胡桃楸树皮提取物对SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞的抑制作用及其机制

目的:观察胡桃楸树皮提取物(JMME)对SMMC-7721、MCF-7和A549 3种肿瘤细胞的生长抑制作用,确定其抑瘤的药用价值,通过检测JMME诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性变化阐述其抑瘤机制。方法:分别以25、50、100、200、400和800 mg.L-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞72 h,采用MTT法检测生长抑制率;以200 mg.L-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549,于倒置显微镜下观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性。结果:不同浓度JMME(25、50、100、200、400和800 mg.L-1)对SMMC-7721的细胞生长抑制率(%)分别为13.06、21.77、29.88、41.74、69.82和78.08;对MCF-7的抑制率(%)为24.91、38.63、49.72、61.84、65.69和81.28;对A549的抑制率(%)为12.32、26.21、41.65、55.38、62.87和80.13;与对照组比较,JMME各浓度作用的3种肿瘤细胞的生长抑制率均升高(P<0.05),抑制率随JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的浓度的增加而增高(P<0.05)。JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为211.21、111.07和176.20 mg.L-1,对MCF-7的IC50小于其他两种瘤细胞株。经不同浓度JMME作用单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象,对照组无此变化。提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳,见DNA Ladder,表明3种肿瘤细胞经不同浓度JMME作用后出现不同程度凋亡。3种肿瘤细胞与阴性对照组比较端粒酶活性升高,而经过JMME作用后端粒酶活性均受到了抑制,抑制率分别为42.86%、73.30%和58.78%。结论:胡桃楸树皮提取物在体外有抗肿瘤活性,其机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡?抑制端粒酶活性有关。

减压蒸馏法提取核桃楸树皮中的胡桃醌

胡桃醌(5-羟基-1,4-萘醌)是从核桃楸中提取分离出来的一种萘醌类活性物质。研究采用超声波辅助浸提和减压蒸馏等方法,从核桃楸树皮中提取制得胡桃醌产品,产品得率0.09%。分别用FT-IR表征了产品的有机官能团、用GC-MS分析了产品的化学组成和产品中胡桃醌的相对含量(GC含量达96.42%)、通过1HNMR确认了产品的胡桃醌结构。本研究提供了一种从核桃楸树皮中简便快捷地提取制得高纯度的胡桃醌产品的方法。

胡桃楸提取物对S_(180)肉瘤的抑制作用及机制

目的:研究胡桃楸提取物(JMME)对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其免疫调节作用。方法:对3组荷瘤鼠(每组10只)用0.023、0.045和0.090 g.kg-1.d-1JMME灌胃给药,同时设阴性对照组和阳性对照组,检测JMME对小鼠体内移植性肿瘤S180肉瘤的抑瘤率;以细胞培养观察JMME对S180细胞生长的抑制作用;MTT法观察JMME对肿瘤坏死因子(TNF)活性和白细胞介素2(IL-2)诱生水平的影响。结果:JMME具有明显的抑制肿瘤的作用,不同浓度的抑瘤率分别为32%、43%和56%,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05);对体外培养的肿瘤细胞增殖抑制率可高达60.10%,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);TNF活性及IL-2诱生水平较对照组明显增高(P<0.05);。结论:JMME具有显著抑制肿瘤的作用,其抑瘤作用机制是抑制肿瘤细胞的增殖并调节机体的免疫功能。

核桃楸树皮乙酸乙酯提取物对原位移植荷胃癌小鼠的抑瘤作用

目的:研究核桃楸树皮乙酸乙酯提取物(HYT)对原位移植荷胃癌小鼠的抑瘤作用及其对免疫功能的影响,阐明HYT抗胃癌作用机理,为研发低毒高效的抗胃癌中草药提供理论依据。方法:建立HYT灌胃的原位移植荷胃癌小鼠研究模型,分为HYF高剂量组(60mg·kg-1)、HYF低剂量组(40mg·kg-1)、假手术组、阳性对照组(5-FU)及阴性对照组,观察每组小鼠抑瘤率及胸腺、脾脏指数,采用ELISA法及流式细胞术等检测荷胃癌小鼠IL-4、IL-12、TNF-α水平及T淋巴细胞亚群情况。结果:HYT高剂量组抑瘤率与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组比较,HYT高剂量组小鼠胸腺指数及脾脏指数明显增加(P<0.05),IL-12水平升高(P<0.05),IL-4水平降低(P<0.05),TNF-α水平升高(P<0.05),T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值升高(P<0.05)。结论:HYT可以增强机体免疫功能,具有明确的抑瘤作用,可以作为抗胃癌低毒高效的中草药。

核桃楸叶乙醇提取物的抑菌活性及活性成分分析

采用常规提取法浸提核桃楸叶的抑菌活性成分。研究结果表明,核桃楸叶乙醇提取物及其乙酸乙酯萃取相对杨树叶枯病菌和樟子松枯梢病菌有抑菌活性,核桃楸叶乙醇提取物及其乙酸乙酯萃取相对杨树叶枯病菌的最低抑菌质量浓度(MIC)为3.12 g/L,对樟子松枯梢病菌的MIC为6.25 g/L。采用GC-MS分析了核桃楸叶乙醇提取物中乙酸乙酯萃取相经柱层析后集分I和集分II的化学组成和相对含量。分析结果表明,乙酸乙酯萃取相中主要活性成分为相对含量较高的5-羟基-1,4-萘醌(胡桃醌)、D-阿洛糖、5,8-二羟基-1,4-萘醌、1,5-萘二酚、2,3-二氢苯并呋喃、7-甲氧基-1-四氢萘酮、1-萘酚、8-羟基-2-甲氧基-1,4-萘醌和4-甲基-2,6-二羟基喹啉等。

核桃楸总黄酮的提取工艺

采用正交试验法研究核桃楸树叶、树皮和外果皮总黄酮的提取工艺,考察浸提液浓度、浸提温度、浸提时间、液料比、浸提次数等5个因素对核桃楸总黄酮提取量的影响。研究结果表明,核桃楸树叶总黄酮最佳提取工艺条件为:浸提液浓度60%乙醇,浸提温度60℃,浸提时间1h,浸提液体积与样品质量比15∶1,浸提次数4次。核桃楸树皮和核桃楸外果皮总黄酮最佳提取工艺条件为:浸提液浓度60%乙醇,浸提温度70℃,浸提时间1h,浸提液体积与样品质量比15∶1,浸提次数4次。

核桃楸树皮乙醇提取物的成分分析

采用常规提取法浸提核桃楸树皮的活性成分,采用GC-MS联用技术对核桃楸树皮乙醇提取物中氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物的化学组成和各成分进行分析。结果表明,核桃楸树皮乙醇提取物中氯仿萃取物的主要活性成分分别为:5-羟基-1,4-萘醌(胡桃醌,质量分数36.65%),4-羟基-2-甲氧基肉桂醛,2,3-二氢苯并呋喃,香草醛,2-甲氧基-4-乙烯基苯酚。核桃楸树皮乙醇提取物中乙酸乙酯萃取物的主要活性成分分别为:1,2,3-苯三醇(质量分数42.31%),5-羟基-1,4-萘醌(胡桃醌,质量分数12.33%),7-甲氧基-1-四氢萘酮(质量分数11.26%),5-羟甲基-2-呋喃醛,3,4-二氢-6,7-二羟基-1(2H)-萘酮,4-羟基-2-甲氧基肉桂醛,D-阿洛糖。

碱溶性东北山核桃蛋白的提取及SDS-PAGE分析

以经超临界CO2去除油脂后的东北山核桃仁渣为原料,利用碱提法对山核桃渣进行蛋白质提取,考察NaOH溶液浓度、料液比、提取温度、提取时间4个因素对蛋白提取率的影响,并在单因素试验的基础上设计正交试验,确定碱溶性山核桃仁蛋白最佳提取条件和其等电点。同时对碱溶性山核桃蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳分析。结果表明:当提取液NaOH浓度0.02mol/L、料液比1:30(g/mL)、提取温度50℃、提取时间1.5h时,碱溶性山核桃蛋白提取率最大可达88.05%,其等电点为4.5。SDS-PAGE分析结果表明,碱溶性山核桃蛋白分子质量主要分布在100、60、36kD和20kD四个区域。

核桃楸皮乙醇提取液对人肝癌细胞抑制作用的研究

探讨核桃楸皮乙醇提取液对人肝癌肿瘤细胞SMMC-7721的抑制作用。应用噻唑蓝比色法,以5-氟尿嘧啶组为阳性对照组,在490nm检测不同剂量的核桃楸皮乙醇提取物水溶液的OD值,考察核桃楸皮乙醇提取物水溶液对肝癌细胞SMMC-7721的24h和48h抑制作用。乙醇提取液IC50=0.0530mg/mL;5-FuIC50=0.0190mg/mL。

胡桃楸提取物抗弓形虫作用的体外实验和超微研究

目的了解胡桃楸提取物(JMME)在体外杀灭弓形虫速殖子的作用效果及其机制。方法收集感染弓形虫小鼠腹水并稀释至含虫1×107个/ml,加入胡桃楸提取物使其终浓度为60μg/ml、30μg/ml、15μg/ml、7.5μg/ml、3.25μg/ml、1.625μg/ml;乙酰螺旋霉素为阳性对照组,终浓度25μg/ml,同时设培养液阴性对照组。用MTT法测定胡桃楸提取物及其含药血清对虫体增殖情况的影响。应用透射电镜观察药物作用24h虫体超微结构的变化并拍照。结果胡桃楸提取物可明显抑制弓形虫增殖,且具有剂量依赖性,浓度大于30μg/ml的抑虫效果优于乙酰螺旋霉素组(P<0.05)。胡桃楸提取物含药血清对弓形虫具有明显的增殖抑制作用,且随含药血清浓度的增加作用效果增强,JMME浓度为0.278g/(kg.d)的含药血清抑虫效果优于SM组(P<0.05)。透射电镜下可观察到虫体电子密度增高、大量空泡形成、细胞器被破坏、细胞膜破裂、内容物溢出。结论胡桃楸提取物对弓形虫具有明显的增殖抑制和破坏作用。

胡桃楸水提物的遗传毒性及抗诱变作用研究

目的:探讨胡桃楸水提物(juglans mandshurica maxim extract,JMME)的抗诱变作用,及评价胡桃楸是否具有遗传毒性。方法:取80只昆明小鼠,随机分成不同JMME剂量的诱变组(6.55、13.09、26.18g/kg,分别为1/8、1/4、1/2 LD_(50)),不同剂量的JMME与环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)(0.04g/kg)联合应用的抗诱变组,阴性对照组(NS)和阳性对照组(CP,0.04g/kg),共8组,每组10只。采用小鼠骨髓细胞微核试验(MNT)检测JMME是否具有遗传毒性及抗诱变作用。结果:阳性对照组微核发生率(28.82‰)明显高于阴性对照组(2.65‰),其差异具有统计学意义(P<0.01),而JMME各剂量组与阴性对照组间的差异无统计学意义(P>0.05)。抗诱变各组的微核发生率与阳性对照组比较,除JMME低剂量组(6.55g/kg)无统计学意义外(P>0.05),JMME中剂量组(13.09g/kg)和高剂量组(26.18g/kg)均显著低于阳性对照组(P<0.05),其中高剂量组明显低于中剂量组(P<0.05)。结论:在本实验条件下,JMME无遗传毒性,JMME对CP诱发的微核率,具有一定抵抗作用,且呈量-效关系。

核桃楸皮粗多糖的急性毒性实验研究

目的观察核桃楸皮粗多糖对小鼠的急性毒性。方法将5.4 mg/mL的核桃楸皮粗多糖溶液,分别按照40 mL/kg每天3次灌胃,20 mL/kg每天2次腹腔注射,给药1 d后,连续观察7 d。结果实验期间,小鼠的活动与饮食情况未见异常,未出现死亡。尸检各脏器无异常。小鼠的核桃楸皮粗多糖每天最大给药量:腹腔注射2.16 mg/10 g,灌胃6.48 mg/10 g。结论通过两种给药方法证明,核桃楸皮粗多糖对小鼠的毒性作用较低。

四种植物提取液抑菌作用的分析

选择三种野生有毒植物白屈菜、胡桃楸和细叶杜香及常见植物蒲公英,研究了它们对三种黄单胞菌属植物病原细菌的抑菌作用.提取四种植物有效成分的提取液,采用96孔板法测定四种植物的最低抑菌浓度(MIC),并用带药平板法检验.试验结果表明,白屈菜、胡桃楸和蒲公英对三种植物病原细菌都有不同程度的抑菌活性.白屈菜(茎叶)和蒲公英抑菌活性较强,对三种植物病原细菌的最低抑菌浓度分别为0.1g/ml、0.1g/ml、0.05g/ml,白屈菜(根)和胡桃楸抑菌活性稍差,细叶杜香提取液未检测到抑菌能力.

山核桃楸乙醇浸出液对大鼠血清抗氧化指标影响的实验研究

目的研究山核桃楸幼果乙醇浸出液对大鼠血清抗氧化指标的影响.方法健康成年大鼠48只,雌雄各半,随机分为4组,分别为对照组、低剂量组(5 mg/mL)、中剂量组(10 mg/mL)、高剂量组(20 mg/mL),连续灌胃28 d后股动脉取血,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)含量.结果与对照组比较,中剂量组(10 mg/mL)大鼠血清SOD活力显著升高(P<0.05);中剂量组(10 mg/mL)、高剂量组(20 mg/mL)大鼠血清CAT活力明显高于对照组(P<0.05);各剂量组大鼠血清GSH-Px活力均明显高于对照组(P<0.05);各剂量组大鼠血清MDA含量均显著低于对照组(P<0.05).结论山核桃楸乙醇浸出液具有明显的抗氧化性,对健康成年大鼠产生抗氧化作用的有效剂量是10 mg/mL.

核桃楸皮提取物在乙型肝炎后肝癌治疗中的展望

通过研究核桃楸皮提取物的药理作用,本文将说明核桃楸皮提取物具有抗感染、抗肿瘤、抗病毒、抗高血压、抗血管生成、镇痛、降血糖、增强机体免疫功能的理论基础,并展望核桃楸皮提取物在乙型肝炎后肝癌治疗中的应用前景。

核桃楸枝条浸提液对百日草种子发芽与幼苗生长的影响

通过不同树龄、枝龄及不同组织的核桃楸枝条浸提液对百日草种子发芽影响的研究,结果表明:核桃楸枝条内含有抑制百日草种子发芽的物质,抑制效果随树龄和枝龄的增加而显著增加,韧皮部显著大于木质部。经浸提液处理的百日草种子发芽期间的α-淀粉酶活性显著低于对照。

核桃楸外果皮三萜类物质的提取及抑菌活性

为探讨核桃楸外果皮三萜类物质提取方法的响应面优化,研究其抑菌活性,本文采用超声辅助的乙醇溶剂提取法提取核桃楸外果皮三萜类物质,并利用响应面法优化其提取工艺。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合法设计多因素试验,分析乙醇体积分数、超声时间和液料比对三萜类物质提取率的影响,确定最佳提取条件。此外,进一步研究三萜类物质对黄孢原毛平革菌(白腐真菌)和绿色木霉菌的抑菌活性。结果表明:核桃楸外果皮三萜类物质的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数为80%、超声时间为44 min、液料比为19∶1(mL/g),此时核桃楸外果皮三萜类物质的提取率为2.62 mg/g。抑菌实验表明,核桃楸外果皮三萜类物质对黄孢原毛平革菌(白腐真菌)和绿色木霉菌均具有抑菌效果,最大抑菌圈直径分别达到18.43 mm和18.92 mm。本研究表明核桃楸外果皮三萜类提取物具有良好的抑菌活性,为核桃楸外果皮的开发和研究提供参考。

核桃楸皮提取物对胃癌细胞增殖的影响

目的观察核桃楸皮乙酸乙酯提取物(HYT)对小鼠前胃癌细胞MFC及人正常胃黏膜上皮细胞GES-1增殖的影响。方法从核桃楸皮中提取HYT,以不同浓度作用于MFC和GES-1细胞,MTT法检测HYT对MFC及GES-1细胞增殖的影响;流式细胞术检测MFC细胞周期变化及细胞凋亡情况。结果与阴性对照组比较,HYT可明显抑制MFC细胞增殖,促进细胞凋亡,对GES-1细胞无明显杀伤作用;HYT使MFC细胞阻滞于G0-G1和G2-M期。结论HYT可通过影响胃癌细胞周期,促进细胞凋亡,抑制其增殖。

核桃楸树皮提取物的抗肿瘤作用

目的:研究核桃楸树皮提取物的抗肿瘤作用。方法:以超声波辅助及减压蒸馏法浸提核桃楸树皮,用核桃楸树皮提取物对S180肉瘤和H22肝荷瘤小鼠进行体内、体外抑瘤实验,并与空白对照组进行比较。结果:核桃楸树皮提取物在50～200mg.kg-1剂量及25～100mg.L-1质量浓度范围内对S180和H22肝荷瘤小鼠有明显的瘤抑制作用(P<0.01),抑瘤率分别为61.76%～69.85%;65.92%～73.18%;A570分别为1.5～1.08;1.6～1.01,且与剂量和浓度呈正相关。结论:核桃楸树皮提取物具有显著的抗肿瘤作用。

胡桃楸树皮抗肿瘤有效成分对H_(22)荷瘤小鼠T细胞亚群的影响

为测定胡桃楸树皮提取物(HT)抗肿瘤有效成分对H_(22)荷瘤小鼠T细胞亚群的影响,将昆明小鼠随机分为HT高剂量组、HT低剂量组、阳性药环磷酰胺组、模型组和正常组,采用接种法复制H22肿瘤移植模型。利用荧光标记抗体-流式细胞术检测HT对建立的H22荷瘤小鼠模型外周血中CD4^+/CD8^+细胞亚群比值变化;ELISA法检测CD4^+细胞所分泌细胞因子IL-4和IFN-γ的含量,以测定Th1/Th2细胞亚群比例。结果显示,与阳性药注射用环磷酰胺(CTX)相比,HT高、低剂量组能显著降低机体CD8^+亚群比例(P<0.01),HT低剂量组可明显提高CD4^+/CD8^+比值(P<0.05)。HT高、低剂量组的IL-4含量显著低于阳性药CTX组(P<0.001),明显低于模型组(P<0.05)。HT高剂量组的IFN-γ/IL-4水平明显高于阳性药CTX组(P<0.05)。研究表明,胡桃楸树皮提取物具有明显的抑瘤作用,能保护胸腺和脾脏,能减轻荷瘤机体的T细胞免疫功能的损伤。