蠲饮泄肺方对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者气道黏液高分泌的影响

目的探讨蠲饮泄肺方对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者(AECOPD)痰热壅肺证患者中医证候、痰液理化性质及黏蛋白5AC(MUC5AC)的影响。方法选取2019年1月—2020年1月期间在上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院呼吸科住院COPD急性加重期患者72例,将72例AECOPD痰热壅肺证患者随机分为蠲饮泄肺方组和对照组,对照组给予常规西医药物治疗,蠲饮泄肺方组在对照组的基础上加用蠲饮泄肺中药复方。观察两组患者的中医证候总积分和各单项证候积分,同时在入院第1天及第7天分别检测患者24 h痰量、痰液干/湿比重及MUC5AC含量。结果治疗后,两组患者中医证候总积分组内比较,差异有统计学意义(P<0.001),两种干预措施均能改善中医证候总积分;蠲饮泄肺方组在改善中医证候总积分方面优于对照组(P=0.001)。治疗后,除胸闷外,两组患者主症治疗前后组内经检验差异有统计学意义(P<0.05,P<0.001),且蠲饮泄肺方组在改善咳嗽、咳痰、喘息方面优于对照组(P<0.05)。但在改善胸闷方面两组无明显差异。另单独统计两组次症(除胸痛外)治疗前后组内比较提示差异有统计学意义(P<0.05),说明两组治疗前后在改善痰热壅肺证证候方面(除胸痛外)均具有疗效;但在改善发热、胸痛、口渴喜冷饮、大便秘结方面两组间比较差异无统计学意义(P>0.05),蠲饮泄肺方组未显示优势。治疗后,两组患者24 h痰量、痰液干/湿比重、痰液MUC5AC含量与治疗前比较明显改善(P<0.05,P<0.001),且蠲饮泄肺方组优于对照组(P<0.05,P<0.001)。Pearson相关性分析显示,痰中MUC5AC含量与痰液干/湿比重呈明显正相关(R=0.880,P<0.001)。结论蠲饮泄肺方在西医的基础治疗上能够较好地改善AECOPD痰热壅肺证患者的中医证候,其治疗机制可能是通过降低黏蛋白MUC5AC的表达,稀释痰液、减少痰量,缓解黏液高分泌对患者的影响,从而减轻临床症状。

蠲饮泄肺方通过SOCS1负调控JAK1/STAT1通路对气道黏液高分泌的作用

目的探讨蠲饮泄肺方对脂多糖(LPS)诱导的气道黏液高分泌的抑制作用及其机制。方法培养人支气管上皮16HBE细胞,分别用脂多糖作用6 h、0.005%浓度的蠲饮泄肺方相应处理细胞,并对细胞进行SOCS1-siRNA转染,荧光定量PCR技术(RTPCR)、Western blot法检测转染效果。根据不同的处理措施,分为空白对照组、试验1组(仅脂多糖刺激)、试验2组(脂多糖刺激+SOCS1-siRNA转染)、试验3组(脂多糖刺激+蠲饮泄肺方)、试验4组(脂多糖刺激+SOCS1-siRNA转染+蠲饮泄肺方)。Western blot法分别检测各组细胞裂解液中SOCS1、MUC5AC、磷酸化JAK1和STAT1表达量,同时检测JAK1、STAT1总蛋白,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)蛋白表达量为内参。结果 RT-PCR、Western blot法检测SOCS1-siRNA转染效果明确。与空白对照组比较,试验1组细胞内SOCS1表达被抑制,MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平增高(P<0.001);试验2组细胞内SOCS1表达被抑制及MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平增高更明显(P<0.001);试验3组相比试验1组,细胞内SOCS1表达增高,MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平下降(P<0.001);试验4组相比试验2组,细胞内SOCS1表达增高,MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平下降(P<0.001)。使用蠲饮泄肺方后能改善脂多糖和SOCS1-siRNA对细胞内SOCS1表达的抑制,降低JAK1和STAT1磷酸化水平及MUC5AC的表达。结论蠲饮泄肺方能抑制脂多糖诱导的MUC5AC高表达,从而抑制气道黏液高分泌,与SOCS1抑制JAK1/STAT1信号通路、产生负反馈调节、降低磷酸化水平有关。

蠲饮泄肺方联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期随机对照双盲研究

目的比较蠲饮泄肺方和清热化痰方分别联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)痰热壅肺证的临床疗效。方法 60例AECOPD患者随机分为治疗组31例和对照组29例,所有患者均给予常规西药治疗的基础上,治疗组和对照组分别加服蠲饮泄肺方和清热化痰方,每日1剂,共7天。治疗前后对患者中医证候积分、呼吸困难评分(MMRC)、辅助呼吸肌动用评分进行评估,记录两组住院天数,并检测两组治疗前后血清C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。结果治疗组临床疗效总有效率为96.43%,对照组总有效率为96.29%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,治疗组治疗后喘息中医症状评分显著降低、MMRC评分显著改善(P<0.05);治疗组住院天数明显缩短(P<0.05)。治疗组与对照组中医证候总积分、辅助呼吸肌动用评分及血CRP、PCT水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论与清热化痰方相比,蠲饮泄肺方能够取得相同的临床疗效,并且蠲饮泄肺方联合西药能更好地缓解AECOPD患者喘息症状、改善呼吸困难,缩短住院天数,有助于细菌感染控制。

蠲饮泄肺方对脂多糖诱导的气道黏液高分泌MUC5AC表达的影响

目的研究蠲饮泄肺方对脂多糖（LPS）诱导的气道黏蛋白MUC5AC表达的调控并探讨可能的机制。方法体外培养人支气管上皮细胞16HBE，根据LPS刺激时长将细胞分为0h、0．5h、1h、6h、12h及24h组，确定后续实验作用时长。用CCK8法检测不同浓度蠲饮泄肺方对16HBE细胞和LPS刺激后细胞增殖的能力，选择最适药物浓度。实验分为空白对照组、LPS刺激组及蠲饮泄肺方组，采用Western blot方法检测MUCSAC、细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）蛋白的表达。结果LPS诱导MuC5AC蛋白高表达，0h、0．5h、1h、6h、12h及24h组的MUC5AC的相对表达量呈增多趋势，而SOCS1蛋白则呈反向表达，6h组MUC5AC和SOCS1蛋白水平均处于中间值，故后续实验LPS的最佳作用时间选择6h。根据CCK-8的实验结果可知当培养基中蠲饮泄肺方溶液的浓度高时对16HBE有抑制生长的作用，当浓度为0．005％时蠲饮泄肺方溶液对LPS刺激后的细胞治疗效果最好，后续实验药物作用浓度选择0．005％，作用时间48h。LPS作用16HBE细胞后MUC5AC相对表达量为0．2513±0．0043，能刺激MUC5AC表达，SOCSl相对表达量为0．4279±0．0040，抑制SOCS1表达。蠲饮泄肺方作用后MUC5AC相对表达量为0．1318±0．0029，降低0．1448±0．0047，抑制LPS作用后MUC5AC的表达（P〈0．01）；SOCS1相对表达量为0．5727±0．0086，增加0．1194±0．0023，促进LPS作用后SOCS1的表达（P〈0．01）。结论蠲饮泄肺方能抑制LPS诱导的气道黏蛋白MUCSAC表达，作用机制可能与SOCS1有关。