它与小鼠神经元蛋白ＮＰ１５．６呈高度同源，尤其是二者的推导氨基酸序列一致性高达８１．２％，故将这一新ｃＤＮＡ序列推导的蛋白命名为神经元蛋白Ｐ１７．３。用ＰＣＧＥＮＥ软件包的ＧＧＢＳＭ程序推导该蛋白质的二级结构，发现该蛋白中３２．６％的氨基酸参与组成α螺旋结构，１５．０％的氨基酸参与组成β折叠片；用位点检测分析软件的ＰＥＳＴＦＩＮＤ程序分析，发现它的第４８～６８位氨基酸残基区为快速衰变蛋白特征性的“ＰＥＳＴ”结构域。

信息生物学技术在人神经元蛋白17.3(NP17.3)结构和功能研究中的应用

本文利用信息生物学技术,对新近克隆的人神经元蛋白基因(np17.3)所编码的人神经元蛋白NP17.3的一、二级结构特点及其理化特性进行分析,同时就其空间三维构象进行了模拟,为研究其在活体内的功能提供了理论指导。

布鲁氏菌17.3kDa蛋白的表达及其免疫学评价(英文)

目的获得布鲁氏菌保护性抗原17.3kDa重组蛋白并以此构建亚单位疫苗。方法用PET32a(+)原核表达载体表达17.3kDa蛋白纯化后加氟氏佐剂肌肉注射免疫小鼠,三免后测定免疫功能进行免疫效果的评价。结果ELISA、WesternBlot检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生,蛋白苗所诱导产生的IgG1抗体远远高于IgG2a;通过细胞因子和CD分子测定表明重组蛋白以诱发ThⅡ型免疫为主。结论所表达的布鲁氏菌17.3kDa蛋白苗具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力,可作为潜在的布鲁氏菌新型疫苗或诊断抗原,有进一步研究的意义。

白及小分子热激蛋白BsHsp17.3基因的克隆与表达分析

为了探索人工栽培白及的适宜条件,该研究以湖北省十堰市野生白及为对象,采用同源克隆和3'RACE技术,从白及(Bletilla striata)中获得与热激蛋白合成有关的BsHsp17.3基因,并分析BsHsp17.3基因对不同胁迫的响应。结果表明:BsHsp17.3基因开放阅读框长度为453 bp,编码150个氨基酸;蛋白的分子量为17.42 kD,等电点为6.33。进化树分析表明BsHSP17.3蛋白与同为兰科的铁皮石斛进化关系较近,同在一分支上。半定量RT-PCR分析显示BsHsp17.3基因在白及根、叶、鳞茎及花组织中的表达具有特异性,且BsHsp17.3基因在叶中的表达量较高,在鳞茎及花中不表达。实时荧光定量PCR检测显示BsHsp17.3对非生物胁迫高温、低温具有明显应答反应,20%PEG模拟干旱胁迫不诱导该基因表达,推测该基因在白及防止倒苗过程中可能发挥一定作用。

MBEL-1025/17.3型汽包锅炉安全性能检验情况介绍

介绍了菏泽发电厂二期工程进口锅炉设备安全性能检验工作过程中发现的承压设备制造缺陷 ,分析了产生缺陷的原因 ,阐明了加强新建机组锅炉压力容器安全性能检验工作的重要性。

从文献计量学角度评析国内三氯乙烯职业病危害防治研究状况

目的了解国内三氯乙烯(TCE)职业病危害有关文献情况,评析其防治研究状况。方法以"中国知网"为主,检索在国内公开杂志上发表的有关TCE危害文献,用Excel 2003建立数据库,进行各项统计分析。结果①1960—2009年共检索到423篇文献,其中前40年文献量为19.4%,以综述、调查为主,后10年文献量为80.6%,以研究、临床为主并有硕、博士论文;②关键信息:高频关键词中以TCE为主(423篇、100%)、药疹样皮炎次之(96篇、22.7%),基金资助以国家级最多(71篇、16.8%)、广东省次之(36篇、8.5%),文献来源以《中国职业医学》杂志最多(79篇、18.7%)、《职业与健康》杂志次之(30篇、7.1%),文献作者中以李来玉最多(29篇)、庄志雄和朱启星次之(均为28篇);③文献产出单位情况:以广东省职业病防治院最多(73篇、17.3%)和被引用率最高(8.05次/篇);④高影响力文献(被引用≥30次)7篇,以"广东省三氯乙烯职业危害新问题研究进展"的文献平均年被引用次数最高(10.1次/年);⑤职业卫生标准中2006年分别新制订和修订了GBZ 185—2006《职业性三氯乙烯药疹样皮炎诊断标准》、GBZ 38—2006《职业性急性三氯乙烯中毒诊断标准》。结论 TCE引起的职业病危害防治研究已经形成了一套比较完善的体系。